093 重组α/β半乳糖苷酶在豆、乳制品中的应用

大豆和牛乳以其丰富的营养价值成为人们生活中不可缺少的食品。但是，存在于大豆和牛乳中的某些低聚糖和乳糖能够引起肠胃胀气，限制了部分人群的食用。α-半乳糖苷酶可以水解大豆中易使肠胃胀气的棉籽糖和水苏糖，制备α-半乳糖基寡糖含量低的豆制品；β-半乳糖苷酶能够水解乳中的乳糖，获得低乳糖乳制品。本文综述了低聚糖引起肠胃胀气的原因以及基因重组α／β半乳糖苷酶在开发低含量寡聚糖的豆、乳制品方面的进展情况。     

重组α-半乳糖苷酶消除大豆低聚糖引起的小鼠肠胃胀气的研究

目的:分析食用大豆及其制品中的低聚糖引起肠胃胀气的原因。基因重组α-半乳糖苷酶对棉籽糖和水苏糖进行酶解,低聚糖对小鼠肠胃胀气的缓解情况。方法:以棉籽糖和水苏糖标准品作为受试物,分别灌胃给予不同周龄的昆明种小鼠,分析棉籽糖和水苏糖是否引起小鼠肠胃胀气;通过测量小鼠胀肠容积的方法检测胀气情况;硅胶薄层层析(TLC)检测低聚糖;SDS-PAGE法检测大豆蛋白。结果:棉籽糖、水苏糖均能够引起小鼠肠胃胀气;基因重组α-半乳糖苷酶可以消除小鼠食用棉籽糖和水苏糖后的肠胃胀气现象,添加的α-半乳糖苷酶对大豆蛋白没有影响。结论:α-半乳糖苷酶可做为食品添加剂,用来解决食用豆制品时发生的肠胃胀气。     

水镁石对大肠埃希菌影响的体外研究

目的 观察不同剂量、不同培养时间的水镁石对大肠埃希菌生长、代谢产物及酶的影响。方法 测定细菌数量、培养基pH值和Mg^2 、葡萄糖、丙酮酸的含量及β-半乳糖苷酶活力的变化。结果 随着水镁石浓度及培养时间的增加,葡萄糖含量逐渐下降,而培养基pH值、细菌数量和Mg^2 、丙酮酸的含量以及β-半乳糖苷酶活力逐渐增加。当水镁石浓度为1600μg／ml培养12h以及800μg／ml培养24h,各指标差异均有显著性。结论 水镁石能促进大肠埃希菌的生长代谢。     

乳糖酶制剂的研究进展

乳糖酶又称β-半乳糖苷酶,是人体中的的一种消化酶,是以母乳/奶粉为主要营养来源的婴幼儿体内最重要的消化酶,乳糖酶的主要功能是消化乳糖,将乳糖水解成能够被人体吸收的半乳糖和葡萄糖。人体缺乏乳糖酶会引起乳糖消化吸收障碍,部分患者出现腹痛、胀气和腹泻等消化不良的临床症状,称为乳糖不耐受。中国人群是乳糖不耐受的高发人群,随着近些年我国饮食中的乳制品逐年增加,我们必须重视乳糖不耐受的危害,尤其是婴幼儿人群。在婴幼儿中最主要的临床表现是腹泻,易造成患儿的营养不良和发育迟缓。目前,补充乳糖酶制剂被认为是解决乳糖不耐受的最理想方法,对我国人群尤为重要。本文通过检索Medline、BING学术、万方数据和中国知网,以检索词"乳糖酶(Lactase)、β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)和乳糖不耐受(Lactose intolerance)"检索最近10年发表的中英文文献,对乳糖酶制剂的研究进展做如下综述。     

保加利亚乳杆菌产β-半乳糖苷酶特性的研究

目的：研究保加利亚乳杆菌产β-半乳糖苷酶的特性，优化产酶条件。方法：以酸奶中分离的保加利亚乳杆菌wch9901和保加利亚乳杆菌标准菌株1．1480为研究对象，观察培养时间、培养基碳源、摇床转速、气体环境对细菌产酶的影响。结果：wch9901于37℃培养18h产酶达高峰，酶活性达0．246 NLU／ml，比酶活达3．465 NLU／g；1．1480于30℃培养36h产酶达高峰，酶活性达0．221 NLU／ml，比酶活达1．637 NLU／g。停止培养前1h加入2％乳糖利于wch9901产酶。两株保加利亚乳杆菌均于静止培养产酶较多。wch9901于厌氧环境培养产酶较多；1．1480于有氧环境培养产酶较多。结论：wch9901的最适产酶条件为37℃厌氧静止培养18h，培养基含乳糖；1．1480的最适产酶条件为30℃有氧静止培养36h。wch9901与1．1480相比具有产酶量多，产酶迅速的特点。     

益生菌和酸奶对乳糖不耐受者的作用研究

目的:研究益生菌和酸奶对乳糖不耐症(lactoseintolerance,LI)者的作用及其机制。方法:以经乳糖负荷试验筛选的乳糖不耐受者11名为对象,持续摄入益生菌(含B.longum)和酸奶(含L.bulgaricus,S.thermophilus,B.animalis)14d进行补充研究。试验分3个阶段,第1阶段为基值阶段1w,第2阶段为补充阶段2w,第3阶段为补充后阶段1w。在第2阶段前后1d分别进行双标稳定同位素13C-lactose/2H-glucose负荷试验,分析受试者摄入底物后6h呼气H2浓度值,以及血浆13C-glucose和2H-glucose浓度,并计算乳糖消化指数(lactosedigestionindex,LDI),乳糖消化量和口—结肠转运时间(orocecaltransittime,OCTT)。整个实验期间共收集5次粪便样本,分析β-半乳糖苷酶活性。结果:在第2阶段补充结束后个体LI症状评分显著低于补充前(7.09±5.50vs16.09±10.03,P<0.05);LDI、乳糖消化量、OCTT和各时间点呼气H2浓度在补充前后无显著性改变;粪便β-半乳糖苷酶活性在补充第1w即开始升高,补充第2w显著高于基值(147.6±165.8IUvs77.3±77.2IU,P<0.05)。结论:持续摄入益生菌和酸奶具有明显改善乳糖不耐受症状的作用,其原因可能与结肠β-半乳糖苷酶活性的增加有关。     

大豆及其制品中大豆低聚糖的测定方法

大豆低聚糖为功能性低聚糖,广泛存在于各类植物中,以豆科植物含量居多。大豆低聚糖主要成分为棉籽糖、水苏糖和蔗糖。棉籽糖、水苏糖都是由半乳糖、葡萄糖和果糖组成的支链杂低聚糖。由于人体内缺乏水解棉籽糖和水苏糖的水解酶-α-D-半乳糖苷酶,所以它们不被消化吸收直接进入大肠,为对双岐杆菌所利用。棉籽糖、水苏糖可替代蔗糖应用于食品工业中,是一种安全无毒的天然产品。为充分认识大豆的特殊成分,合理开发利用我国这一丰富的物产资源,故制定此方法。     

矿物尘粒对大肠埃希菌作用的体外研究

目的 研究来自全国各地的含硅矿物尘粒对大肠埃希菌生长、代谢产物、酶及形态的影响，从而探讨矿物尘粒对大肠埃希菌作用的机制。方法 分析矿物尘粒主要物理组成及化学成分，测定大肠埃希菌数量、培养基pH值、钙离子（Ca^2＋）、镁离子（Mg^2＋）、葡萄糖（GLU）、丙酮酸的含量、β-半乳糖苷酶的活力，扫描电镜观察大肠埃希菌的形态变化。结果 矿物尘粒物理组成基本一致，化学成分各不相同；含Ca^2＋或Mg^2＋高的矿物尘粒能使大肠埃希菌数量、丙酮酸含量增加，使β-半乳糖苷酶的活力增强，并能增加大肠埃希菌对GLU的利用；各矿物尘粒均可引起大肠埃希菌形态的变化。结论 含Ca^2＋或Mg^2＋高的矿物尘粒能促进大肠埃希菌的生长代谢。     

β-半乳糖苷酶基因及其在基因学中的应用

β -半乳糖苷酶基因 (ｌａｃＺ基因 )编码 β -半乳糖苷酶 ,由4个亚基组成 ,可催化乳糖分解为一分子的葡萄糖和一分子的半乳糖 ,还可催化Ｘ -ｇａｌ (5 -溴 -4 -氯 -3 -吲哚 -β -Ｄ -半乳糖苷 )水解 ,产物呈蓝色 ,便于检测和观察。基于这个特点 ,ｌａｃＺ基因常作为载体基因 ,被广泛地应用于基因学研究当中。ｌａｃＺ基因来源广泛 ,可来源于大肠杆菌、乳酸菌、链球菌等多种微生物。目前 ,已对多种来源的酶基因进行了深入的分析 ,β -半乳糖苷酶基因库已基本建立并日趋完善 ,但在基因学中应用最广的仍然是大肠杆菌ｌａｃＺ基因 ,它是大肠杆…     

轻质油(45℃馏分)蒸气的生殖毒性研究——Ⅱ.对大鼠睾丸LDH—X及溶酶体酶的影响

本研究观察了轻质油(45℃馏分)蒸气急性(30000mg/m~3和15000mg/m~3×8小时)和亚急性(3000mg/m~3×6小时/天×30天)动式染毒条件下,成年大鼠睾丸生化指标的改变。结果表明:(1)各实验组大鼠睾丸匀浆中LDH总量,LDH-X含量,与空白对照组比较无显著性变化(P>0.05)。(2)各实验组睾丸匀浆中游离型溶酶体酶β-D-半乳糖苷酶(β-D-G)、结合型β-D-G以及β-D-G游离酶/结合酶比值与空白对照组比较,差别不显著(P>0.05)。结合精子形态学检查结果,我们认为,在本实验浓度范围内,实验性急性、亚急性吸入轻质油(45℃馏分)蒸气对动物的生殖系统影响不明显。     

老年糖尿病患者尿液酶谱变化与超早期肾病的关系

目的　观察老年糖尿病患者尿液酶谱升高时 ,用胰岛素、糖适平等治疗后 ,糖尿病肾病发生和发展的情况。　方法　老年糖尿病患者运动后 2 4h尿蛋白定量 <30mg ,血尿微球蛋白 (β2 -MG)、尿微白蛋白、血尿素氮(BUN)、血肌酐 (Cr)均正常 ,尿液N -乙酰 - β -D -氨基葡萄糖苷酶、β -D -半乳苷酶、γ -谷氨酰转肽酶和胆碱脂酶升高 6 0例 ,随机分为观察组和对照组 (各 30例 ) ,观察组用胰岛素、糖适平治疗 ,对照组用优降糖、二甲双胍、达美康治疗 ,比较二组治疗前后尿液酶谱等的变化。　结果　尿蛋白定量、微白蛋白、血尿β2 -MG、BUN、Cr及尿液酶谱检测结果 ,观察组治疗前后的差异均无显著意义 (P >0 .0 5 ) ;而对照体治疗前后的差异均有极显著意义 (P <0 .0 1) ,治疗后高于治疗前且有 5 0 %的患者发生糖尿病肾病 ,有 2例发生肾功能衰竭。　结论　老年糖尿病患者尿液酶谱升高 ,提示早期肾小管、肾小球病变 ,避免使用有肾脏毒性的降糖药物 ,可预防糖尿病肾病发生     

三种低聚糖引起小鼠胃肠胀气现象的实验研究

目的: 对大豆低聚糖、改性大豆低聚糖和低聚果糖引起的胃肠胀气现象进行研究;方法: 建立引起小鼠的胃肠胀气的动物模型并测量胀肠容积的方法;结果:大豆低聚糖和改性大豆低聚糖各剂量组(高、中、低)与空白组的胀肠容积相比较,无明显差异(P>0.05),低聚果糖中、低剂量组与空白组比较,胀肠容积无统计学上的差异(P >0.05),而高剂量组有显著性意义(P<0.01)。结论:大豆低聚糖和改性大豆低聚糖各剂量组(高、中、低)均无胀气现象,低聚果糖的中、低剂量组也无胀气现象,而高剂量组(成人实际用量的100倍时)有极显著胀气现象。     

一株乳杆菌的鉴定及其乳糖酶活力测定

酸奶是一种高营养的发酵奶制品 ,具有减轻乳糖不耐受症等多种保健作用〔1〕。研究表明 ,酸奶之所以具有此种功效 ,就在于其中含有的活菌 ,尤其是保加利亚乳杆菌 ,更确切地说是保加利亚乳杆菌中的内源性高活力 β -半乳糖苷酶。在发酵奶的过程中 β -半乳糖苷酶能将奶中的乳糖分解为半乳糖和葡萄糖 ,降低牛奶中的的乳糖含量 ,从而减轻乳糖不耐受〔2〕。本文随机抽取市售酸奶 ,采用MRS培养基 ,随机从中分离纯化出 1株乳杆菌 ,对其进行鉴定并测定其 β -半乳糖苷酶活性 ,以期从酶的角度了解普通市售酸奶对乳糖不耐受的作用 ,并探讨从酸奶中筛…     

红杉醇抑制葡萄糖苷酶及改善糖耐量实验研究

目的探讨红杉醇体外对葡萄糖苷酶的抑制作用以及对糖耐量的影响。方法采用96孔板法,分别测定红杉醇对α-葡萄糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、蔗糖酶和海藻糖酶的抑制作用,以及抑制类型。对小鼠灌胃给予红杉醇后,考察其糖耐量。结果红杉醇等化合物对α-葡萄糖苷酶具有较强的抑制作用,对β-半乳糖苷酶,α-淀粉酶,葡萄糖淀粉酶和海藻糖酶也有一定的抑制作用,且抑制类型多为竞争性抑制。结论红杉醇在一定程度上具有降血糖的作用,其作用机制部分通过抑制-葡萄糖苷酶实现。红杉醇对糖尿病的预防与治疗具有一定作用。     

国家卫生计生委公告 2015年第1号

根据《中华人民共和国食品安全法》和《食品添加剂新品种管理办法》,经审核,现批准β-半乳糖苷酶为食品添加剂新品种;6-甲基辛醛为食品用香料新品种;氧化亚氮、阿拉伯胶、红曲黄色素、抗坏血酸(维生素C)、迷迭香提取物、二甲基二碳酸盐(又名维果灵)、硫酸铝钾(又名钾明矾)/硫酸铝铵(又名铵明矾)、磷酸、焦磷酸钠、六偏磷酸钠、迷...     

尿蛋白3项联合尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄苷酶检测在妊娠期糖尿病患者肾损伤中的临床应用价值

目的探讨尿α_1-微球蛋白(α_1-mG)、尿β_2-微球蛋白(β_2-mG)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)联合尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)检测在妊娠期糖尿病(GDM)肾损伤中的临床应用价值。方法选取滕州市中心人民医院临床明确诊断的妊娠期糖尿病患者174例和孕期正常体检者(对照组)56例作为研究对象。GDM患者按照血生化肾功能诊断结果分为肾功能异常组70例和肾功能正常组104例;按照肾小球滤过率(GFR)大小分为GDMⅠ组106例和GDMⅡ组68例。分别检测晨尿α_1-mG、β_2-mG、RBP及NAG水平,使用SPSS 19.0进行统计学分析。结果 GDM肾功能异常组和GDM肾功能正常组尿α_1-mG、β_2-mG、RBP、NAG水平明显高于对照组(P<0.05);GDM肾功能异常组尿α_1-mG、β_2-mG、RBP水平明显高于GDM肾功能正常组(P<0.05)。GDMⅠ组和GDMⅡ组尿α_1-mG、β_2-mG、RBP、NAG水平明显高于对照组(P<0.05);GDMⅡ组尿α_1-mG、β_2-mG、RBP水平明显高于GDMⅠ组(P<0.05)。GDM肾功能异常组和GDM肾功能正常组尿蛋白3项联合NAG检测阳性率均明显高于单一检测(P<0.05)。结论尿α_1-mG、β_2-mG、RBP及NAG可用于GDM肾早期损伤的诊断,尿α_1-mG、β_2-mG、RBP浓度变化与GDM肾损伤程度呈正相关;4项联合检测更有利于GDM肾早期损伤的筛查、诊断以及疾病进展的判断,有一定的临床应用价值。     

分光光度法测定乳制品中的乳糖

分光光度法测定乳制品中的蔗糖已在文献［１］中报道。乳制品中乳糖的测定目前均以国标方法［２］为准。该法需测定样品处理液水解后单糖的含量,再进行换算,操作较为麻烦。我们在实际工作中采用分光光度法直接测定乳制品中的乳糖,方法简单,结果满意。从而与文献［１］形成了用分光光度法测定乳制品中蔗糖和乳糖含量的完整体系。现报道如下。１原理 样品经除去蛋白质,其中的乳糖在加热情况下与碱直接发生颜色反应,生成分解的、缩合的、聚合的黄色产物［３］［４］。２试剂２．１乙酸锌溶液：称取２１．９ｇ乙酸锌,加入３．０ｍｌ乙酸…     

改性大豆低聚糖及其预防龋齿作用的研究

大豆低聚糖 (soybean oligosaccharides)是大豆籽粒中可溶性寡糖的总称 ,主要成分是水苏糖、棉子糖和蔗糖等 [1 ]。改性大豆低聚糖 (modified soybeanoligosaccharides)是大豆低聚糖经过酶改性的一种新型低聚糖。目前 ,国内生产大豆低聚糖是加入赋形剂后喷雾干燥制得粉末状产品 ,该产品中蔗糖的含量高达 44%。如此高的蔗糖含量限制了大豆低聚糖在一些功能性食品中使用。以大豆低聚糖中的蔗糖为底物 ,采用从米曲霉 (Aspergillus oryzae)中[2 ] 提取出的β-D-呋喃果糖苷酶 (E.C.3 .2 .1 .2 6) ,可以有效地将蔗糖水解成葡萄糖和果糖 ,并将果…     

2型糖尿病及合并大血管病变患者C反应蛋白、白细胞介素-6水平观察

Fabry病，又称Anderson-Fabry病或弥漫性躯体血管角质瘤，1898年由Fabry和Anderson两位学者首先报道故而命名，是一种较少见的、与X染色体连锁遗传的糖鞘脂类代谢疾病，白种人较东方人种更多见。Fabry病的发病机制是由于α-半乳糖苷酶A（alpha-galactosidase A，α-Gal A）先天性缺乏从而使其代谢底物三己糖酰基鞘脂醇（globotriaosylceramide，Ob3）和二己糖酰基鞘脂醇的末端半乳糖酰基不能被裂解而在体内储积，发生储积的主要部位包括血浆、血管内皮细胞、平滑肌细胞和上皮细胞的溶酶体内。     

中国六地区成熟母乳中低聚糖含量研究

目的探究中国六地区成熟母乳中主要母乳低聚糖(2'-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、乳酰-N-新四糖、乳酰-N-四糖、6'-唾液酸乳糖和3'-唾液酸乳糖)的含量及不同含量组母乳的比例及分布。方法在全国六个地区招募单胎足月分娩的健康产妇,收集40-45 d的成熟乳,使用高效阴离子交换色谱偶联脉冲安培检测器(HPAEC-PAD)测定了629例母乳样品中6种母乳低聚糖的含量。结果所有母乳样品中均检出6种母乳低聚糖,含量最高为2'-岩藻糖基乳糖,中值为1915.88mg/L,依次是乳酰-N-四糖、3-岩藻糖基乳糖、6'-唾液酸乳糖、乳酰-N-新四糖和3'-唾液酸乳糖,中值分别为701.13、443.95、301.72、112.78和105.52 mg/L。本研究显示,根据检测方法中2'-岩藻糖基乳糖的含量可划分母乳为极低含量组、低含量组和高含量组,其中极低/低含量组在乳母中的比例为22%,而高含量组约占乳母的78%,与人群中母乳非分泌和分泌型比例基本一致,且2'-岩藻糖基乳糖的含量在高、低含量组中相差约80倍。6种母乳低聚糖在六地区成熟乳中均存在显著差异(P0.05)。结论成熟母乳中均可检测出6种母乳低聚糖,其中2'-岩藻糖基乳糖的含量高于其他五种低聚糖。[营养学报,2020,42(3):219-223]