NS患儿CD系列阳性细胞与免疫球蛋白调节改变的相关性

对３０例肾病综合症（Ｎｓ）患儿与１０例正常健康儿童所进行的ＣＤ系列阳性细胞与免疫球蛋白调节改变的相关性进行对照研究。按全国统一诊断标准，诊断为单纯性综合症１８例（Ｂ组）；肾炎性肾病综合症１２例（Ｃ组）；健康儿童对照组１０例（Ａ组）。Ｂ组平均年龄６．６岁，Ｃ组７．１岁，Ａ组６．１岁。Ｂ组男女各９例，Ｃ组男性８例、女性４例，Ａ组男性４例、女性６例。几种ＣＤ＋细胞检测结果见表：从ＣＤ４＋／ＣＤ８＋的比值与ＩｇＧ含量的关系看：单纯性ＮＳ组患儿ＣＤ４＋／ＣＤ８＋细胞比值与血清ＩｇＧ含量水平无相关性（ｒ＝０…     

抗鸡蛋黄IgY单克隆抗体的制备和初步鉴定

以纯化的鸡蛋黄ＩｇＧ（ＩｇＹ）为免疫原，免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。取其脾细胞与小鼠Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ筛选，３次克隆化后，获得２株能稳定分泌抗ＩｇＹ单克隆抗体的杂交瘤细胞ＩＧ１１和３Ａ６。用琼脂双扩散法鉴定，两者均为ＩｇＧ１亚类。特异性鉴定表明，１Ｇ１１和３Ａ６。两株单克隆抗体均与鸡血清ＩｇＧ和鸡蛋黄ＩｇＧ起强反应，而不与鸭蛋黄、鹌鹑蛋黄、小鼠血清、大鼠血清、兔血清、羊血清、马血清，以及人血清的ＩｇＧ起反应。１Ｇ１１与３Ａ６的腹水效价分别为３．１×１０－６和６．４×１０－６。     

细胞因子与哮喘发病机理的关系

研究分设３组，哮喘发作组、哮喘缓解组和正常对照组各２０例，外周血ＩＦＮ－ｒ测定采用微量细胞病变抑制法。ＩＬ－４分泌细胞阳性率测定采用ＡＰＡＡＰ法。Ｃｏｎ－Ａ诱导Ｔｓ细胞活性测定采用Ｓｍｉｔｈ改良法。血清ＩｇＥ测定采用ＥＬＩＳＡ法。试验结果如下：（１）哮喘发作组外周血Ｔ淋巴细胞检测ＩＬ－４分泌细胞阳性率（７．６±３．５％）明显高于哮喘缓解组（３．８±２．０％），Ｐ＜０．０１，更高于正常对照组（１．８±０．５％），Ｐ＜０．０００１。在体外用ＰＨＡ诱导检测产生ＩＰＮ－Ｖ的能力，发现哮喘发作组（７３２．…     

抗人重组IL—1单克隆抗体的制备及初步鉴定

以重组人ＩＬ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞６５３融合，得到一组分泌抗人重组ＩＬ－１单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的３株 ＹＡ１３３、ＹＡ１４０和ＹＡ１６３进行了初步鉴定，抗体类别为ＩｇＧ，亚类均为ＩｇＧ１，免疫转印显示，３株抗体均能特异性地识别分子量为１７．５ｋＤ的ＩＬ－１蛋白条带，ＥＬＩＳＡ法证明与其它细胞因子如：ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＤ－α，ＩＦＮ－γ和ＧＭ－ＣＳＦ均无     

重组人红细胞生成素单克隆抗体的制备

本文应用常规淋巴细胞杂交瘤技术制备了４株能稳定分泌抗人重组红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系ＢⅡ１Ｂ５、ＤⅡ６Ｂ９、ＭⅡ１Ｈ４和ＧＩ３Ｅ７。用鼠单克隆抗体分型试剂盒鉴定，其分泌的ＭｃＡｂ的类分别是ＩｇＭ、ＩｇＭ、ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ａ。间接ＥＬＩＳＡ法测定细胞上清的效价为１×１０－２～１．２５×１０－４，腹水效价为１×１０－２～１×１０－８。培养上清经ＥＬＩＳＡ鉴定，与ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－α等细胞因子均无交叉反应，只与ｒＨｕＥＰＯ特异性结合。     

rhIL—2调节离体boPBMC增殖和分泌Ig的作用

应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法，ＥＬＩＳＡ和ＦＡＣＳ研究了ｒＨＩＬ－２调节离体奶牛外周血单核细胞（ｂｏＰＢＭＣ）免疫应答的特点。ｒｈＩＬ－２能诱导细胞持续性增殖和分泌Ｉｇ，尤其是分泌ＩｇＡ和ＩｇＧ２（与ＰＷＭ相比，Ｐ〈０．０１）；还能增强ＰＷＭ诱导的Ｉｇ的分泌，但不改变ＳＥＢ抑制Ｉｇ分泌的作用。细胞表型也表明，ｒｈＩｌ－２对ＰＷＭ或ＳＥＢ诱导的ｂｏＰＢＭＣｋ中ＣＤ４或ＣＤ８细胞增殖作用无选择性。     

抗金黄色葡萄球菌C1型肠毒素McAb的制备及初步应用

金葡菌Ｃ１型肠毒素免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与Ｓｐ２／０小鼠骨髓细胞融合选出了能分泌高滴度ＭｃＡｂ的１８个克隆株，对其中１０株进行了鉴定，６档属ＩｇＧ１，４株属ＩｇＧ３。用双抗体夹心法和特异性中和抑制试验比较了ＭｃＡｂ和ＰｃＡｂ的敏感性的特异检出１ｎｇ ＳＥＣ１／０．５ｇ食物／ｍｌ。     

ELISA法检测血清中柯萨奇B组病毒抗体

以柯萨奇Ｂ组１－６型病毒感染的Ｖｅｒｏ细胞上清液作抗原，建立了间接ＥＬＩＳＡ法，用于检测心肌炎患者血清中ＣｏｘＢ１－６型病毒ＩｇＧ抗体，ＩｇＧ抗体滴度≥６４００者定为阳性，在４４例心肌炎患者中有３１例为阳性占７０．４５％，其阳性检出率明显高于正常对照组，后者仅占７．４１％。     

MTEC 1分泌的趋化因子引起特定亚群胸腺细胞的定向迁移

分析胸腺髓质上皮样细胞系ＭＴＥＣ１分泌的化学趋化因子对胸腺细胞亚群的趋化作用。方法以抗体加补体杀伤结合免疫磁珠及ｐａｎｎｉｎｇ法，将小鼠胸腺细胞分离纯化，获得ＣＤ４＋ＣＤ８＋（ＤＰ），ＣＤ４－ＣＤ８－（ＤＮ），ＣＤ４＋ＣＤ８－（ＣＤ４ＳＰ）及ＣＤ４－ＣＤ８＋（ＣＤ８ＳＰ）四亚群细胞，用Ｂｏｙｄｅｎ小室分析ＭＴＥＣ１┐ＳＮ对四群胸腺细胞的趋化作用。结果ＭＴＥＣ１┐ＳＮ对ＤＰ及ＣＤ４ＳＰ胸腺细胞有趋化活性（ＣＩ＝６．６±１．０及６．１±１．８）；对ＣＤ８ＳＰ细胞有中度趋化活性（ＣＩ＝３．２±１．０）；对ＤＮ趋化活性微弱（ＣＩ＝１．３±０．６）。化学趋化因子ＭＣＰ┐１纯品对ＣＤ４ＳＰ胸腺细胞显示强趋化活性（ＣＩ＝５．６），对ＤＮ胸腺细胞则无可测出趋化活性。结论ＭＴＥＣ１分泌的化学趋化因子对ＤＰ，ＣＤ４ＳＰ及ＣＤ８ＳＰ胸腺细胞有显著趋化作用，对ＤＮ胸腺细胞几乎无趋化作用。提示此类化学趋化因子有趋使胸腺发育中后期阶段的细胞向胸腺髓质区迁移和定位的作用。     

rhIL－2调节离体boPBMC增殖和分泌Ig的作用

应用￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法、ＥＬＩＳＡ和ＦＡＣＳ研究了ｒＨＩＬ－２调节离体奶牛外周血单核细胞（ｂｏＰＢＭＣ）免疫应答的特点。ｒｈＩＬ－２能诱导细胞持续性增殖和分泌Ｉｇ，尤其是分泌ＩｇＡ和ＩｇＧ＿２（与ＰＷＭ相比，Ｐ＜０．０１）；还能增强ＰＷＭ诱导的Ｉｇ分泌，但不改变ＳＥＢ抑制Ｉｇ分泌的作用。细胞表型也表明，ｒｈＩＬ－２对ＰＷＭ或ＳＥＢ诱导的ｂｏＰＢＭＣ中ＣＤ４￣＋或ＣＤ８￣＋细胞增殖作用无选择性。     

非小细胞肺癌患者放疗前后机体免疫功能变化的研究

目的：报道３０例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者放疗前后免疫功能的变化。方法：采用双抗体夹心法和比浊法检测血清中ｓＩＬ－２Ｒ、免疫球蛋白（ＩｇＧ,ＩｇＡ,ＩｇＭ）含量,用单克隆抗体和流式细胞仪技术检测外周血中Ｔ细胞亚群,Ｂ细胞,ＮＫ细胞百分数;与健康人做对照。结果：放疗前ｓＩＬ－２Ｒ显著增高（Ｐ〈０．０１）,ＩｇＧ及ＩｇＭ６亦增高（Ｐ〈０．０５）,Ｂ细胞百分数低于（Ｐ〈０．０１）,ＣＤ３＾＋细胞降低     

外周血T细胞亚群及细胞因子对外源性哮喘IgE生成的作用

对３０例哮喘患者及３０例健康成年人的外周血，采用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）间接免疫荧光法测定Ｔ细胞亚群；ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定ＩｇＥ、ＩＬ－４；ＦＩ２细胞株，生物学方法测定ＩＬ－２；ＩＬ－６依赖细胞株７ＴＤ１，掺入法测定ＩＬ－６；用抗人ＣＤ２３的ＭｃＡｂ测定ＣＤ２３。为研究Ｔ细胞、细胞因子对哮喘ＩｇＥ生成调节机理及细胞因子在哮喘发病过程中的作用。结果显示：发作期ＩｇＥ、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＣＤ２３、ＣＤ８~＋、ＣＤ４／ＣＤ８~＋比值较对照组及缓解期有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。缓解期ＩｇＥ与对照组之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；ＣＤ８＋、ＣＤ４／ＣＤ８比值，ＣＤ２３与对照组之间有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ＣＤ２３、ＣＤ４、ＩＬ－６三组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果表明，ＩｇＥ合成增加是哮喘发作的关键，Ｔ细胞对日细胞合成ＩｇＥ的调节是通过细胞因子实现的，细胞因子又参与气道炎症过程。     

中效价乙型肝炎免疫球蛋白与乙型肝炎疫苗合用阻断母婴传播的效果

用ＲＰＨＡ及ＥＩＡ法筛ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ双阳性孕妇，其新生儿分两组，以６０ＩＵ／ｍｌ１针免疫球蛋白（ＨＢＩｇ）加３针１０μｇ乙型肝炎疫苗为实验组，于出生２４小时内分别在左右上臂三角肌内接种１支ＨＢＩｇ和１支乙肝疫苗，１、６个月时各接种１支１０μｇ乙肝疫苗，用同剂量、同批号、同方法接种乙型肝炎疫苗３针为对照组。均于出生后１、６、９个月采静脉血进行血清学检测。结果显示，免后６、９个月对照组和实验组的ＨＢｓＡｇ阳转率分别为７．５％、５．３％。保护率为９０．４％和９３．２％，达到３０μｇ疫苗加２００ＩＵ／ｍｌＨＢＩｇ免疫局６个月的保护率（７６．５％～９２．２％）。两组ＨＢｓＡｇ阳转率、保护率、Ｓ／Ｎ值ＧＭＴ的差异非常显著，ｘ２＝７．５２，Ｐ＜０．０１。表明中效价ＨＢＩｇ与乙肝疫苗共同应用，对主动免疫应答无抑制现象。     

抗金黄色葡萄球菌C_1型肠毒素McAb的制备及初步应用

金葡菌Ｃ１型肠毒素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与Ｓｐ２／０小鼠骨髓瘤细胞融合选出了能分泌高滴度ＭｃＡｂ的１８个克隆株，对其中１０株进行了鉴定，６株属ＩｇＧ１，４株属ＩｇＧ３。用双抗体夹心法和特异性中和抑制试验比较了ＭｃＡｂ和ＰｃＡｂ的敏感性和特异性，并用制备的ＭｃＡｂ诊断试剂对ＳＥＣＩ污染食品进行了检测应用，可特异检出ｌｕｇＳＥＣ１／０．５ｇ食物／ｍｌ。     

抗人红细胞NADH—细胞色素b5还原酶单克隆抗体的建立

以重组人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；通过常规方法将小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，经ＥＬＩＳＡ筛选及有限稀释法克隆化，选出６株阳性克隆，其中两株分泌ＩｇＧ，其余均为分泌ＩｇＧ。免疫印迹分析表明，两株ＩｇＧ单克隆抗体对人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶有较高的特异性和亲和力。这一研究为开展对人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶的研究和遗传性高铁血经蛋白血症的     

外周血T细胞亚群及细胞因子对外源性哮喘IgE生成…

对３０例哮喘患者及３０例健康成年人的外周血，采用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）间接免疫荧光法测定Ｔ细胞亚群；ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定ＩｇＥ、ＩＬ－４；ＦＩ２细胞株，生物学方法测定ＩＬ－２；ＩＬ－６依赖细胞株７ＴＤ１，掺入法测定ＩＬ－６；用抗人ＣＤ２３的ＭｃＡｂ测定ＣＤ２３。为研究Ｔ细胞、细胞因子对哮喘ＩｇＥ生成调节机理及细胞因子在哮喘发病过程中的作用。结果显示：发作期ＩｇＥ、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＣＤ２３     

抗人红细胞NADH－细胞色素b5还原酶单克隆抗体的建立

以重组人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶为抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；通过常规方法将小鼠脾细胞与Ｓｐ２／０骨髓瘤细胞融合，经ＥＬＩＳＡ筛选及有限稀释法克隆化，选出６株阳性克隆。其中两株分泌ＩｇＧ，其余均分泌ＩｇＭ。免疫印迹分析表明，两株ＩｇＧ单克隆抗体对人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶有较高的特异性和亲和力。这一研究为开展对人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶的研究和遗传性高铁血红蛋白血症的免疫诊断奠定了基础。     

一氧化氮在培养的大鼠心肌细胞缺氧—复氧损伤中的作用

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）对心肌细胞缺氧－复氧损伤（ＨＲＩ）的作用。方法：培养的大鼠心肌细胞，培养液中分别预先加入ＮＯ前体Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）、ＮＯ供体ＳＩＮ－１或硝普钠（ＳＮＰ）、ＮＯＳ抑制剂Ｌ－ＮＮＡ或ＮＯＳ诱导剂脂多糖（ＬＰＳ），经缺氧１２０ｍｉｎ，复氧６０ｍｉｎ处理后，检测细胞存活率，乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出量，亚硝酸盐（ＮＯ２）含量及细胞诱导型ＮＯ合酶（ｉＮＯＳ）活性等指标的改变。结果：①与常氧组比较，缺氧－复氧ＨＲ降低细胞存活率（２３％，Ｐ＜０．０１），增加ＬＤＨ漏出（６２倍，Ｐ＜０．０１），ｉＮＯＳ活性（７７％，Ｐ＜０．０１），ＮＯ２含量（６１７％，Ｐ＜０．０１）。②ＨＲ前预先加入ＳＩＮ－１、ＳＮＰ或Ｌ－Ａｒｇ，均引起ＬＤＨ漏出进一步增高（Ｐ＜０．０１），细胞存活率进一步降低（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。③Ｌ－ＮＮＡ２ｍｍｏｌ／Ｌ，单独应用对细胞损伤的影响无统计学意义，与Ｌ－Ａｒｇ联合应用，则减弱Ｌ－Ａｒｇ的细胞损伤作用。④ＬＰＳ１μｇ／ｍＬ，增加ｉＮＯＳ活性（２６倍，Ｐ＜０．０１）和ＬＤＨ漏出（５６％，Ｐ＜０．０１）。结论：ＮＯ加重心肌细胞ＨＲＩ，是心肌细胞ＨＲＩ的损伤因子     

用噬菌体抗体分离NK细胞抑制受体特异性的ScFv片段

目的 探讨从噬菌体抗体库分离杀伤细胞抑制受体特异性ＳｃＦｖ的可行性及其特征。方法 所用ＫＩＲ为ＮＫＡＴ２，其可溶性形式为ＮＫＡＴ２－ＩｇＧ１。噬菌体抗体库为Ｎｉｓｓｉｍ等报道的半合成抗体库。抗体库经包被免疫管的ＮＫＡＴ２－ＩｇＧ１５次筛选后，可溶性ＳｃＦｖ由ＩＰＴＧ诱导细菌而获得，筛选效果由测定噬菌体的菌落形成单体及ＤＮＡ酶切图谱分析。     

rr－烯醇化酶单克隆抗体双位点夹心ELISA的建立和临床应用

在自制的８株烯醇化酶（ＮＳＥ）ＭｃＡｂ中，经方阵排列滴定筛选出无交叉反应且效价较高的２株ＭｃＡｂ，用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）为标记物，建立了ＮＳＥ－ＭｃＡｂ双位点夹心ＥＬＩＳＡ。经直线回归方程、取代试验、阻断试验检验，该标准曲线近似直线关系，可测定标本中ＮＳＥ的范围为５～５０μｇ／Ｌ。对２３例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）（Ⅰ和Ⅱ期４例、Ⅲ期７例、Ⅳ期１２例）．３２例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ），２２例肺良性疾病（ＢＰＤ）和３６例健康体检者血清ＮＳＥ进行了测定，ＳＣＬＣ的阳性率为８２．６％（１９／２３），其中Ⅰ和Ⅱ期为５０％（２／４）；Ⅲ期为８５．７％（６／７），Ⅳ期为９１．７％（１１／１２）；ＮＳＣＬＣ的阳性率为３．１％（１／３２），ＢＰＤ阳性率为４．５％（１／２２）。ＳＣＬＣ的显著高于ＮＳＣＬＣ和ＢＰＤ（Ｐ＜０．０１）；ＳＣＬＣ的Ⅳ和Ⅲ期显著高于Ⅰ和Ⅱ期（Ｐ＜０．０１）。２３例ＳＣＬＣ经综合治疗后，完全缓解组和部份缓解组血清ＮＳＥ水平非常显著低于进展组和无改变组（Ｐ＜０．０１）。本文研究结果证明，ＮＳＥＭｃＡｂ双位点夹心ＥＬＩＳＡ具有灵敏、特异和简便快速的特点，对ＳＣＬＣ的血清学诊断有较高的灵敏度和特异性，对ＳＣ