吡喹酮对曼氏裂头蚴感染小鼠治疗效果的进一步观察

目的进一步观察吡喹酮对曼氏裂头蚴感染小鼠的疗效。方法将72只小鼠分为8组（每组9只）,每只小鼠经口感染5条裂头蚴,感染后1周1-3组分别应用2 000、2 800、3 600mg/kg吡喹酮治疗1个疗程（每日3次,疗程3d）后1周剖杀,4-6组治疗2个疗程后1周剖杀,7、8组为对照组。另选40只小鼠分为4组（每组10只）,每只经口感染5条裂头蚴,感染后14周1～3组应用2 000mg/kg吡喹酮治疗后1、3、5周剖杀;4组为对照组。各组小鼠剖杀后收集裂头蚴数并计算各组的平均检出虫数和减虫率,光镜下观察虫体形态变化。结果小鼠感染裂头蚴后1周,应用2 000、2 800、3 600mg/kg吡喹酮治疗1个疗程后的减虫率分别为70.6%、77.3%及84%（P〉0.05）,治疗2个疗程后的减虫率分别为57.1%、54.6%及54.6%（P〉0.05）。小鼠感染裂头蚴后14周,应用2 000mg/kg吡喹酮治疗后1、3及5周的减虫率分别只有28%、20%及20%（P〉0.05）;虽然治疗后裂头蚴虫体有断裂现象,体壁上出现突起、溃烂及溶解等,但虫体头部无明显破坏。结论增加剂量与疗程不能提高吡喹酮对裂头蚴感染小鼠的疗效;吡喹酮对裂头蚴病的治疗效果可能与感染后的治疗时间有关。     

曼氏裂头蚴实验感染小鼠吡喹酮治疗后血清IgG水平的变化

目的观察曼氏裂头蚴实验感染小鼠吡喹酮治疗后血清IgG抗体水平的变化。方法将40只雄性昆明小鼠随机分为4组(每组10只),1~3组分别经口接种1、5、1条裂头蚴,1组和2组于感染后3周应用吡喹酮灌胃治疗(总剂量2 800 mg/kg体重,3次/d,疗程3 d),3组和4组分别为阳性和空白对照组。每周尾静脉采血,ELISA检测血清裂头蚴IgG抗体。治疗后18周剖杀,收集裂头蚴并计算减虫率。结果感染后3周,1条和5条裂头蚴感染小鼠的血清IgG抗体阳性率均为100%;两组小鼠治疗后1周血清IgG抗体水平快速升高,治疗后2周达峰值,然后开始下降,治疗后18周两组小鼠的血清IgG抗体阳性率分别为70%和100%,与治疗后5周相比无明显下降;减虫率分别为20%和0。检出的虫体平均长26.1 cm,比接种时虫体(平均长5 cm)均显著增长,其中36.21%(21/58)的虫体形成囊包。结论吡喹酮(2 800 mg/kg体重)对裂头蚴无明显杀虫作用,裂头蚴感染小鼠应用吡喹酮治疗后血清抗裂头蚴IgG水平无明显下降。     

阿苯达唑对曼氏裂头蚴感染小鼠的疗效观察

为观察不同剂量阿苯达唑对感染曼氏裂头蚴小鼠的疗效,将72只小鼠随机均分为A～H等8组,每鼠经口感染5条裂头蚴。感染后1周,A～C组小鼠应用阿苯达唑灌胃治疗1个疗程(2次/d×7d),阿苯达唑1个疗程的总剂量分别为1700、2500和3300mg/kg,治疗后1周剖杀;E～G组小鼠治疗1个疗程后间隔7d,再治疗1个疗程,总剂量同A～C组,第2疗程结束后1周剖杀;D、H组小鼠仅灌服蒸馏水,分别作为A～C组和E～G组小鼠的对照组。检获裂头蚴,计算各组小鼠的平均虫数和减虫率。结果发现,A～C组小鼠的减虫率分别为20.0%、20.0%和24.9%,差异无统计学意义(χ~2=0.351,P>0.05)。E～G组小鼠的减虫率分别为22.3%、36.4%和31.9%,差异亦无统计学意义(χ~2=1.812,P>0.05);应用相同阿苯达唑剂量治疗1个与2个疗程后,小鼠减虫率的差异均无统计学意义(P>0.05)。表明阿苯达唑对裂头蚴感染小鼠无明显的治疗效果。     

曼氏裂头蚴感染小鼠血清IgG抗体动态变化

目的观察小鼠实验感染曼氏裂头蚴后不同时间血清IgG抗体水平的变化。方法 40只小鼠随机分为5组,每组8只,1-5组小鼠采集尾静脉血后分别经口感染裂头蚴1、2、4、6及8条。感染后1周开始每周尾静脉采血,分离血清,至感染后18周。应用裂头蚴排泄分泌(excretory-secretory,ES)抗原ELISA检测血清中抗裂头蚴IgG抗体水平。结果 2条裂头蚴感染小鼠感染后2周的血清抗体阳性率为87.5%(7/8),感染后3周升至100%(8/8);1、4、6及8条裂头蚴感染小鼠感染后2周抗体阳性率即达100%(8/8)。5组小鼠均是在感染2~4周后血清抗体水平快速升高,感染后5~7周达峰值,之后抗体水平稍有下降,至感染后第18周抗体阳性率仍均为100%。5组小鼠感染裂头蚴后1~18周血清抗体水平间的差异有统计学意义(F=245.296,P<0.05),且抗体水平随感染剂量的增加而升高。结论小鼠感染不同剂量裂头蚴后2周即可检出血清抗裂头蚴抗体,ES抗原ELISA对不同感染度小鼠均有早期诊断价值。     

雷丸及吡喹酮对猬迭宫绦虫裂头蚴感染性及超微结构的影响

目的了解雷丸及吡喹酮对猬迭宫绦虫裂头蚴感染性及超微结构的影响。方法从黑斑蛙体内检获裂头蚴,用20、40和80 mg/ml雷丸粉末混悬培养液以及20、80和320μg/ml吡喹酮培养液分别体外培养裂头蚴4、12和24 h,单纯培养液培养4、12和24 h为感染对照组。168只昆明小鼠均分为21组(每组8只),每组小鼠经口感染相应条件培养后的裂头蚴各5条/鼠。感染后1周剖杀各组小鼠,计数每鼠裂头蚴检出数,并计算每组小鼠的减虫率。扫描电镜和透射电镜分别观察不同培养处理后的裂头蚴超微结构变化。结果小鼠感染经40和80 mg/ml雷丸粉末混悬液分别培养4、12和24 h的裂头蚴1周后,每组小鼠裂头蚴平均检出数分别为1.6、1.0和0.3条,0.3、0和0条,均显著低于对照组(4.1、3.5和3.3条)(P0.05),且两组间差异有统计学意义(P0.05);减虫率分别为60.0%、71.4%和90.1%,92.7%、100%和100%,且两组间差异有统计学意义(P0.05)。小鼠感染经320μg/ml吡喹酮溶液分别培养4、12和24 h的裂头蚴1周后,每组小鼠裂头蚴平均检出数分别为1.9、1.3和0.4条,与对照组间差异均有统计学意义(P0.05);减虫率分别为53.7%、62.9%和87.9%,显著高于20μg/ml吡喹酮处理组的14.6%、2.9%和6.1%以及80μg/ml吡喹酮处理组的24.4%、17.1%和24.2%(P0.05)。扫描电镜和透射电镜观察可见,经40 mg/ml雷丸粉末混悬液培养4 h以及320μg/ml吡喹酮溶液培养4和12 h后,裂头蚴虫体出现轻度挛缩;经40 mg/ml雷丸粉末混悬液培养12和24 h,虫体微毛凝集、融合或脱落,质膜破裂,石灰小体释出,皮质组织受损;经80 mg/ml雷丸粉末混悬液培养4~12 h,虫体损害逐渐加重,至24 h,裂头蚴组织结构严重受损,无法辨清;经320μg/ml吡喹酮溶液培养24 h,虫体前端挛缩明显,质膜水肿、泡状隆起,石灰小体形态改变,糖原颗粒耗损,分泌颗粒增加及焰细胞核质浓缩。经20 mg/ml雷丸粉末混悬液、20和80μg/ml吡喹酮溶液培养4、12和24 h的裂头蚴虫体与对照组相比,超微结构无明显改变。结论随着吡喹酮和雷丸体外培养浓度的增加以及时间的延长,裂头蚴对小鼠的感染性逐渐降低,并引起虫体广泛的组织结构损伤;雷丸的作用较吡喹酮明显。     

不同理化因素对曼氏裂头蚴感染性的影响

目的观察不同理化因素对曼氏裂头蚴感染性的影响。方法取含有裂头蚴的黑斑蛙肉(约1 cm3),分别经不同温度(-20℃、4℃、37℃和56℃)或不同乙醇浓度(20%、30%、40%、50%和60%)处理1、2或3 h,或经生姜汁、食用醋(总酸浓度4.5%,pH 3.05)或食用酱油(含19.3%NaCl)浸泡3、6、12或24 h,同时均设20℃生理盐水对照组。每种条件分别处理含30条裂头蚴的蛙肉,喂饲10只昆明小鼠(3条/只)。另将含20条裂头蚴的蛙肉机械匀浆处理3 min后平均喂饲10只小鼠。所有处理组喂饲1周后剖杀,计数阳性感染鼠数和小鼠体内的裂头蚴数。结果裂头蚴于-20℃处理2 h,无小鼠感染;56℃处理2 h或3 h后,所有小鼠均被感染,分别检获裂头蚴18和13条,具有感染性的裂头蚴所占比例分别为60%和43%,与对照组(均为90%,27/30)之间差异均有统计学意义(P<0.05)。裂头蚴于60%乙醇中浸泡2 h,无小鼠感染;60%乙醇中浸泡1 h,或者50%乙醇中浸泡2 h或3 h后,所有小鼠均被感染,分别检获裂头蚴18、17和15条,具有感染性的裂头蚴所占比例分别为60%、57%和50%,均显著低...     

小鼠感染曼氏裂头蚴后体内虫体分布与血清抗体水平变化

目的观察昆明小鼠感染曼氏裂头蚴后组织中裂头蚴的寄生情况及血清中IgG抗体含量的动态变化,以了解昆明小鼠用于曼氏裂头蚴感染模型建立的价值。方法从黑斑蛙体内检获曼氏裂头蚴,口服法5条/只感染昆明小鼠,于感染后第2～10周分批处死小鼠,进行大体观察,并用间接ELISA法检测血清中特异性IgG抗体的水平。结果小鼠感染裂头蚴后,多组织器官有裂头蚴寄生,其中以皮下肌肉处多见。裂头蚴寄生处组织有弥漫性淤血斑点或囊包块形成。实验小鼠血清中特异性IgG抗体于感染后第2周检出,第2～8周呈上升趋势,第8周达峰值,后逐渐下降。结论昆明小鼠感染曼氏裂头蚴后组织中可检出裂头蚴和特异性抗体,用于建立曼氏裂头蚴感染模型,成功率高、造模简单、经济适用。     

曼氏裂头蚴病动物模型的建立及诊治技术研究Ⅱ原尾蚴灌胃法建立曼氏裂头蚴病小鼠模型

目的　探索通过感染原尾蚴的剑水蚤灌胃小鼠建立曼氏裂头蚴病小鼠动物模型的可行性。方法　实验室条件下用曼氏裂头蚴感染家猫,收集当日新产猫粪,用去氯水淘洗后过滤获得曼氏迭宫绦虫虫卵,制成虫卵悬浊液。将20只C57BL/6j小鼠随机分为实验组和对照组,实验组15只、对照组5只。以曼氏迭宫绦虫钩球蚴感染野生剑水蚤,使每只剑水蚤体内含有3 ~ 5条原尾蚴;再将感染原尾蚴的剑水蚤灌胃实验组小鼠,每只小鼠灌入剑水蚤15只,对照组灌胃等体积去氯水。6个月后处死小鼠,分离疑似裂头蚴虫体,并用间接酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中抗曼氏裂头蚴特异性IgG抗体水平。提取疑似虫体基因组DNA,以曼氏裂头蚴细胞色素C氧化酶1（CO1）基因片段为目的序列进行PCR扩增以鉴别疑似虫体。结果　实验组15只小鼠中,6只小鼠血清抗曼氏裂头蚴特异性IgG抗体检测呈阳性;于其中4只小鼠皮下发现并分离出乳白色虫体。每只小鼠均仅检出1条虫体,虫体形态与曼氏裂头蚴相似。基于CO1基因的疑似虫体PCR扩增产物在毛细管电泳上于151 bp处显示特异性条带,测序结果与已知曼氏裂头蚴序列100%符合。结论　本研究成功建立了一种曼氏裂头蚴病小鼠动物模型。     

血吸虫对吡喹酮抗药性的研究XIIV湖沼型流行区日本血吸虫对吡喹酮的敏感性评价

目的比较中国大陆湖沼型流行区日本血吸虫不同分离株对吡喹酮的敏感性,为建立吡喹酮敏感性检测/监测技术提供实验依据。方法从湖南、湖北、江西、安徽和江苏5省湖沼型血吸虫病流行区现场采集感染性钉螺,分离尾蚴,以40条各虫株尾蚴感染小鼠,感染35 d后分为6组,5个用药组分别一次灌服37.5、75、150、300 mg/kg和600 mg/kg吡喹酮,对照组小鼠灌服2.5%Cremophor EL溶液。所有小鼠于感染后50 d解剖,收集小鼠体内成虫,统计虫负荷和减虫率,计算并比较不同分离株血吸虫的吡喹酮半数有效剂量(ED50值)。结果37.5、75、150、300 mg/kg和600 mg/kg吡喹酮一次灌胃给药后,各组小鼠减虫率分别为10.37%～19.81%、23.22%～33.09%、39.25%～49.61%、62.87%～74.44%和91.26%～98.09%。经不同剂量吡喹酮给药后,各组小鼠减虫率差异无统计学意义(P>0.05)。7株日本血吸虫不同分离株的吡喹酮ED50值为134.1～186.7 mg/kg,但各分离株的吡喹酮ED50值差异无统计学意义(P>0.05)。结论中国大陆湖沼型流行区日本血吸虫不同分离株对吡喹酮的敏感性差异无显著性。血吸虫吡喹酮ED50值作为定量指标,能够客观反映血吸虫种群对吡喹酮的敏感性。     

血吸虫对吡喹酮抗药性的研究ⅩⅢ日本血吸虫吡喹酮抗药性的实验诱导

目的实验研究在吡喹酮药物压力下中国大陆日本血吸虫对吡喹酮产生抗药性的可能性。方法取采自湖南省血吸虫病流行区湖滩现场和江苏省实验室传代的感染性钉螺实验室逸蚴,获得日本血吸虫尾蚴感染小鼠,从感染鼠肝脏分离成熟虫卵孵化毛蚴感染湖北钉螺,建立现场采集株和实验室传代株日本血吸虫小鼠钉螺实验室生活史循环。用定量尾蚴（40条/鼠）感染小鼠,感染35d后将小鼠随机分为对照组和抗性诱导组：对照组小鼠感染后45d解剖收集肠系膜静脉和肝门脉静活虫体,计算虫负荷（条/鼠）;抗性诱导组小鼠采用灌胃法一次口服亚治疗剂量吡喹酮进行治疗,服药22d后解剖收集肠系膜静脉和肝门脉静存活虫体。计算虫负荷（条/鼠）和减虫率,完成首轮诱导。取抗性诱导组小鼠肝脏,分离虫卵,实验室孵化出毛蚴重新感染钉螺,感染后的钉螺经25℃生化培养箱内饲养60~70d后,分离感染性钉螺并逸蚴,用成熟尾蚴感染小鼠,开始新一轮循环诱导。首轮诱导吡喹酮口服剂量为100mg/kg,后每循环2~3轮增加100mg/kg口服剂量。取完成8轮诱导后和未经诱导原代虫株的尾蚴感染小鼠,感染35d后分别采用300mg/kg和600mg/kg吡喹酮一次性灌胃治疗感染小鼠,服药后14d解剖感染鼠,收集活虫,计算各虫株减虫率,评价虫株经8轮诱导后对吡喹酮敏感性的变化。结果在实验室内建立了江苏实验室传代株和湖南现场采集株2个虫株,并对其实施了8轮诱导。江苏实验室传代株在小鼠体内经第1轮口服100mg/kg吡喹酮治疗后减虫率为22.3%,第8轮口服300mg/kg吡喹酮治疗后减虫率为53.7%,减虫率随口服吡喹酮剂量增加而增加;湖南现场采集株在小鼠体内经第1轮口服100mg/kg吡喹酮治疗后减虫率为66.8%,第8轮口服300mg/kg吡喹酮治疗后减虫率仅为20.6%,减虫率随口服吡喹酮剂量增加而显著降低。未经吡喹酮诱导的江苏实验室传代株在小鼠体内经300mg/kg和600mg/kg吡喹酮治疗后,减虫率分别为71.5%和97.4%;经8轮吡喹酮筛选治疗后该虫株减虫率降至32.6%和68.1%。未经吡喹酮诱导的湖南现场采集株在小鼠体内经300mg/kg和600mg/kg吡喹酮治疗后,减虫率分别为70.8%和97.5%;经8轮吡喹酮筛选治疗后该虫株减虫率降至45.7%和61.9%。结论中国大陆日本血吸虫在吡喹酮持续药物压力下可产生抗药性,但不同虫株间对吡喹酮敏感性存在差异,药物压力下产生抗性的潜能也存在差异。中国大陆日本血吸虫吡喹酮抗性株的建立,可为研究日本血吸虫吡喹酮抗性机制及其检测和监测技术奠定基础。     

Therapeutic effect of subcurative dose praziquantel on Schistosoma mansoni infected mice and resistance to challenge infection after treatment

The therapeutic effect of a subcurative dosage of praziquantel (PZQ) on Schistosoma mansoni infected mice and resistance to challenged worm infection after treatment were assessed and compared with conventional treatment using a curative dosage of PZQ. S. mansoni infected mice were treated with PZQ at a curative dosage (600 mg kg(-1)) or a subcurative dosage (300 mg kg(-1)) at 9 weeks after infection. Untreated mice and non-infected mice were added as controls. The therapeutic effect of the drug was evaluated in terms of the mortality of mice after treatment, and the parasitological and pathological findings in mice sacrificed at 1 week, 1 month, or 3 months after treatment. Another sample of mice was not killed but challenged with S. mansoni cercariae at 1 week, 1 month, or 3 months after treatment. Resistance to re-infection was evaluated by the extent of challenged worm reduction. In conclusion, there was no significant difference in mortality, or parasitological and pathological findings between mice treated with PZQ at the two dosages. However, resistance to challenged worm infection was more sustained in the group treated with subcurative dose PZQ, especially at 3 months after treatment.     

Failure to induce resistance of Schistosoma japonicum to praziquantel

In order to explore the possible occurrence of inducing resistance of Schistosoma japonicum to praziquantel (PZQ), a set of animal experiments were carried out. Outbred mice (NIH strain), Anhui isolates of S. japonicum and Oncomelania hupensis were used. In one protocol five weeks after being infected with 48-52 cercariae, mice were orally dosed with PZQ 300 mg/kg, and killed 82 days later to isolate eggs from the liver. Snails were exposed to miracidia released from egg-hatching. F1 progeny were thus obtained through cercarial inoculation. The same scheme was applied for the establishment of the F2 generation. In another protocol two weeks after infection, PZQ 50 mg/kg/day was given to mice for 5 days. Eggs were collected 26-27 days post treatment and the identical procedures were adopted for F1 and F2 generations successively. Analysis of total worm and female worm reduction rates indicated that there was no significant difference between the sensitivity to PZQ of F1 and F2 progenies of S. japonicum and the parent worms.     

青蒿琥酯与吡喹酮联合应用早期治疗兔血吸虫病的实验观察

目的 观察青蒿琥酯与吡喹酮先、后使用早期治疗兔血吸虫病的效果。方法 实验共分4组，第1组于感染后第7天首服青蒿琥酯，第35天再服吡喹酮，剂量分别为20mg／kg和40mg/kg。第2组为单青蒿琥酯组，于感染后第7天首服青蒿琥酯，剂量为20mg/kg，每周服1次，连服4次。第3组为单用吡喹酮组，于感染后第35天顿服吡喹酮，剂量为40mg/kg。第4组为不服药对照组。各组于停药后4周解剖，检获成虫，比较各组的减虫率、减雌率和肝脏变化。结果 以感染后第7天首服青蒿琥酯，第35天再服吡喹酮的效果最好，减虫率为97．88％、减雌率达98．63％，6只兔中有2只无虫。单青蒿琥酯和单吡喹酮两组的减虫率分别为94．32％和71．67％，减雌率为96．14％和80．75％。结论 青蒿琥酯与吡喹酮先、后用药组明显优于吡喹酮组(P＜0．01)，但与青蒿琥酯组比较差异不显著，然而缩短了疗程，减少了费用，便于现场使用。     

吡喹酮透皮给药治疗日本血吸虫病

目的 探究吡喹酮(praziquantel,PZQ)透皮剂的治疗效果,以及吡喹酮与宿主免疫系统是否具有协同作用,为治疗血吸虫病提供更便利的治疗途径.方法 新西兰大白兔感染日本血吸虫尾蚴150±2条或300±2条,透皮剂浓度为24％,以100 mg/kg剂量对感染日本血吸虫28 d的新西兰大白兔分别进行腹部透皮治疗1次和...     

洞庭湖反复化疗地区日本血吸虫对吡喹酮敏感性实验研究

目的探索反复化疗地区日本血吸虫对吡喹酮的敏感性.方法从洞庭湖反复化疗区及新流行区现场收集获取感染性钉螺,分别逸蚴、分组感染小鼠;5周后再分对照组和治疗组,治疗组用吡喹酮(600 mg/kg 体重)1次灌服,治疗后3周与对照组同时剖杀,观察记录各组成虫、肝卵、粪卵数和粪便毛蚴孵化阳性率.结果反复化疗地区与新流行区吡喹酮治疗组减虫率分别为98.24%、98.71%;粪卵减少率分别为99.94%、99.64%;肝卵减少率分别为75.85%、73.10%;两者差异均无显著性.对照组均有毛蚴孵出,而各治疗组鼠粪均无毛蚴孵出.结论洞庭湖反复化疗地区日本血吸虫对吡喹酮敏感性没有发现降低,与新流行区比较差异亦无显著性.     

Kinetics of the pulmonary phase of Schistosoma mansoni in mice treated with dexamethasone

In the experimental schistosomiasis mansoni glucocorticoids cause a reduction in the worm burden when administered in the week of infection or, the longest, at the next week. In order to determinate the probable(s) site(s) of reduction of the worm burden, mice were infected with cercariae of LE strain of S. mansoni and dexamethasone was administered daily (50 mg/kg, subcutaneously) starting 1 hour before infection until the eighth day. Mice were sacrificed daily starting on the third day after infection until the ninth day, and schistosomula from lungs were collected. Six weeks after infection, the remaining mice were sacrificed and perfused for adult worm recovery. Analysis of the results showed that the non-treated mice presented larger numbers of lung larvae than the treated ones, and this difference was also found later in the worm burden in the portal system. This difference may reflect the early death of larvae in treated animals, before or after reaching the lungs.