NF-κB的激活及MMP-9的表达在腹主动脉瘤形成中的意义

目的 探讨核转录因子NF-κB (nuclear factor-kappa B) 的激活及基质金属酶9（MMP-9）的表达在腹主动脉瘤形成中的作用。方法 成年雄性WISTER大鼠24只，随机分为腹主动脉瘤组、正常对照组(每组各12只)。用弹力酶灌注法建立大鼠腹主动脉瘤模型，免疫组织化学分析NF-κB、MMP-9的蛋白表达，RT-PCR方法检测其mRNA的表达。结果 腹主动脉瘤组可见明显炎症细胞浸润， NF-κB被激活，同时伴有MMP-9表达增高。正常对照组未见明显炎症细胞浸润，仅有少量NF-κB的表达。结论 NF-κB的激活、MMP-9表达增加在腹主动脉瘤病变的发生与发展过程中起着重要作用。     

NF-κB的激活及基质金属酶-9的表达在腹主动脉瘤形成中的意义

目的探讨核转录因子NF-κB(nuclear factor-kappaB)的激活及基质金属酶9(MMP-9)的表达在腹主动脉瘤形成中的作用。方法成年雄性WISTER大鼠24只,随机分为腹主动脉瘤组、正常对照组(每组各12只)。用弹力酶灌注法建立大鼠腹主动脉瘤模型,免疫组织化学分析NF-κB,MMP-9的蛋白表达,RT-PCR方法检测其mRNA的表达。结果腹主动脉瘤组可见明显炎症细胞浸润,NF-κB被激活,同时伴有MMP-9表达增高。正常对照组未见明显炎症细胞浸润,仅有少量NF-κB的表达。结论NF-κB的激活、MMP-9表达增加在腹主动脉瘤病变的发生与发展过程中起着重要作用。     

细胞间粘附分子-1在早期腹主动脉瘤中的动态表达

目的：探讨早期腹主动脉瘤（abdominal aortic aneurysm，AAA）的发病机制。方法：建立大鼠腹主动脉瘤模型，于术后3，7，14，28d取材，观察主动脉的扩张情况，弹力纤维染色观察弹力纤维的损伤；免疫组织化学染色检测细胞间粘附分子-1（ICAM-1）及CD68（巨噬细胞特异性抗原）的蛋白表达。结果：在AAA组织中，ICAM-1蛋白表达于3d出现，7d达到高峰，与其它时段相比，差异有统计学意义（P〈0．01）。CD68蛋白表达于14d达到高峰（P〈0．01）。结论：ICAM-1在早期腹主动脉瘤组织中表达增强，介导炎性细胞浸润，可能成为腹主动脉瘤治疗的新靶点。     

实验性肝纤维化形成和逆转过程中基质金属蛋白酶-13蛋白及其mRNA表达

目的：研究基质金属蛋白酶－13（matrix metalloproteinase 13,MMP-13)在大鼠四氯化碳实验性肝纤维化形成和逆转过程中的表达。方法：应用免疫组织化学和核酸原位杂交方法研究MMP－13蛋白及其mRNA在四氯化碳实验性大鼠肝纤维化形成和逆转过程中的表达变化，并进行网织纤维染色和胶原纤维染色。结果：MMP－13蛋白及其mRNA在肝脏间质细胞和部分肝细胞中表达。在纤维化形成过程中MMP－13蛋白及其mRNA的表达量相对增加；在纤维化逆转过程中MMP－13蛋白及其mRNA的表达量是由强渐弱的动态变化。结论：肝脏间质细胞是MMP－13蛋白及其mRNA的主要细胞来源，MMP－13在肝纤维化形成和逆转过程中具有重要作用。     

巨噬细胞浸润及相关基因的表达在早期腹主动脉瘤发病中的作用

目的　探讨早期腹主动脉瘤 (AAA)的发病机制。方法　猪胰弹力蛋白酶灌注入 4 0只Wistar大鼠的股动脉 ,建立大鼠AAA模型 ,分别于灌注后 3d、7d、14d、2 8d切取大鼠的动脉瘤标本 ,应用弹力纤维特殊染色、CD6 8(巨噬细胞的特异性抗原 )免疫组织化学染色观察不同时期动脉壁弹力纤维的损伤、巨噬细胞的浸润 ,用原位分子杂交方法观察单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)及基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )的mRNA表达。结果　动脉壁弹力纤维的损伤于灌注后 2周时最重 ,CD6 8蛋白于灌注后 2周表达最强烈 ,与其他时段相比差异有非常显著意义 (P <0 0 1) ;MCP 1、MMP 2mRNA表达于灌注后 1周、2周时达到高峰 ,分别为 31 5 %± 5 7%、35 2 %± 7 8% ,并显著高于其他时段。结论动脉壁巨噬细胞的浸润程度与MMP 2mRNA表达、动脉壁弹力纤维的损伤呈平行关系 ;MCP 1的mRNA表达作为一种始动因素 ,可诱导巨噬细胞的浸润 ,促进了AAA的发生、发展     

吲哚美辛抑制大鼠腹主动脉瘤基质金属蛋白酶9表达的研究

目的:研究吲哚美辛对大鼠腹主动脉瘤基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的抑制作用.方法:将腹主动脉瘤弹力蛋白酶灌注模型大鼠随机分为实验组和对照组,各8只.实验组皮下注射吲哚美辛(1.6 mg/d),对照组皮下注射生理盐水.观察两组动脉瘤的形成率和动脉壁的组织学改变,并应用免疫组织化学技术检测MMP-9在动脉壁中的表达.结果:灌注1周后实验组大鼠腹主动脉瘤形成率为0,对照组大鼠动脉瘤形成率为100%,两组差异有显著意义(P<0.05).2组大鼠弹力纤维染色均可见弹力纤维不连续,结构模糊不清,但对照组大鼠动脉中层弹力纤维层数明显减少,胶原纤维溶解现象较严重,实验组弹力纤维层的损伤较轻;实验组大鼠动脉壁组织MMP-9蛋白表达为弱阳性或阴性,对照组动脉瘤组织中MMP-9蛋白表达则明显增强.结论:吲哚美辛能降低MMP-9的表达,直接影响大鼠腹主动脉中膜弹力蛋白层的降解和退变过程,抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成.     

实验性自身免疫性肌炎中MMP—2，MMP—9，TIMP—1的表达及甲基强的松龙的影响

目的：探讨基质金属蛋白酶（MMP－2，MMP－9）及基质金属蛋白酶抑制剂（TIMP－1）在实验性自身免疫性肌炎（EAM）发病中的作用，以及甲基强的松龙对MMP－2，MMP－9，TIMP－1基因mRNA和蛋白表达的影响。方法：应用RT－PCR及免疫组织化学技术，研究MMP－2，MMP－9及TIMP－1在EAM组、甲基强的松龙治疗组（EAMM组）和对照组（NS组）大鼠外周血、脾脏、肌肉组织中的表达水平。结果：EAMM组大鼠发病程度低于EAM组，炎症细胞浸润和肌纤维坏死程度减轻。MMP－2，MMP－9 mRNA在EAM大鼠外周血、脾脏淋巴细胞中的表达上调；MMP－2，MMP－9蛋白在EAM组大鼠肌肉组织表达增加，与对照组相比差异有显著性。EAMM组MMP－2，MMP－9mRNA的表达及蛋白的表达均受到抑制，与EAM组比较差异有显著性。EAMM组TIMP－1基因mRNA及蛋白的表达上调，与EAM组相比差异有显著性。结论：MMP－2，MMP－9表达增加可能与EAM发病有关；TIMP－1可能参与了抑制免疫反应；甲基强的松龙能减轻EAM发病程度，其作用机制可能与MMP－2及MMP－9的表达下调、TIMP－1的表达上调有关。     

塞来昔布抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成

目的研究塞来昔布对实验性大鼠腹主动脉瘤形成的抑制作用。方法Wister大鼠24只,随机分为2组,实验组12只,对照组12只。实验组术后胃灌注塞来昔布,对照组胃灌注生理盐水。观察两组动脉瘤的形成率和动脉壁组织学改变,并用免疫组织化学技术和分子原位杂交技术检测基质金属蛋白酶2和9的表达。结果 灌注两周后实验组大鼠腹主动脉瘤形成率8.33％,对照组大鼠腹主动脉瘤形成率100％,两组差异有显著意义(P<0.01)实验组大鼠动脉壁组织基质金属蛋白酶2和9的表达为弱阳性或阴性,对照组动脉壁组织中两着表达明显增高。原位杂交检测结果表明两组mRNA表达强度无明显差异。结论塞来昔布能够通过抑制动脉瘤组织中基质金属蛋白酶2和9的表达来阻止动脉壁组织弹力纤维的降解,并抑制实验性大鼠腹主动脉瘤的形成。这为人类对小腹主动脉瘤的药物治疗提供了可行性的理论依据。     

MMP-9在腹主动脉瘤和动脉硬化闭塞性疾病中组织表达的比较研究

目的通过对基质金属蛋白酶-9（Matrix Metalloproteinases-9，MMP-9）在人腹主动脉瘤（Abdominal Aortic Aneurysms，AAAs）和动脉硬化闭塞性疾病（Arterial Occlusive Diseases，AODs）中组织表达的分析，初步探讨MMP-9在腹主动脉瘤发病机制中的作用。方法采集德国科隆大学医院血管外科中心AAAs手术治疗20例AAAs组织标本，采用免疫组织化学技术，用MMP-9抗体标记药盒对组织标本进行染色；同时，采集15例AODs的病变管壁及10例正常动脉管壁组织，在同样条件下进行免疫组化染色，对染色结果进行分析、比较研究。结果AAAs动脉壁中富含大量MMP-9阳性颗粒，MMP-9阳性表达率这95％（19／20）；正常动脉管壁组织未检测到MIMP-9的表达；15例AODs病变组织中，4例可见散在分布的MMP-9阳性颗粒。MMP-9阳性表达率为26．7％（4／15）。与AODs和正常动脉管壁相比较，MMP-9在AAAs病变主动脉壁中的表达具有显著性差异（P〈0．01）。结论腹主动脉瘤体组织中MMP-9的高表达，促进主动脉中层细胞外基质崩解进而导致动脉弹性下降、动脉扩张及进-步的瘤体形成，在AAAs的发病机制中具有重要作用。抑制MMP-9在主动脉中层的表达，有助于增加血管张力，防止动脉进行性扩张，对于预防AAAs的进展具有重要的临床价值。     

硫酸锌对大鼠腹主动脉瘤的影响

目的:建立大鼠腹主动脉瘤模型,用硫酸锌治疗,通过观察管径、管壁、弹力板的变化情况探讨硫酸锌对腹主动脉瘤的影响。方法:取15只成年雄性健康Wistar大鼠,分为对照组、手术组、治疗组,每组各5只。对手术组和治疗组的10只大鼠用灌注猪胰蛋白酶的方法建立大鼠腹主动脉瘤模型,造模完成一天后对治疗组注射硫酸锌。分别对3组的大鼠在手术4周后切取腹主动脉。进行HE染色观察腹主动脉管径的变化、地衣红染色观察弹力板的形态变化、免疫组织化学染色观察白细胞、巨噬细胞、B细胞的表达情况。结果:(一)HE染色后,手术组与对照组大鼠相比较,腹主动脉管径增大、形状变得不规则、管壁变薄,注射硫酸锌的治疗组腹主动脉外观有所恢复,与对照组相似。(二)地衣红染色后,可以观察到手术组中腹主动脉中弹力蛋白和胶原纤维变性,出现断裂,经过硫酸锌的治疗后,弹力板恢复正常状态。(三)免疫组织化学染色后,可以看到手术组大鼠炎症细胞浸润明显,治疗组炎症细胞浸润减少。结论:成功制备了Wistar大鼠腹主动脉瘤模型;Wistar大鼠腹主动脉壁扩张、炎性细胞浸润、弹力板减少;硫酸锌具有逆转大鼠腹主动脉瘤的作用和对血管壁的保护作用。     

显微外科技术在腹主动脉瘤动物模型制作中的应用

目的:研究提高腹主动脉瘤(AAA)动物模型制作成功率的方法.方法:Wistar大鼠40只,分成2组,分别按传统方法和改进后的方法制成腹主动脉瘤模型,并通过弹力纤维和胶原纤维的特殊染色、CD68免疫组织化学染色观察动脉壁的损伤、炎性细胞浸润程度;通过基质金属蛋白酶(MMP-2)原位分子杂交,观察内生性弹力酶的mRNA表达,并比较两种方法的优劣.结果:方法改进组的动物模型成功率为90%;CD68的免疫组化染色阳性细胞明显多于对照组,MMP-2的mRNA阳性表达水平亦较高.结论:充分运用显微外科技术对腹主动脉瘤动物模型的制作方法加以改进,可提高成功率;保证灌注液具有一定的浓度对模型制作成功亦具有重要作用.     

雌激素在大鼠腹主动脉瘤形成中的作用

目的研究雌激素在大鼠腹主动脉瘤（AAA）形成中的作用,探讨雌激素对腹主动脉瘤抑制作用的机制。方法雄性Wistar大鼠20只,随机分为实验组、对照组各10只。实验组定期腹腔内注射雌二醇,对照组定期腹腔内注射生理盐水（NS）,分别用弹性蛋白酶灌注肾下腹主动脉制成AAA模型。14d后用放射免疫法检测血清雌二醇的含量,用免疫组织化学、实时荧光定量聚合酶链反应（Real-Time PCR）测定动脉瘤组织基质金属蛋白酶2、9（MMP-2、9）的mRNA及蛋白的表达。结果实验组与对照组比较雌二醇水平显著增高,P〈0．01。其动脉瘤扩张率分别为（103±4）％和（172±13）％（P〈0．01）、MMP-2 mRNA的相对表达量分别为0．07±0．04和0．22±0．07（P〈0．01）、MMP-9 mRNA的相对表达量分别为1．4±0．7和7．4±2．8（P〈0．01）、MMP-2的表达率分别为（22±3）％和（50±12）％（P〈0．01）、MMP-9的表达率分别为（23±2）％和（45±10）％（P〈0．01）。结论在腹主动脉瘤形成的过程中雌激素可能通过降低MMP-2、9的mRNA表达、蛋白合成及减少炎性细胞浸润来抑制腹主动脉瘤的形成。     

尿激酶型纤溶酶原活化物和基质金属蛋白酶类在腹主动脉瘤组织中的表达

目的探讨尿激酶型纤溶酶原活化物（u-PA）和明胶酶A（MMP-2）、明胶酶B（MMP-9）在腹主动脉瘤（AAA）组织中的表达及产生的源泉.方法用u-PA和MMP-2、MMP-9单克隆抗体以免疫组织化学方法在30例AAA组织和30例正常腹主动脉组织切片上检测u-PA和MMP-2、MMMP-9抗原（蛋白）;用u-PA的寡核苷酸探针和MMP-2、MMP-9的cDNA探针以原位杂交方法,在上述AAA组织和正常腹主动脉组织的冰冻切片上探测u-PA和MMP-2、MMP-9的mRNA.结果u-PA和MMP-9主要在AAA组织中层和外膜巨噬细胞表达,在正常腹主动脉组织中无表达;MMP-2在AAA组织中主要由中层平滑肌细胞表达,在正常腹主动脉组织中无表达.结论由巨噬细胞产生的u-PA直接激活原MMP-2和原MMP-9,在AAA形成和扩张中起着关键性作用.     

尿激酶型纤溶酶原活化物和基质金属蛋白酶类在腹主动脉瘤组织中的表达

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原活化物(u-PA)和明胶酶A(MMP-2)、明胶酶B(MMP-9)在腹主动脉瘤(AAA)组织中的表达及产生的源泉。方法 用u-PA和MMP-2、MMP-9单克隆抗体以免疫组织化学方法在30例AAA组织和30例正常腹主动脉组织切片上检测u-PA和MMP-2、MMMP-9抗原(蛋白);用u-PA的寡核苷酸探针和MMP-2、MMP-9的cDNA探针以原位杂交方法,在上述AAA组织和正常腹主动脉组织的冰冻切片上探测u-PA和MMP-2、MMP-9的mRNA。结果 u-PA和MMP-9主要在AAA组织中层和外膜巨噬细胞表达,在正常腹主动脉组织中无表达;MMP-2在AAA组织中主要由中层平滑肌细胞表达,在正常腹主动脉组织中无表达。结论 由巨噬细胞产生的u-PA直接激活原MMP-2和原MMP-9,在AAA形成和扩张中起着关键性作用。     

miR-19a对腹主动脉瘤血管平滑肌细胞增殖迁移及炎症浸润的影响

目的：探讨miR-19a对腹主动脉瘤（AAA）血管平滑肌细胞增殖迁移及炎症浸润的影响及其机制。方法：收集AAA发生后未行任何治疗的15例患者血清，15例同期健康体检者血清，以及15例手术切除AAA患者的腹主动脉瘤组织和15例正常腹主动脉组织。RT-qPCR检测miR-19a的表达水平；CCK-8检测血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖活力；Transwell检测VSMCs迁移能力；流式细胞术检测VSMCs凋亡水平；ELISA法检测炎症因子的表达水平；Western blot检测蛋白的表达水平；双荧光素酶报告基因验证miR-19a和CDKN2B的靶向关系。结果：与对照组比，miR-19a在AAA患者组织和血清中均明显高表达。敲降miR-19a可明显抑制VSMCs增殖、迁移并诱导细胞凋亡，下调THP-1细胞炎症因子和基质金属蛋白酶（MMPs）的表达水平。双荧光素酶报告基因结果显示，miR-19a通过结合CDKN2B基因的3’非编码区（3’ UTR），进而抑制其表达水平。过表达CDKN2B可明显缓解miR-19a对VSMCs增殖和转移的抑制作用，以及THP-1细胞的炎症反应。结论：敲降miR-19a可通过抑制VSMCs增殖和迁移，以及下调炎性细胞浸润缓解AAA的发展进程，其机制是通过靶向上调CDKN2B的表达水平。     

腹主动脉瘤组织HMGB1与RAGE表达及意义

目的检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及晚期糖基化终产物受体(RAGE)在腹主动脉瘤(AAA)组织中的表达,探讨它们在AAA发展、破裂中的作用。方法 AAA病人42例,小AAA(横径<5 cm)病人9例,中AAA(横径5~7 cm)病人15例,大AAA(横径>7 cm)病人6例,破裂AAA病人12例;另选10例正常腹主动脉壁组织作为对照。采用免疫组化方法检测两组HMGB1及RAGE蛋白的表达。结果 AAA组织中HMGB1、RAGE的阳性表达率均明显高于正常腹主动脉组织(2χ=15.61、13.37,P<0.01),大、中AAA组织中RAGE的阳性表达率高于小AAA组织(χ2=6.075,P<0.05),大AAA和破裂AAA组织中RAGE的阳性表达率高于中小AAA组织(2χ=4.978,P<0.05)。而HMGB1在不同大小AAA及破裂AAA组织中的表达差异无显著性(χ2=3.060,P>0.05)。HMGB1与RAGE在AAA组织中的表达无相关性(P>0.05)。结论 HMGB1可能参与了AAA的发展过程,尤其RAGE与AAA的扩张和破裂可能密切相关。     

氯沙坦和卡托普利对实验性大鼠腹主动脉瘤形成的影响

目的研究氯沙坦和卡托普利对腹主动脉瘤(AAA)形成的抑制作用。方法雄性Wistar大鼠30只,体质量250～300 g,随机分为对照组、氯沙坦组和卡托普利组,每组10只,以腔内猪胰弹力蛋白酶灌注法复制AAA动物模型,术后分别给予生理盐水、氯沙坦及卡托普利灌胃,观察各组AAA形成情况,并用HE染色及VVG染色检测主动脉壁内炎症浸润及中膜弹力纤维破坏情况,用免疫组织化学染色检测主动脉壁内MMP-2和MMP-9的表达情况。结果对照组均形成AAA;而氯沙坦组和卡托普利组均未形成AAA,与对照组相比,氯沙坦组和卡托普利组腹主动脉壁增厚不明显,中膜弹力纤维层及平滑肌细胞保存较好,炎症细胞浸润明显减少,主动脉壁内MMP-2和MMP-9的表达均较对照组明显减少;而氯沙坦组和卡托普利组之间差异无统计学意义。结论氯沙坦和卡托普利能抑制弹力蛋白酶灌注的大鼠主动脉壁的炎症反应和主动脉壁的MMP的表达,最终抑制弹力蛋白酶灌注大鼠AAA的形成。为证实血管紧张素Ⅱ在AAA发病机制中的作用和小AAA的药物治疗提供了理论基础。