蚯蚓纤溶酶的分离纯化及其部分酶学性质的研究

以野生环毛蚓(Pheretima)为材料，经匀浆抽提、热变性、硫酸铵分步沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤和DEAE—纤维素离子交换柱层析等纯化步骤，得到纯度较高的蚯蚓纤溶酶(EFE)，具有强烈的溶解血纤维蛋白的作用。同时对酪蛋白和BAEE也具有较强的水解作用，但对ATEE无水解活性。实验表明蚯蚓纤溶酶能被苯甲磺酰氟强烈抑制，说明该酶是丝氨酸蛋白酶、属胰蛋白酶类。金属离子Na^ 、K^ 、Mg^2 对此酶有一定的抑制作用，Hg^2 对EFE有强烈抑制作用，而Ca^2 可提高此酶活力。     

豆豉纤溶酶的纯化及其性质研究

由发酵大豆(豆豉)分离纯化一种活性强的纤溶酶,采用硫酸铵盐析,Sephadex G-100和Sephacryl S-200色谱纯化的纤溶酶,在SDS-PAGE上呈一条蛋白带,Mr31000,等电点8.6±0.2.纯化倍数44倍,纯酶比活31020UK/mg,活性回收率68%.由于该酶具有较强的催化纤维蛋白原溶解的作用,因而有望成为一种新型抗血栓药物或预防血栓病的保健食品.     

蚯蚓纤溶酶新组分的分离纯化及部分性质

采用以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基的亲和色谱分离蚯蚓纤溶酶，以DEAE-纤维素-52离子交换柱色谱和制备电泳纯化各单组分。结果表明新组分8、9、10都是能水解纤维蛋白的糖蛋白。组分8是一种纤溶酶原激活剂，有2个亚基，Mr为25．5k和17．8k；组分9仅一条肽链，Mr为33．6k；组分10含有Mr为18．7k和10．9k的2个亚基。组分9、10均兼有纤溶酶原激活活性和直接纤溶活性。     

药用蚯蚓纤溶酶的制备及其性质的研究

从爱胜蚓中制备药用纤溶酶，经工厂中试，收率为２．５２－２．７４％，纤溶活性为２４３３３－２６５６０ｍｍ＾２／ｍｇ；水解酪蛋白活性为５９８－６４０ｍＵ／ｍｇ。制备工艺重复性好，操作简易可行另报道了该酶的一些生化特性和稳定性的研究结果。     

双胸蚓纤溶酶的分离纯化及性质研究

通过选择性热变性、大豆胰蛋白酶抑制剂－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析和Ａｒｇ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，从双胸蚓中分离纯化得到具有强烈纤溶活性的酶组分。     

不同蚯蚓纤溶酶组分纤溶活性的相互作用

采用纤维蛋白平板法对从赤子爱胜蚓中纯化的4种纤溶酶(EFE-1，EFE-2，EFE-3，EFE-4)组分的单独作用及相互作用的活性进行了研究，结果表明，4种组分单独作用时以EFE-4的活性最强，其次是EFE-3，最弱的是EFE-1和EFE-2，4种组分之间存在着相互作用，其纤溶活性的大小因组合不同而不同，不同组分联合使用时，以EFE-2—4的活性最强，除EFE-1-3、EFE-3—4两组合的活性与其单独作用的活性差异不显著外，其它各组合的纤溶活性都显著地高于单独作用的活性     

中草药桃仁纤溶酶的亲和层析分离

目的分离出高效、特异、安全、不良反应较小的纤溶酶,为溶栓药物的研究奠定基础。方法利用硫铵沉淀法提取出桃仁纤溶酶,测定其比活力,并比较不同蛋白酶抑制剂对桃仁纤溶酶活性的抑制作用,采用亲和层析法对桃仁纤溶酶进行分离纯化。结果亲和层析法分离得到了纤溶酶活性单一组分,比活力为89.08 U.mg？1,比纯化前提高了7.37倍,该组分属于丝氨酸蛋白酶家族。结论利用大豆胰蛋白酶抑制剂作为配基,采用亲和层析法分离桃仁纤溶酶可以得到单一活性成分,且比活力相对提高。     

中草药桃仁纤溶酶的亲和层析分离

目的 分离出高效、特异、安全、不良反应较小的纤溶酶,为溶栓药物的研究奠定基础。方法 利用硫铵沉淀法提取出桃仁纤溶酶,测定其比活力,并比较不同蛋白酶抑制剂对桃仁纤溶酶活性的抑制作用,采用亲和层析法对桃仁纤溶酶进行分离纯化。结果 亲和层析法分离得到了纤溶酶活性单一组分,比活力为89.08 U·mg^-1,比纯化前提高了7.37倍,该组分属于丝氨酸蛋白酶家族。结论 利用大豆胰蛋白酶抑制剂作为配基,采用亲和层析法分离桃仁纤溶酶可以得到单一活性成分,且比活力相对提高。     

用亲和色谱柱纯化蚯蚓纤溶酶

蚯蚓纤溶成分具有良好的抗栓、溶栓作用，也未见毒副反应。利用亲和柱色谱分离可获得纯度极高的产品，本研究用国产对氨基苯砜乙基交联琼脂代替进口Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ，可降低生产成本，是一种较为实际的纯化方法。     

蚯蚓纤溶酶的分离纯化及抗栓活性研究

目的摸索蚯蚓纤溶酶的分离纯化工艺和研究蚯蚓纤溶酶的抗血栓活性。方法采用分步盐析、透析、凝胶色谱和亲和色谱法分离纯化蚯蚓纤溶酶 ;此酶的体内抗栓活性检测采用动静脉旁路血栓形成抑制实验法。结果分离纯化得到的蚯蚓纤溶酶比活高 ,为 16 0 5IU/mg ;蚯蚓纤溶酶的体内血栓形成抑制效果比尿激酶作用显著。 结论该法分离纯化工艺简单 ,特异性好 ,纯化的纤溶酶比活高 ;体内抗栓活性比尿激酶作用显著     

蚓激酶的分离纯化和对大鼠脑血栓模型的药效观察

以威廉环毛蚓为原料，用循环工艺纯化。纯品蚓激酶经股静脉注射实验性局灶脑梗塞大鼠，并与尿激酶比较，观察其对脑梗塞模型大鼠的药效。从脑片染色结果及给药后不同时间点大鼠血液中纤溶酶原激活剂和其抑制剂的含量变化显示用该工艺纯化的蚓激酶有较好的溶栓作用。     

均匀设计在蚯蚓纤溶酶肠溶片研究中的应用

应用均匀设计研究蚯蚓纤港酶肠溶片的处方和工艺，以片剂酶活力不改变为指标观察处方工艺，成功地获得了使蚯蚓纤溶酶活力基本不改变的肠溶衣片剂最佳处方和工艺。     

白眉蝮蛇蛇毒纤溶酶的分离纯化

目的用白眉蝮蛇蛇毒分离纯化纤溶酶。方法利用离子交换层析、亲和层析、分子筛层析技术进行分离纯化纤溶酶。结果得到了电泳纯的纤溶酶,其相对分子质量为24000。结论该工艺可以快速地分离纯化白眉蝮蛇蛇毒纤溶酶：     

长白山白眉蝮蛇蛇毒纤溶酶的纯化

从长白山白眉蝮蛇蛇毒中纯化具有溶栓功效的纤溶酶。方法：用 ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ５０离子交换、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ７５凝胶过滤层析和 ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ ５０三步柱层析分离方法,对长白山白眉蝮蛇蛇毒进行分离纯化,得到了一种纤溶酶活性组分。结果：经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱表征该酶为单一蛋白,其分子量为 ２３．３６７ ｋＤ。结论：为进一步研究其结构和功能提供了可靠依据。     

快速蛋白液相色谱法纯化威廉环毛蚓纤溶酶及其活性研究

摸索威廉环毛蚓纤溶酶的分离纯化工艺和研究蚯蚓纤溶酶(earthw fibrinolytic enzyme，EFE)体内外的抗栓溶栓活性。通过提取，分步盐析，再经AKTAbasic蛋白快速液相色谱进一步纯化，得一组有纤溶活性的同工酶，其中一种比活较大达2000IU／mg。药理试验表明该酶有明显的抗拴溶栓活性。     

赤子爱胜蚓五种纤溶酶组分的分离纯化及对纤维蛋白原酶解的初步研究

经硫酸铵盐析沉淀和ＰＡＧＥ制备电泳,从赤子爱胜蚓粗品中分离纯化出五种纤溶酶组份,在ＰＡＧＥ中均呈现单一带。组份Ⅶ、Ⅷ、Ⅹ能将纤维蛋白原中α、β、γ链依次降解,对α链亲和力最大。     

单克隆抗体亲和层析法纯化Namalva细胞干扰素

采用自行研制的α干扰素单克隆抗体亲和层析胶3D9进行了Namalva细胞干扰素纯化的初步研究.结果表明α干扰素纯化活性回收率达96%,比活性达1×108IU/mg,一次亲和层析纯化倍数4.4×104.电泳及Westem blot结果显示相对分子质量在2.1×103.