高压氧后低氧放疗对Lewis肺癌小鼠效应初探

目的 观察高压氧后低氧放疗对小鼠肿瘤组织和正常组织的影响。方法 实验用C57 BL／6小鼠，共设5组：空白对照组，单纯放疗组(单放组)，单纯低氧放疗组(LO组)，单纯高压氧放疗组(HBO组)，高压氧后低氧放疗组(HBO LO组)。单次大剂量6MeV电子束一次给予20Gy，高压氧条件为2．5个绝对大气压，100min。低氧条件为10．5％的低氧混合气，各组小鼠均经鼠尾静脉注射5．55mBq／0．2ml^99mTc-HL91后120min进行ECTγ显像。结果 (1)HBO组和HBO LO组的小鼠肿瘤平均生长延迟天数明显长于其他各组，对肿瘤抑制作用相近。(2)LO组和HBO LO组的小鼠平均存活天数明显长于其他各组，保护正常组织，延长寿命效应相近。(3)HBO组和HBO LO组乏氧组织显像剂放射性计数比值明显低于其他各组，两组间差异无显著性。结论 高压氧后低氧放疗对小鼠肿瘤组织有放射增敏作用而且对正常组织有放射防护作用。     

重离子对小鼠移植性Lewis肺癌分次照射的生物效应

目的研究重离子不同分次照射的生物效应。方法除对照组外，选择了2个剂量点：低剂量为12Gy，高剂量为24Gy。每个剂量分单次、2和3次照射组，观察Lewis肺癌的肿瘤体积变化、肿瘤生长延迟时间和荷瘤小鼠生存时间。结果无论高剂量还是低剂量，分3次照射的肿瘤生长延迟和生存时间都显著大于单次和分2次照射。结论采用分3次照射的肿瘤生物效应优于单次和分2次照射，低剂量又优于高剂量。此研究结果为我国重离子柬治疗肿瘤的I临床试验提供了实验依据。     

蒲黄水提物对小鼠Lewis肺癌的抑制作用

目的探讨蒲黄水提物对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法建立Lewis肺癌小鼠模型，随机分为阴性对照组，氟尿嘧啶注射液组，蒲黄水提物50、100、200rag·kg^-1·d^-1 3个剂量组，每组8只，连续治疗14d后，剥取胸腺、脾脏、肿瘤，称取重量，计算免疫器官指数及抑瘤率，并用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率及细胞周期。结果连续灌服给药14d后蒲黄水提物3个剂量，对Lewis肺癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用，其中100、200mg·kg^-1·d^-1剂量组有显著性差异（P〈0．05）；流式细胞仪检测各剂量组均出现不同程度的细胞周期阻滞，诱导肿瘤细胞凋亡率分别为：5．73％、20．76％、4．55％。结论蒲黄水提物对Lewis肺癌小鼠移植瘤的生长有一定的抑制作用，在肿瘤的预防及综合治疗中具有一定的应用价值。     

高压氧对Lewis肺癌小鼠免疫功能影响的研究

目的探讨高压氧（ＨＢＯ）暴露对Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。方法９０只患Ｌｅｗｉｓ肺癌的Ｃ５７小鼠被随机分为常压空气组（ＮＡ）、高压常氧氮（Ｎ２－Ｏ２）组和ＨＢＯ组。ＮＡ组置于舱内常压空气下,Ｎ２－Ｏ２组和ＨＢＯ组则分别暴露在含１０％氧的高压常氧氮和医用纯氧环境下,暴露的压力时程为绝对压２５０ｋＰａ－９０分钟,每日１次,每周暴露６天,共暴露两周;加压速度为１００ｋＰａ／ｍｉｎ,减压采用匀速减压法,以１０分钟减至常压。实验中检测了各组小鼠的自然杀伤细胞（ＮＫ）、非特异杀肿瘤细胞（ＬＡＫ）、细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）水平和巨噬细胞（Ｍφ）杀伤活性;同时还对各组小鼠荷瘤的体积、溃破率及动物致死率进行了观察。结果与ＮＡ组相比,ＨＢＯ组小鼠体内ＮＫ、ＬＡＫ、ＣＴＬ及Ｍφ活性显著升高（Ｐ＜０．０１）;实验动物肿瘤体积显著减小,荷瘤溃破率则明显增高（Ｐ＜０．０１）;且实验组小鼠的存活时间显著延长（Ｐ＜０．０５）。结论ＨＢＯ暴露显著提高了Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠体内ＮＫ、ＬＡＫ、ＣＴＬ的活性和增强Ｍφ细胞杀伤效率,从而解释了ＨＢＯ能抑制Ｌｅｗｉｓ肺癌生长的原因     

鲨鱼软骨提取物对大鼠佐剂性关节炎的防治作用

目的　探讨鲨鱼软骨提取物 (SCE)灌胃对大鼠佐剂性关节炎 (AIA )的预防和治疗作用。方法　用 Freund完全佐剂注入实验大鼠右后足造成佐剂诱导性大鼠关节炎模型 ,观察鲨鱼软骨提取物对佐剂性关节炎的影响。结果　在致炎后 7d SCE灌胃 ,连续 7d,在 SCE剂量为 2 .5 ,10 .0 ,4 0 .0 mg/kg时 ,第 2 2天 AIA计分分别为 (6 .12± 0 .6 4 )、(5 .38± 0 .74 )、(4.5 0± 1.2 0 )分 ,体重分别为 (2 74± 15 )、(2 76± 16 )、(2 88± 9) g,与 AIA对照组 [计分为 (6 .38± 0 .74 )分 ,体重为 (2 6 3± 16 ) g]比较 ,差异均有显著性 (P<0 .0 5或 0 .0 1) ,提示 SCE可明显抑制 AIA症状。在致炎后 19d SCE灌胃 ,连续 7d,在剂量为2 .5 ,10 .0 ,4 0 .0 mg/kg时 ,第 38天其 AIA计分分别为 (6 .75± 0 .4 6 )、(5 .2 5± 0 .4 6 )、(4.88± 0 .35 )分 ,与 AIA对照组 [计分 (7.38± 0 .74 )分 ]比较 ,抑制率分别为 8.5 4 % ,2 8.86 % ,33.87% ,差异均有显著性(P<0 .0 5或 0 .0 1) ,明显抑制 AIA症状。结论　鲨鱼软骨提取物灌胃对大鼠佐剂性关节炎模型的继发性病变具有显著的预防和治疗作用。     

高压氧在小鼠Lewis肺癌化学治疗中增效作用的研究(论著)

目的：探讨高压氧（ＨＢＯ）对荷Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠在化学治疗中的增效作用及其机理。方法：２７０只荷Ｌｅｗｉｓ肺癌的Ｃ５７小鼠被随机等分为空气对照组、高压氮氧组、ＨＢＯ组、ＨＢＯ－丝裂霉素组、ＨＢＯ－环磷酰胺组、ＨＢＯ－ＳＯＤ组、丝裂霉素组、环磷酰胺组和ＳＯＤ组共９个组。对Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠使用化疗结合ＨＢＯ疗法。采用电子自旋共振（ＥＳＲ）技术直接检测Ｌｅｗｉｓ肺癌组织中的氧自由基（ＯＦＲ）含量，并且应用分光光度法测定其脂质过氧化物丙二醛（ＭＤＡ）的含量，同时对各组动物荷瘤的体积、重量、坏死率及小鼠致死率进行了观察。结果：ＨＢＯ组、ＨＢＯ－丝裂霉素组及ＨＢＯ－环磷酰胺组的动物与相应的对照组相比，肺癌组织中的ＯＦＲ含量和ＭＤＡ含量均显著增高（Ｐ＜０．０５～０．００１）；荷瘤组织坏死率高，且坏死所需时间短；动物成活率高；肿瘤体积和重量也显著小于对照组（Ｐ＜０．０５～０．００１）。结论：荷Ｌｅｗｉｓ肺癌小鼠经ＨＢＯ暴露可以减缓荷瘤生长速度并加速癌细胞的坏死，丝裂霉素或环磷酰胺结合ＨＢＯ治疗能显著增强药物的抗肿瘤作用，减轻药物的副作用和延长小鼠的生命。     

照射、加温和顺铂对小鼠Lewis肺癌实体瘤的实验研究

以Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌实体瘤为研究对象，通过单纯照射、加温、顺铂（ＰＤＤ）以及这三种实验方法的不同组合，观察小鼠体重变化、肿瘤生长体积、足皮肤反应和干性坏死情况、病理学检查。结果表明：照射＋加温＋ＰＤＤ组效果最好、其次是照射＋加温组；单纯加温和ＰＤＤ３．５ｍｇ／ｋｇ组效果差，肿瘤抑制率分别是９１．６％、８０．４％、３３．７％和２９．９％。     

OK-432/IL-2对Lewis肺癌的抑制作用

OK-432/IL-2治疗60只C_(57),BL/6 小鼠体内移植性路易氏肺癌(Lewis lung cancer,LLC).实验结果如下:①治疗前15d中,Ⅲa、Ⅲb及Ⅳ组肿瘤直径始终小于Ⅰ、Ⅱ组,P<0.01,在>15d的治疗过程中,各组肿瘤直径趋于一致.②第15dⅠ、Ⅱ两组肿瘤重量明显大于 Ⅲa、Ⅲb及Ⅳ组,P<0、05.③Ⅰ、Ⅱ两组的肺转移瘤发生较Ⅲa、Ⅲb及Ⅳ组早,且前者转移灶数目较后者多,P<0.01.④15 d或 20 d,Ⅲa、Ⅲb及Ⅳ组的NK细胞活性及淋转刺激指数(SI)均高于 Ⅰ、Ⅱ组,P<0.01.     

鲨鱼软骨血管生成抑制因子的研究进展

目的 综述鲨鱼软骨血管生成抑制因子（SCAIF）的研究进展，为改进制备工艺和临床治疗提供依据。方法 依据献资料结合我们的研究成果，综述不同作从不同鲨鱼软骨中提取的SCAIF的理化性质，生物活性，抗肿瘤试验研究及临床疗效，评价其应用前景。结果 近10年来， 不同实验室从不同鲨鱼软骨中获得了相对分子量大小不一，生物活性亦有差异的SCAIF，但它们都具有抑制血管生成的生物活性和荷瘤小鼠的确切抑瘤效果。尽管临床疗效观察结果不一，究其原因可能与制剂纯度和病例选择等因素有关。结论 应用高纯度的SCAIF于临床治疗，因其具有生物活性高，不易产生耐药性，天然而无明显的毒副作用等优点，在治疗肿瘤及其它血管增生性疾病中，有着广阔的应用前景。     

小鼠Lewis肺癌移植瘤模型活体分子成像研究

目的建立能进行光学活体分子成像的lewis肺癌(LLC)移植瘤模型，探讨其在观察研究肿瘤的生长、转移、肿瘤血管生成及治疗效果等方面的价值。方法利用pLEIN-CMV-GFP逆转录病毒载体将绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)报告基因转入小鼠Lewis肺癌(LLC)肿瘤细胞，体外稳定高效表达后，种植于小鼠双侧腹股沟，在不同时间利用光学活体成像仪成像，观察并用病理学证实。结果所有动物均成功制成荷GFP基因LLC移植瘤模型，GFP基因稳定高效表达，可见随肿瘤生长，绿色荧光团块增大。结论该模型稳定可靠，能够使我们利用光学分子成像的方法，实时、无创、连续地观察肿瘤生长，为研究肿瘤提供了新的思路和方法。     

18F-FDG对小鼠Lewis肺癌移植瘤P53、XIAP与GADD45蛋白表达的影响

目的 观察¹⁸F-氟代脱氧葡萄糖(¹⁸F-FDG)内照射对Lewis肺癌移植瘤P53、XIAP与GADD45蛋白表达的影响,探讨其作为内照射治疗药的可行性.方法 建立Lewis肺癌C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型48只,随机数字表法分为高剂量组、低剂量组和对照组,每组 16只.接种后第7天,3组小鼠分别腹腔注射0.2 ml ¹⁸F-FDG及等体积生理盐水,使高、低剂量组¹⁸F-FDG注射量分别为18.5×10⁷和9.25×10⁷ Bq.第22天处死小鼠,SP免疫组织化学法检测移植瘤组织P53、XIAP与GADD45蛋白表达.结果 每种蛋白3组小鼠间表达差异有统计学意义(χ²=8.30、16.02、7.68,P<0.05).3组小鼠Lewis肺癌P53蛋白表达的平均积分光密度分别从对照组的(0.089±0.033)随照射剂量增大为高剂量组的(0.315±0.028);XIAP蛋白表达的平均积分光密度从(0.422±0.034)逐步减小为(0.149±0.055);GADD45蛋白表达的平均积分光密度从(0.126±0.023)逐步上升为(0.383±0.035).3组间蛋白表达量差异有统计学意义(P53:F=5.26,P<0.05;XIAP:F=4.29,P<0.05;GADD45:F=5.98,P<0.05).结论 ¹⁸F-FDG能够上调P53和GADD45蛋白表达,下调XIAP蛋白表达,促使小鼠Lewis肺癌组织细胞以P53依赖的方式凋亡,抑制Lewis肺癌移植瘤生长.     

内皮抑素对小鼠Lewis肺癌移植瘤抑瘤作用的分子影像研究

目的　利用绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)标记的小鼠Lewis肺癌 (LLC)移植瘤模型 ,观察内皮抑素对LLC的作用。方法　将GFP标记的小鼠LLC细胞种植于 15只C5 7小鼠体内 ,分为空白对照组、尾静脉注射内皮抑素组、局部注射内皮抑素组。采用活体荧光成像 ,测定抑瘤率、微血管密度及测定VEGF和Bcl 2水平的方法评价治疗效果。结果　试验组抑瘤率分别为2 1 6 %和 2 7 7% ,较对照组增高 (P <0 0 5 )。尾静脉注射组MVD为 (13 77± 4 4 1)个 /高倍镜视野 ,局部注射组MVD为 (14 13± 4 0 5 )个 /高倍镜视野 ,明显低于空白对照组 (2 7 76± 8 87)个 /高倍镜视野 (P <0 0 1)。微血管计数 (MVD)密度降低 (P <0 0 5 ) ,试验组VEGF和Bcl 2强阳性较对照组少(P <0 0 1)。结论　GFP标记的小鼠LLC模型荧光显像清晰稳定。可在活体观察肿瘤细微的变化过程 ;内皮抑素对小鼠Lewis肺癌移植瘤有明显的抑制作用。     

含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸1826对Lewis肺癌放疗联合作用及其剂量-效应关系

目的 探讨含非甲基化二核苷酸的寡脱氧核苷酸( unmethylated cytosine-phosphate-guanine oligodeoxynucleotide,CpG ODN) 1826对X射线照射荷瘤小鼠Lewis肺癌的联合作用及其剂量-效应关系.方法 在C57BL/6J纯系小鼠右前腋窝接种Lewis肺癌细胞,制备荷瘤小鼠模型.将64只荷瘤小鼠按完全随机化方法随机分为对照组、X射线照射(IR)组、低剂量CpG ODN1826组(0.15 mg)、中剂量CpG ODN1826组(0.30 rag)、高剂量CpG ODN1826组(0.45 mg)、低剂量CpG ODN826+ IR组(CPG1826 0.15 mg+ IR)、中剂量CpG ODN1826+ IR组(CpG 0.30 mg+ IR)和高剂量CpG ODN1826+ IR组(CpG 0.45 mg+ IR),每组8只.实验的第1、2、9天注射CpG ODN1826.实验的第2天开始X射线照射,1次/d,2.50 Gy/次,总剂量12.50 Gy.观察各组移植瘤生长速度和各治疗组肿瘤生长延迟时间(TGD),用DNA断裂的原位末端标记法检测细胞凋亡.结果 成功建立荷瘤小鼠Lewis肺癌模型,成瘤率为100％.经治疗后,各组小鼠肿瘤体积都较对照组明显减小,CpG ODN1826 0.45 mg+ IR组移植瘤体积最小.DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡率分别为(2.40±0.55)％、(5.50±0.76)％、(7.13±0.83)％、(11.63±1.06)％、(19.13±0.83)％、(12.88±0.83)％、(20.57±2.37)％和(28.17±3.31)％.各治疗组都明显高于对照组(t=11.15、7.91、17.82、39.48、24.73、16.61和17.05,P＜0.05),不同剂量CpG ODN1826 +IR组显著高于IR组(t=13.78、15.08和17.47,P ＜0.05)和不同剂量CpG ODN1826组(t=18.53、9.66和7.51,P ＜0.05).结论 CpG ODN1826能明显地抑制肿瘤细胞生长,促进肿瘤细胞凋亡,且呈剂量-效应关系.     

车叶草苷对小鼠Lewis肺癌的抑瘤、抗炎作用及其机制

 目的 探讨车叶草苷对小鼠Lewis肺癌种植瘤的抑瘤和抗炎作用。方法 SPF级小鼠36只,制备荷瘤小鼠模型,然后将成瘤小鼠随机分为模型对照组、车叶草苷组、顺铂对照组。分别施加经口灌服车叶草苷或腹腔注射顺铂等干预因素,1次/d,连续3周。末次给药后,测量小鼠体质量、瘤体质量,检测血清中IL-1β、TNF-α含量;检测瘤组织中TLR4、MYD88、NF-κB的表达水平;检测瘤组织中p-NF-κB的表达定位及水平。结果 与模型对照组比较,车叶草苷组和顺铂对照组小鼠血清IL-1β、TNF-α含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);车叶草苷组和顺铂对照组比较无统计学差异。与模型对照组比较,车叶草苷组和顺铂对照组小鼠瘤组织中TLR4、MYD88、NF-κB表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);车叶草苷组和顺铂对照组比较无统计学差异。与模型对照组(0.261±0.026)比较,车叶草苷组(0.171±0.026)和顺铂对照组(0.207±0.020)小鼠瘤组织中p-NF-κB表达水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);车叶草苷组和顺铂对照组比较无统计学差异。结论 车叶草苷对Lewis荷瘤鼠具有明显的抑瘤作用,能够降低荷瘤小鼠整体的炎性反应状态。     

放射抗拒Lewis肺癌细胞系的建立

目的 通过X射线反复照射体外培养的Lewis肺癌细胞系(LLC),建立其放射抗拒细胞系(R-LLC),并比较两种细胞系间Survivin蛋白的表达及分泌细胞因子水平的差异。方法 应用6MV X射线反复照射Lewis肺癌细胞系,5 Gy/次,共6次,30 Gy。采用CCK-8实验及克隆形成实验测定两种细胞系的放射敏感性;Western blot法检测两种细胞系Survivin蛋白表达的差异;ELISA法检测两种细胞系培养液上清细胞因子TNF-α、IL-12的浓度。结果 R-LLC及LLC细胞系的平均致死剂量D₀分别是(1.397±0.128)和(1.053±0.214)Gy,外推值N分别是2.680±1.179和4.149±0.785,D_q值分别为1.038和1.988 Gy,SF₂值分别为0.353±0.092和0.682±0.092,显示了明显的辐射抗性;Western blot结果显示,R-LLC细胞株的Survivin蛋白表达水平较LLC细胞株升高,差异有统计学意义(t=15.310,P<0.05);ELISA结果显示,R-LLC细胞上清液TNF-ɑ和IL-12浓度较LLC细胞明显升高,差异有统计学意义(t=2.867和3.014,P<0.05)。结论 反复照射使肿瘤细胞获得了辐射抗性,同时又促进了Lewis肺癌细胞Survivin蛋白及细胞因子的表达,为放射增敏及肿瘤免疫相关的研究提供依据。