肿瘤控制概率模型研究外照射分次剂量与治疗的关系

目的：研究在给定治疗剂量和治疗时间的情况下，使用不等分次剂量（UEFD）治疗方案是否能治疗效果。方法：参考细胞存活率的计算公式，推导出分次治疗时的肿瘤控制概率（TCP）的计算模型，然后在假设的全序程或1周1内分次剂量以等比数列，等差数列递增或递减等4种分次剂量方案及肿瘤生物学参数的情况下，计算给定总治疗剂量D所能获得的TCP值，能作TCP与D的关系曲线及TCD50与等比或等差之间的关系曲。结果：上述4种UEFD方案所得到的TCP－D曲线治疗好于递增分次剂量治疗，但分次剂量间变化幅度小时两者间的差异不明显。结论：从理论上讲，在给定治疗剂量及治疗的情况下用UEFD治疗能获比EFD治疗更好的结果。     

维拉帕米对外照射导致的小细胞肺癌细胞系耐药性的逆转作用

目的 观察维拉帕米对分次外照射引发的小细胞肺癌细胞系NCI-H446耐药性的逆转作用.方法 采用GWGP80型远距离60Co治疗机对进入指数生长期的NCI-H446细胞进行分次外照射,总照射剂量为50Gy.用不同浓度的丝裂霉素(MMC)干扰,观察外照射前后NCI-H446细胞存活率的变化;同时观察在上述干扰条件不变的前提下,加入逆转剂维拉帕米后其存活率的变化.结果 在相同浓度MMC干扰下,照射组细胞的存活率均明显高于未照射组(P＜0.01);加入逆转剂维拉帕米后,两组细胞的存活率差别不大(P＞0.05)或者照射组细胞的存活率反而明显低于未照射组(P＜0.01).结论 经逆转剂维拉帕米作用后,照射组细胞的耐药性几乎完全被逆转甚至对MMC更敏感.     

外照射对体外培养的小细胞肺癌细胞系的总RNA及多药耐药基因的影响

目的 观察分次外照射对NCI－H446小细胞肺癌细胞系的总RNA及其MDR1基因的影响。方法 采用GWGP80型远距离^60Co治疗机对进入指数生长期的NCI－H446小细胞肺癌细胞系进行分次外照射，每次Cy，总剂量为50Gy。用Trizol分别提取未照射和已完成全部外照射剂量的NCI－H446细胞系的总RNA。通过RT－PCR，琼脂胶电泳，应用Gelbase电脑软件计算电泳条带的平均光密度值（光密度值愈大，表示产物愈多），求两组细胞的MDR1DNA与其β-actin DNA的平均光密度 比来确定两组细胞MDR1mRNA表达的高低。结果 在相同细胞数和相同体积的条件下，未照射组和照射组细胞总RNA的浓度分别为25．9μg/ml和16．6μg/ml；未照射组细胞其MDR1DNA/β-actin DNA为1．078，照射组为1．338。结论 对NCI－H446小细胞肺癌细胞系进行外照射可抑制其总RNA的生物合成；同时可提高其MDR1mRNA的表达水平。     

累积高剂量照射对体外培养的小细胞肺癌细胞系的总RNA及其多药耐药基因的影响

观察累积高剂量外照射对小细胞肺癌NCI-H446细胞系的总RNA及其MDR1mRNA的影响。采用GWGP80型远距离^60Co治疗机对进入指数生长期的NCI-H446小细胞肺癌细胞系进行分次外照射，每次2Gy，累积总剂量为50Gy。用Trizol分别提取未照射和已完成全部外照射剂量的NCI-H446细胞系的总RNA。通过RT-PCR，琼脂胶电泳，Gellbase电脑软件计算电泳条带的平均OD值（OD值愈大，表示产物愈多），求两组细胞的MDR1 DNA及其β-actinDNA的平均OD值的比来确定两组细胞MDR1mRNA表达的高低。结果显示，在相同细胞数和相同体积的条件下，未照射组和照射组细胞总RNA的浓度分别为25.9μg/ml和16.6μg/ml；未照射组细胞MDR1DNA/β-actin DNA为1.078，照射组为1.338。由此推断MDR1mRNA表达增加。研究表明，对小细胞癌细胞系MCI-H446进行累积高剂量外照射可抑制其总RNA的生物合成；同时可提高其MDR1mRNA的表达水平。提示累积高剂量放射可能诱发多药耐药。     

立体定向放射治疗中分次照射生物学效应校正因子的形成

基于加速器的立体定向放射治疗(SRT)分次照射总照射时间的增加可产生明显的生物学效果的减弱。其减弱的原因很可能是由于在分次SRT的两次照射间隔期间而发生的修复过程。作者通过在试管中的实验评估了分次SRT过程中随着照射时间的增加细胞修复的效果。照射方案设计为多弧、分次照射逐渐增加剂量的典型的SRT方案。     

用染色体畸变研究AT细胞系辐射敏感性和适应性反应

目的探讨毛细血管扩张运动共济失调症(ataxiatelangiectasia,AT)细胞系的辐射敏感性和对低剂量辐射能否诱导细胞遗传学适应性反应。方法用2cGy60Coγ射线预先照射进入G1期的AT5B1VA(AT)细胞和GM0639(GM)细胞,培养6h后再照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线,分析染色体畸变。结果G1期的GM细胞在预照射2cGy60Coγ射线的诱导剂量后能非常显著地降低随后照射1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发的染色体畸变率,染色体畸变的观察值非常显著地低于预期值(P<0.001),而对AT细胞则没有观察到这种现象,染色体畸变的观察值与预期值差异无统计学意义(P>0.05);另外,1.0Gy或3.0Gy60Coγ射线诱发AT细胞的各种畸变率(包括着丝粒畸变、无着丝粒畸变和染色单体型畸变)均显著地高于GM细胞(P<0.001)。结论低剂量电离辐射不能诱导AT细胞产生细胞遗传学适应性反应;AT细胞对电离辐射诱发染色体畸变高度敏感,可能是由于不能正确修复DNA双链断裂的结果。     

不同照射方式对结直肠癌CL187细胞的抑制作用和分子机制初探

目的 研究单次、分次和125Ⅰ粒子持续低剂量率照射对结直肠癌CL187细胞生物学效应的影响.方法 实验分高剂量率单次照射组(400 cGy/min,单次组)、分次照射组(2 Gy/次/d,400 cGy/min,分次组)和125Ⅰ粒子持续低剂量率照射组(2.77 cGy/h,125Ⅰ组).3组细胞照射0、2、4和8 Gy后,24和48 h进行细胞计数和锥虫蓝染色,比较细胞总数和细胞存活率的差异.利用克隆形成实验比较3组细胞增殖能力的差异.通过流式细胞仪检测细胞凋亡.蛋白免疫印迹法分析PHLPP2、PTEN和Bax蛋白表达的变化.结果 与单次组和分次组相比,125Ⅰ组细胞总数减少(t=34.28和29.48,P＜0.05)、存活细胞比例减少(t=-12.38和-14.61,P＜0.05),细胞克隆形成能力下降,相对生物学效应是1.41.照射后48 h细胞凋亡检测发现125Ⅰ组细胞凋亡比例增加(t=-15.08和-11.99,P＜0.05).蛋白免疫印迹法检测发现125Ⅰ组Bax表达量升高,PHLPP2和PTEN的表达量3组间差异无统计学意义.结论 单次、分次和持续低剂量率照射后细胞PHLPP2蛋白表达水平均升高,但剂量率的高低并不影响其表达水平.不同方式照射后,凋亡相关蛋白Bax的表达水平上升,125Ⅰ组升高更加明显,125Ⅰ持续低剂量粒子照射可能通过影响凋亡相关蛋白Bax的表达水平实现对结直肠癌CL187细胞的杀伤作用.     

射线照射对胰腺癌细胞凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响

目的研究不同剂量的γ射线对人胰腺癌细胞凋亡及bcl2,bax基因表达的影响。方法利用不同剂量的γ射线对体外培养的胰腺癌Panc1细胞进行照射,采用PI和AnnexinⅤPI法定量检测细胞凋亡,流式细胞仪检测照射后胰腺癌细胞Panc1的Bcl2、Bax基因表达水平。结果胰腺癌panc1细胞凋亡百分率在一定剂量范围内(≤15Gy)随着照射剂量的提高而增大,在一定时间范围内(≤24h),随着时间的延长而增大。照射组细胞凋亡相关基因Bcl2表达较对照组明显降低,两组相比差异有统计学意义(P<005);照射组bax基因的表达较对照组明显升高,两组相比差异有统计学意义(P<005)。结论γ射线诱导胰腺癌panc1细胞凋亡具有剂量依赖性和时间相关性,bcl2和bax在胰腺癌细胞凋亡调节过程中起着重要作用,不同剂量γ射线照射胰腺癌细胞时Bcl2和Bax表达水平也不相同,通过降低bcl2的表达及提高bax表达来诱导胰腺癌细胞发生凋亡有可能是γ射线杀伤肿瘤细胞的机制之一。     

低剂量γ射线诱导小鼠细胞不同辐射敏感株对基因突变适应性反应

作者用低剂量γ射线预照射同源但辐射敏感性不同的小鼠乳癌细胞ＳＫ－１和ＳＸ－９，观察其对随后较大剂量照射所引起ｈｐｒｔ基因突变的影响．结果，具有辐射抗性的ＳＲ－１细胞经５ｍＧｙ或１ｃＧｙ低剂量顶照射后，能显著降低随后３Ｇｙ照射诱发的ｈｐｒｔ基因突变频率．而ＤＮＡ双链断裂修复能力缺陷的电离辐射敏感细胞ＳＸ－９，经相同处理后，并不减轻随后的较大剂量照射所诱发的基因突变率．表明ＤＮＡ双链断裂修复缺陷的细胞，对低剂量辐射诱导的适应性反应能力差．     

不同放疗方案对大鼠伤口瘢痕愈合影响的病理研究

目的：研究3种不同放疗方案对于大鼠伤口瘢痕愈合过程的影响，为临床瘢痕放疗采取更加合理的治疗方案提供实验依据。方法：大鼠外科切口法制备动物模型，直线加速器照射，采用宏观、光镜(观察胶原纤维)及免疫组化(检测TGF-β1表达的变化)等方法，动态观察3种放疗方案对于大鼠创伤愈合影响的病理变化过程。结果：各照射组创面愈合均延迟，胶原纤维含量及组织中TGF-β1的表达降低，300cGy(单次剂量300cGy，1／d，连续照射5次)照射方案组效果较好：结论：直线加速器放射治疗影响TGF-β1表达和胶原形成的效果与照射剂量有关，小剂量分次照射的效果优于大剂量照射的效果。     

肝癌裸鼠移植瘤端粒酶活性表达的近日节律

目的：探讨肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成与端粒酶表达的近日节律。方法：在时辰同步化裸鼠中构建肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤，继续在程控光照条件下饲养，于光照后3、9、15、21h取样，用流式细胞仪测定各时期细胞DNA含量，细胞周期分布及端粒酶活性水平。结果：肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成随近日节律变化，且伴随端粒酶活性的同步节律变化，呈近日节律特征。结论：肝癌裸鼠移植瘤的生长与端粒酶活性表达在静止相达高峰，为制定肿瘤时辰化疗方案提供了有价值的参考。     

不同LET射线对SMMC-7721细胞辐射敏感性与周期的影响

目的研究不同LET射线对SMMC-7721肝癌细胞辐射敏感性、周期进程和凋亡的影响，为重离子治疗癌症的临床应用积累基础数据。方法以0、0．5、1、2、4和8Gy的^12C^6＋离子及X射线分别照射处于指数生长期的SMMC-7721细胞，用克隆形成率测定细胞辐射敏感性，通过流式细胞术测定细胞DNA含量以确定各时相细胞的比例及细胞凋亡情况。结果^12C^6＋离子所致的SMMC-7721细胞存活率明显低于x射线。随着吸收剂量的增加和修复时间的延长，^12C^6＋离子能导致更显著的细胞S期阻滞、G2/M期阻滞延迟和细胞凋亡。结论与X射线相比，^12C^6＋离子辐照能更有效地杀伤HepG2肝癌细胞，并诱导其凋亡。     

低剂量电离辐射对7721细胞细胞周期及p53、Ku70和Ku80表达的影响

目的　观察电离辐射对 772 1细胞 (人肝癌细胞 )细胞周期和p53、Ku70和Ku80基因表达的影响。方法　以人肝癌细胞株 772 1为研究对象 ,通过克隆形成实验拟合出 772 1细胞的剂量存活曲线 ;用流式细胞技术检测 75mGyX射线照射后 772 1细胞周期变化 ;用原位杂交方法检测 772 1细胞p53、Ku70和Ku80基因在 75mGyX射线照射前、后的表达情况。结果　与对照组相比 ,75mGyX射线照射后 0 5～ 6h ,772 1细胞S期延长 (P <0 0 5)。p53、Ku70和Ku80基因的表达照射前与照射后比较差异无显著性。结论　 772 1细胞在 75mGyX射线照射后 ,未出现G1期阻滞 ,p53、Ku70和Ku80基因在照射前、后表达无明显变化 ,是由于这些基因自身存在缺陷或激活机制存在缺陷所致     

上调microRNA-150表达对肝癌SMMC7721细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨上调microRNA- 150 (miR- 150)表达对肝癌SMMC7721细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法 SMMC7721细胞分成miR-150感染组(加入pGIPZ-miR-150慢病毒表达载体)、阴性对照组(加入只含GFP的慢病毒载体)和空白对照组(不转染).采用荧光定量PCR检测miR-150的表达情况,Western blotting检测靶基因c-Myb蛋白的表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 荧光定量PCR结果显示,转染miR-150pGIPZ后,SMMC7721细胞miR-150表达量(2.48±0.15)较阴性对照组(0.81±0.09)增加了2倍(p＜0.01).CCK-8法检测结果显示,与阴性对照组和空白对照组比较,miR-150组的细胞增殖率显著降低(P＜0.05).Western blotting检测结果表明,miR-150组细胞c-Myb蛋白表达(0.31±0.07)与空白对照组(0.80±0.09)及阴性对照组(0.81±0.08)相比明显减少(P＜0.0l).流式细胞仪检测结果显示,miR-150组细胞凋亡率(19.36％±1.78％)与阴性对照组(5.12％±0.54％)及空白对照组(4.68％±0.35％)相比明显增加(P＜0.01).结论 上调miR-150表达可通过降低靶基因c-Myb的表达,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,miR-150可能成为肝癌靶向治疗新的靶基因.     

不纯泊松分布法在6 MV X射线局部照射剂量估算中的应用

目的从离体和活体两方面探索不纯泊松分布法估算6MV X射线局部受照射剂量和受照射份额的适用性。方法2、4Gy6MV X射线离体照射健康人外周血，受照射份额为20％、50％和80％模拟局部照射；选择2、3Gy6MV X射线局部放射治疗的肿瘤病人，观察首次放射治疗前、后24h外周血淋巴细胞染色体畸变，采用不纯泊松分布法，估算受照射剂量和份额。结果2Gv离体照射50％、80％份额和4Gy照射20％、50％、80％份额的淋巴细胞双着丝粒 环(dic r)畸变呈过分散分布，受照射剂量和份额估算值与实际值基本吻合。单次2Gy盆腔照射、受照射局部红骨髓比例大于20％或3Gy全颅照射放射治疗病人的外周血淋巴细胞dic r畸变呈过分散分布，估算的受照射份额与受照射局部红骨髓比例相接近，较大剂量3Gy放疗时估算的受照射剂量较为准确。患者局部放射治疗后与放射治疗前离体模拟的实验结果都显示较好的一致性。结论采用不纯泊松分布法可以比较准确的估算离体和活体局部受照射剂量和份额，适用于照射剂量较高和照射份额不是太小的低LET射线，受照射局部红骨髓占全身的比例可大致反映局部照射的份额。     

Late radiation fibrosis in rat lung following protons and 250 kV X-rays irradiation

To investigate the biological effectiveness of proton beams in the development of pulmonary fibrosis the lungs of male 7-week-old Wistar rats were locally irradiated with a single dose of 10-50 Gy of 250 kV X-rays and modulated, 250 MeV protons at Particle Radiation Medical Science Center (PARMS). Animals were sacrificed serially after 3, 6, 9 and 12 months at which times the development of the fibrotic lesion in alveolar walls and peribronchial connective tissues was assessed quantitatively by analysis of microscopic images of Azan-Mallory stained sections. Fibrosis index (FI) values in alveolar walls and peribronchial tissues were defined as the fraction (in percent) of a specific image area, the gray level of which represents collagen deposits. Using this FI values, the increase of fibrotic lesion following 0-40 Gy of X-rays irradiation as a function of time were observed better in alveolar walls than in peribronchial tissues. Compared with 250 kV X-rays, 30 Gy of proton beams irradiation produced less increase in the time course of FI values of alveolar walls and dose-response curve at 12 months later suggested that the fibrotic lesion in alveolar walls after protons exposure of the doses above 30 Gy might develop more slowly.     

槲皮素对人肝癌细胞SMMC7721增殖的影响

目的：研究槲皮素人肝癌细胞SMMC7721生长抑制的影响。方法：采用^3H-TdR掺入法,MTT检测法和双层琼脂集落形成实验,观察了肝癌细胞的生长变化。结果：槲皮素对人肝癌细胞SMMC77231有显的抑制生长及增殖,并能使肝癌细胞出现脱落死亡,DNA生成物减少,肝癌细胞SMMC7721集落形成率降低。结论：本实验研究提示,槲皮素对肝癌细胞SMMC7721具有较强的抑制生长及增殖性,并可能用于对肿瘤的协同的治疗研究。     

Index of Authors (with Titles) (Vol. 62)

Epidermal stem cells accelerate their repopulation rate during fractionated irradiation. To study the changes in keratinocyte differentiation associated with radiationinduced repopulation, we investigated the expression of a panel of 14 monoclonal or polyclonal antibodies against keratins, involucrin and others, as well as the expression of 15 lectins in the irradiated mouse leg skin. Tissue samples were collected after 1, 2, and 3 weeks of daily irradiation with 3 Gy per fraction. Abnormal morphological appearance of the irradiated epidermis suggested disturbed terminal differentiation. Keratin 16 (K16) was negative in normal epidermis but intense staining was observed in the irradiated epidermis. Involucrin was expressed in the outmost suprabasal layers only in the normal epidermis but extended to the lower layers in the irradiated epidermis. The lectin binding patterns for agglutinins from Soybean, Dolichos biflorus, and Helix pomatia showed differences between the normal and the irradiated epidermis. From these characteristic changes in staining patterns we concluded that accelerated repopulation of the epidermis during fractionated irradiation is associated with a deficiency in terminal squamous differentiation.     

脑胶质瘤SHG-44细胞株照射后子代辐射敏感性

目的 探讨脑胶质瘤SHG-44细胞株照射子代生长特性及辐射敏感性变化。方法 培养人脑胶质瘤SHG-44细胞株照射后的存活子代细胞,测定其群体倍增时间,并进行集落形成实验和流式细胞仪检测,分析其辐射敏感性和细胞周期变化。结果 SHG-44细胞群体倍增时间为(22.78±2.61) h,SHG-44细胞经6 MV X射线10 Gy照射后存活子代SHG-44.10细胞群体倍增时间为(30.46±2.73) h (F=7.878,P<0.05)。SHG-44细胞和SHG-44.10细胞再次2 Gy照射后的存活分数分别为70.8%、80.6%。与SHG-44细胞相比,SHG-44-10细胞在G₂/M期比例减少,S期比例增多。结论 SHG-44细胞照射后存活子代细胞增殖延缓,辐射敏感性下降。     

E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响

目的 研究抗放药物E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响。方法 用不同剂量的^137Csγ射线照射培养的CHO和CHL细胞,比较在有或没有E838的情况下,其对细胞集落形成率以及转化率的影响。结果 在3Gy照射剂量下,CHO细胞加药1μg/ml处理组集落形成率显著高于不加药组（P＜0．05）,而转化率加药组比不加药组低且有统计学意义（P＜0．01）。CHL细胞在此范围内变化亦有同样的趋势,但结果无统计学意义（P＞0．05）。结论 E838在浓度范围内对辐射诱导哺乳动物细胞转化有一定的抑制作用。