无机纳米粒子对人肺癌细胞A_(549)和小鼠成纤维细胞L_(929)生物学特性研究

目的 :探讨无机纳米粒子对人肺癌细胞A54 9和小鼠成纤维细胞L92 9生长增殖的影响。方法 :用羟基磷灰石 (HAP)及碳酸钙 (CaCO3 )对A54 9人肺癌细胞和L92 9小鼠成纤维细胞进行体外培养研究 ,分对照组、CaCO3 组和HAP组。绘制细胞生长曲线 ,MTT法测细胞存活率 ,并测集落形成率。结果 :①经CaCO3 纳米粒子处理过的A54 9人肺癌细胞生长曲线明显下降 ,HAP及CaCO3 纳米粒子对L92 9细胞生长曲线无明显影响 ;②CaCO3 纳米粒子在 48h、72h对A54 9细胞的OD值分别为 0 .44± 0 .0 4;0 .42± 0 .0 3,较对照组明显降低 (P <0 .0 1) ;③经CaCO3 纳米粒子处理过的A54 9细胞集落形成率为 33.3% ,较对照组明显降低 (P <0 .0 0 1)。结论 :①CaCO3 对A54 9细胞生长和集落有一定抑制作用 ,对L92 9细胞无明显影响。②HAP对L92 9细胞亦无明显影响。     

无机纳米粒子对人肺癌细胞A549和小鼠成纤维细胞L929生物 …

目的：探讨无机纳米粒子对人肺癌细胞Ａ５４９和小鼠成纤维细胞Ｌ９２９生长增殖的影响。方法：用羟基磷灰石（ＨＡＰ）及碳酸钙（ＣａＣＯ３）对Ａ５４９人肺癌细胞和Ｌ９２９小鼠成纤维细胞进行体外培养研究,分对照组ＣａＣＯ３组和ＨＡＰ组。绘制细胞生长曲线,ＭＴＴ法测细胞存活率,并测集落形成率。结果：①经ＣａＣＯ３纳米粒子处理过的Ａ５４９人肺癌细胞生长曲线明显下降,ＨＡＰ及ＣａＣＯ３纳米粒子对Ｌ９２９细胞生长内     

乳酸对人非小细胞肺癌细胞A549生物学特性影响的研究

背景 肿瘤的重要特征之一是代谢异常,乳酸作为代谢产物也参与肿瘤代谢。目的 探讨乳酸对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549糖酵解压力、增殖、迁移和周期等生物学特性的影响。方法 培养人非小细胞肺癌细胞A549,分为对照组、5 mmol/L乳酸处理组和10 mmol/L乳酸处理组。对照组不作任何处理,其他两组乳酸处理24 h后,通过Seahorse细胞代谢分析仪分析乳酸处理后A549细胞的糖酵解压力和线粒体底物选择,qPCR检测糖酵解相关基因(HK3、LDHA、LDHB、PKM)和细胞周期及迁移相关基因(CCNE1、CCND1、CCNB1、CDK2、CDH1、TWIST1、SNAI2)mRNA表达水平,Western blot检测糖酵解相关蛋白(G6PD、PKM2、HK1和LDHA)水平。利用实时无标记细胞分析(real time cellular analysis,RTCA)、流式细胞术分析乳酸对NSCLC细胞A549增殖、迁移、周期等生物学特性的影响。结果 两个乳酸处理组相较对照组糖酵解降低,糖酵解最大能力及糖酵解储备均降低且10 ...     

miRNA-155表达对人肺癌细胞A549增殖的影响

【目的】探讨miRNA-155在正常肺组织和非小细胞肺癌组织中的表达及miRNA-155对人肺癌细胞A549增殖的影响。【方法】采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）技术检测15例非小细胞肺癌组织及其癌旁组织中miRNA-155的表达;A549细胞分别转染miR-NC和miRNA-155 mimic ,采用Real-time PCR技术检测转染后A549细胞中的miRNA-155表达水平,同时采用MTT 技术和流式细胞技术检测转染后A549细胞增殖情况,Western印迹法检测转染后A549细胞中Akt、p-Akt（Ser473）、p27、bcl-2、bax的表达。【结果】miRNA-155在非小细胞肺癌组织中的表达情况明显高于癌旁组织（ P ＜0．05）;与转染 miR-NC 组相比, A549细胞转染miRNA-155 mimic后miRNA-155表达水平明显增高（ P ＜0．001）,MTT实验和流式细胞技术显示miRNA-155促进A549细胞的增殖;Western印迹法结果显示：转染miRNA-155的A549细胞p-Akt （Ser473）,bcl-2的表达水平增高,p27、bax的表达水平降低。【结论】miRNA-155可能通过促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,上调p-Akt（Ser473）、bcl-2表达,同时抑制p27、bax的表达来促进非小细胞肺癌的发生发展。     

A549人肺癌细胞系/615-SCID小鼠转移瘤的生物学特征

目的通过建立A549人肺腺癌细胞/615-SCID小鼠模型,评价重度联合免疫缺陷615-SCID小鼠在建立人类肺癌转移模型方面的应用价值.方法将1×107A549细胞接种到615-SCID及SCID小鼠右上肢背部皮下,观察成瘤时间、成瘤率、肿瘤生长速度及转移发生.结果两品系小鼠接种后的成瘤率均为100%,615-SCID小鼠移植瘤潜伏期较长、生长较缓慢,更容易发生转移.结论 615-SCID小鼠比SCID小鼠更易于构建人类肺腺癌转移模型,对于肺癌转移特性研究具有较大的意义.     

针灸大鼠血清诱导人肺癌A549细胞凋亡的研究

目的:观察“针灸血清”对人肺癌细胞的A549增殖和凋亡的影响。方法:针灸刺激Wister大鼠双侧足三里、三阴交穴,此大鼠针灸血清分别作用于A549细胞,MTT法检测细胞生长情况,48h后流式细胞技术检测细胞凋亡率。结果:A549细胞生长受到明显抑制,作用48h后的细胞凋亡率分别为9.36%和5.12%。结论:针灸血清作用A549细胞可抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

融合自杀基因AdCD-UPRT对人肺癌细胞A549的体外作用

目的:研究融合自杀基因CD-UPRT系统对A549细胞的体外作用.方法:包装、扩增携带重组腺病毒AdCD-UPRT,并测定其滴度.检测AdCD-UPRT感染A549细胞的效率、毒性及目的基因的表达.用MTT法观察AdCD-UPRT/5-FC系统对A549细胞的体外抑制作用及旁观者效应.运用AO-EB染色、电镜及FCM观察AdCD-UPRT/5-FC系统对A549细胞的诱导凋亡作用.结果:CD-UPRT融合自杀基因对A549细胞显示出明显的生长抑制作用并存在旁观者效应,使细胞周期阻滞于S期并诱导细胞凋亡.结论:CD-UPRT融合自杀基因系统对A549细胞有较强的细胞毒作用.     

人肺腺癌A549多重抗药细胞株生物学特性变化

目的；探讨人肺腺癌Ａ５４９多重抗药细胞株生物学特性变化，方法：采用阿霉素（ＡＤＭ）浓度递增的方法诱导人肺腺癌Ａ５４９细胞系（Ａ５４９／Ｐ）在体外持续培养６个月，获得了具有多重抗药的Ａ５４９／Ｒ２细胞，该细胞能在０．２μｇ／ｍｌＡＤＭ下持续增殖，通过光镜和电镜观察其增殖及形态结构变化，结果：Ａ５４９／Ｒ２细胞由巨大细胞增殖而来，其微绒毛，线粒体及分泌泡明显增加，有进一步分化趋向，结论：Ａ５４９／Ｒ２     

纳米羟基磷灰石膜复合材料与小鼠成纤维细胞的相容性

目的探讨纳米羟基磷灰石膜聚氨酯复合材料(nano-Hydroxyapatite/ polyurethane,nHA/PU) 与小鼠成纤维细胞（L929）的生物相容性[1]。方法 将小鼠成纤维细胞与纳米羟基磷灰石膜聚氨酯复合材料体外复合培养,并设单独细胞培养的阴性对照和细胞与传统材料复合培养的对照组,倒置相差显微镜、扫描电镜行形态学观察,计数接种后的黏附情况,流式细胞仪分析接种到材料上的细胞的生长周期,CCK-8法[2]检测材料对细胞增殖影响。结果 小鼠成纤维细胞在纳米羟基磷灰石膜聚氨酯复合材料上良好的黏附、生长、增殖,流式细胞仪分析接种到材料上的细胞,其细胞周期与空白对照组和传统对照对比差异均无显著统计学（P>0.05）,CCK-8检测显示材料对细胞增殖的影响小于传统材料。结论 纳米羟基磷灰石膜聚氨酯复合材料具有良好的细胞相容性,可望作为组织工程人工肛门括约肌的外层套囊材料。     

转移力不同的肺癌克隆细胞中nm23-H1基因产物NDPK的表达

【目的】比较转移抑制基因nm2 3 H1表达产物核苷酸二磷酸激酶 (nucleosidediphosphatekinase ,NDPK)在转移力不同的肺癌克隆株中的表达。【方法】通过单细胞克隆技术及裸鼠接种筛选出高转移及低转移的人肺巨细胞癌克隆细胞株及高转移的人肺腺癌克隆细胞株 ,用LSAB免疫组化法检测nm2 3 H1基因产物NDPK的表达。【结果】NDPK在高转移及低转移的人肺巨细胞癌克隆细胞移植瘤及转移瘤中均有表达 ,高转移株的阳性细胞数目及强度均高于低转移株和裸鼠正常肺组织 ;NDPK在高转移的肺腺癌克隆细胞移植瘤中有表达 ,表达强度低于裸鼠正常肺组织。【结论】nm2 3 H1基因对肺巨细胞癌并不具转移抑制基因的功能 ,而可能促进肿瘤的发生、发展和转移。     

鳞癌相关抗原在诱发性肺鳞癌癌变过程中动态监测的研究

目的 :探讨肺癌形成发展过程中鳞癌相关抗原 (SCCAg)、癌胚抗原 (CEA)及糖链抗原 (CA15 3)的动态变化 ,为寻找有意义的肺癌早期诊断指标提供依据。方法 :经肺叶支气管内灌注甲基胆蒽碘油溶液对 91只Wistar大鼠诱癌 ,分别于灌注后第 2 0d、40d、5 0d、6 0d、70d、80d分批处死动物并取血清。从经病理确诊为不典型增生、原位癌及早期浸润癌各阶段的动物模型组中各选取 3～ 7例 ,应用微粒子酶免疫试验技术 (MEIA)测定血清中SCCAg、CEA、CA15 3的水平。结果 :在不典型增生、原位癌阶段 ,3种标志物均无改变 ;但在早期浸润癌阶段 ,SCCAg明显增高 ,其差异有显著意义 (P <0 .0 1) ,而CEA、CA15 3无明显改变。结论 :血清SCCAg在肺鳞癌早期即升高 ,表明SCCAg是肺鳞癌早期诊断的一个很有意义的指标。     

p53在肺癌中的表达及其与VEGF和血管新生关系的研究

目的探讨63例人肺癌中p53蛋白的表达与血管内皮细胞生长因子(VEGF)和血管新生的关系。方法采用免疫组织化学方法,以抗CD34单抗标记血管内皮细胞以测定血管新生,抗p53多抗标记p53蛋白,抗VEGF165单克隆抗体检测VEGF的表达。结果所有肺癌组织均有不同程度的血管新生,iMVD4～138.7(44.5±29)/×400,p53突变率为54%(34/63),VEGF的表达率为50.8%(32/63)。p53突变率与组织类型、临床分期、病人性别、年龄等临床参数无关;VEGF与组织类型、临床分期、病人性别、年龄等临床参数无关。结论p53蛋白表达与VEGF和血管新生未见相关;人肺癌的发生发展与p53蛋白过度表达有关。     

肺癌p53蛋白表达的免疫组织化学研究

应用链菌素亲生物素－过氧化物酶免疫组化方法研究了ｐ５３蛋白在６８例各型肺癌组织的表达情况。发现ｐ５３蛋白在常规石蜡切片中保存较好，在肺癌组织中表达的总阳性率为６３．２％，正常细胞中未见ｐ５３蛋白表达。提示ｐ５３蛋白是肺癌细胞的重要标志物。支气管粘膜上皮重度不典型增生的细胞可见ｐ５３蛋白表达，说明ｐ５３蛋白表达可能是支气管粘膜上皮癌变的早期事件。     

细胞周期调控因子p16和CDK4在肺癌中的表达

目的探讨肺癌中细胞周期调控因子p16和CDK4的表达意义.方法应用S-P免疫组织化学方法研究62例肺癌组织中p16和CDK4的表达情况.结果62例肺癌组织中p16和CDK4阳性率分别为58.1%和48.4%.腺癌中p16的阳性率明显高于小细胞癌(P＜0.05);淋巴结转移阳性组p16的表达显著低于阴性组(P＜0.05,r=0.27).不同组织类型肺癌中CDK4的表达未见明显差异,淋巴结转移阳性组CDK4的表达高于阴性组(P＜0.01,r=0.58).p16和CDK4的表达明显负相关(P＜0.01,r=-0.81).结论p16的表达与肺癌的组织学类型有关,腺癌中p16的阳性率高于小细胞癌,检测CDK4的表达可作为判断肺癌淋巴结转移的一项新指标.     

三株抗人肺鳞癌单克隆抗体免疫组化分析

目的对三株抗云南个旧肺鳞癌YTMLC-90杂交瘤细胞S2D1、N2D1、N3C5所分泌的单克隆抗体进行不同组织细胞的免疫组化分析,探讨其特异性.方法用收集的原倍杂交瘤细胞上清常规ABC免疫组化法进行组织细胞学交叉检测,分析三个抗体与临床病理确诊的肺鳞癌组织、肺腺癌组织、肠癌组织、食道癌组织、肾癌组织、肺正常组织石腊切片和肺鳞癌YTMLC-90细胞系、肺腺癌GLC-82细胞系、舌鳞癌Tca-8113细胞系、鼻咽癌KB细胞系、胶质瘤U-251细胞系、膀胱癌T-24、B1u-87细胞系的交叉反应.结果杂交瘤细胞上清液与肺癌组织及肺鳞癌、肺腺癌细胞系YTMLC-90、GLC-82反应呈阳性,阳性率分别为82%、100%;与正常肺组织及肠癌组织、肾癌组织、食道癌组织及体外培养的其它各肿瘤细胞系均呈阴性反应.结论经免疫组化研究,三株单克隆抗体具有肺癌特异性,属于肺癌相关抗原的单克隆抗体.     

纤支镜肺活检材料肿瘤标记与肺癌预后的研究

目的：探讨纤支镜肺癌标本中肿瘤标记物的表达及其与预后的关系。方法：应用增生细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、ｒａｓ－ｐ２１、ｐ５３单克隆抗体和ｃ－ｅｒｂＢ－２多克隆抗体，对７１例肺癌的纤支镜标本和１０例正常肺组织进行免疫组化染色研究。结果：１０例正常肺组织均为阴性表达。７１例肺癌中，ＰＣＮＡ、ｒａｓ－ｐ２１、ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２抗体的阳性表达率分别为：７０．４２％；８０．２８％；５６．３４％和８１．６９％。ｃ－ｅｒｂＢ－２与肺癌分型相关，其它三者与肺癌分型、分化及ＴＮＭ分期无关。但与预后均呈负相关。结论：上述４种抗体可作为判断肺癌预后的肿瘤标记物，提示用于术前判定肺癌患者的预后是可行的。     

人类巨细胞病毒与肺癌关系初探

目的 :评价人类巨细胞病毒与肺癌的关系。方法 :对 6 0例原发性肺癌和 2 0例肺良性疾病的病理标本采用PCR扩增后电泳判断人类巨细胞病毒DNA的检测率。结果 :肺癌组人类巨细胞病毒DNA的检测率明显高于肺良性疾病组。结论 :人类巨细胞病毒感染与肺癌的发生有关 ,人类巨细胞病毒可能是肺癌发生的病因之一     

结肠癌中多药耐药相关蛋白和肺耐药蛋白的表达

目的:探讨结肠癌中多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测51例结肠癌和32例癌旁相对正常结肠中MRP和LRP的表达情况。结果:51例结肠癌中MRP的阳性率为41.18％(21/51),32例癌旁相对正常结肠中MRP的阳性率为18.75％(6/32),两组比较差异有显著性(P<0.05)。LRP的表达与结肠腺癌的分化程度相关,高分化腺癌的阳性率为90.00％(9/10),中分化腺癌的阳性率为79.66％(23/29),高于低分化腺癌20.00％(1/5)的阳性率,差异有显著性(P<0.05)。结肠癌中MRP与LRP的表达存在相关性(P<0.05)。结论:结肠癌中MRP和LRP均为高表达,两者均可能是结肠癌原发性多药耐药的重要机制,且两者可能有协同作用。临床上检测这2种蛋白的表达,有助于对化疗药物的选择。