TECAN全自动酶免分析系统检测乙型肝炎血清学标志物的特异性评价

目的对TECAN全自动酶免分析系统检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）的特异性进行评价。方法参考美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）EP12-A、EP7-A及有关文献,分别通过加样针的携带污染、加样和加酶间隔时间、溶血干扰等试验对仪器的RSP150/8前处理系统和BEPⅢ后处理系统检测HBsAg、抗-HBs的特异性进行评价。结果标本HBsAg〉8 000 S/CO时,加样针仍未出现携带污染,而标本抗-HBs〉1 000 mIU/mL时加样针出现携带污染现象。已加样HBsAg、抗-HBs阴性及弱阳性标本的反应板室温放置30min内加酶以及标本中加入血红蛋白（浓度≤8 g/L）,未出现假阳性结果。结论高浓度的抗-HBs对加样容易产生携带污染。血红蛋白对HBsAg、抗-HBs试验的干扰并不明显。HBsAg、抗-HBs酶标板在室温放置30 min内加酶对检测结果影响不大。     

HBsAg和抗-HBs双阳性模式分析及临床意义

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)同时阳性的感染模式,探讨此类模式的产生原因及其临床意义。方法应用时间分辨免疫荧光分析法定量检测10 939例血清标本,从中筛选出HBsAg和抗-HBs同时阳性的标本,进而分析其检测结果 ,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测的12000例血清标本得到的HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果进行比较。结果定量检测10939例血清标本,其中HBsAg阳性3 338例,阳性率为30.5%,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.8%(28/3 338);ELISA定性检测12 000例标本,HBsAg和抗-HBs同时阳性者占0.3%(12/12 000),统计学分析两种方法在检测HBsAg和抗-HBs同时阳性的结果 ,差异有统计学意义(P0.05)。该28例表现出4种类型HBV血清学指标的组合方式,以HBsAg、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)阳性模式和HBsAg、乙型肝炎e抗体(抗-HBe)、抗-HBc阳性模式为主,分别有8例和17例;HBsAg、抗-HBs和抗-HBc阳性模式1例;其余2例仅HB-sAg和抗-HBs双阳性。结论 HBsAg和抗-HBs同时阳性虽然少见,但具有一定的临床意义,应当引起实验室和临床的注意。     

全自动酶免疫分析系统加样中携带污染问题及其解决方案

目的 评价全自动酶免疫分析系统ELISA实验中的HBsAg加样携带污染并探索解决方案。方法 利用分配HBsAg强阳性标本的加样针再分配阴性标本进行阳性携带污染评价，通过对不同洗针次数的洗涤效果比较选择阳性携带污染解决方法；利用洗涤后未干燥和已干燥的加样针分配0.5ng/ml HBsAg标本观察阴性携带污染(稀释效应)。结果 加样针在吸取强阳性标本进行分配后洗涤5次，再分配阴性标本，造成部分实验孔出现弱阳性结果，洗涤后未经干燥的加样针再分配低值弱阳性标本使部分实验孔出现阴性结果，造成弱阳性标本漏检。洗涤次数增加至10次和干燥后的加样针没有类似问题。结论 加过强阳性标本的加样针未经充分洗涤会对阴性标本造成携带污染，出现假阳性结果；洗涤后未经干燥的加样针存在稀释效应，造成弱阳性标夏漏检。通过增加洗涤次数和对加样针进行干燥可以在一定程度上解决携带污染问题。     

全自动酶免疫分析系统加样中携带污染问题及其解决方案

目的 评价全自动酶免疫分析系统ELISA实验中的HBsAg加样携带污染并探索解决方案。方法 利用分配HBsAg强阳性标本的加样针再分配阴性标本进行阳性携带污染评价,通过对不同洗针次数的洗涤效果比较选择阳性携带污染解决方法;利用洗涤后未干燥和已干燥的加样针分配0.5ng/mL HBSAg标本观察阴性携带污染(稀释效应)。结果 加样针在吸取强阳性标本进行分配后洗涤5次,再分配阴性标本,造成部分实验孔出现弱阳性结果,洗涤后未经干燥的加样针再分配低值弱阳性标本使部分实验孔出现阴性结果,造成弱阳性标本漏检。洗涤次数增加至10次和干燥后的加样针没有类似问题。结论 加过强阳性标本的加样针未经充分洗涤会对阴性标本造成携带污染,出现假阳性结果;洗涤后未经干燥的加样针存在稀释效应,造成弱阳性标本漏检。通过增加洗涤次数和对加样针进行干燥可以在一定程度上解决携带污染问题。     

新疆沙湾县部分汉族和哈萨克族人群乙型肝炎表面抗原和表面抗体阳性率对比分析

目的对比分析新疆沙湾县汉族和哈萨克族自然人群中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带率和乙型肝炎表面抗体(抗-HBs)阳性率的分布情况,为制定和控制HBV感染有效措施和预防接种提供科学依据。方法对被检人群血清标本采用酶联免疫吸附试验法行HBsAg和抗-HBs检测。结果检测总数1100例,HBsAg阳性检出率6.3%,抗-HBs阳性检出率28.8%,其中汉族600例HBsAg阳性49例,阳性率为8.2%,哈萨克族500例HBsAg阳性21例,阳性率4.2%,汉族和哈萨克族HBsAg携带率间差异有统计学意义(χ2=7.20,P0.05),抗-HBs汉族阳性230例,阳性率38.3%,哈萨克族阳性87例,阳性率哈萨克族17.4%;二者间差异有统计学意义(χ2=54.29,P0.01)。结论本次调查沙湾县汉族、哈萨克族HBsAg携带率和抗-HBs阳性率两族群差异明显,提示应强化乙肝疫苗的接种和执行力度,提高易感人群免疫力控制传染源切断传播途径。     

全自动酶免分析系统的应用分析

目的评价全自动酶免检测与手工检测的效果，探索全自动酶免检测中所遇问题的解决办法。方法利用HBsAg质控血清0．5、1ng／ml和抗-HCV质控血清1NCU／ml进行两种检测方法的孔间、板间精密度分析；采用HBsAg血清盘进行两种检测方法的特异性、灵敏度分析；采用加样间只用水冲针2次和加样间洗液冲针后再用水冲洗针内外壁的办法，探索消除携带污染问题的解决方法。结果全自动酶免检测的孔间、板间精密度均高于手工检测，二者检测的特异性、灵敏度均佳；但使用永久性加样针的样本处理器存在携带污染，可通过洗液冲洗后加水冲洗针内外壁或进一步调整冲洗液量、强度、次数来解决，同时对样本的稀释效应不应忽视。结论ELISA全自动酶免检测分析提高了血液检测的精密度水平，可确保血液检测质量和安全。     

乙型肝炎病毒表面抗原、抗体同时阳性的实验分析及原因初探

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)和表面抗体(抗-HBs)同时阳性患者的血清学模式、病毒复制情况及肝功能状况,探讨此类模式的产生原因及其临床意义。方法应用酶联免疫分析法检测标本的HBV血清标志物,从中筛选出HBsAg和抗-HBs同时阳性的标本,检测此类标本HBV DNA定量值和肝功能结果并分析统计其血清学模式。结果检测25 200例患者的HBV血清标志物,HBsAg和抗-HBs同时阳性者为85例(占0.34%),85例HBsAg和抗-HBs同时阳性的患者根据其HBV血清指标的组合模式不同分成4种类型,以HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性模式和HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性模式最多见;85例HBsAg和抗-HBs同时阳性的患者中,HBV DNA420 U/mL者占77.4%,肝功能指标的异常率为58.8%。结论乙型肝炎患者出现HB-sAg和抗-HBs同时阳性并不代表乙型肝炎恢复,相反此类患者往往持续存在HBV的复制和突变,更容易造成肝功能的慢性损伤,预后较差,应当引起实验室和临床的高度重视。     

两对半定量检测中HBsAg与抗-HBs同时阳性的实验分析

目的探讨乙型肝炎标志物检测中血清乙型肝炎表面抗原（HBsAg）与乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）同时阳性的特殊模式分析。方法采用时间分辨荧光免疫分析技术（TRFIA）检测样本的乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物,从中选取HBsAg与抗-HBs同时阳性的样本,测定其丙氨酸氨基转移酶（ALT）,天门冬氨酸氨基转移酶（AST）,总胆红素（TBIL）,γ～谷氨酰基转移酶（GGT）等肝功能项目。结果对2011年1～8月7002例患者进行HBV血清标志物检测后,HBsAg阳性为631侧,其中有27例为HBsAg、抗-HBs同时阳性,占总送检标本的0．39％,占HBsAg阳性标本的4．28％。肝功能异常的】8例（66．7％）,以ALT,AST,TBIL,GGT的升高为主。结论HBsAg和抗-HBs同时阳性,是由多种原因引起,临床应加以重视。     

抗-HBs拖带对HBsAg测定的影响

目的 探讨血站自动化加样仪加高浓度抗-HBs标本拖带造成弱阳性HBsAg标本测定为阴性的概率,以采取防范措施。方法 通过采用不同的加样方式对弱阳性HBsAg进行测定,观测OD值的改变情况。结果 抗-HBs污染量越多,HBsAg的OD下降值越大。HBsAg含量越低（原始OD值小）,OD下降值就越小,但占原始OD值的百分比越大。不同自动化加样洗针方式的OD值差异元显著性。结论 手工加样不换吸头很容易造成假阴性,但在目前血站自动化加样仪加样方式下,高滴度抗-HBs标本拖带造成弱阳性HBsAg标本阴性的概率不到万分之一。     

儿童乙型肝炎表面抗原及其抗体阳性率现状分析

目的 了解泾阳县幼儿园及中小学校儿童乙型肝炎(简称乙肝)疫苗免疫效果及乙肝表面抗原(HBsAg)携带情况.方法 将受检儿童分组抽取静脉血采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBsAg、乙肝表面抗体(抗-HBs).结果 1 283例儿童HBsAg阳性16例,阳性率1.24%;抗-HBs阳性550例,阳性率42.87%.幼儿组未检出HBsAg阳性,小学组和初中组儿童HBsAg阳性率分别为3.11%和1.29%;3组儿童抗-HBs阳性率分别为49.40%、41.61%和36.77%.结论 该县儿童HBsAg携带率较低,抗-HBs阳性率也相对较低,且随年龄增长逐年下降,提示对乙肝疫苗全程接种后必须及时检测抗-HBs的产生情况,应重视对接种过乙肝疫苗的儿童进行必要的加强免疫.     

应用CLSI EP12-A2文件评价HBsAg酶联免疫吸附试验试剂盒的分析性能

目的：应用CLSI EP12-A2文件评价乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒的性能,并比较2个不同厂家试剂盒之间的性能差异。方法按照CLSI发布的EP12-A2文件,对实验室使用的2个不同厂家的 HBsAg ELISA试剂盒的性能进行评价。结果2个厂家的试剂盒对分析物浓度为120％临界值的标本的检测阳性率均大于或等于95％,对分析物浓度为80％临界值浓度的标本的检测阴性率大于或等于95％,批内变异系数小于或等于15％,批间变异系数小于或等于20％。2个厂家试剂盒的灵敏度分别为94．2％（95％CI：84．3％∽98．0％）和92．3％（95％CI：81．8％∽97．0％）;特异性分别为98．0％（95％CI：89．5％∽99．6％）和100．0％（95％CI：92．8％∽100．0％）。2个厂家试剂盒灵敏度差值95％区间为-5．46％∽10．19％,特异性差值95％区间为-2．00％∽5．32％。结论2个厂家试剂盒检测 HBsAg 临界值＆#177;20％的浓度范围之外标本,能够得到稳定、可靠的检测结果,并具有较高的灵敏度和特异性,两者的检测灵敏度和特异性相近。     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ）用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体（抗ＨＢｓ），制成免疫层析检测试条。血清中ＨＢｓＡｇ与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果ＧＩＣＡ试条只与ＨＢｓＡｇ有特异性反应，与乙型肝炎病毒核心抗原、ｅ抗原等无交叉反应。检测中国药品生物制品检定所ＨＢｓＡｇ标准品，灵敏度可达１ｎｇ／ｍｌ。用ＧＩＣＡ与酶免疫法比较检测了３９５份不同血清标本中ＨＢｓＡｇ，两法符合率为９９．０％。结论ＧＩＣＡ检测血清中的ＨＢｓＡｇ特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。     

孕产妇HBV前S1抗原与相关血清标志物联合检测结果分析

目的了解孕产妇乙型肝炎(下称乙肝)病毒(HBV)感染情况,对孕产妇乙肝预防控制提供依据,并探讨HBV前S1抗原和乙肝血清标志物联合检测的关系及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对2 067例孕产妇进行血清HBV前S1抗原(PreS1-Ag)、HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc进行检测,并对检测结果进行分析。结果 HBsAg阳性211例,阳性率10.21%。在211例HBsAg阳性血清中,PreS1-Ag阳性138例(65.40%),HBeAg阳性71例(33.65%),经χ2检验,二者差异有统计学意义(P<0.05);大三阳模式为HB-sAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+),HBsAg(+)、HBeAg(+),小三阳模式为HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)的PreS1-Ag检测阳性率分别为80.39%、75.00%和64.04%,经χ2检验,3种模式之间差异无统计学意义(P>0.05)。其中71例HBeAg阳性血清标本,PreS1-Ag检出56例(78.87%);HBeAg阴性140例,PreS1-Ag检出82例(58.57%),二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。HBsAg阴性血清中未检出PreS1-Ag。结论 PreS1-Ag检测比HBeAg更敏感,是HBV复制的可靠指标之一,与乙肝相关血清标志物联合检测可更准确反映HBV感染与复制状况,及时对孕产妇采取相关措施,对减少母婴传播乙肝,降低新生儿乙肝传播,提高优生优育有着重要意义。     

国产化学发光免疫试剂检测血清HBsAg的应用评价

目的考核国产化学发光免疫分析试剂检测血清HBsAg的效果,探讨其在血液筛查和临床检测应用中的可行性。方法采用国产化学发光免疫分析试剂筛查345份HBsAg确认阳性的血清标本,比较其与常用的进口和国产酶联免疫检测试剂盒的漏检率;并采用不同浓度的标准HBsAg血清对国产化学发光免疫分析试剂进行线性分析和精密性试验。结果国产化学发光免疫分析检测试剂的漏检率高于Murex和Organon酶联免疫试剂盒,差异有统计学意义（P〈0．01）,而与国产英科新创（厦门）科技公司和上海科华生物技术有限公司的HBsAg酶联免疫诊断试剂盒的差异无统计学意义;采用标准血清进行线性分析,标本浓度在（0．5～150）ng／ml范围时与化学发光单位量（RLUs）呈良好的线性正相关;分别对低、中、高浓度标准血清进行板内和板间的重复检测,其反应具有良好的重复稳定性。结论化学发光免疫分析法检测血清HBsAg具有快速、可定量、反应稳定的特点,可用于血液筛查和临床标本的检测。     

自建检测系统定性检测乙型肝炎病毒表面抗原的重复性研究

目的通过在自建检测系统上对乙型肝炎病毒表面抗原的测定,评估自建检测系统定性检测乙型肝炎病毒表面抗原的重复性,并为其标准化提供参考依据.方法参照NCCLS《EP12‐A文件》,用酶联免疫吸附试验(ELISA)在自建检测系统上对-20%临界值浓度和+20%临界值浓度的样本分别测定20次,然后对检测结果进行统计学分析.结果-20%临界值浓度的样本阴性率为105%,+20%临界值浓度的样本阳性率为100%.结论自建检测系统对±20%临界值浓度范围以外样本的检测可以得到稳定的结果,可以满足《EP12‐12A文件》对定性试验重复性的要求.     

遵义医学院珠海校区2007级新生HBV感染状况分析

目的掌握遵义医学院珠海校区2007级新生乙型肝炎(简称乙肝)病毒(HBV)感染情况,为防治HBV传染提供一定依据。方法空腹静脉采血5 mL,分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中的HBsAg,对HBsAg阳性者进行乙肝三系统(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc)检测;用全自动生化分析仪检测〔紫外-乳酸脱氢酶法测丙氨酸氨基转移酶(ALT),紫外-苹果酸脱氢法测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)〕肝功能。结果受检的933名新生中,HBsAg阳性率为4.61%,其中男生为7.94%,女生为2.91%,男生HBV感染率高于女生,不同性别间感染情况差异有统计学意义(χ2=10.39,P0.01)。ALT异常者占0.86%,HBsAg阳性者中合并ALT异常的人数占11.63%,ALT异常者中HBsAg阳性人数占62.50%。结论2007级新生HBsAg阳性率低于全国平均水平(10%)。     

光激化学发光法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志的性能评价

目的评价光激化学发光法（LICA）对乙型肝炎病毒（HBV）感染血清学标志的检测性能。方法用乙型肝炎表面抗原（HBsAg）定值血清和质控品对LICA检测HBV感染血清学标志的试验性能进行评价;以化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）为比较对象,对LICA检测453例临床样本HBV感染5项血清学标志的结果进行分析。结果 LICA对HBsAg的检测下限（LLD）为0.23 ng/mL,批内的总变异系数（CV）〈5%,平均回收率为99.88%。LICA与CMIA检测HBsAg、乙型肝炎表面抗体（抗HBs）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、乙型肝炎e抗体（抗HBe）的阳性率差异无统计学意义（P〉0.05）,2种方法的符合率〉95%,而LICA检测乙型肝炎核心抗体（抗HBc）阳性率低于CMIA,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 LICA检测HBV感染HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe 4项血清学标志具有良好的检测性能,与CMIA有很高的符合率。     

扬州地区2010年乙型肝炎表面抗原阳性率调查

目的 了解扬州地区的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)和表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)阳性率,评价乙肝疫苗策略效果.方法 以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg,将受检者以不同的年龄、性别分组计算HBsAg的阳性率.结果 HBsAg的阳性率8.05%,41～50岁组的HBsAg的阳性率最高,达到10.38%,男性多年龄组HBsAg的阳性率高于女性且变化幅度较大.结论 年龄和性别是乙肝感染的重要影响因素,注射乙肝疫苗的预防免疫在控制乙肝发挥了重大作用,乙肝的防治仍需重视.     

6523例大学新生乙型肝炎病毒和丙氨酸氨基转移酶检测结果分析

目的了解大学新生乙型肝炎(下称乙肝)病毒(HBV)感染与丙氨酸氨基转移酶(ALT)异常情况。方法使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg,抗-HBs、HBsAg阳性者进一步用ELISA检测乙肝5项,同时利用全自动生化分析仪检测血清ALT。结果 HBsAg阳性率为6.4%,抗-HBs阳性率为58.7%,HBV全阴率为35%,ALT在HBsAg阴性新生中异常率为3.7%,ALT在HBsAg阳性新生中异常率13.7%。结论 HBV感染与ALT异常密切相关,ALT明显异常者为乙肝活动期,对大学学生应加强传染病相关知识宣传,继续加强乙肝疫苗接种,预防HBV传播。