白细胞介素4基因转移的肿瘤细胞体内诱导杀伤细胞活性及细胞因子产生的实验研究

观察了小鼠接种高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞后体内免疫效应细胞（包括ＣＴＬ、ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞）抗肿瘤活性及其分泌的细胞因子（包括ＩＬ－２、ＩＦＮ－ｒ、ＴＮＦ及ＧＭ－ＣＳＦ）水平的变化，荷瘤后第１５天小鼠脾细胞ＮＫ活性及经诱导后的ＬＡＫ活性有所降低，而经诱导后的ＣＴＬ杀伤活性显著升高，荷瘤小鼠腹腔内巨噬细胞杀伤活性及其分泌的ＩＬ－１水平也明显升高；在荷瘤后第４天及第１２天出现两个高峰，实验结果表明，高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞体内生长受抑制是因为ＩＬ－４基因的导入及ＩＬ－４的分泌使体内ＣＴＬ及巨噬细胞杀伤活性提高，因而使机体抗肿瘤免疫功能得以增强。     

联合应用IL-2基因疗法和IL-3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免疫功能的增强作用

以大剂量化疗后给予同基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型，动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后荷瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＦＮ－γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促进机体某些免疫功能恢复而增强ＢＭＴ后的抗肿瘤作用。     

基因修饰肿瘤疫苗研究进展

近年来基因修饰肿瘤疫苗包括ＭＨＣ分子、共刺激信号Ｂ７分子及各种细胞因子基因修饰的肿瘤疫苗，在体内外试验和基础研究中取得了相当的进展，本文主要对其作用机理进行了小结。肿瘤细胞表达外源ＭＨＣ、Ｂ７分子，使宿主免疫系统能有效识别、杀伤肿瘤；表达某些细胞因子（如ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＧＭ－ＣＳＦ、ＴＮＦ－α等）能诱导产生ＣＴＬ，而某些细胞因子则激发非Ｔ细胞的杀伤作用（如ＩＬ－４、Ｇ－ＣＳＦ诱导中性粒细胞的炎症反应，ＩＬ－２诱导ＮＫ细胞的杀伤作用，ＩＬ－４、ＩＬ－７、ＩＦＮ－γ等诱导肿瘤局部Ｍφ的浸润）。     

逆转录病毒载体介导的IL-4基因修饰对HL-60细胞增殖及T细胞功能的影响

目的观察ＩＬ－４基因转染对ＨＬ－６０增殖及Ｔ细胞功能的影响及其可能机制。方法采用逆转录病毒载体介导基因转染法将人ＩＬ－４基因导入髓系白血病细胞ＨＬ－６０,观察高表达外源性ＩＬ－４基因ＨＬ－６０株的增殖反应及其诱导的正常人ＰＢＭＣ增殖,ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ基因表达及肿瘤特异性ＣＴＬ杀伤活性。结果ｒＩＬ－４或瘤细胞产生的ＩＬ－４早期促进ＨＬ－６０细胞增殖,培养５天后则明显抑制其增殖;与ｒＩＬ－４处理的ＨＬ－６０细胞比较,ＩＬ－４基因修饰的ＨＬ－６０细胞明显促进正常人ＰＢＭＣ增殖并合成ＩＬ－２、ＩＬ－６及ＩＦＮ－γｍＲＮＡ,其诱导的特异性ＣＴＬ杀伤活性明显高于野生型ＨＬ－６０、仅导入载体的ＨＬ－６０和加入ｒＩＬ－４共育的ＨＬ－６０细胞诱导者。结论ＩＬ－４基因转染在影响ＨＬ－６０细胞增殖和分化过程的同时,可能促进某些抗原（如ＭＨＣⅠ类抗原）的抗原性,从而有利于机体建立有效的抗肿瘤免疫反应。     

内源性IL-12决定人PBMC产生干扰素γ的水平(英)

目的：ＩＦＮ－γ是由被有丝分裂原或抗原所激活的Ｔ细胞和ＮＫ细胞所产生，它具有广泛的免疫调节活性，现认为ＩＬ－１２（外源性）是诱导 ＩＦＮ－γ产生的强诱导剂，并可促进静息 ＣＤ４＋Ｔ细胞朝向 Ｔｈ１表型分化，即诱导细胞免疫。目的是为了解由ＰＢＭＣ产生的内源性ＩＬ－１２是否在体外可诱导ＩＦＮ－γ的产生及通过何机制诱导细胞免疫。方法：用抗ＣＤ３抗体、ＰＨＡ、抗ＣＤ３抗体加抗ＣＤ２８抗体和抗原（ＭＬＣ）来检测被刺激的ＰＢＭ细胞的ＩＦＮ－γ的产生，同时也用ＩＬ－１２和ＩＬ－１２Ｒβ１的中和抗体来抑制ＩＦＮ－γ的产生。结果：激活的人ＰＢＭ中ＩＦＮ－γ分泌依赖于内源性ＩＬ－１２的产生，而且激活的Ｔ细胞可诱导ＡＰＣ细胞产生ＩＬ－１２，此过程是通过Ｔ细胞表面的ＣＤ４０Ｌ和ＡＰＣ的ＣＤ４０相互作用而实现。结论：这些结果提示，内源性ＩＬ－１２在正常宿主抗细胞内抗原的感染反应中起重要作用，在某些形式的自身免疫性疾病和移植排斥反应的免疫病理发生中也起中心作用。     

IL-4基因转染瘤苗体内抗肿瘤转移作用及其免疫机理的初步研究

将白细胞介素４（ＩＬ－４）基因转染Ｂ１６黑色素瘤细胞，筛选出高分泌克隆，体外扩增后经丝裂霉素Ｃ灭活制备成瘤苗，用以治疗实验性肺转移荷瘤小鼠，同时用低剂量白细胞介素２（ＩＬ－２）及低剂量环磷酰胺（Ｃｙ）辅助治疗。结果发现，经ＩＬ－４基因转染瘤苗治疗后荷瘤小鼠肺部转移结节明显减少，存活期明显延长，辅以ＩＬ－２治疗后效果更佳；同时辅以ＩＬ－２及Ｃｙ则治疗效果最佳。体内免疫功能研究发现，经ＩＬ－４基因转染瘤苗治疗后小鼠脾淋巴细胞诱导的ＣＴＬ及腹腔巨噬细胞杀伤活性明显升高，但脾脏ＮＫ及经诱导的ＬＡＫ活性变化不明显。脾淋巴细胞经诱导后分泌的细胞因子（包括ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ、ＧＭ－ＣＳＦ）中，ＴＮＦ和ＧＭ－ＣＳＦ在治疗各组有所升高。本实验结果表明，ＩＬ－４基因转染瘤苗能有效地激活体内抗肿瘤免疫功能并具有显著的抗肿瘤转移效果，将其与低剂量ＩＬ－２和低剂量Ｃｙ联合应用时抗肿瘤转移效果更佳。     

IL－12－NK细胞剌激因子的研究进展

ＩＬ－１２又称ＮＫ细胞刺激因子（ＮＫＳＦ），是最近才被纯化、鉴定的一种新型细胞因子。它是由二硫键相连的异二聚体，其分子量为７０ｋＤ，它的基因也已被克隆。ＮＫＳＦ其有多种生物学功能，它能诱导外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）产生ＩＦＮ－γ，增强ＮＫ细胞介导的细胞毒活性，增强丝裂原激活的Ｔ细胞增殖，增强ＩＬ－２对ＬＡＫ活性的诱导。由于ＮＫＳＦ对免疫活性细胞的诱导和调节功能，提示它在肿瘤和病毒性疾病的生物免疫治疗中起着重要作用。     

逆转录病毒载体介导的IL—4基因修饰对HL—60细胞？…

目的 观察ＩＬ－４基因转染对ＨＬ－６０增殖及Ｔ细胞功能的影响及其可能机制。方法 采用逆转病毒载体介民基因转染法将人ＩＬ－４基因导入髓系白血病细胞ＨＬ－６０,观察高表达外源性ＩＬ－４基因ＨＬ－６０株的增殖反应及其诱导的正常人ＰＢＭＣ增殖,ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ基因表达及肿瘤特异性ＣＴＬ杀伤活性。结果 ｒＩＬ－４或瘤细胞产生的ＩＬ－４早期促进ＨＬ－６０细胞增殖,培养５天后则明显和抑制其增殖;与     

IL－12增强杀伤细胞活性作用

ＩＬ－１２增强杀伤细胞活性作用［日］／叶久贵司临床免疫．－１９９５，２７（７）．－７７７～７８２ＩＬ－１２被称为自然杀伤细胞刺激因子（ＮＫＳＦ）或细胞毒淋巴细胞成熟因子（ＣＬＭＦ）。ＩＬ－１２的产生细胞是单核细胞、巨噬细胞系的粘附细胞及Ｂ细胞。所用Ｉ...     

IL－12的体内抗小鼠肿瘤作用

ＩＬ－１２的体内抗小鼠肿瘤作用［英］／ＢｒｕｎｄａＭＪ…／／ＪＥｘｐＭｅｄ．－１９９３，１７８．－１２２３～１２３０ＩＬ－１２是一个多活性细胞因子；它不但能促进ＮＫ细胞和Ｔ细胞生长，增强它们的杀伤活性；而且能增强ＣＴＬ杀伤活性，以及诱导Ｔ细胞和ＮＫ细...     

ANTI-DNA AUTOANTIBODIES STIMULATE THE RELEASE OF INTERLEUKIN-1 AND INTERLEUKIN-6 FROM ENDOTHELIAL CELLS

The pathogenetic mechanism of vasculitis in systemic lupus erythematosus (SLE) remains a subject of debate. Evidence for a direct pathogenetic role of anti-double-stranded DNA antibodies (anti-dsDNA) is not strong. Supernatant concentrations of interleukin-1β and interleukin-6, and mRNAs encoding for interleukin-1 α and interleukin-1 receptor-1 were determined in cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVEC), incubated with control IgG ( n =18), anti-dsDNA ( n =18), or IgG from the same lupus patient depleted of anti-dsDNA by affinity chromatography (anti-dsDNA-dep-IgG). Compared with control IgG, there was a significant increase of supernatant interleukin-1β and interleukin-1α mRNA in endothelial cells incubated with anti-dsDNA. The supernatant interleukin-1β and interleukin-6, and mRNAs encoding for interleukin-1α and interleukin-1 receptor-1, were significantly elevated in endothelial cells incubated with anti-dsDNA, compared with those incubated with anti-dsDNA-dep-IgG. Pretreating HUVEC with native DNA before incubating with anti-dsDNA did not result in an additive effect. These in vitro studies suggest that anti-dsDNA plays an important pathogenetic role in inducing inflammatory injury of vascular endothelium in SLE.     

IL－2对NOD鼠糖尿病的影响

ＮＯＤ鼠是人类胰岛素依赖型糖尿病的动物模型，其发病与自身免疫有关。环磷酰胺（ＣＰ）可以加速这一过程，使ＮＯＤ鼠糖尿病的发病率提高或提前。一些研究表明：ＮＯＤ鼠的淋巴细胞在淋巴细胞混合反应中（ＭＬＲ），在有或无刺激物的存在下，白细胞介素２（ＩＬ－２）的产量均明显低于正常鼠的淋巴细胞。该实验对注射了一次大剂量的ＣＰ（３００ｍｇ／ｋｇ体重）后的ＮＯＤ鼠试用了ＩＬ－２治疗。结果显示：对于年幼的ＮＯＤ鼠ＩＬ－２治疗１４无可以明显减轻注射ＣＰ后的胰岛破坏加速。病理检查显示三组胰岛炎严重程度积分分别为２９；８１；８８。ＩＬ－２处理组明显低于ＣｏｎＡ处理组与对照组。这个研究还显示，对于１２周龄的ＮＯＤ鼠，经１４天的ＩＬ－２治疗，可以完全预防ＣＰ诱导的糖尿病的发生。糖尿病发病率在ＩＬ－２组为０／１２；对照组为７／１２。但对已发病的ＮＯＤ鼠自发性糖尿病ＩＬ－２不能使其缓解。     

AN INVESTIGATION OF POLYMORPHISM IN THE INTERLEUKIN-10 GENE PROMOTER

Interleukin-10 (IL-10) has been described as an anti-inflammatory cytokine and B-cell proliferation factor and has been implicated in autoimmunity, tumorigenesis and transplantation tolerance. We have identified three single base pair substitutions in the IL-10 gene promoter and have investigated whether this polymorphism correlates with IL-10 protein production in vitro.     

白细胞介素6受体样免疫反应性细胞在大鼠脑内的分布

目的　研究白细胞介素６ 受体（ＩＬ－６Ｒ和ｇｐ１３０）免疫反应性细胞在大鼠脑内的分布。方法　采用ＡＢＣ免疫组织化学方法。结果　ＩＬ－６Ｒ免疫反应性细胞主要分布在下丘脑的视前区、腹内侧核、室旁核和弓状核;在海马,ＩＬ－６Ｒ阳性细胞呈强阳性,密集分布于齿状回颗粒细胞层和ＣＡ１ ～ＣＡ２ 锥体细胞层;在大脑皮层、嗅结节、丘脑腹内侧核、终纹床核等处也有ＩＬ－６Ｒ阳性细胞。ｇｐ１３０ 阳性细胞主要分布于下丘脑的室周核、室旁核的内侧小细胞部、弓状核及视上核,在大脑皮层也有ｇｐ１３０ 阳性大锥体细胞的分布。ｇｐ１３０ 阳性细胞亦见于尾壳核、杏仁核区、终纹床核,在海马结构内的ｇｐ１３０ 阳性细胞较ＩＬ－６Ｒ染色较浅。此外,ＩＬ－６ 两种受体亚单位的免疫反应性细胞也散在分布于小脑皮层、小脑外侧核以及延髓／脑干。结论　在大鼠脑内广泛分布着ＩＬ－６ 两种受体亚单位的免疫反应性细胞,提示ＩＬ－６ 及其受体可能具有重要的神经生物学意义。     

人白介素-2基因在原代培养骨骼肌细胞中的表达研究

目的 对以人白介素－２在原代培养骨骼肌细胞中的表达作为肿瘤基因治疗模式进行新的探索;方法 将人白介素－２ｃＤＮＡ片段与ＣＭＶ启动子及ＲＳＶ启动子重组,通过Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导将得到真核表达载体ｐＣＭＶ－ＩＬ２和ｐＲＳＶ－ＩＬ２转入原代培养的骨骼肌细胞,并用免疫组织化学方法观察白介素－２的表达;结果 ｐＣＭＶ－ＩＬ２和ｐＲＳＶ－ＩＬ２经酶切鉴定正确,免疫组织化学观察到约有１０％左右细胞表达了白介     

白细胞介素—2受体和糖皮质激素受体在脑神经元内共存

目的 研究白细胞介素－2受体和糖皮质激素受体在大鼠脑内的分布及两者共存的可能性。方法 免疫细胞化学双重标记技术（PAP法与ABC法相结合）,分别采用DAB和DBHC（二盐酸联苯胺）呈色,前者为棕黄色,后者为深蓝色。结果 白细胞介素－2受体和糖皮质激系受体广泛分布于大脑皮质、海马、下丘脑,脑干大部分运动性和感觉性核团。白细胞介素－2受体免疫反应产物位于细胞膜上;糖皮质激素受体免疫反应产物位于细胞核和胞浆内。脑内有较多的白细胞介素－2受体和糖皮质激素受体共存的神经元,它们在阳性神经元总数中所占的比例在不同的脑区有所不同,在大脑皮质约占50％,在展神经核约占30％。结论 免疫细胞因子和激素可通过各自的受体作用于同一个脑神经元而调节神经元的功能。本实验在受体水平为“免疫－神经－内分泌调节网络”学说提供了形态学证据。     

白细胞介素—2放射免疫测定和质量控制

本文阐述了血清，尿液及激活淋巴细胞悬浮培养液中白细胞介素－２水平测定的放射免疫分析方法，该方法特异性强，与其它免疫因子和类似物的交叉反应率均〈０．０１％，测定的灵敏度达１ｎｇ／ｍｌ。关于ＲＩＡ的质量控制，保持标准品ＩＬ－２的免疫活性是关键，当然＾１２５Ｉ－ＩＬ－２的比活度和抗血清的质量也是很重要的。     

白细胞介素－1与阿片肽在大鼠大脑皮层细胞中的相互作用

白细胞介素－１（ＩＬ－１）及阿片肽作为免疫与神经系统之间调节的介质与中枢神经系统生理及病理生理的变化密切相关。我们探讨了ＩＬ－１和阿片肽在培养的大鼠脑皮层神经细胞中的相互作用。结果表明，ＩＬ－１β明显促进大脑皮层细胞前脑啡肽原ｍＲＮＡ表达及亮脑啡肽分泌增加；对β－内啡肽分泌有一定影响；ＩＬ－１受体拮抗剂能抑制ＩＬ－１的作用；亮脑啡肽不能促进大脑皮层神经细胞ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达及ＩＬ－１活性改变。提示在大脑皮层神经细胞中，ＩＬ－１和阿片肽间仅存在单向作用，ＩＬ－１对中枢神经系统的部分作用可能依赖于阿片肽的神经调节作用。     

INTERLEUKIN-6 PROMOTER POLYMORPHISM AND LATE-ONSET ALZHEIMER's DISEASE IN THE FINNISH POPULATION

Recently, the involvement of the inflammatory response in Alzheimer's disease (AD) has received considerable attention. The gene encoding for interleukin-6 (IL-6) is interesting since IL-6 has been reported not only to be involved in immune functions but also in AD. We investigated whether the IL-6-174 G/C polymorphism is associated with late onset AD (LOAD) in the Finnish subjects. The G allele was over-represented in ApoE4-LOAD patients but remained unimportant in all and in the ApoE E4 carriers. Interestingly, the G allele frequency was lower in our population in both AD patients and in controls compared to Southern European populations.