慢性乙型肝炎乙肝病毒基本核心启动子变异的实验与临床研究

目的 研究乙型肝炎基本核心启动子(BCP)变异与慢性乙型肝炎病情的关系.方法 通过PCR及其产物直接检测128例慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV,同时检测患者HBV定量及血清生化指标.结果 128例标本中nt1762、1764变异(双变异)共检出56例,nt1753、1762、1764变异(三变异)共检出10例,肝炎肝硬化(LC)组中双变异明显高于其他CHB组(P＜0.05);双变异组的HBeAg、ALB明显低于无变异组(P＜0.05),三变异组HBeAg明显低于双变异组(P＜0.05).结论 BCP区双变异可减少HBeAg的表达,引起肝功能受损严重并导致肝硬化的发生,BCP区尚有新发现的变异如三变异也可影响HBeAg的表达.     

抗HBe阳性乙型肝炎和无症状携带者的HBVC基因启动子和前C基因变异

目的 研究抗HBe阳性乙型肝炎病人和抗HBe阳性无症状携带(AsC)的乙型肝炎病毒(HBV)C基因启动子(CP)和前C基因变异。方法 通过DNA扩增、基因序列分析检测34例抗HBe阳性和55例抗HBe阴性乙型肝炎病人及28例抗HBe阳性AsC的血清HBVCP和前C基因序列。结果 (1)抗HBe阳性肝炎组的前C终止变异(nt1896G→A)的发生率显高于抗HBe阴性肝炎组(61．8％和14．5％);而CP双变异(nt1762A→T和1764G→A)则在两组中无明显差异(50．0％和45．5％);(2)同抗HBe阳性AsC组比较,抗HBe阳性肝炎组的HBVDNA定量呈高水平,前C终止变异的发生率也显增高(61．8％和28．6％);(3)同抗HBe阳性慢性乙型肝炎(CHB)组比较,抗HBe阳性重型乙型肝炎(CSH)病人的前C终止变异发生率和CP双变异发生率无明显差异(70．0％和58．3％,50．0％和50．0％),HBV DNA定量也无明显差异,而CPnt 1752A→G变异发生率则显增高(80．0％和29．2％)。结论 前C终止变异、nt1846突变和病毒复制可能与抗HBe阳性乙型肝炎发病有关;而Cpnt1752突变则可能与抗HBe阳性CSH发病有关。     

基因芯片技术检测肝细胞癌前C区/BCP区基因突变

目的应用基因芯片技术探讨HBV慢性感染并发肝细胞癌(HCC)前C区/BCP区基因突变的临床意义。方法应用基因芯片杂交技术检测46例HBV慢性感染并发肝细胞癌前C区A1896、A1899及BCP区nt1762、nt1764四位点突变,比较各位点突变的发生率;据乙肝血清学标志熏将研究对象分为HBeAg阳性组、HBeAg阴性组两组,比较前C区/BCP区变异与HBeAg分泌障碍的关系,分析前C区/BCP区基因突变与血清HBVDNA定量的关系。结果①用基因芯片法测定46例患者,阳性率91.3%(42/46),A1896突变率52.4%,A1899突变率19%熏nt1762/nt1764联合突变率66.7%。②HBeAg阴性组与HBeAg阳性组比较,A1896突变率、nt1762nt1764联合突变率及多位点突变率明显为高,P<0.05。前C区/BCP区变异组与非变异组比较,HBVDNA定量无显著性差异。结论应用基因芯片法可一次同时检测乙型肝炎病毒多个突变位点熏HBV持续慢性感染并发的HCC前C区/BCP区变异的发生率较高,该变异与HBeAg分泌障碍有关,但与HBVDNA复制水平并无明显相关性。     

Advances in the treatment of hepatitis B virus/hepatitis C virus coinfection

Introduction: Patients with chronic hepatitis B virus (HBV)/hepatitis C virus (HCV) coinfection are at a high risk of developing liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma, and consequently, warrant effective treatment.

Areas covered: Effective treatment should eradicate HCV infection and inhibit HBV replication but without serious adverse reactions. Careful evaluation of disease progression, predominance of one virus over another, comorbidities and concomitant hepatitis delta virus and/or HIV infection are essential for better therapy choices. In the case of HCV predominance, Peg-interferon plus ribavirin with or without a first-generation directly acting antiviral (DAA) should be the first choice, but future treatments will be DAA-based and interferon-free. In the case of HBV predominance, tenofovir or entecavir should be part of treatment. Patients should be closely monitored for early identification and treatment of HCV or HBV reactivation.

Expert opinion: High potency and high genetic barrier nucleos(t)ide analogues to inhibit HBV replication have been used for years, with no urgency for new drugs. Several DAAs for interferon-free therapy for HCV eradication will be available in the near future. We hope that the high cost of these drugs will not be a limitation to their use in developing countries. Further investigation of HBV/HCV interaction is needed before and during the administration of new therapies.     

乙肝病毒C基因启动子和前C／C基因变异与慢性乙肝发作及病情严重性的关系

目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）C基因启动子（CP）和前C/C基因变异与无症状慢性HBV携带者（ASC）的肝炎发作及慢性乙肝病情严重性的关系。方法 通过PCR及其产物直接测序,检测4例ASC、27例慢性乙肝和3例慢性重型乙肝病人血清的HBVCP和前C/C基因序列,并定量检测HBV DNA。结果 （1）CP主要变异为nt1726-1730聚集变异（1726A→C、1727A→T、1730C→G）和nt17621764双变异（1762A→T和1764G→A）。前C区主要变异为1896G→A。C基因变异常使C蛋白aa5、13、27、60、87、97及130发生置换,（2）CP聚集变异与ASC首次肝炎急性发作有关,11例中,8例出现CP聚集变异。（3）CP聚集变异合并CP双变异的乙肝病人。临床上或表现为重型肝炎或迅速进展为活动性肝硬化,HBVDNA高水平,、HBeAg/抗HBe转换。结论 同前C/C基因比较,CP变异与慢性乙肝病人的临床表现可能更为密切。     

慢性重型乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒C基因启动子和前C基因变异及与e抗原系统的关系

目的 研究慢性重型乙型肝炎患血清的HBV C基因启动子(CP)和前C基因变异情况。方法 通过DNA扩增、基因序列分析检测75例慢性乙型肝炎(CHB)和14例慢性重型乙肝(CSH)患血清的EIBV CP和前C基因序列,通过微粒子发光法定量检测血清中HBeAg的含量及通过荧光定量PCR技术定量检测血清中的HBV DNA。结果 (1)前C终止变异(nt1896G→A)在CASH组中的发生率显高于CHB组(71．4％和26．7％);CP双变异(nt1762A→T和1764G→A)则在CASH组和CHB组的发生率无显差异(42．9％和48．0％)。(2)CSH组的HBeAg含量显低于CHB组;CSH组的HBeAb阳性率则显高于CHB组(71．4％和32．0％)。(3)CSH组和CHB组的HBV DNA定量则无明显差异。结论 前C终止变异,对e系统有明显影响,与CSH的发病有关。     

Safely treating hepatitis C in patients with HIV or hepatitis B virus coinfection

Introduction: There are several clinical trials and prospective studies which support the use of direct-acting antiviral agents (DAAs) in hepatitis C virus (HCV)-coinfected patients. In this review, the safety of DAAs in HCV patients coinfected with hepatitis B virus (HBV) or HIV has been evaluated.

Areas covered: All available prospective studies, clinical trials and congress abstracts in the English language that assessed the safety and efficacy of DAAs in HCV coinfections have been considered.

Expert opinion: The newer DAAs in the treatment of HCV/HIV-coinfected patients resolved major limitations of the first-generation protease inhibitors including complex dosing, poor tolerability and interactions with antiretroviral drugs. There are not yet enough data regarding the safety and efficacy of DAAs in some coinfected patients with comorbidities, nor for pregnant, lactating or pediatric patients. Evaluating the safety and efficacy of these agents in these subgroups with HCV coinfection is recommended for future studies. The role of new direct-acting antiviral-based therapy for the treatment of patients with HCV/HBV coinfection remains to be evaluated.     

广东惠州地区慢性乙肝患者乙肝病毒基因型和HBVcccDNA含量关系研究

目的 探讨广东惠州地区慢性乙型肝炎（乙肝）患者基因型及HBVcccDNA含量水平及关系.方法 利用患者血清为材料,通过HBV基因型特异性引物PCR方法检测HBV-DNA阳性标本的基因型,同时用荧光定量PCR方法对HBVcccDNA含量进行检测.结果 123例慢性乙肝病毒感染者中,HBV B型91例（73.98％）、C型28例（22.76％）、B、C混合型1例（0.81％）,未能确定基因型3例;HBVcccDNA检测阳性为66例,阳性率为53.66％,57例无法检测到HBVcccDNA含量.结论 惠州地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型以B型和C型多见,B、C混合型较少,基因型与HBVcccDNA含量没有直接关系.     

乙型肝炎病毒C基因启动子双突变与肝硬化、肝癌的临床研究

目的：分析乙型肝炎病毒（HBV）C基刚启动子（BCP）双突变与乙型肝炎肝硬化、肝癌的关系。方法：针对BCP双突变的特点，设计一条通用捕捉探针，一条野生型和一条双突变显色探针。待测标本DNA经聚合酶链反应（PCR）扩增后分别与野生型和双突变显色探针杂交，然后用酶联免疫吸附实验（ELISA）显示杂交结果．判定BCP突变与否。结果：87例经证实为HBV-DNA阳性的慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者中共有46例双突变，其中38例有单纯双突变。8例为混合突变（双突变和野生型皆为阳性）。25例慢性肝炎，有5例单纯双突变，1例混合突变。32例肝硬化有20例单纯双突变，3例为混合突变。30例肝细胞癌有13例单纯双突变，4例混合突变。结论：BCP双突变可能与慢性肝病进展有关。     

丙型和乙型肝炎合并感染患者的抗病毒治疗分析

目的：探讨HBV／HCV合并感染患者的临床特征以及对聚乙二醇干扰素α-2a（ PEGIFNα-2a）联合利巴韦林的抗病毒疗效。方法选取收治的HBV／HCV合并感染患者45例（ A组）,单纯HBV感染患者49例（ B组）,单纯HCV感染患者38例（ C组）,比较病毒感染和抗病毒疗效。结果 A组与B组HBeAg阳性率、HBV DNA阳性率、HBV DNA平均值以及HBV DNA量的患者分布差异有统计学意义（ P ＜0貂．05）;A组与C组HCV RNA平均值差异无统计学意义（ P ＞0．05）,HCV RNA量的患者分布差异有统计学意义（ P ＜0．05）;A组与C组基因型分布、HCV RNA和ALT差异无统计学意义（ P ＞0．05）,PLT、WBC、PTA和Alb差异具有统计学意义（ P ＜0．05）;Ⅰ基因型中,A组与C组pEVR、ETVR以及复发率差异有统计学意义（ P ＜0．05）,RVR、cEVR以及SVR差异无统计学意义（ P ＞0．05）;非Ⅰ基因型中,RVR、cEVR、pEVR、ETVR、SVR以及复发率差异均无统计学意义（ P ＞0．05）;A组与C组不良反应例数以及WBC和PLT减少例数差异有统计学意义（ P ＜0．05）,溶血以及甲状腺功能减退差异无统计学意义（ P ＞0．05）;未获得SVR患者和获得SVR患者阳转率差异具有统计学意义（ P ＜0．05）。结论丙型和乙型肝炎合并感染患者以HCV为优势病毒株为主,HBV复制受抑制。合并感染Ⅰ基因型患者复发率、部分早期病毒学应答和治疗结束时病毒学应答高于单纯HCV感染患者,持续病毒学应答相似,但合并感染对非基因Ⅰ型病毒学应答率无影响。     

慢性乙型肝炎患者YMDD变异合并前C/C区启动子变异的临床研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者中拉米夫定诱导的YMDD变异和前C区1896位核苷酸以及C区启动子1762和1764位核苷酸变异的检出率及其临床意义。方法 采用基因芯片技术检测拉米夫定治疗6个月以上的122例慢性乙型肝炎患者血清中前C区1896位以及C区启动子1762和1764位核苷酸变异发生率。结果 122例慢性乙型肝炎患者中检出40例YMDD变异阳性患者，检出率为32.8％。发生YMDD变异后，HBVDNA反跳，ALT和AST增高，差异有统计学意义（P〈0．01）。YMDD变异阳性患者前C区1896位和C区启动子1762和1764位核苷酸变异检出率显著高于无YMDD变异的慢性乙型肝炎患者，差异有统计学意义（P〈0．01）。YMDD变异阳性伴前C区1896位以及C区启动子1762和1764位核苷酸变异患者与无前C区1896位以及C区启动子1762和1764位核苷酸变异的YMDD变异阳性患者比较．病情容易加重、易发展为重型肝炎或肝硬化，但差异无统计学意义（P〉O．05）。结论 拉米夫定诱导的YMDD变异患者容易发生前C区1896位／C区启动子1762和1764位核苷酸变异，但与病情加重和预后无相关性。     

乙型肝炎病毒前C区及基本核心启动子区变异的临床研究

目的 研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异、基本核心启动子(BCP)A 1762T/G1764A变异及二者联合变异在HBeAg阴性和HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者中的变异特点及与病情进展的关系.方法 将120例HBV DNA阳性CHB患者分为A、B两组,A组为HBeAg阴性CHB患者60例,B组为HBeAg阳性CHB患者60例,用荧光定量PCR检测A、B两组HBV DNA水平,用直接测序法检测A、B两组前C区G1896A及BCP区A1762T/G1764A变异的发生率.根据前C区及BCP区测序结果又分为变异组和无变异组,分析前C区及BCP区变异发生与病情进展的关系.结果 120例HBV DNA阳性CHB患者中A组检出变异株47例,B组检出变异株15例,A组和B组CHB患者中G1896A变异检出率分别为40.0％和10.0％ (x2=14.40,P=0.000);A1762T/G 1764A变异检出率分别为38.3％和15.0％(x2=8.35,P=0.003);联合变异的检出率分别为21.7％和0％(x2=14.58,P=0.000).120例CHB患者中G1896A、A1762/G1764A、联合变异的变异组HBV DNA含量明显高于无变异组HBV DNA含量,P＜0.05,差异有统计学意义.HBeAg阴性CHB患者轻、中、重度不同病情中,G1896A变异、A1762T/G1764A变异及联合变异的变异组与无变异组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 (1 )HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762T/G 1764A变异是导致HBeAg阴性、HBV DNA持续阳性的主要机制之一.(2) HBV前C区G1896A变异和BCP区A1762T/G 1764A变异可能加重HBeAg阴性CHB患者病情的发展.     

慢性乙型肝炎患者干扰素治疗前后血清可溶性细胞间粘附分子-1水平变化

目的　观察干扰素 - α1b(IFN- α1b)治疗慢性乙型肝炎患者前后血清可溶性细胞间粘附分子 - 1(s ICAM- 1)水平变化。方法　对慢性乙型肝炎治疗前行肝穿活检术 ,治疗前和治疗 6个月后 ,采用酶联免疫吸附方法 ,检测血清可溶性细胞间粘附分子 - 1的水平 ,观察干扰素对慢性乙型肝炎患者的疗效、干扰素疗效与肝组织炎症活动度的关系。结果　 IFN-α1b治疗后呈完全应答者4 5 .6 %、部分应答者 2 6 .1%、无应答者 2 8.3% ;肝组织炎症活动度为 G3者 ,干扰素治疗慢性乙型肝炎的疗效为 72 .2 %、G4者为75 .0 % ;完全应答者与部分应答者 ,治疗前后血清 s ICAM- 1水平的变化有显著性差异 (P<0 .0 1)。结论　 IFN- α1b可调控肝细胞表达 ICAM- 1,动态监测血清中 s ICAM- 1水平的变化 ,对评判干扰素抗乙肝病毒的疗效有一定的临床意义。     

不同基因型慢性乙型肝炎患者体内黄嘌呤氧化酶和维生素E水平的研究

目的:探讨不同基因型(GT)慢性乙型肝炎(乙肝)患者体内黄嘌呤氧化酶和维生素E水平,阐明患者体内氧化损伤的情况。方法:检测30例慢性乙肝患者的基因型、氧化损伤指标(黄嘌呤氧化酶和维生素E)、肝功能、乙型肝炎病毒(HBV)DNA,并做出统计分析。结果:慢性乙肝患者基因型C型组与B型组比较:血清中ALT水平高,黄嘌呤氧化酶水平明显升高,维生素E水平明显降低。在基因型B型、C型及全部乙肝患者体内,黄嘌呤氧化酶浓度与ALT水平呈明显正相关,维生素E浓度与ALT水平呈明显负相关;黄嘌呤氧化酶浓度与维生素E浓度与HBVDNA水平无明显相关。结论:基因型C型患者较基因型B型患者体内存在较严重的氧化损伤。氧化损伤是引起基因型C型患者出现较重临床表现的重要机制。HBVDNA的水平与患者的基因型及氧化损伤水平无明显关系。     

拉米夫定治疗乙型肝炎病毒感染3年临床观察

目的:探讨拉米夫定治疗乙型肝炎的长期疗效和适当疗程。方法:选择HBsAg、HBeAg和HBVDNA均阳性的成年患者。服用拉米夫定100mg·d-1,治疗3年(156周),观察其对HBVDNA、HBeAg、ALT和病毒变异的影响。结果:拉米夫定对HBVDNA有明显的抑制作用,对维持ALT的正常有一定疗效,治疗2年有39.8%的患者发生病毒变异;可出现HBVDNA的反跳。拉米夫定的疗效与患者治疗前ALT和HBVDNA的水平相关。拉米夫定的不良反应轻微,患者耐受性好,可长期服用。结论:拉米夫定治疗HBV感染,对抑制HBV的病毒复制和维持患者的ALT正常有显著疗效;其临床应用的最佳适应证为HBeAg和HBVDNA均阳性,HBVDNA水平较低而ALT异常的患者。拉米夫定的长期疗效与乙型肝炎病毒的变异相关。     

HBeAg/HBeAb双阳性者血清病毒C基因启动子热点变异分析

目的　了解乙型肝炎患者 HBe Ag和 HBe Ab双阳性状态下 C基因启动子区 ( BCP)变异情况。方法　采用时间分辨荧光免疫分析方法定量检测乙型肝炎“二对半”,对 HBe Ag/ HBe Ab双阳性标本采用巢式聚合酶链反应扩增目的 DNA片段 ,并对阳性的 PCR产物直接标记测序 ,测序结果和 Grenbank中登录的标准序列相比较。结果　对 17例 HBe Ag和 HBe Ab双阳性患者血清中 HBV DNA进行了检测 ,阳性 13例 ,测序结果显示 ,13例 HBV DNA阳性者均存在 T1762和 A1764的突变。结论　在乙型肝炎 HBe转换过程中均伴有 C基因启动子区 T1762与 A1764变异     

拉米夫定治疗中HBeAg阳性慢性乙型肝炎病人发生前C区变异

目的:分析在服用拉米夫定过程中,HBeAg阳性的慢性乙型肝炎病人出现前C区变异的临床特点。方法:回顾性分析在服用拉米夫定过程中发生前C区变异的13例慢性乙型肝炎病人,口服拉米夫定100 mg·d-1,44～160 wk先后出现ALT复常后反跳,HBV DNA再次升高。结果:前C区变异可导致病人肝功能明显损害,ALT平均(544±s 324)U·L-1,180～1 249 U·L-1。HBV DNA随即复升(108～1010)拷贝·L-1,其中9例为109拷贝·L-1,2例为1010拷贝·L-1。结论:在拉米夫定治疗中,HBV DNA正常后再次上升,肝功能复常后又明显异常且HBeAg阴性者,首先要考虑前C区变异的可能,应引起高度重视。     

慢性乙型肝炎患者肝组织中HBV cccDNA定量检测与基因型的相关性分析

目的探讨广东博罗地区慢性乙型肝炎患者肝组织中HBV cccDNA定量检测及其与患者的基因型的相关性。方法对305例患者进行随机分为4组,保证各组之间具有可比性,并对各HBV cccDNA含量的高低并没有明显的相关关系。结果研究为慢性乙型肝炎患者的诊治提供了参考,具有重要的临床意组患者的基因型和肝组织中HBV cccDNA含量进行测定,并分析其相关性。结论表明慢性乙型肝炎患者的HBV基因型和HBV cccDNA含量差异无统计学意义。