人肝癌细胞凋亡小体超微结构观察

人肝癌细胞凋亡小体超微结构观察张晓东，王文亮（病理学教研室西安７１００３３）关键词肝肿瘤；凋亡；凋亡小体；超微结构中图号Ｒ７３我们应用抗癌药阿霉素（ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ）成功地诱导培养的人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞发生凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ...     

阿霉素诱导的HCC—9204细胞系凋亡细胞cDNA文库构建及策略

阿霉素诱导的ＨＣＣ┐９２０４细胞系凋亡细胞ｃＤＮＡ文库构建及策略杨帆张晓东王文亮（第四军医大学病理学教研室西安７１００３３）关键词细胞凋亡ｃＤＮＡ文库中图号Ｒ７３细胞凋亡是机体生长发育，细胞分化和病理状态中细＊国家自然科学基金资助项目Ｎｏ．３９４７０...     

肝细胞刺激因子与阿霉素在人肝癌细胞凋亡的协同作用

目的　研究肝细胞刺激因子（ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｓｕｂｓｔａｎｃｅ , Ｈ Ｓ Ｓ） 对肝癌细胞凋亡的作用及与化疗药物的相互影响。方法体外培养人肝癌细胞（ Ｑ Ｇ Ｙ－ ７７０３） ,并用不同剂量的 Ｈ Ｓ Ｓ 及 Ｈ Ｓ Ｓ＋ 阿霉素（ Ａ Ｄ Ｒ） 处理,琼脂糖凝胶电泳分析 Ｄ Ｎ Ａ 片段。碘化丙锭染色,流式细胞仪观察细胞死亡率。结果　肝癌细胞在体外经 Ｈ Ｓ Ｓ,阿霉素及阿霉素＋ Ｈ Ｓ Ｓ 处理后,肝癌细胞发生凋亡。结论　 Ｈ Ｓ Ｓ可以诱导人肝癌细胞发生凋亡,阿霉素对 Ｈ Ｓ Ｓ 所致人肝癌细胞的凋亡有协同作用。     

龙力胶囊对人肝癌细胞诱导分化及机理研究

目的：研究中药复方龙力胶囊对人肝癌ＨＣＣ－９２０４的诱导分化作用及其机理。方法：用体外培养ＨＣＣ－９２０４细胞，观察龙力胶囊对ＨＣＣ－９２０４细胞形态学、集落形成能力、ＡＥＰ与ＡＬＢ分泌量、γ－ＧＴ活力、核型、细胞周期以及癌基因表达的影响。结果：龙力胶囊能改善ＨＣＣ－９２０４细胞的异型性，降低其集落形成能力，降低ＡＦＰ分泌量及γ－ＧＴ活力，提高ＡＬＢ分泌量，降低细胞染色体主流范围，降低ｃ－ｍｙｃ、     

一组抗人肝癌单抗相应抗原的表达及位点分析

为分析肿瘤细胞的异质性，解决导向诊治中的问题。方法：我们用流工细胞仪定量地测定了四株抗人肝癌单抗在五种不同人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１，ＢＥＬ－７４０２，ＱＧＹ－７７０１人肝癌细胞系ＨＨＣＣ，ＨＨＣＣ－９２０４和正常人肝细胞ＱＺＧ中的相应抗原表达及抗原位点分析。结果：Ｈ１８，Ｈ２７和Ｅ５相应抗原在五种人肝癌细胞株中均有表达，Ｆ１１在ＳＭＭＣ－７７２１，ＱＧＹ－７７０１两种肝癌细胞株有表达，但表达     

顺铂诱导人肝癌细胞凋亡模型的构建

目的 建立肝癌细胞凋亡模型,探讨顺铂抗癌作用机理,为进一步研究细胞凋亡分子机制打下基础。方法 用抗癌药顺铂诱导增减的人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞发生凋亡,用四氮甲唑蓝比色试验（ＭＴＴ）,细胞形态学检查,ＤＮＡ凝胶电泳检测。结果 顺铂可显著抑制ＳＭＭＣ－７７２１细胞的生长,并有很好的量效和时效关系,经药物作用后,肝癌细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳吴现明显的梯度     

瞬时转染p21WAF1基因诱导HCC—9204细胞系细胞凋亡的形态学观察

瞬时转染ｐ２１ＷＡＦ１基因诱导ＨＣＣ┐９２０４细胞系细胞凋亡的形态学观察杨帆李英春王文亮（第四军医大学病理学教研室西安７１００３３）关键词野生型ｐ５３活化因子基因转染凋亡中图号Ｒ７３ｐ２１ＷＡＦ１基因是近年来发现的一个新基因，它可由野生型ｐ５３基因激...     

顺铂诱导肝细胞性肝癌细胞凋亡及其临床意义

目的：探讨顺铂（ＣＤＤＰ）体内诱导肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）细胞凋亡的发生情况及其临床意义。方法：１８例ＨＣＣ患者随机分成２组,１０例行ＣＤＤＰ诱导治疗,另８例作对照。用流式细胞仪（ＦＣＭ）检测２且患者患者手术切除之肿瘤组织,作凋亡及细胞周期分析。结果：ＣＤＤＰ治疗组肝癌细胞凋亡率较对照组显著增高。ＣＤＤＰ治疗组肿瘤细胞Ｇ０－Ｇ１期对照组明显增加;而Ｓ期细胞有显著减少。细胞增殖指数（ＰＩ）在ＣＤＤＰ治     

人肝癌细胞系HCC－9204的建立及其特性研究

目的和方法：作者用组织块培养法，对１２例肝细胞肝癌手术标本进行培养，并对能存活的细胞进行形态学观察，ＬＤＨ同工酶谱和ＡＦＰ检查，核型分析，对数求解和放射自显影测定细胞增殖周期，异种移植及生物学特性研究，结果：１例获得长期体外生长的能力，将其命名为ＨＣＣ－９２０４，无论形态学观察，还是ＬＤＨ同工酶谱的变化，均符合肝癌细胞的一般特征，并具有体外分泌ＡＦＰ的能力，染色体众数为７８～８０条各群染色体均增加，而以Ｃ，Ｅ群增加最为明显，并恒定出现Ｍ＿２ｄｅｒ（４）ｔ（４；１９）和Ｍ＿８ｄｅｌ（１３）两种标记染色体，增殖周期约为２０ｈ，异种移植成瘤率１００％．结论：ＨＣＣ－９２０４是一株人体肝癌细胞系，可用于肝癌防治研究．     

双氢青蒿素体外抑制人肝癌细胞株HepG2生长作用的实验研究

目的研究双氢青蒿素（DHA）对体外培养的人肝癌细胞株HepG2的生长抑制作用及诱导凋亡作用。方法常规体外培养人肝癌细胞株HepG2,将不同浓度DHA在不同时间内作用于人肝癌细胞株HepG2,采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果不同浓度DHA均可抑制体外培养的人肝癌细胞株HepG2细胞生长,并可诱导其发生凋亡,且呈一定的剂量-效应、时间-效应关系。结论 DHA对体外培养的人肝癌细胞株HepG2有明显的生长抑制作用及诱导凋亡作用。     

表阿霉素和阿霉素诱导人肝癌细胞凋亡

目的　观察和比较表阿霉素和阿霉素诱导肝癌细胞凋亡的作用 ,为临床治疗肝癌的药物选择提供依据 .方法　用 2 0 μmol· L- 1表阿霉素和阿霉素分别作用于人肝癌细胞株HCC- 92 0 4细胞 3h,换液继续培养 8h.用细胞形态学观察、DNA电泳和流式细胞仪判定细胞凋亡情况 .结果　表阿霉素和阿霉素分别作用于 HCC- 92 0 4细胞 11h后 ,细胞形态学改变均符合凋亡细胞特征 .凋亡细胞分别占细胞总数的13.8%和 13.1% .MTT试验示各实验组与空白对照组间比较相差显著 ,表阿霉素和阿霉素相同剂量处理组之间比较无显著差异 .细胞周期检测表阿霉素组 G1 期、G2 期和 S期分别为 5 6 .4% ,10 .4%和 38.2 % ,阿霉素组分别为 6 1.1% ,8.6 %和 30 .3% ,对照组为 31.1% ,6 1.9%和 6 .0 % .结论　表阿霉素和阿霉素均能有效地诱导人肝癌细胞株 HCC- 92 0 4细胞发生凋亡 ,无明显差异 .     

紫杉醇对肝癌细胞增殖抑制及诱导凋亡的效应分析

目的：探讨并分析紫杉醇对肝癌细胞增殖抑制及诱导凋亡的效应。方法：利用ATP生物发光法进行TCA检测肝癌细胞对紫杉醇、10－羟基喜树碱、5－Fu、表阿霉素、顺铂、丝裂霉素等药物的敏感性，以及诱导肝癌细胞凋亡的情况。结果：肝癌细胞对紫杉醇表现出极高的敏感度，对5－Fu敏感度相对较低；对表阿霉素等药物表现出明显耐药性；肝癌细胞诱导凋亡率对比结果显示，紫杉醇浓度与凋亡率呈反比。结论：紫杉醇采用引诱细胞坏死方法为主，癌细胞对紫杉醇的敏感度相对较高，具有临床推广价值。     

肝癌细胞内表达抗肝癌单链抗体对肝癌细胞的杀伤作用

为研究抗肝癌单链抗体基因在肝癌细胞内表达对肝癌细胞的作用。采用脂质体转梁技术把含抗人肝癌ｓｃＦｖ基因的逆转录病毒载体导入人肝癌细胞系ＨＣＣ９２０４中，Ｇ４１８筛选阳性细胞克隆。ＲＮＡ ｄｏｔ ｂｌｏｔ杂交分析ｓｃＦｖ基因在ＨＣＣ细胞中的表达。光镜及电镜技术观察转染细胞结构的变化。     

化疗药物不同配伍诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡

目的通过对临床常用化疗药物５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）、丝裂霉毒（ＭＭＣ）、卡铂（ＣＢＰ）、阿霉素（ＡＤＭ）和表阿霉素（Ｅ－ＡＤＭ）相互配伍诱导人胰腺癌细胞株细胞凋亡的观察,探讨化疗药物抑制胰腺癌细胞生长的作用机制,为临床制定合理的化疗方案提供理论依据。方法不同配伍的化疗药物作用于胰腺癌细胞后,以倒置显微镜和荧光显微镜观察其形态变化;以流式细胞仪检测细胞ＤＮＡ含量的变化,计算出凋亡细胞的比例;提取细胞ＤＮＡ,进行凝胶电泳确定细胞凋亡的发生。结果联合化疗可以诱导胰腺癌细胞凋亡,与引起细胞坏死相比,诱导肿瘤细胞凋亡的化疗药物剂量小、作用时间短;随作用时间的延长和药物剂量的增加,凋亡细胞的比例也增加;不同配伍的化疗药物诱导不同胰腺癌细胞株细胞发生凋亡的情况是不完全相同的。结论诱导肿瘤细胞凋亡是化疗药物抑制胰腺癌细胞生长的主要机制,能否诱导胰腺癌细胞发生凋亡可作为判断不同配伍的化疗药物抑制胰腺癌细胞生长能力的重要指标之一。     

人粘液表皮样癌MEC─1细胞凋亡过程中细胞周期与P53的研究

人粘液表皮样癌ＭＥＣ┐１细胞凋亡过程中细胞周期与Ｐ５３的研究金军１张盈华２唐文杰１张菊２（第四军医大学唐都医院：１口腔科，２中心实验室西安７１００３８）关键词细胞凋亡阿霉素细胞周期Ｐ５３蛋白中图号Ｒ７３－３我们用１０μｇ／ｍｌ阿霉素成功地诱导了人涎腺...     

逆转录病毒介导的人肝癌特异性的HSV—tk／ACV的体外抗肝癌作用

目的；建立肝癌特异性前药转换基因治疗的方法。方法和结果；构建携带单纯疱疹病毒胸苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）的人肝癌特异性逆转录病毒载体，经过ＰＡ３１７细胞包装及病毒滴度测定后，感染肝癌ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞，用Ｎｏｒｈｅｒｎ杂交方法证明ＨＳＶ－ｔｋ基因在ＡＦＰ高分泌的ＨｅｐＧ２细胞中得到特异转录，以阿昔洛韦（ＡＣＶ）为前药攻击转基因的肝癌细胞呈示对ＨｅｐＧ２有相对选择性杀伤作用。结论；该Ａ     

健脾化瘀方对肝癌HepG2细胞生物行为学的影响

目的：本研究旨在探讨：①健脾化瘀方体外对人肝癌细胞株HepG2增殖、黏附和侵袭的生物行为学影响;②健脾化瘀方体外对人肝癌细胞株HepG2凋亡的影响。方法：①采用MTT法、黏附实验、Transwell小室侵袭迁移实验,观察不同浓度的健脾化瘀方对人肝癌细胞株HepG2增殖、黏附和侵袭的影响;②利用流式细胞仪,AnnexinV/PI双染色法,研究不同浓度健脾化瘀方对人肝癌细胞株HepG2早期凋亡的诱导作用。结果：①健脾化瘀方有抑制人肝癌细胞株HepG2增殖的作用,并呈一定的浓度依赖性：同一时间不同浓度各组细胞的生长抑制率有明显差异（P〈0.01）。②健脾化瘀方高、中浓度（2、1mg/mL）作用HepG 2细胞40、60和120min时,细胞的黏附能力明显降低（P〈0.01）。健脾化瘀方作用HepG 2细胞24h后,侵袭的细胞数减少（P〈0.05）。③健脾化瘀方对人肝癌细胞HepG2作用48h后,有诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的作用（P〈0.05）。结论：①健脾化瘀方对人肝癌细胞株HepG2的增殖具有抑制作用;②健脾化瘀方能抑制人肝癌细胞株HepG2的黏附能力和侵袭能力;③健脾化瘀方有诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的作用。     

阿霉素对人肝癌细胞SMMC—7721抑制作用的研究

目的 研究阿霉素对人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１生长的影响。方法 应用ＭＴ法、流式细胞术及航向电镜技术观察阿霉素对ＳＭＭＣ－７７２１细胞生长的作用及细胞周期和形态学改变。结果 阿霉素明显抑制人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１的生长（Ｐ〈０．０５）,半数生长抑制剂量（ＩＣ５０）为０．４４ｍｇ／Ｌ。流式细胞术证实,阿霉素作用１２ｈ,细胞阻滞于Ｇ２期,４８ｈ细胞阻滞于Ｇ１期。航向电镜超微结构观察发现阿霉素可使肿     

粉防己碱对人肝癌7402细胞株增殖与凋亡的影响

目的：通过观察粉防己碱（Tetrandrine）对人肝癌7402细胞株增殖与凋亡的影响，初步探讨粉防己碱对肝癌的体外抗肿瘤效应。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法、集落形成实验观察粉防己碱对人肝癌7402细胞株增殖的抑制效应，利用细胞DNA琼脂糖凝胶电泳、细胞凋亡荧光染色法及流式细胞术检测粉防己碱诱导肿瘤细胞凋亡的作用，以免疫细胞化学法检测粉防己碱对Bcl-2和Bax蛋白表达水平的影响。结果：MTT比色法、集落形成实验显示，粉防己碱对人肝癌7402细胞株增殖有抑制作用，其抑制效应具有剂量依赖的特点，细胞凋亡荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术表明，粉防己碱可诱导7402细胞凋亡，免疫细胞化学法显示，粉防己碱上调Bax蛋白表达，下调Bcl-2蛋白表达。结论：粉防己碱对人肝癌7402细胞株增殖的抑制效应具有剂量依赖性，并可诱导细胞凋亡，其抗肿瘤效应可能与凋亡相关基因表达的调控有关。     

二苯乙烯类化合物对肺癌细胞株生长的抑制作用

目的研究二苯乙烯类化合物（含３种结构类似的成分：（１）（＋）－α－ｖｉｎｉｆｅｒｉｎ，（２）ｍｉｙａｂｅｎｏｌＣ，（３）ｋｏｂｏｐｈｅｎｏｌＡ，一种蛋白激酶Ｃ抑制剂）对人肺癌细胞株Ａ５４９，９５－Ｄ，ＳＰＣ－Ａ－１，ＮＣＩ－Ｈ４６０及ＮＣＩ－Ｈ４４６细胞体外生长的抑制作用。方法锥虫蓝排除法、ＭＴＴ法、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８荧光染色及ＤＮＡ凝胶电泳。结果药物处理时间越长及浓度越高，细胞生长抑制作用越强，其中Ａ５４９细胞株ＩＣ５０为２０μｍｏｌ／Ｌ，敏感性最高，而ＮＣＩ－Ｈ４６０及ＮＣＩ－Ｈ４４６的ＩＣ５０为２００μｍｏｌ／Ｌ，敏感性最低；荧光染色结果为所有经药物处理的肺癌细胞的染色质均产生凝集现象，在ＤＮＡ凝胶电泳图中，出现梯状ＤＮＡ电泳条带。结论二苯乙烯类化合物可显著抑制Ａ５４９细胞的生长，且这种抑制作用表现出时间及浓度依赖性；此化合物对ＮＣＩ－Ｈ４６０及ＮＣＩ－Ｈ４４６细胞的生长未表现明显的抑制作用。另外，此类化合物体外可诱导肺癌细胞产生凋亡现象