肝癌患者射频消融与手术前后外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及意义

目的：探讨肝癌患者接受射频消融或手术治疗前后外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平的变化及意义。方法：分析35例原发性肝细胞肝癌患者射频消融治疗前和治疗后1周外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平变化,并与20例原发性肝细胞肝癌手术切除患者外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平进行对比分析。另外检测10例因患胆囊结石行胆囊切除患者手术前后的CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平作为对照。结果：所有肝癌患者在射频消融治疗后7d外周血中CD4^＋、CD25^＋调节性T细胞水平降低,而手术组明显升高,对照组无明显变化。结论：采用射频消融治疗肝癌,可以改善患者的细胞免疫状态。     

人CD4+CD25+调节性T细胞系的建立与功能分析

目的：建立可在体外长期培养的人CD4^ CD25^ 调节性T细胞系并研究其免疫生物学特性。方法：用流式分选的方法从健康人外周血淋巴细胞中得到CD4^ CD25^ T细胞，并对其进行体外长期培养、扩增；淋巴细胞转化实验分析其免疫抑制功能，流式细胞法分析其表型。结果：经对人CD4^ CD25^ T细胞的长期培养扩增，获得具有免疫抑制功能的调节性T细胞系。该T细胞系对经TCR的刺激不敏感，且能抑制同一来源或同种异型CD4^ CD25^ T细胞的活化，大剂量IL－2可以逆转其抑制功能。长期培养的CD4^ CD25^ T细胞，膜表面CD25和CTLA－4分子持续高表达，而CD4^ CD25^ T细胞CD25和CTLA－4分子的表达呈周期性变化。结论：将CD4^ CD25^ T细胞体外扩增培养成系，其功能和表型与同一来源的CD4^ CD25^ T细胞显著不同。     

转化生长因子-β参与CD4^＋CD25^＋调节性T细胞诱导的发育研究进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）足一类具有免疫调节功能的淋巴细胞,在维持机体免疫耐受和免疫应答稳态方面发挥重要作用。转化生长因子β（TGF—β）与CD4^＋CD25^＋Treg的发育分化和功能有着密不可分的关系,虽然作用机理尚不完全明了,但其重要性毋情置疑。     

CD4^＋CD25^＋T细胞与移植免疫耐受

调节性T细胞是机体维持自身耐受的重要组成部分.CD4^＋CD25^＋T细胞以持续高表达CD25为特征,可通过细胞间直接接触或分泌TGF-β、IL-10来发挥抑制功能.它广泛参与自身免疫耐受、肿瘤免疫、移植免疫.现就其发育、特性、发挥功能的机制以及在移植免疫耐受中的作用和应用前景作一综述.     

慢性肾功能不全患者外周血调节性T细胞的表达

目的：探讨慢性肾功能不全患者外周血调节性T细胞表达水平及意义。方法：采用流式细胞术测定40例慢性肾功能不全患者外周血CD4’T细胞占淋巴细胞（CD45^＋细胞）的比例及CD4^＋CD127^-Treg、CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果：慢性肾功能不全各组患者外周血CD4^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例显著低于健康对照组，而CD4^＋CD25^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例较健康对照组无显著性差异，代偿期患者CD4^＋T占淋巴细胞的比例跟健康对照组相比，没有统计学差异，其余各期均显著高于健康对照组。患者CD4^＋T细胞占淋巴细胞的比例，CD4^＋CD127^-Treg、CD4＋CD25^＋CD127^-Treg占CD4^＋T细胞的比例与血清BUN和Cr值之间没有相关性。结论：慢性肾功能不全患者外周血CD4^＋T细胞数量增高，CD4^＋CD127^＋Treg数量降低，免疫功能异常。     

环孢霉素A对OVA免疫TCR转基因DO11.10小鼠CD4+CD25+T细胞的影响

目的：研究免疫抑制剂Csh对处于免疫应答状态的小鼠脾脏调节性CD4^＋CD25^＋T细胞影响。方法：采用流式细胞术检测卵白蛋白（OVA）免疫的DO11．10小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞及其中Foxp 3^＋T细胞的变化。结果：OVA免疫后脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞百分数及Foxp 3^＋T细胞占CD4^＋CD25^＋T细胞百分数均增加，显示CsA可明显减少正常及免疫应答状态下小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞及CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞百分数。结论：CsA在抑制免疫应答的同时也可能抑制了免疫耐受的诱导。     

尖锐湿疣患者皮损及外周血CD4^＋和CD8^＋细胞免疫功能的检测

目的通过对尖锐湿疣（CA）患者皮损及外周血CD4^＋和CD8^＋细胞免疫功能检测的分析,探讨尖锐湿疣患者细胞免疫功能的变化及其对CA的影响。方法通过流式细胞仪（FCM）对40例CA患者及20名正常人外周血进行反映细胞免疫功能的T淋巴细胞亚群的检测,实验采用免疫组化的方法对40例CA皮损样本中CD4^＋和CD8^＋细胞的数目进行检测。结果CA患者外周血及皮损较正常对照组中的CD8^＋细胞百分率增加．CD4^＋细胞百分率及CD4^＋／CD8^＋比值降低。结论CA患者存在全身和局部的细胞免疫功能低下,而且局部皮损细胞免疫功能低下可能在CA的发病中具有重要作用。     

CD4+CD25+调节性T细胞及相关细胞因子的研究进展

胸腺来源的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）是机体维持自身免疫耐受的重要组成部分，约占CD4^＋T细胞的5％-10％。它具有免疫抑制及免疫无能的特性，是最重要的Treg细胞的亚群之一。近年发现CD4^＋CD25^＋Treg细胞主要通过分泌一些抑制性细胞因子和抑制自身反应性T细胞的免疫应答等方式在维持自身免疫耐受中扮演着重要的角色，其数量的缺乏或功能紊乱会导致各种自身免疫性疾病的发生。     

手足口病患儿T淋巴细胞亚群与CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨外周血T淋巴细胞亚群及CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞在手足口病病人发病中的临床意义。方法采用流式细胞术检测了46例手足口病患者以及17例健康体检者外周血T细胞亚群CD3^＋、CD3^＋CD4ˉCD8^＋、CD3^＋CD4^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋CD8ˉ与CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞水平。结果与正常对照组相比,手足口病患者组CD3^＋、CD3^＋CD4ˉCD8’、CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞的百分率降低（P值分别为0．008、0．050、0．025）。CD3^＋CD4^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋CD8ˉ百分率以及CD4／CD8比值差异无统计学意义（P值分别为0．847、0．775、0．149）,以上各细胞亚群的百分率以及CD4／CD8比值在年龄与性别方面差异无统计学意义。结论手足口病患者CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞、CD3^＋、CD3^＋CD4ˉCD8^＋异常变化提示其免疫功能异常。     

CD4^＋T淋巴细胞内三磷腺苷检测法及其在器官移植中的应用

CD4^＋T细胞内ATP水平可反映其活化程度。Immuknow免疫细胞功能检测法，通过定量检测CD4^＋T细胞内ATP的含量，来评估CD4^＋T细胞的活化程度，进而评价机体的免疫状态。该检测法目前已应用于监测临床移植物受者免疫状态，可减少移植物活检频率，以及指导免疫抑制剂的个体化应用。     

抗肿瘤免疫研究的体外检测指标

随着分子生物学及相关技术的发展，肿瘤的免疫治疗已成为当前令人关注的研究领域。在机体抗肿瘤免疫中，各种淋巴细胞都有可能发挥作用，但大量研究表明，T细胞扮演着最重要的角色，尤其是CD8^ 细胞毒性T细胞(CTLs^ )和CD4^ 辅助T细胞(Th)，前者可识别肿瘤细胞表面被MHC Ⅰ类分子递呈的抗原多肽，导致肿瘤细胞裂解；后者可使CTL前体细胞增殖，产生大量效应细胞。所以在肿瘤免疫治疗中，检测CD8^ CTL反应和Th1型CD4^ T细胞的数目和功能是评价疗效的关键。     

CD4+ CD25+调节性T细胞对树突状细胞的杀伤作用

目的 探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是否对树突状细胞发挥免疫调节作用及其可能的机制。方法 用MACS（magnetic cell sorting）从BALB／c小鼠静息T细胞分离纯化CD4^＋CD25^＋T细胞，体外细胞增殖实验观察其对CD4^＋CD25^＋T细胞的免疫抑制作用；GM-CSF／IL-4培养自体小鼠骨髓来源DC，FACS（fluorescence-activated cell sorting）鉴定其表面分子特性；以CD3／CD28单克隆抗体活化CD4^＋CD25^＋调节性T细胞，FACS体外杀伤实验研究其对自体DC的调节作用，并观察穿孔素抑制剂EGTA对上述作用的影响。结果 用MACS法成功分离出CD4^＋CD25^＋T细胞，纯度可达98％，特异性表达而Faxp3基因，能明显抑制CD4^＋CD25^＋T细胞的体外增殖；骨髓来源的DC表达CDllc、MHCⅡ及少量协同刺激分子CD80、CD86；FACS体外杀伤实验证实以CD3／CD28抗体体外活化的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对自体DC有显著杀伤作用（P〈0．05），穿孔素抑制剂EGTA能部分抑制该杀伤效应（P〈0．05）。结论 CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可通过杀伤作用对自体DC发挥免疫调节作用，穿孔素／颗粒酶杀伤途径可能参与其中。     

介导CD4+CD25+调节性T细胞发育与功能的一个关键基因--Foxp3

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是天然产生的调节性T细胞的重要亚群之一，在维持免疫系统稳态中发挥重要的作用。目前有关CD4^＋CD25^＋调节性T细胞分化发育的确切机制还不清楚。最近的研究发现Foxp3基因与CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分化发育和免疫调节功能的关系密切，进而提示Foxp3可能是CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的一个特征性标志。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及其功能

CD4^＋CD25^＋T细胞亚群具有免疫调节功能，是机体内调节性T细胞（regulatory T cells，Tr）的主要类型，于1995年首次由Sakaguchi等提出。CD4^＋CD25^＋Tr的免疫学特点是免疫无反应性和免疫抑制性，可以通过下调机体的免疫应答维持对自身和非自身抗原的免疫耐受，CD4^＋CD25^＋Tr数量低下和功能紊乱可导致多种自身免疫性疾病，另外，它们在某些严重的炎症性疾病和下调肿瘤免疫应答中也起重要作用。对这类细胞生物特性的深入研究将有助于我们对临床有关疾病机制的理解及新型治疗策略的制定。     

GITR及其在免疫调节中的作用

糖皮质激素诱导的TNFR家族相关受体（GITR），也被称为TNFRSF18、AITR（人类）。静止T细胞低水平表达GITR，而CD4^＋CD25^＋调节性T细胞则呈高水平表达。GITR与其配体（GITRL）结合后会增强T细胞激活、增殖、分泌细胞因子、MAPKs和NF-κB激活效应、抑制CD4^＋CD25^＋Treg细胞的功能，从而加强效应性T细胞的活性，有利于增强抗肿瘤免疫和抗病毒免疫。随着生物学环境的变化，GITR激活Siva或者TRAF，起着促进或诱导凋亡的作用。     

CD4+ CD25+调节性T细胞AICD机制的研究

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞活化诱导的细胞死亡（AICD）发生的机制。方法CD4^＋CD25^＋T细胞以磁性细胞分离器（MACS）从BALB／c小鼠或DO11．10小鼠的静息T细胞分离纯化。体外细胞增殖抑制实验证实其免疫调节作用。CD4^＋CD25^＋T细胞的AICD以CD3／CD28单克隆抗体活化或以特异性OVA323-339肽、抗原提呈细胞活化等两种方法获得。CD4^＋CD25^＋T细胞凋亡相关基因的表达通过实时定量PCR检测。流式细胞仪检测细胞的凋亡率。进一步观察FasL中和抗体、TRAIL中和抗体及caspase抑制剂zVAD-fmk对CD4^＋CD25^＋T细胞凋亡的影响。结果MACS成功分离CD4^＋CD25^＋T细胞，纯度可达98％，该细胞可特异性表达Foxp3基因，能明显抑制效应性T细胞的体外增殖。CD3／CD28抗体以及OVA特异性抗原活化8d的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞AICD达39％～45％。活化前后的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞死亡受体家族表达发生明显变化；FasL、TRAIL中和抗体及zVAD-fmk可明显抑制CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的凋亡。结论FasL／Fas及其他凋亡相关分子可能参与了CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的凋亡。     

CD4+CD25+调节性T细胞的生物学特性及功能

对自身抗原产生免疫耐受是防止发生自身免疫病的关键。自1995年日本学者Sakaguchi等首次报道CD4^＋CD25^＋调节性T（Treg）细胞以来，越来越多的研究证明这群T细胞在自身耐受的维持中发挥着重要的作用。CD4^＋CD25^＋调节性T细胞具有以下特点：①自身免疫防御作用；②自然条件下是处于无能（Anergy）状态；③抑制其他CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞的生物活性；④抑制活性是抗原非特异性的；⑤抑制方法可能通过细胞与细胞间直接接触，或经分泌抑制性细胞因子发挥免疫抑制效应；     

移植免疫耐受中调节性T细胞的研究进展

调节性T细胞（Tr）在诱导和维持移植免疫耐受过程中的作用越来越受到人们的重视。根据不同的细胞表型和功能已将Tr分为若干亚类，首先是胸腺内T细胞发育过程中自然产生的CD4^＋T细胞亚群，能够构成性表达IL-2受体的仅链（CD25）存在于外周，体内体外均可抑制效应性T细胞的增殖和功能；其次是产生于正常的免疫应答过程中的诱导性Tr亚群，包括Tr1和Th3通过分泌细胞因子如IL-10和TGF—β发挥抑制作用。除此之外，也有报道CD8^＋Tr、双阴性T（DNT）细胞和NKT细胞在移植耐受的不同模型中亦发挥重要作用。因而研究各种Tr亚群的生物学特征、调节机制及其在移植耐受中的作用非常必要。     

中国HIV感染者细胞毒性淋巴细胞内穿孔素的差异性表达

目的 了解中国HIV感染者细胞毒性相关的NK细胞及CD8^＋T细胞内穿孔素表达水平，探讨HIV感染过程中穿孔素表达与机体免疫功能的关系。方法 采集31例未经抗病毒治疗的HIV感染者和经过高效抗逆转录病毒疗法（HAAS）治疗的17例HIV／AIDS患者以及15例健康对照的抗凝全血，应用流式细胞仪胞内染色法检测CD56^＋／CD3^-、CD3^-／CD16^＋NK细胞及CD8^＋／CD3^＋内穿孔素表达的百分数，分析其与NK细胞绝对值、NK细胞百分数、CD4^＋T、CD8^＋T淋巴细胞绝对值及血浆病毒载量的相关性。结果 中国HIV感染者的NK细胞CD56^＋／CD3^-及CD3^-／CD16^＋亚群穿孔素表达百分数（平均13．17％，平均24．05％）高于CD8^＋T细胞穿孔素表达百分数（平均9．03％）；NK细胞内穿孔素表达低于健康对照（P〈0．05，P〈0．05），CD8^＋T细胞内穿孔素表达高于健康对照（P〈0．05）；NK细胞及CD8^＋T细胞内穿孔素表达水平与其绝对计数显著相关，与疾病进展不相关。HAART治疗组NK细胞内穿孔素表达升高，CD8T^＋细胞内穿孔素表达无显著变化。结论 中国HIV感染者NK细胞内穿孔素表达降低，抗病毒治疗后升高；CD8^＋T细胞内穿孔素表达升高，抗病毒治疗后无显著变化。     

OD4^＋ CD25^＋调节性T细胞参与肿瘤免疫逃逸的研究进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）是机体行使负性免疫调节的重要载体,在生理病理的诸多方面都有重要意义.本文旨就其与肿瘤的关联、介导逃逸的机制、细胞来源以及可能的临床运用作一综述.