环氧合酶-2在应激胃黏膜适应性细胞保护中的作用

目的：研究环氧合酶-2(COX-2)、乳癌相关肽(PS2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在水浸束缚应激(WRS)大鼠胃黏膜基因中表达的变化，探讨其在应激胃黏膜适应性细胞保护中的相互关系及作用。方法采用重复WRS制作模型，动态监测胃黏膜血流量(GMBF)，大体及光镜下观察黏膜损伤程度(UI)及组织学变化，逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测COX-2、PS2，及iNOS表达变化。结果：单次应激造成胃黏膜广泛损伤，重复应激后胃黏膜产生适应性，胃黏膜血流量上升，损伤逐渐减轻，4次应激后，损伤指数降低为单次应激的21．99％，并且胃腺区细胞增殖。单次应激后，PS2表达减弱，而COX2及iNOS增强；重复应激后，PS2基因表达逐渐增强，而COX-2及iNOS基因表达逐渐减弱；正常时，COX-2及iNOS几乎无无达，PS2主要在胃腺颈部表达；应激后，PS2不但在胃腺颈部黏膜增殖带表达增强，在胃腺基底部亦有表达，COX-2及iNOS在溃疡及其边缘存在。结论：胃黏膜适应性细胞保护伴有细胞增殖，PS2表达逐渐增强，COX2及iNOS表达逐渐减弱，表明三者在这一现象中重要的调节作用。     

辣椒素受体-1、一氧化氮和降钙素基因相关肽在大鼠上颈段脊髓刺激诱导脑血流增加中的作用

目的:探讨辣椒素受体-1(TRPV1)、一氧化氮(NO)和降钙素基因相关肽(CGRP)在上颈段脊髓刺激(cSCS)诱导脑血流(CBF)增加中的作用和相互关系。方法:将雄性SD大鼠在全麻下行C1-2椎板切除暴露颈段脊髓,刺激电极放置在左侧C2脊髓背柱上。切开颅骨暴露左侧大脑皮质,CBF变化由激光多普勒血流仪测量。分析90%运动阈值(MT)cSCS在静脉注射辣椒素类似物树胶脂毒素(RTX)2μg/kg(n=9)、CGRP8-37(CGRP受体拮抗剂)2.5mg/kg(n=8)、L-NAME(一氧化氮合酶抑制剂)5.0mg/kg(n=7)前和20min后同侧脑血流变化(%△CBF)及脑血管阻力变化(%△CVR)。结果:60%和90%MT的cSCS使同侧大脑皮质血流增加(P0.05,n=9)。静脉注射含有TRPV1纤维脱敏化的RTX(2μg/kg)后,90%MT的cSCS引起%△CBF由65.0%±9.5%减少到27.4%±7.2%(P0.05,n=9),%△CVR由-28%±7.6%增加到-14.8%±4.2%(P0.05,n=9);静脉注射CGRP8-37(2.5mg/kg)使90%MT的cSCS引起增加的CBF降低(%△CBF:63.4%±10.4%vs.22.7%±5.3%,P0.05,n=8;%△CVR:-27.9%±5.9%vs.-14.8%±3.2%,P0.05,n=8);静脉注射L-NAME(5.0mg/kg)使90%MT的cSCS引起增加的CBF显著下降(%△CBF:58.1%±9.5%vs.14.0%±2.5%,P0.01,n=7;%△CVR:-20.4%±4.3%vs.-7.6%±0.6%,P0.01,n=7)。结论:TRPV1、NO和CGRP参与cSCS引起显著的脑血流增加或脑血管扩张,它可能为cSCS治疗缺血性脑血管病提供新的理论依据。     

钙敏感受体在细胞凋亡过程中的作用

细胞凋亡是指由基因控制的细胞程序性死亡,其参与机体正常发育及内环境稳态的维持,而钙敏感受体(Calcium-Sensing receptor,Ca SR)在细胞凋亡过程中发挥重要作用。近年来,Ca SR与细胞凋亡关系的研究在多种临床疾病中得到展开。本文通过介绍细胞凋亡的3条主要信号转导通路阐述了细胞凋亡的发生机制,并对近些年来在不同疾病中Ca SR与细胞凋亡关系的研究进展作一叙述,以期为相关疾病的诊断与治疗提供新的思路。     

三叶肽对胃黏膜适应性细胞保护的调节作用

目的探讨三叶肽(ITF)对胃黏膜适应性细胞保护的调节作用。方法采用重复水浸束缚应激(WRS)法制作模型，动态监测模型动物的胃黏膜血流量(GMBF)，观察黏膜损伤指数(UI)及病理组织学变化；采用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测乳癌相关肽(PS2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、ITF、转化生长因子-α(TGF—α)及环氧合酶-2(COX-2)的表达。结果单次WRS后造成胃黏膜广泛损伤；重复应激后胃黏膜产生适应性，GMBF上升，损伤逐渐减轻；经4次应激后，UI降低到单次应激的22．0％，并且胃腺区细胞增殖。单次应激后，PS2基因表达减弱，而iNOS、ITF、TGF—α及COX-2基因表达均增强；重复应激后，PS2、ITF、TGF—α表达逐渐增强，而iNOS及COX-2基因表达逐渐减弱；正常时iNOS、ITF及COX-2几乎无表达，PS2、ITF、TGF—α主要在胃腺颈部表达；应激后PS2、ITF、TGF—α不但在胃腺颈部黏膜增殖带表达增强。在胃腺基底部亦有表达，iNOS及COX-2在溃疡及其边缘存在。结论胃黏膜适应性细胞保护伴有细胞增殖，PS2、ITF、TGF—α表达逐渐增强，iNOS及COX-2表达逐渐减弱，表明三叶肽在这一现象中具有重要的调节作用。     

感觉神经肽P物质对肉芽组织成纤维细胞核因子-κB的激活及生物学作用

目的：研究感觉神经肽P物质（SP)对肉芽组织成纤维细胞核因子-κB(NF-κB)的激活作用，以探讨其生物学作用的信号机制。方法：采用甲醛注射的方法造成Wistar大鼠局部无菌性炎症反应，提取肉芽组织进行成纤维细胞原代培养；采用凝胶迁移阻滞实验的方法，检测SP对肉芽组织成纤维细胞NF-κB的激活作用，观察其量效和时效关系及NF-κB的亚基组成；观察NK-1受体在NF-κB活化中的作用。结果：SP可有效激活NF-κB，且呈显著的剂量依赖性(r=0.712，P&;lt;0.01)；在0.1μmol／L SP作用下，NF-κB活性在刺激30min时达到高峰；活化的NF-κB是由p50和p65亚基组成的；NF-κB的活化可被NK-1受体阻断剂所阻断。结论：SP可有效激活肉芽组织成纤维细胞NF-κB，该作用是通过NK-1受体途径实现的。     

神阙穴隔药饼灸对应激大鼠胃黏膜损伤的作用

目的：通过观察神阙灸对应激大鼠胃黏膜损伤指数、胃黏膜血流量、胃黏膜组织中降钙素基因相关肽和转化生长因子α含量的影响，探讨神阙灸对应激性溃疡胃粘膜损伤的保护作用及其机制。方法：实验选用健康SD大鼠36只，将其随机分为对照组、模型组、神阙穴隔药饼灸组、非穴隔药饼灸组，每组9只。采用水浸-束缚应激法制备应激性溃疡模型。计算胃黏膜损伤的溃疡指数，用激光多普勒血流仪测定胃黏膜血流量，用放免分析法测定各组大鼠胃黏膜降钙素基因相关肽和转化生长因子α含量的变化。结果：神阙穴隔药饼灸组大鼠胃黏膜损伤指数(19．89&;#177;8．43)明显低于模型组(52．22&;#177;11．88)(P&;lt;0．01)。神阙穴隔药饼灸组大鼠胃黏膜血流量明显高于模型组和非穴隔药饼灸组(P&;lt;0．01)。神阙穴隔药饼灸组胃黏膜组织降钙素基因相关肽含量明显高于模型组和非穴隔药饼灸组(P&;lt;0．01)。神阙穴隔药饼灸组胃黏膜组织转化生长因子α含量明显高于模型组和非穴隔药饼灸组(P&;lt;0．01)。结论：神阙穴隔药饼灸对应激大鼠胃黏膜损伤有保护作用，其机制可能与增加胃黏膜血流量，调节降钙素基因相关肽和转化生长因子α的水平有关。     

辣椒素受体在腹腔注射内皮素-1 引起内脏痛中的作用

目的：研究辣椒素受体（TRPV1）在内皮素（ET-1）引起内脏痛中的作用.方法：选用TRPV1基因敲除小鼠（KO小鼠）及其野生型C57BL/6小鼠（WT小鼠）,均接受腹腔内注射0.6%醋酸（10ml/kg,n=6）和硫酸镁（60 mg/kg,n=6）,以及按50、25、12.5、4μg/kg注射ET-1（每组每一剂量n=10）,注射后观察小鼠的行为,记录扭体反应的情况.结果：WT小鼠在硫酸镁或醋酸腹腔内注射后均引起扭体,而KO小鼠没有出现扭体.两组注射ET-1后均出现扭体,呈剂量依赖性,但WT组在各剂量时扭体反应发生率均明显高于KO组,扭体次数在剂量为50、25和12.5μg/kg时明显高于KO组.结论：腹腔注射ET-1能够引起内脏痛,其机制之一在于激活了TRPV1.     

神阙穴隔药饼灸对应激大鼠胃黏膜损伤的作用

目的:通过观察神阙灸对应激大鼠胃黏膜损伤指数、胃黏膜血流量、胃黏膜组织中降钙素基因相关肽和转化生长因子α含量的影响,探讨神阙灸对应激性溃疡胃粘膜损伤的保护作用及其机制。方法:实验选用健康SD大鼠36只,将其随机分为对照组、模型组、神阙穴隔药饼灸组、非穴隔药饼灸组,每组9只。采用水浸-束缚应激法制备应激性溃疡模型。计算胃黏膜损伤的溃疡指数,用激光多普勒血流仪测定胃黏膜血流量,用放免分析法测定各组大鼠胃黏膜降钙素基因相关肽和转化生长因子α含量的变化。结果:神阙穴隔药饼灸组大鼠胃黏膜损伤指数(19.89±8.43)明显低于模型组(52.22±11.88)(P<0.01)。神阙穴隔药饼灸组大鼠胃黏膜血流量明显高于模型组和非穴隔药饼灸组(P<0.01)。神阙穴隔药饼灸组胃黏膜组织降钙素基因相关肽含量明显高于模型组和非穴隔药饼灸组(P<0.01)。神阙穴隔药饼灸组胃黏膜组织转化生长因子α含量明显高于模型组和非穴隔药饼灸组(P<0.01)。结论:神阙穴隔药饼灸对应激大鼠胃黏膜损伤有保护作用,其机制可能与增加胃黏膜血流量,调节降钙素基因相关肽和转化生长因子α的水平有关。     

缺氧诱导因子-1α在酒精性急性胃黏膜损伤中的作用

目的检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在酒精性急性胃黏膜损伤中的表达,探讨其在酒精性急性胃黏膜损伤中的作用。方法 60只SD大鼠随机分为4组(每组15只):对照组和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ实验组。对照组以2ml生理盐水灌胃,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ实验组分别予30%、65%、100%浓度酒精2ml灌胃。2h后处死大鼠取全胃剖开,肉眼观察形态学变化计算损伤指数;HE染色后光镜观察黏膜炎症程度;RT-PCR检测胃黏膜HIF-1αmRNA表达,蛋白免疫切迹法检测HIF-1α蛋白表达。结果肉眼观察实验组黏膜有充血、水肿及糜烂、溃疡形成,光镜下观察实验组均有炎症反应;对照组与实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组损伤指数分别为0.47±0.52、9.27±2.49、11.07±2.71、28.60±3.11,实验各组损伤指数与对照组相比差异有统计学意义(P均<0.05),且随着酒精浓度增加损伤更为严重;实验组HIF-1αmRNA及蛋白表达随酒精浓度升高而递增(P<0.01或P<0.05)。结论随着酒精浓度的增高,大鼠急性胃黏膜损伤的程度加重,且胃黏膜HIF-1α的表达水平增加,推测HIF-1α在酒精性胃黏膜损伤过程中起重要作用。     

炎症反应在胃黏膜防御中的作用

炎症是高等动物机体对各种损伤性刺激的一种天然防御反应,它主要发生在有血管分布的组织内,其主要作用是限制损伤、促进损伤组织的修复等。在胃肠道,     

幽门螺杆菌诱导上皮-间质转化在胃癌中的作用机制

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是一种单极、微需氧、多鞭毛、螺旋形的革兰氏阴性菌,可在人胃黏膜上存活并定植。Hp作为与胃癌相关的Ⅰ类致癌物,其对胃黏膜的长期刺激可导致萎缩性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤等多种疾病。研究表明,Hp感染可诱导胃上皮细胞发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT),而EMT的异常调控则会导致胃癌发生。本文就Hp诱导胃上皮细胞发生EMT致胃癌的相关机制研究展开综述,为胃癌的早期诊断和靶向治疗提供新思路。     

酸敏感离子通道-3在急性肺损伤大鼠肺组织中的表达

目的 探讨酸敏感离子通道-3(ASIC3)在急性肺损伤肺组织中的表达.方法 24只雄性SD大鼠随机分为4组(每组6只):脂多糖(LPS)刺激组(LPS 2 h,LPS 4 h,LPS 6 h),分别为LPS刺激后2,4,6 h;生理盐水对照组;LPS组静脉注射LPS复制大鼠急性肺损伤模型,对照组静脉注射同等剂量生理盐水,以肺部特征性病理改变作为ALI模型成功的主要指标.各组检测动脉血气,留取肺组织标本,观察肺湿/干质量比、肺组织病理,免疫组化检测肺组织ASIC3的表达.统计数据用均数±标准差表示,采用SPSS 13.0统计软件行单因素方差分析、Dunnett-t检验和Kendall秩相关系数(Kendall'stau_b)检测其相关性,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 LPS 2 h,4 h,6 h组大鼠的动脉血氧分压(PaO2)分别为(67.47±6.01)mmHg,(59.17±7.18)mmHg,(52.54±7.62)mmHg,比对照组(98.15±1.06)mmHg低,差异有统计学意义(P<0.01);pH值LPS4 h(7.28±0.04),6 h(7.24±0.03)组显著低于对照组(7.35±0.01)(P<0.01).光镜下见肺组织内的炎性细胞逐渐增多,肺泡隔增宽,肺间质水肿,肺结构破坏逐渐加重;LPS注射后4 h,6 h肺泡上皮细胞内ASIC3的表达分别是(205.91±10.12),(196.51±18.60),显著低于对照组(220.23±10.11)(P<0.05);肺的湿/干质量比6 h组(5.18±0.21)亦明显高于对照组(4.45±0.18)(P<0.05).结论 LPS诱导的大鼠急性肺损伤肺泡上皮细胞和支气管黏膜上皮有ASIC3表达.     

降钙素基因相关肽和内皮素在充血性心力衰竭中的作用

用同位素放射免疫法同时检测30例CHF患者的血浆CGRP和ET浓度，求出ET/CGRP比值，并与30例健康人对照。结果显示CHF组血浆CGRP和ET浓度较对照组明显增高（P＜0．05），且ET／CGRP比值较对照组升高更显著（P＜0.01）。本研究提示在CHF时血浆CGRP和ET浓度均增高，且ET／CGRP比值升高更明显，这对CHF的防治具有重要意义。     

肺在血管活性物质合成和代谢中的作用

在一个相当长的时间内，医学界认为肺仅仅是一个呼吸器官。直到1953年GADDUM证实肺具有灭活5-羟色胺（5-HT）的作用后，人们才逐渐认识到肺参与合成、降解、移除及释放生物体内某些血管活性物质的过程。近10年来已确立了肺不仅是一个呼吸器官。而且是一个复杂的代谢器官的概念。特别是肺能够代谢循环血液中的某些生物活性物质，对维持机体内环境的稳定起着重要的作用。一旦这些功能发生紊乱，患者就会出现肺外某些系统功能紊乱。     

凋亡相关基因Bcl-2及Bax在糖尿病大鼠早期视网膜病变细胞凋亡中的作用

目的：研究凋亡相关基因Bcl-2，Bax在早期糖尿病大鼠视网膜的表达，探讨其在糖尿病视网膜病变细胞凋亡中的作用。方法：选择健康成年Wistar大鼠40只，随机分成正常对照(CON)、糖尿病1个月(DMl)、3个月(DM3)及6个月(DM6)组。腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病。制备大鼠视网膜石蜡切片行免疫组化ABC法染色，并对染色结果进行计算机图像分析。结果：于CON及DM各组，Bax和Bcl-2二基因的蛋白均在视网膜血管表达。且随病程进展，其阳性反应强度逐渐增加。此外，Bcl-2阳性反应在DM3组于色素上皮细胞出现，在DM6组，再进一步扩大到视杆内节和节细胞。而Bax在DM6亦出现于节细胞。结论：凋亡相关基因Bcl-2和Bax在早期糖尿病大鼠视网膜血管和神经细胞的表达随病程的进展逐渐增强。二者在糖尿病视网膜细胞凋亡中起重要作用。     

A20基因在活性氧对内皮细胞损伤中的保护作用

目的：探讨外源性锌指蛋白A20对氧损伤诱导内皮细胞同型半胱氨酸蛋白酶Caspase3表达和凋亡的影响。方法：DOTAP脂质体介导pcDNA 3．1 EHA20质粒转染人脐静脉内皮细胞，经G418筛选，免疫荧光检测A20基因的表达，Tunnel原位末端标记法、原位杂交检测转染前后过氧化氢诱导内皮细胞凋亡情况及Caspase 3的表达情况。结果：A20基因在内皮细胞得到有效表达，正常对照组及转染A20基因组人内皮细胞凋亡为(4&;#177;1)％，过氧化氢作用后对照组与转染A20基因组凋亡分别为(21&;#177;2)％，(6&;#177;1)％，两者相差有显著性意义(P&;lt;0．05)。A20基因能显著抑制过氧化氢诱导的内皮细胞Caspase 3的表达。结论：A20基因在活性氧对内皮细胞损伤中具有保护作用，在缺血再灌注等相关疾病防治方面可能有一定作用。     

解痉多肽在应激胃黏膜适应性保护中的作用

目的 研究解痉多肽(spasmolytic polypeptide,SP)在水浸束缚应激(WRS)大鼠胃黏膜的基因表达变化,探讨其在应激胃黏膜适应性保护中的作用.方法 采用单次和重复水浸束缚应激制作模型,动态监测胃黏膜血流量(GMBF),大体及光镜下观察黏膜损伤程度(UI)及组织学变化,逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测研究SP基因表达变化,免疫组化染色进一步证实SP表达.结果 ①单次应激造成胃黏膜广泛损伤,但损伤指数在3、5、7 d逐渐减小,至7 d降为208%,GMBF逐渐恢复,至7 d上升为正常94.5%,SP基因表达逐渐增强(0.50±0.12 vs 0.71±010,P＜0.01),免疫组化染色计分为0.94±0.10 vs 1.50±0.13 (P＜0.01);②重复应激后胃黏膜产生适应性,胃黏膜血流量上升,损伤逐渐减轻,4次应激后,损伤指数降低为单次应激的22%,胃黏膜血流量上升为正常94.2%,并且胃腺区细胞增殖,SP基因表达增强(0.57±0.01 vs 0.97±003,P＜0.01),免疫组织化学染色计分为1.25±0.11 vs 2.56±0.16(P＜0.01).结论 SP可能参与了应激胃黏膜适应性细胞保护.     

凝血酶敏感蛋白-1在慢性移植肾病大鼠肾组织中的表达及意义

目的:探讨大鼠肾组织凝血酶敏感蛋白-1的表达与慢性移植肾病的关系。方法:依照国际标准CAN实验大鼠模型,以F344大鼠作供者,Lewis大鼠作受者,行原位异体肾移植,建立大鼠CAN模型,作为CAN组。以Lewis大鼠做供、受体,行原位异体肾移植,作为对照组。16周后,观察两组大鼠肾功能、肾组织学改变;免疫组织化学法检测肾组织TSP-1及TGF-β1的表达。结果:与对照组比较,CAN组大鼠24h尿蛋白定量、血肌酐明显升高(P<0.01);根据Banff 97评分标准,对照组未见明显病理改变,而CAN组肾小球硬化率达24%以上,可见明显的肾小管萎缩、间质纤维化及严重的血管内膜纤维化,两组移植肾Banff评分结果差异显著(P<0.01);TSP-1在对照组弱表达,TGF-β1仅有少量表达,而CAN组TSP-1、TGF-β1阳性表达面积显著增强,可见于肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞、肾间质细胞。结论:TSP-1在CAN大鼠移植肾组织中高表达,可能作为TGF-β1的上游分子参与TGF-β1介导的慢性移植肾病变的发生发展。     

针对Fas基因RNA抑制作用前后帕金森病细胞相关因子变化的凋亡作用

近年来研究表明，细胞凋亡在帕金森病的病理机制中起重要作用。细胞凋亡涉及多种基因的复杂变化，其中凋亡促进基因Fas与之关系密切。基因干预可通过降低凋亡基因的表达而对细胞凋亡起到干预作用。本实验用6-羟基多巴胺作用于NGF诱导后PC12细胞，建立帕金森病细胞模型，用RNAi方法对Fas基因表达进行抑制，从而观察该方法以帕金森病细胞凋亡的影响。     

基于Donabedian结构-过程-结果理论的护理敏感质量指标构建在ERAS中的应用效果研究

目的 探讨基于Donabedian结构-过程-结果理论的护理敏感质量指标构建在加速康复外科(Enhanced Recovery After Surgery, ERAS)中的应用效果。方法 2019年2月—2021年2月,以Donabedian结构-过程-结果理论为依据,通过查阅文献、德尔菲(Delphi)等方法,建立围术期ERAS评价指标。结果 函询专家权威系数为0.89,肯德尔和谐系数为0.410。两轮专家函询后,确定围术期ERAS评价指标体系包括一级指标3个,二级指标10个,三级指标54个。结论 基于Donabedian结构-过程-结果理论的护理敏感质量指标构建在ERAS中的应用效果良好,具有较高实用性和科学性,可为围术期ERAS质量评价提供依据。