颗粒酶B在不明原因复发性流产患者蜕膜组织中的表达

<正>本研究通过对不明原因反复自然流产(URSA)患者蜕膜组织局部颗粒酶B(GrB)的蛋白表达情况,探讨GrB在同种移植排斥的作用及与URSA的关系。     

蜕膜组织杀伤细胞免疫球蛋白样受体与不明原因早期复发性流产的相关性

目的探讨蜕膜组织杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）与不明原因早期复发性流产（URSA）易感性的关系。方法留取URSA妇女（病例组,36例）及正常早孕妇女（对照组,34例）的蜕膜组织,采用酚-氯仿法抽提基因组DNA,序列特异性引物聚合酶链反应检测蜕膜组织14种KIR基因的表达;Trizol一步法提取总RNA,逆转录聚合酶链反应分析KIR mRNA的表达率,荧光实时定量聚合酶链反应分析KIR2DL1、2DL3 mRNA的相对表达量。结果① 14种KIR基因均以不同频率表达;KIR2DS1基因的表达率在病例组与对照组中分别为60.27%、41.18%,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05);② 6种抑制性KIR mRNA在蜕膜组织中均以不同频率表达,两组的表达率无统计学差异;抑制性KIR mRNA的表达率与KIR基因的表达率并不完全一致;③ KIR2DL1 mRNA及KIR2DL3 mRNA在病例组与对照组中的相对表达量分别为699.37±259.78、1?002.96±476.98和625.93±234.81,1?216.12±425.96,两组比较差异无统计学意义（P均＞0.05)。结论蜕膜组织活化性KIR2DS1基因的表达率增加,抑制性、活化性KIR基因失衡,可能与URSA的发生有关。     

泌乳素在不明原因复发性流产和正常妊娠早期中的差异性表达

目的·探讨不明原因复发性流产(unexplained recurrent pregnancy loss,URPL)和正常妊娠早期,泌乳素(prolactin,PRL)在外周血和蜕膜基质细胞(decidual stromal cells,DSCs)中的表达差异.方法·纳入2018年3月—2019年3月于上海交通大学医学院...     

复发性流产蜕膜组织中转化生长因子-β1的表达及意义

目的:研究复发性流产患者蜕膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)表达及意义。方法:选取2014年3月-2016年3月我院收治的复发性流产患者30例(复发流产组)和人工流产的健康早孕妇女32例(正常妊娠组),采用免疫组织化学法检测TGF-β1的分布和表达情况,Western Blot和RT-PCR分别检测TGF-β1蛋白和mRNA的表达水平。结果:免疫组化结果结果显示:TGF-β1主要表达于蜕膜的腺体细胞和间质细胞,与正常妊娠相比,复发性流产蜕膜组织中的TGF-β1表达明显降低(P<0.05),差异具有统计学意义。荧光定量PCR结果和Western Blot结果与免疫组织化学结果相一致,与正常妊娠相比,复发性流产蜕膜组织中的TGF-β1表达明显降低(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:复发性流产蜕膜组织中TGF-β1的表达降低,提示TGF-β1对妊娠的维持发挥重要作用。     

MIF与VEGF在原因不明早期复发性流产患者血清和蜕膜中的表达及意义

目的研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及可溶性血管内皮生长因子(VEGF)在原因不明早期复发性流产(UERSA)患者血清和蜕膜中的表达及意义。方法选取2010年11月至2011年8月在菏泽市立医院计划生育门诊因原因不明早期复发性流产就诊的患者28例(UERSA组)及同孕龄正常早孕妇女30例(正常早孕组)。采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测2组外周血清中和蜕膜组织中MIF、VEGF的浓度。并对血清和蜕膜组织中MIF水平与VEGF水平的相关性进行分析。结果 2组血清和蜕膜组织中均有MIF和VEGF的表达。UERSA组血清、蜕膜组织中MIF、VEGF分别为(29.21±6.98)μg.L-1、(23.09±7.65)μg.L-1与(23.37±7.15)μg.L-1、(18.70±6.76)μg.L-1,正常早孕组分别为(43.98±9.15)μg.L-1、(5.96±2.53)μg.L-1与(36.08±8.43)μg.L-1、(4.85±2.08)μg.L-1,UERSA组血清和蜕膜组织中MIF分别低于正常早孕组,而VEGF水平则明显高于正常早孕组,差异均有统计学意义(P<0.01)。血清和蜕膜组织中MIF水平与VEGF水平呈负相关(r=-0.72、-0.55)。结论妊娠期母胎界面MIF和VEGF的异常表达可能在原因不明早期复发性流产的发生发展中起重要作用。     

原因不明的复发性流产患者子宫蜕膜组织Vα24NKT细胞表达研究

目的探讨V24NKT细胞在原因不明的复发性流产患者子宫蜕膜组织中的表达意义。方法采用流式细胞术检测30例正常妊娠自行要求终止妊娠孕妇和30例原因不明的复发性流产患者子宫蜕膜组织V24NKT细胞的表达,并进行分析比较。结果原因不明的复发性流产患者子宫蜕膜组织中V24NKT细胞比例明显高于正常妊娠者,差异有统计学意义（〈0.01）。结论V24NKT细胞的高表达在原因不明的复发性流产中有着重要的意义,推测V24NKT细胞通过数量上的增加和分泌水平的变化调控妊娠的进程,而导致原因不明的复发性流产。     

诱导性共刺激分子表达与原因不明复发性流产的相关性研究

目的 探讨诱导性共刺激分子(EOS)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系.方法 采集10例诊断为难免流产的URSA患者(URSA组)和10例正常早孕妇女(正常对照组)的部分蜕膜组织和外周血,采用流式细胞术检测蜕膜组织和外周血CD3+和CD4+T细胞中ICOS的表达;Real-Time PCR检测蜕膜组织中ICOS mRNA的表达情况.结果 URSA组蜕膜组织中ICOS+ CD3+T淋巴细胞亚群所占百分比为(0.612±0.693)％,显著高于正常对照组的(0.056±0.103)％,差异有统计学意义(P＜0.001).URSA组外周血ICOS+ CD4+T淋巴细胞亚群所占百分比为(1.943±0.762)％,显著高于正常对照组的(0.221±0.127)％,差异有统计学意义(P＜0.001).URSA组蜕膜组织中ICOS mRNA的相对表达量较正常对照组显著升高[(9.875±1.464)vs(2.701±1.737)],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 蜕膜组织中ICOS的表达异常与URSA的发病具有密切关系.     

let-7f-5p在不明原因复发性流产绒毛组织中的表达及其功能研究

目的：筛选与不明原因复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion, URSA)相关的微小RNA（miRNA）,探讨其在URSA发生中的作用及其可能机制。方法：通过对URSA绒毛组织进行miRNAs测序,初步筛选差异表达的miRNAs;利用实时荧光定量PCR,验证筛选所得miRNAs表达水平;利用DAVID软件对靶基因进行Pathway分析;利用实时荧光定量PCR,检测p53通路中靶基因及其下游基因的表达水平。结果：let-7f-5p在URSA绒毛组织中表达水平显著上升;let-7f-5p的靶基因富集于p53通路,通路中靶基因MDM-X和其下游靶标促生长基因MDM2水平显著下降,促凋亡基因p53表达水平显著上升。结论：let-7f-5p可能调控p53信号通路中MDM-X/MDM2/p53基因,促进细胞凋亡,最终导致URSA发生发展。     

不明原因早期复发性自然流产患者蜕膜组织中杀伤细胞免疫球蛋白样受体2DL1的表达

目的研究不明原因早期复发性自然流产（RSA）患者早孕蜕膜组织中杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）2DL1 mRNA和蛋白的表达变化,探讨RSA发病的免疫机制。方法选择30例不明原因早期RSA者作为研究组,30例同期正常早孕要求行人工流产术者为对照组,采用SYBR绿色荧光染料I(SYBR Green I)实时荧光定量PCR法及Western blotting技术检测两组蜕膜组织中KIR2DL1 mRNA和蛋白的表达差异。结果① 研究组蜕膜中KIR2DL1 mRNA阳性表达率为90.00%(27/30),对照组蜕膜中KIR2DL1 mRNA阳性表达率为96.67%(29/30),两者无统计学差异(P＞0.05)。研究组KIR2DL1 mRNA表达量用RQ值表示为699.37±259.78,对照组KIR2DL1 mRNA的表达量为1?002.96±476.976,差异亦无统计学意义(P＞0.05);② 研究组蜕膜中KIR2DL1蛋白阳性表达率为86.67%（26/30）,对照组蜕膜中KIR2DL1蛋白阳性表达率为93.33%（28/30）,两者差异无统计学意义(P＞0.05)。但研究组蜕膜中KIR2DL1蛋白的表达量0.28±0.14显著低于对照组0.71±0.14(P＜0.05)。结论蜕膜组织中KIR2DL1表达量降低,传递给NK细胞的抑制性信号减少,可能影响母胎免疫耐受过程,导致RSA的发生。     

TLR2和TLR4在原因不明复发性流产绒毛和蜕膜中的表达及其意义

目的本实验通过检测原因不明复发性流产(URSA)患者和健康早孕者TLR2和TLR4在子宫绒毛和蜕膜中的表达,及外周血清中TNF-α及IL-10的水平,初步探讨TLR2和TLR4与URSA存在相关性,以及在URSA发生发展中的可能途径。方法前瞻性研究2008~2009年在浙江大学医学院附属妇产科医院和杭州市第一人民医院门诊患者。年龄在25~35周岁,孕龄<12周。将有≥3次自然流产的URSA患者作为研究组;将曾有正常生育史,本次要求行人工流产终止妊娠的早孕健康妇女作为对照组,分别选择20例。免疫组化检测TLR2和TLR4在两组绒毛和蜕膜中的表达;用ELISA法检测血清TNF-α及IL-10的水平,比较是否存在差异性。结果①TLR2在两组绒毛、蜕膜中表达差异无统计学意义(P>0.05);②TLR4在研究组绒毛、蜕膜表达明显增强,有显著统计学意义(P<0.05);③TNF-α在研究组中的水平明显增高,有显著统计学意义(P<0.05);IL-10在两组中的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TLR4可能是通过释放过量的Th1型细胞因子,导致Th1/Th2失衡,从而极可能参与URSA的发病。     

CD4+ CD25high T细胞和FOXP3在不明原因复发性自然流产中的作用

 【目的】 检测不明原因复发性自然流产(URSA)患者外周血及蜕膜的CD4+ CD25high T细胞和FOXP3的表达,探讨CD4+ CD25high T细胞和FOXP3在母胎免疫耐受中的作用&;#65377;【方法】 选择从2005年9月至2006年6月就诊的154例URSA患者根据就诊时的妊娠状态分成未孕组129例,早期流产组25例;正常早孕要求人工终止妊娠的妇女组50例及正常未孕女性组42例为对照组&;#65377;收集所有研究对象的外周血及由于计划外妊娠要求行人工流产者和已确认胚胎停育的URSA患者行清宫术后的新鲜蜕膜组织,采用流式细胞仪分析外周血及蜕膜组织CD4+ CD25+ 调节性T细胞及其亚群的比例及FOXP3表达&;#65377; 【结果】 ①外周血及蜕膜中CD4+ CD25high T细胞的比例:正常早孕妇女外周血CD4+ CD25high T细胞高于正常未孕妇女及URSA流产组, 差异有统计学意义(P < 0.01),URSA未孕患者外周血CD4+ CD25high T细胞也显著低于正常未孕女性及URSA流产患者(P < 0.01);URSA流产患者蜕膜CD4+ CD25high T细胞低于正常早孕妇女蜕膜(0.62 ± 0.27 vs. 1.41 ± 0.31, P < 0.01)&;#65377;②外周血及蜕膜中FOXP3表达比例:正常早孕妇女外周血CD4+ CD25high T细胞中FOXP3的表达比例为(95.6 ± 3.6),高于正常未孕妇(92.1 ± 3.4)及URSA流产患者,差异有统计学意义(P < 0.01;P < 0.05);URSA未孕组患者外周血中FOXP3的表达与正常未孕妇女及URSA流产组之间相比无统计学差异(P > 0.05);URSA流产患者蜕膜CD4+ CD25high T细胞中FOXP3的表达比例低于正常早孕妇女蜕膜,差异有统计学意义(94.3 ± 3.1 vs. 97.1 ± 2.2, P < 0.01)&;#65377;【结论】 CD4+CD25high T细胞在维持正常妊娠中发挥重要作用,URSA的发生与CD4+CD25high T细胞的减少有关,URSA患者CD4+ CD25high T细胞比例下降与FOXP3表达的降低有关&;#65377;     

原因不明复发性流产患者蜕膜组织中Th17/Treg免疫失衡研究

目的 探讨原因不明复发性流产(URSA)患者蜕膜组织中Th17/Treg免疫平衡情况.方法 应用流式细胞技术检测URSA患者和正常早孕者蜕膜组织中Th17和Treg细胞频率,应用real-time PCR方法检测转录因子RORc和Foxp3 mRNA水平.结果 URSA患者蜕膜组织中Th17细胞在淋巴细胞和CD4+T细...     

补肾安胎冲剂对复发性流产小鼠蜕膜组织VEGF及VEGFR2蛋白表达的影响

目的:探讨补肾安胎冲剂对复发性流产模型小鼠蜕膜组织血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白表达的影响。方法:采用CBA/J×BALB/c小鼠复制正常妊娠模型;采用DBA/2×CBA小鼠复制复发性流产(RSA)模型。造模后小鼠分为正常组、模型组、西药(黄体酮)组及补肾安胎冲剂低、中、高剂量组,每组10只,从妊娠第1天开始灌胃给药,干预15 d。处死小鼠,留取样本。采用免疫组化法、Western blot技术检测各组小鼠蜕膜组织VEGF、VEGFR2蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组蜕膜组织VEGF、VEGFR2表达明显降低(P0.05);与模型组比较,西药组及补肾安胎冲剂低、中、高剂量组小鼠蜕膜组织VEGF、VEGFR2表达显著升高(P0.01)。结论:补肾安胎冲剂具有安胎作用,其机制可能与上调复发性流产小鼠蜕膜组织VEGF、VEGFR2蛋白表达水平有关。     

SOCS3在早期流产患者蜕膜及绒毛组织中的表达

目的探讨细胞因子信号转导负调控因子3(SOCS3)在早期流产患者蜕膜及绒毛膜绒毛组织中的表达。方法选择早期流产患者40例为早期流产组,以同期非意愿条件下行人流术的正常妊娠妇女40例为正常对照组,采用免疫组化SP法和逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测两组妊娠蜕膜及绒毛组织SOCS3蛋白及mRNA的表达水平,进行半定量分析。结果①早期流产患者组年龄、孕周与正常对照组年龄、孕周之间比较,差异无统计学意义;②SOCS3在两组蜕膜及绒毛组织中均有表达,早期流产组的蜕膜及绒毛组织中SOCS3蛋白表达量明显低于正常对照组;SOCS3 mRNA在早期流产组的蜕膜及绒毛组织中表达量明显低于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论SOCS3蛋白及mRNA在早期流产组表达降低,可能与早期妊娠流产有关;SOCS3可能对早期妊娠的维持起保护作用。     

外周血及蜕膜组织中CD4加CD25加调节性T细胞比例与原因不明复发性流产的关系研究

目的：：探讨外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例与原因不明复发性流产的关系。方法：随机选取自2012年6月到2015年6月,我院门诊部与住院部的原因不明复发性流产患者62例(观察组)和正常妊娠妇女62例(对照组)作为研究对象。采用流式细胞四色荧光法测量两组研究对象外周血及蜕膜组织中的 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例。分析比较两组研究对象外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例情况。结果：观察组患者外周血中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例低于对照组患者外周血中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞的比例,且两组差异具有统计学意义( t ＝2.669,P ＝0.015);观察组患者蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例低于对照组患者蜕膜组织中CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例,两组差异具有统计学意义(t ＝4.986,P ＝0.001)。结论：外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例在早孕期显著升高,参与了正常妊娠的维持,有可能是调控母胎界面局部免疫耐受形成的一个重要因素;外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例降低可能与 URSA 的发生有关。     

子宫内膜、正常早孕及原因不明复发性流产患者蜕膜上Foxp3表达的意义

目的探讨子宫内膜、正常早孕和原因不明复发性流产患者蜕膜上Foxp3的表达情况。方法收集来我院进行治疗的自然流产次数不低于3次的患者37例作为流产组：选取正常妊娠妇女40例作为正常妊娠组;孕龄期妇女的增生期内膜及分泌期内膜分别为25例、20例,对各组中的Foxp3的表达及分布情况采用统计学方法进行分析。结果（1）Foxp3在分泌期内膜的表达与正常妊娠组及URSA组比较明显较低,在URSA患者蜕膜中的表达与正常妊娠组比较明显较低（P〈0．05）。（2）蜕膜间质为URSA组Foxp3的主要表达部位,蜕膜腺上皮细胞为正常妊娠组患者Foxp3表达的主要位置,蜕膜腺上皮细胞为增生期内膜阴性表达及分泌期子宫内膜Foxp3的主要分布位置。结论在胚泡植入及早期妊娠的维持中分泌期子宫内膜和蜕膜组织中Foxp3的表达具有非常重要的意义,在URSA的发生发展过程中Foxp3的表达水平的降低可能具有重要的作用。     

NK细胞在不明原因复发性流产诊治研究中的意义

目的：探究NK细胞与复发性流产的相关性。方法将我院68例复发性流产患者随机分为观察组与对照组,观察组为48例,对照组为20例,观察组行淋巴主动免疫治疗,对照组予常规保胎指导,比较两组患者外周血NK细胞的数量及妊娠结果。结果治疗前检测CD3／CD16＋CD56组间比较无显著差异（ P＞0．05）;经淋巴主动免疫治疗后两组比较,观察组CD3／CD16＋CD56较对照组显著下降（ P＜0．05）,观察组妊娠成功率（妊娠至12周）66．7％,显著高于对照组25．0％;观察组流产率（妊娠12周内流产）14．6％与对照组55．0％比较显著较低,两组治疗一年内未成功妊娠率比较,观察组18．8％较对照组20．0％稍低,差异不大。组间比较有统计学意义（ P＝0．001）。结论通过监测NK细胞在淋巴细胞中的比例,可有效指导淋巴细胞主动免疫治疗不明原因复发性流产,可改善妊娠结局,具有一定的临床推广价值。     

热休克蛋白在不明原因复发性流产中的研究进展

临床中常见不明原因复发性流产(URSA)。母胎界面免疫、子宫内膜蜕膜化、细胞自噬与凋亡、生殖细胞发育及男性精子因素、母体雌孕激素水平、同型半胱氨酸代谢等多种因素异常均与URSA有关。该文针对热休克蛋白在上述相关因素中的研究进行综述,以期为URSA病理机制和临床干预技术的进一步研究提供参考。