脂肪干细胞转化神经元移植对大鼠颞叶癫痫发作的影响

目的 研究脂肪干细胞(ADSCs)转化神经元移植对颞叶癫痫大鼠癫痫发作情况的影响.方法 SD大鼠40只,随机分为移植组(n=15)、移植对照组(n=15)、生理盐水对照组(n=10),依据大鼠左侧海马CA3区坐标,通过立体定向手术将ADSCs转化神经元用微量注射器注入移植组大鼠海马;对比手术前后实验大鼠的行为学、皮层及海马脑电改变情况.结果 移植后2周,癫痫大鼠的发作频率与移植前2周比较明显减少,海马及大脑皮层可记录到少量的癫痫波;2个月内绝大多数大鼠癫痫发作逐渐停止,活动逐渐恢复正常;2个月时,癫痫大鼠海马和大脑皮层记录到的脑电图,与生理盐水组大鼠脑电图差别较小.结论 ADSCs转化神经元移植可减轻大鼠颞叶癫痫的发作.     

神经元移植与鼠颞叶癫痫海马γ-氨基丁酸能神经元的变化

目的 探讨脂肪干细胞(ADSCs)转化神经元移植前后大鼠颞叶癫痫海马γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的变化及海马形态学改变.方法 40只SD大鼠随机分为3组,移植组(n=15):海马内注射海人酸(KA)后,依据大鼠左侧海马CA3区坐标,立体定向将ADSCs转化神经元注入海马;移植对照组(n=15):海马内注射KA后,靶点内移植生理盐水;生理盐水对照组(n=10):海马内注射生理盐水后,不进行任何移植.比较手术前后大鼠海马GABA能神经元的变化以及海马形态学的改变.结果 ADSCs转化神经元移植后,GABA能神经元较移植前显著增加(P＜0.01).移植对照组海马区神经元水肿数量较生理盐水对照组明显增多,细胞内胞质贫乏,细胞器数量减少,细胞核边界不规整;而移植组神经元水肿减轻,其余结构变化与生理盐水对照组差异不大;且术后8周较2周与生理盐水对照组的差异更小.结论 ADSCs转化神经元移植对颞叶癫痫大鼠的神经元修复起到了良好的效果.     

神经元移植与鼠颞叶癫痫海马γ-氨基丁酸能神经元的变化

目的探讨脂肪干细胞(ADSCs)转化神经元移植前后大鼠颞叶癫痫海马γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的变化及海马形态学改变。方法40只SD大鼠随机分为3组,移植组(n=15):海马内注射海人酸(KA)后,依据大鼠左侧海马CA3区坐标,立体定向将ADSCs转化神经元注入海马;移植对照组(n=15):海马内注射KA后,靶点内移植生理盐水;生理盐水对照组(n=10):海马内注射生理盐水后,不进行任何移植。比较手术前后大鼠海马GABA能神经元的变化以及海马形态学的改变。结果ADSCs转化神经元移植后,GABA能神经元较移植前显著增加(P<0.01)。移植对照组海马区神经元水肿数量较生理盐水对照组明显增多,细胞内胞质贫乏,细胞器数量减少,细胞核边界不规整;而移植组神经元水肿减轻,其余结构变化与生理盐水对照组差异不大;且术后8周较2周与生理盐水对照组的差异更小。结论ADSCs转化神经元移植对颞叶癫痫大鼠的神经元修复起到了良好的效果。     

干细胞治疗颞叶癫痫展望

成人颅脑的特定部位在损伤后有自我修复的能力，这种能力通过激活神经干细胞（NSCs）后产生神经元来实现，以海马兴奋性增高和自发性癫痫发作为特征的颠叶癫瘸（TLE），也许是干细胞治疗临床疾病的一个目标。本文对近年来干细胞治疗颞叶癫痫的进展做一综述。     

棕色脂肪干细胞与白色脂肪干细胞移植对心肌梗死大鼠心功能的影响

目的对比研究棕色脂肪干细胞（BADSCs）与白色脂肪干细胞（ADSCs）治疗急性心肌梗死大鼠的效果。方法采用酶消化法分别分离大鼠腹股沟脂肪组织及肩胛骨下脂肪组织,获得ADSCs与BADSCs,并进行流式分析与多谱系分化鉴定。30只雄性SD大鼠随机分为PBS对照组、ADSCs移植组及BADSCs移植组,建立急性心肌梗死模型,将各组对应细胞直接注入大鼠心肌梗死边缘区。移植后4周进行心功能检测并利用组织学检测移植细胞的体内分化与血管化作用。结果术后4周,与PBS对照组相比,ADSCs以及BADSCs移植组大鼠心功能均显著提高（P〈0.05）,且纤维化程度显著减弱（P〈0.05）。免疫荧光结果表明,移植的BADSCs成心肌分化数量显著高于ADSCs。免疫组化结果显示,ADSCs移植组以及BADSCs移植组大鼠心肌梗死区血管密度均较PBS对照组显著增加（P〈0.05）,ADSCs移植组血管密度显著高于BADSCs移植组（P〈0.05）。结论不同来源脂肪干细胞移植均具有改善心肌梗死患者心功能的作用,虽然BADSCs体内促血管化作用不如ADSCs,但其具有明显的心肌分化能力,可有效改善心脏功能。     

胚胎NA能神经元移植对鼠点燃癫痫发作程度的影响

目的：明确胚胎NA能神经元移植对点燃癫痫发作严重程度的影响。方法：以Wistar大鼠为研究对象，按移植物的性质分为NA移植组、移植对照组和还对照组。首先定期电刺激杏仁核制备电点燃癫痫模型，再用立体定向技术向各组动物的海马移植相应的移植物，移植后观察癫痫的电生理和行为学指标（杏仁核后放电阈值、持续时间、癫痫行为级别、癫痫持续时间）变化情况，TH免疫组织化学染色了解移植物存活情况。结果：经统计学处理，移植前后各指标无显著性差异（P＞0．05）。结论：胚胎NA能神经元移植对点燃癫痫的发作严重程度无抑制作用。     

丹红注射液对颞叶癫痫大鼠海马可塑性的影响

目的研究丹红注射液对氯化锂-匹罗卡品点燃慢性颞叶癫痫（temporal lobe epilepsy,TLE）大鼠海马神经元及GFAP表达的干预作用。方法建立氯化锂-匹罗卡品点燃颞叶癫痫大鼠模型,将50只造模成功的颞叶癫痫大鼠随机分为颞叶癫痫组（生理盐水10ml/kg腹腔注射）及丹红治疗组（丹红注射液10ml/kg腹腔注射）,另选10只大鼠作为正常对照组;每组大鼠随机分为5个不同时间点：24h、3d、7d、15d及30d。采用尼氏染色及免疫组化染色,检测每组大鼠不同时间点海马CA1区神经元存活数目及GFAP表达。结果与正常对照组相比,颞叶癫痫组大鼠海马CA1区存活神经元数目明显减少,海马GFAP表达显著增多（P〈0.05）;与颞叶癫痫组相比,丹红治疗组大鼠海马CA1区存活神经元数目明显增多,海马GFAP表达显著减少（P〈0.05）。结论丹红注射液可以减轻颞叶癫痫大鼠海马神经元脱失及减少GFAP表达,有助于减轻大鼠发作程度及阻断慢性颞叶癫痫的形成和发展。     

脂肪干细胞复合富血小板血浆对脂肪颗粒移植的影响

目的 探讨运用组织工程技术构建的组织工程脂肪对颗粒脂肪移植的影响。 方法 通过酶消化法获取脂肪干细胞(ASCs),采用两步离心法制备富血小板血浆(PRP),运用组织工程技术构建组织工程脂肪。根据移植物的组成不同分为ASCs+PRP+脂肪颗粒、PRP+脂肪颗粒、ASCs+脂肪颗粒及对照组(PBS+脂肪颗粒),分别移植入裸鼠皮下,并于移植后10 d、30 d、60 d及90 d取出移植物,进行大体观察及体积测量,镜下观察组织结构变化。 结果 90 d后ASCs+PRP+脂肪颗粒组移植物质地柔软、颜色淡黄,较其它组别更接近于正常的脂肪组织,且具有更多的存活体积(P<0.05)及更好的组织学形态。 结论 运用ASCs与PRP复合脂肪颗粒能够成功构建组织工程脂肪,是一种新的安全有效的修复颌面部及全身软组织缺损方法,具有较高的应用前景。     

胚胎干细胞源性神经元移植治疗癫痫的初步动物试验研究

目的研究胚胎干细胞源性神经元移植对杏仁核电刺激点燃癫痫模型大鼠脑电及痫性发作行为的影响。方法利用无血清培养方法将胚胎干细胞进行诱导分化成神经元,建立大鼠杏仁核电刺激点燃癫痫模型,将体外标记的带有绿色荧光蛋白的胚胎干细胞源性神经元的细胞混悬液移植入实验组,对照组给予生理盐水,于移植前2天、移植后第10天和第15天进行电刺激,通过皮层脑电图及视频监测仪记录和观察两组大鼠的首次痫性发作级别、诱发4级发作的电脉冲串个数、ADT(after-discharge threshold,后放电阈值)。结果经统计学处理,两组ADT差别与分组因素无关,而是时间因素所致,随时间延长ADT均升高,对照组ADT升高幅度较实验组有减慢趋势,余观察指标两组均无统计学差异。结论本次研究未发现胚胎干细胞源性神经元移植对杏仁核电刺激点燃癫模型的大鼠起到治疗癫痫的作用。     

脂肪来源干细胞(ADSC)在脂肪移植中的应用

自体脂肪移植是整形外科一个常见的手术,临床应用广泛。然而,移植脂肪的存活率具有很大的不确定性。脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cell, ADSC)是近年来从脂肪组织中发现的一类具有多功能分化能力的干细胞。ADSC能够在自体脂肪移植中起到辅助作用,增加脂肪存活率,这一技术又叫做细胞辅助脂肪移植术(cell-assisted lipotransfer, CAL)。本文对CAL的现状进行综述,为ADSC在脂肪移植中的临床应用和基础研究提供参考。     

颞叶癫癎的手术治疗效果分析

目的 评价手术治疗对难治性颞叶癫痫的疗效。方法 回顾性总结72例难治性颞叶癫痫的手术效果。结果 随访1～11年，癫痫发作停止37例(51．4％)，发作频率减少75％以上19例(26．4％)，发作频率减少50％～75％，者8例(11．1％)，效差或无效8例(11．1％)，总有效率为88．9％，无严重并发症及手术死亡。结论 外科手术治疗对药物难治性颞叶癫痢是一种安全、有效的方法；对致痫灶的精确定位和彻底处理是提高疗效的关键。     

50例颞叶癫痫的病理临床研究

以光镜和电镜观察了50例颞叶癫痫之手术切除病灶.结果发现:(1)颞叶癫痫的基本病变为神经细胞的变性和噬节,胶质细胞增生和脱髓鞘,以及出血、血铁素沉积、炎细胞浸润、继发囊肿和胶质、胶原瘢痕形成等.电镜下主要为神经细胞内脂褐素显著增加,粗面内质网扩张、线粒体肿胀等退行性变;(2)22例患者有明确的国产期损害、产伤、外伤及脑部感染或高热病史.这些病例的病灶病变也与病史吻合.另从病理上明确为血管畸形和肿瘤者12例.作者认为,加强围产期保健,减少产伤,避免外伤.预防和积极治疗感染是减少颞叶癫痫发病的重要一环.     

Diagnosis and surgical treatment of temporal lobe epilepsy

目的　探讨颞叶癫痫 (TLE)的诊断和治疗方法。方法　 1996年至 1998年 ,36例顽固性颞叶癫痫病例依据EEG和MR检查进行定位诊断 ,其中 16例实施前颞叶切除术 ,另 2 0例接受选择性海马杏仁切除术 ,分析其近期疗效及随访结果。结果　所有患者癫痫得到满意控制 ,其中手术疗效满意 2 4例 ;显著 11例 ;良好 1例 ,术后无并发症发生。结论　MR有助于对TLE的定位诊断 ;手术是治疗顽固性TLE的重要手段 ,颞叶内侧癫痫病例应选用选择性海马杏仁核切除 ,采用经颧弓颞底入路使手术更为安全。     

Tenidap is neuroprotective in a pilocarpine rat model of temporal lobe epilepsy

Background Tenidap is a liposoluble non-steroidal anti-inflammatory drug that is easily distributed in the central nervous system and also inhibits the production and activity of cyclooxygenase-2 (COX-2) and cytokines in vitro.This study aimed to evaluate the neuroprotective effect of tenidap in a pilocarpine rat model of temporal lobe epilepsy (TLE).Methods Tenidap was administered daily at 10 mg/kg for 10 days following pilocarpine-induced status epilepticus (SE)in male Wistar rats after which prolonged generalized seizures resulted in TLE.After tenidap treatment,spontaneous recurrent seizures (SRSs) were recorded by video monitoring (for 7 hours per day for 14 days).The frequency and severity of the SRSs were observed.Histological and immunocytochemical analyses were used to evaluate the neuroprotective effect of tenidap and detect COX-2 expression,which may be associated with neuronal death.Results There were 46.88±10.70 survival neurons in tenidap-SE group,while there were 27.60±5.18 survival neurons in saline-SE group at-2.4 mm field in the CA3 area.There were 37.75±8.78 survival neurons in tenidap-SE group,while there were 33.40±8.14 survival neurons in saline-SE group at-2.4 mm field in the CA1 area.Tenidap treatment significantly reduced neuronal damage in the CA3 area (P ＜0.05) and slightly reduced damage in the CA1 area.Tenidap markedly inhibited COX-2 expression in the hippocampus,especially in the CA3 area.Conclusion Tenidap conferred neuroprotection to the CA3 area in a pilocarpine-induced rat model of TLE by inhibiting COX-2 expression.     

不同胎龄人胎脑皮质颞叶神经干细胞变化特征观察

目的：探讨不同胎龄胎脑皮质颞叶神经干细胞（NSC）的发育规律。方法：收集胎龄为16～36周的水囊引产胎儿90例，采朋免疫组化及光镜技术对人胎脑皮质颞叶NSC的分布、彤态、生长方式以及数量进行检测。结果：NSC主要分布在锥体细胞层及内颗粒细胞层，呈圆形、椭圆形及多角形，尤以小圆形细胞为甚，0～2个突起，核相对较大，1～2个核仁不等，染色质疏松。NSC呈区域性分布，其中有大量由数个细胞形成的NSC集落，少部分NSC以单个彤式存在于其他神经细胞间。各胎龄组间NSC在分布、形态、种类、生长方式等方面无明显差异；随着胎龄的增加，皮质颞叶NSC逐渐减少。结论：不同胎龄人胎脑皮质颞叶NSC在分布、形态、种类和生长方式等方面无明显差异，其数量随着胎龄的增加而减少。     

颞叶癫痫大鼠缝隙连接蛋白32表达变化的实验研究

目的 建立大鼠颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)模型,观察大鼠缝隙连接蛋白32(connexin32,Cx32)的表达变化,进一步探讨TLE发病机制.方法 健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠88只,随机为正常对照组(n=8)、手术对照组(n=40)和红藻氨酸(KA)致痫组(n=40),其中手术对照组和KA致痫组又按术后3 h、6h、12、24h和7 d分为5个亚组.每组8只.通过免疫组织化学染色检测各组cx32蛋白的表达变化.结果 KA致痫后3 h大鼠的颠叶皮层区及海马区Cx32阳性表达逐渐增多,并持续上升,时程越长阳性表达越多,平均光密度值越高(P<0.01).KA致痫后各时间点cx32平均光密度值明显比对照组增多,差异有显著性(P<0.05);手术对照组与正常对照组相比,Cx32平均光密度值差异无显著性(P>0.05).KA致痫后大鼠颞叶皮层区及海马区均有Cx32阳性表达,海马区Cx32平均光密度值明显比颞叶皮层高(P<0.05 o结论cx32可能参与颞叶癫痫的发生发展过程,提示cx32特异性的抑制剂有可能为颞叶癫痫的临床治疗开辟新的前景.     

海人酸颞叶癫痫大鼠海马GAD65表达的动态变化

目的探讨GAD65在颞叶癫痫大鼠海马的表达变化及其意义。方法112只雄性SD大鼠随机分为实验组(n=70)与对照组(n=42),实验组大鼠选用海人酸腹腔注射法建立颞叶癫痫模型,对照组大鼠腹腔注射无菌生理盐水。选取腹腔注射后3h、6h、12h、24h、48h、7d和30d为研究的时间点,颞叶海马的CA1区、CA3区、齿状回为研究部位。腹腔给药后每天观察大鼠的行为学变化,大鼠处死前进行EEG描记。用原位杂交方法检测不同时间点海马不同区域GAD65mRNA的表达,免疫组织化学法检测GAD65蛋白的表达。结果实验组大鼠海马GAD65mRNA及其蛋白的表达随时间呈逐渐增高趋势,致痫后48h￣30d,GAD65mRNA及其蛋白表达较对照组增高(48h,P<0.05;7￣30d,P<0.01)。结论颞叶癫痫慢性期海马GAD65表达的增高是癫痫发生后机体的一种内源性抗痫机制。     

颞叶癫痫情景记忆损害的研究

目的:研究颞叶癫痫对情景记忆损害的特点及其影响因素。方法:采用听觉词汇测试(auditoryverbal memory test,AVMT),测试62例颞叶癫痫患者(包括29例新诊断颞叶癫痫未服药患者和33例门诊随访且规律服药患者)和年龄、受教育程度相匹配的30例健康者的情景记忆。结果:颞叶癫痫组自由回忆(27.52±1.23)分、延时回忆(9.21±0.63)分、再认测试(11.83±0.54)分,均低于正常对照组成绩,且两组间差异有统计学意义(t=5.73～6.99;P<0.05)。其中颞叶癫痫服药组与未服药组相比,服药组自由回忆测试(24.42±1.15)分、延时回忆测试(7.24±0.64)分、再认测试(11.00±0.47)分,得分均较低,且延时回忆测试得分的差异有统计学意义(t=2.18;P<0.05);两组间自由回忆和再认测试的差异无统计学意义(t=1.20～1.84;P>0.05)。结论:颞叶癫痫患者存在情景记忆的损害,对自由回忆、延时回忆以及再认都有损害,提示颞叶参与情景记忆的神经机制学说;与未服药组相比服药组癫痫患者存在更加明显的情景记忆损害,提示抗癫痫药物是影响记忆的重要因素之一。