Smac基因在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

Smac基因是近年发现的一种凋亡促进基因,在细胞凋亡中有重要作用.当细胞受到凋亡刺激时,线粒体释放细胞色素C和Smac蛋白到细胞质中,两者与凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis proteins,IAP）结合,使其丧失抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）活性的作用,从而促进细胞凋亡.细胞凋亡的减少与肿瘤的发生关系密切.本研究旨在探讨Smac基因在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义.     

上皮性卵巢癌中USP39的表达及其临床意义

目的:探讨USP39在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义。方法:收集2011～2014年郑州大学第一附属医院病理科的118例上皮性卵巢癌组织(54例卵巢浆液性囊腺癌、28例卵巢黏液性囊腺癌、19例卵巢内膜细胞癌、17例卵巢透明细胞癌)及40例卵巢良性肿瘤组织(20例卵巢浆液性囊性瘤、20例卵巢黏液性囊腺瘤)、24例正常卵巢组织的石蜡包埋组织。免疫组化法检测USP39表达,分析其表达与上皮性卵巢癌临床病理特征的相关性。结果:卵巢癌组织中USP39高表达率为72.03%(85/118),与卵巢良性肿瘤(19/40)及正常卵巢组织(5/24)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。浆液性癌的USP39高表达率是85.19%(46/54),高于其他类型的癌,差异有统计学意义(P=0.032)。浆液性囊腺瘤(12/20)与黏液性囊腺瘤(7/20)相比,USP39高表达率无统计学差异(P=0.113)。上皮性卵巢癌中,USP39表达与患者年龄、肿瘤大小及肿瘤分化程度无关(P>0.05),而与病理类型、FIGO分期及淋巴结转移显著相关(P<0.05)。USP39高表达、FIGO分期及淋巴结转移是影响上皮性卵巢癌预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:USP39表达升高与上皮性卵巢癌的发生发展有关,可能成为治疗上皮性卵巢癌的新靶点和评估预后的有力指标。     

14-3-3γ在人卵巢上皮性癌中的表达检测

目的:检测14-3-3γ在卵巢上皮性癌组织的表达,探讨在卵巢上皮性癌发病机理中14-3-3γ蛋白家族的作用机制。方法:应用实时荧光定量PCR方法检测14-3-3γ在15例正常卵巢组织和52例卵巢上皮性癌组织中的表达差异,应用原位杂交方法检测14-3-3γ mRNA在正常卵巢组织和卵巢上皮性癌组织中的定位。结果:实时荧光定量PCR结果经过Mann-Whitney U检验,表明卵巢癌组的14-3-3γ mRNA水平显著高于正常卵巢组。14-3-3γ mRNA定位于卵巢癌细胞中,在正常卵巢组织中没有明显信号出现。结论:在人上皮性卵巢癌中,14-3-3γ转录上调,14-3-3γ mRNA定位于癌细胞。由此推测,14-3-3γ可能参与了人上皮性卵巢癌的发生。     

活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3分子的构建及其致卵巢上皮性癌细胞凋亡的实验研究

目的 构建能自我激活的活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3分子,并探讨其对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞的致凋亡作用.方法利用基因重组技术构建活性caspase-3分子--rev-caspase-3及其重组腺病毒--Ad-rev-casp3;应用免疫组化方法、细胞计数试剂盒8、流式细胞仪和蛋白印迹法分别检测rev-caspase-3作用后卵巢癌细胞系AO细胞中活性caspae-3蛋白的表达情况、细胞存活率、凋亡率、细胞周期、caspase-3活性亚单位p17和聚(腺苷二磷酸-核糖)多聚酶(PARP)的分解产物p85的表达水平,应用透射电镜观察rev-caspase-3作用后细胞的超微结构,实时PCR技术检测细胞中凋亡相关基因的表达情况;建立卵巢癌裸鼠皮下及腹腔移植瘤模型,观测rev-caspase-3作用后裸鼠生存情况及肿瘤体积的变化.结果 Ad-rev-casp3作用后的AO细胞中显著表达活性caspase-3蛋白,细胞质明显棕染;细胞中活性caspase-3亚单位p17和PARP裂解片段p85的表达水平升高.Ad-rev-casp3以感染复数(MOI)为70作用后的AO细胞存活率为30.3%,凋亡率为40.2%.Ad-rev-casp3以MOI=10作用后的细胞凋亡率只为3.4%,但此时S期细胞比例高达56.5%,G1期比例下降至9.8%,与未感染Ad-rev-casp3(MOI=0)的AO细胞的S期和G1期比例显著不同(P均＜0.05).Ad-rev-casp3作用后的AO细胞呈现显著的凋亡形态改变,电镜下见明显的凋亡小体形成;细胞中活性caspase-3基因的表达水平显著升高,为9.44.Ad-rev-casp3能显著延长荷瘤裸鼠的生存期,平均生存时间为(213±16)d,并显著抑制移植瘤的生长,在第1次注射后53 d时抑瘤率为70%.结论 表达rev-caspase-3的重组腺病毒载体对卵巢癌细胞有强烈的致凋亡作用,并可显著延长荷瘤裸鼠的生存期,抑制肿瘤生长.     

Galectin-3、CAⅨ在卵巢上皮性肿瘤的表达及意义

目的探讨半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨ)在卵巢上皮性肿瘤的表达情况,探讨二者在恶性卵巢上皮性肿瘤发生、发展中的作用及相关性。方法采用免疫组化SP法检测45例良性卵巢上皮性肿瘤,50例交界性卵巢上皮性肿瘤及61例恶性卵巢上皮性肿瘤中Galectin-3、CAⅨ的表达情况。结果 1 Galectin-3、CAⅨ在恶性卵巢上皮性肿瘤中的阳性表达率分别为67.2%和59.0%,明显高于良性及交界性组,差异有统计学意义(P0.01,P0.05)。Galectin-3及CAⅨ在恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达与肿瘤分化程度、浸润、转移密切相关(P0.05)。而与肿瘤的组织学类型及患病年龄状况无关(P0.05);2恶性卵巢上皮性肿瘤组织中Galectin-3与CAⅨ的表达呈正相关(r=0.672,P0.01)。结论 Galectin-3、CAⅨ在恶性卵巢上皮性肿瘤的发生过程中发挥重要作用,参与肿瘤浸润、转移,可能成为指导肿瘤预后的参考指标。     

上皮性卵巢癌中Survivin的表达及意义

目的　探讨凋亡抑制基因Survivin在上皮性卵巢癌组织中的表达及意义。方法　应用半定量RT-PCR及免疫组化的方法 ,分别检测SurvivinmRNA及蛋白在 5 2例上皮性卵巢癌、 2 5例良性上皮性卵巢肿瘤和 2 0例正常卵巢组织中的表达。结果　SurvivinmRNA及蛋白在 5 2例卵巢癌组织中的阳性表达率分别为 84 6 % (4 4 5 2 )、 6 5 4 % (34 5 2 ) ;在 2 5例良性肿瘤中的阳性表达率分别为 2 4 0 % (6 2 5 )、 0 (0 2 5 ) :在 2 0例正常卵巢组织中的阳性表达率分别为 15 0 % (3 2 0 )、 0 % (0 2 0 )。三者比较均差异有极显著性 (P <0 0 0 1) ;5 2例上皮性卵巢癌中 ,浆液性囊腺癌 30例 ,粘液性囊腺癌 16例 ,其他类型癌 6例 ,各种类型上皮性卵巢癌中SurvivinmRNA及蛋白阳性表达率比较 ,差异均无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;上皮性卵巢癌中 ,临床分期Ⅰ～Ⅱ期 16例 ,Ⅲ～Ⅳ期 36例。组织学分级G1 ～G2 19例 ,G333例。SurvivinmRNA及蛋白在卵巢癌组织中的表达随着卵巢癌临床分期及组织学分级的升高而显著增加 (P <0 0 5 )。结论　Survivin基因在卵巢癌的发生发展中起一定作用。     

IL-17B和STAT3在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的:探究白介素(IL)-17B、细胞信号和转录激活因子(STAT)3蛋白在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达及临床意义。方法:免疫组化法检测IL-17B和STAT3在50例EOC、28例卵巢上皮性良性肿瘤及18例正常卵巢组织中的表达情况,探讨IL-17B和STAT3表达与EOC临床病理特征及预后的关系。结果:EOC中IL-17B和STAT3表达与FIGO分期、病理类型、组织分化程度有关(P<0.05),与年龄、淋巴结转移无关(P>0.05)。IL-17B和STAT3在EOC中表达呈正相关(r=0.364)。EOC中IL-17B和STAT3高表达与患者不良预后密切相关,IL-17B和STAT3高表达者的总生存期明显缩短(P<0.05)。结论:IL-17B和STAT3可能参与EOC的发生、发展,有望作为EOC临床预后预测指标。     

MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的:探究MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达水平及其与患者临床病理特征之间的关系。方法:免疫组化法检测46例上皮性卵巢癌、25例良性卵巢肿瘤及15例正常卵巢组织中MEX3A蛋白表达。结果:MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达明显高于良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织(P0.05),而良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织比较则无显著差异(P0.05)。MEX3A蛋白表达与上皮性卵巢癌的临床分期、淋巴结转移有关(P0.05),而与患者年龄、组织分级、组织类型及有无腹水无关(P0.05)。结论:MEX3A蛋白在上皮性卵巢癌组织中高表达,并与患者临床分期和淋巴结转移相关,在卵巢癌的发生发展中具有重要作用。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后caspase-3蛋白表达与神经元变性的关系

目的探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic ischemic brain damage，HIBD）后半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3（cysteinyl asparate-specific proteinase-3，caspase-3）蛋白表达及其与神经元变性的关系。方法将35只7日龄Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、HIBD后6、12、24、72和120h组，每组5只。HIBD组按Rice法制成模型。采用免疫组化法及Fluoro-Jade B（FJB）荧光染色分别观察caspase-3蛋白表达及神经元变性情况。结果缺氧缺血（hypoxic ischemia，HI）后12h皮质caspase-3表达（0．405±0．021）高于正常对照组（0．367±0．023）（P〈0．05），HI后24h皮质、纹状体及海马caspase-3表达达高峰（P〈0．05）；至HI后120h皮质、纹状体和海马caspase-3表达均与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。正常对照组大鼠各脑区内FJB阳性细胞罕见，HI后24h各部位脑组织FJB阳性细胞明显增多（P〈0．05），72h进一步增多（P〈0．05），120h时FJB阳性细胞数达高峰（P〈0．05）。结论新生大鼠HIBD后脑caspase-3蛋白表达与变性神经元在空间与时间分布上存在一致性，但变性神经元分布得更广泛、更持久。提示caspase-3蛋白可能在缺氧缺血所致神经元变性中起到一定作用。     

MMPs和TIMPs在卵巢上皮性肿瘤中表达的分析

目的　体内组织重建和生理过程中基质金属蛋白酶 (MMPs)和特异性抑制剂 (TIMPs)保持着动态平衡 ,不同的TIMP对不同的MMP具有不同的亲和性 ,本课题旨在研究MMP2、MMP9、TIMP1和TIMP2在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其作用。方法　收集 1 996年 5月～ 2 0 0 1年 5月在浙江大学医学院附属妇产科医院行手术切除 ,并用福尔马林固定、石蜡包埋的 1 32例病例 ,运用免疫组织化学染色法检测。结果　MMP2、MMP9、TIMP1和TIMP2均表达于细胞胞浆内 ,均随着上皮性卵巢肿瘤恶性程度的增加 ,表达增强 ;在有淋巴结转移的患者中表达明显高于无淋巴结转移者 ;且MMP9 TIMP1、MMP2 TIMP2比例在恶性卵巢上皮性肿瘤中明显增高 ;相关性分析表明MMP2和TIMP2、MMP9和TIMP1间存在相关性 (P <0 0 0 0 1 )。结论　MMP2、MMP9、TIMP1和TIMP2与卵巢上皮性肿瘤的演化、侵袭过程关系密切     

基质金属蛋白酶-2在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及意义

目的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA和蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达以及与临床病理特征和预后的关系.方法用半定量逆转录聚合酶链反应技术、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法对41例卵巢上皮性癌及26例卵巢良性肿瘤组织中MMP-2mRNA及蛋白的表达分别进行定量和定位分析;应用蛋白印迹法定性检测MMP-2酶原和活性MMP-2在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达.结果良、恶性卵巢肿瘤组织中MMP-2mRNA表达分别为0.68±0.48和0.97±1.00,MMP-2蛋白表达阳性率分别为54%和76%,两者分别比较,差异无显著性(P＞0.05).卵巢上皮性癌组织中的活性MMP-2表达阳性率为71%,显著高于卵巢良性肿瘤组织的42%(P＜0.05).手术病理分期为Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者的活性MMP-2表达阳性率为81%,显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者的9例中3例(P=0.01).病情进展患者的活性MMP-2表达阳性率为86%,明显高于无进展患者的19例中10例(P=0.02).结论卵巢上皮性肿瘤普遍存在MMP-2mRNA及蛋白表达,活性MMP-2表达与卵巢上皮性癌侵袭、转移密切相关,是卵巢上皮性癌的一项预后监测指标.     

Survivin和Caspase-3在结肠癌和结肠腺瘤组织中的表达及意义

为探讨Survivinfp Caspase-3在结肠癌和结肠腺瘤组织中的表达及意义,应用免疫组织化学染色法对42例结肠癌正常黏膜组织、38例结肠腺瘤组织进行Survivin和Caspase-3检测。结果显示,结肠癌组织中Survivin阳性率明显高于结肠腺瘤和结肠正常黏膜组织(P<0.05)结肠癌组织中Caspase-3阳性率明显低于结肠腺瘤组织(P<0.05)。Survivine-3在结肠癌组织中的表达呈负相关(r--0.8535,P=0.000)。结果表明,Survivin可能通过抑制结肠癌细胞凋亡,对肠癌的发生发展起重要作用;在结肠癌的癌变过程Survivin的作用可能是通过抑制Caspase-3介导的细胞凋亡实现的。     

Luteinizing hormone upregulates survivin and inhibits apoptosis in ovarian epithelial tumors

Objective

Luteinizing hormone (LH) plays an important role in the development of ovarian cancer, and has been shown to inhibit apoptosis in ovarian cancer cells. Similarly, survivin is a molecule that has been shown to inhibit apoptosis in other types of cancer. Therefore, the aim of this study was to determine whether survivin can be induced by LH in ovarian cancer, and whether this induction influences the sensitivity of ovarian cancers to chemotherapy.

Study design

Survivin expression was monitored using western blot assays, and flow cytometry was used to detect the effects of cisplatin on the induction of apoptosis by LH. MTT assays were also used to analyze rates of cell proliferation.

Results

Administration of LH in vitro induced survivin expression in a dose-dependent manner. Moreover, this signaling was dependent on the ERK1/2 signaling pathway. LH also blocked apoptosis induced by cisplatin.

Conclusion

These results suggest that LH influences the sensitivity of ovarian cancer cells to chemotherapy via signaling to inhibit apoptosis that also upregulates survivin.     

微小染色体维持蛋白5基因在卵巢上皮性肿瘤中的表达与意义

目的:探讨微小染色体维持蛋白5(MCM5)基因在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法分别半定量检测MCM5mRNA和MCM5蛋白在正常卵巢、卵巢上皮性肿瘤组织中的表达。结果:MCM5mRNA和蛋白在不同卵巢组织中的表达趋势是一致的,上皮性癌组织中的表达高于正常和上皮性良性肿瘤组织,差异有统计学意义(P<0.05)。MCM5mRNA和蛋白在不同年龄组、不同病理类型的肿瘤中表达差异无统计学意义(P>0.05)。MCM5mRNA和蛋白的表达水平随组织学级别的升高而升高,在低分化(G3)上皮性癌中的表达高于高分化(G1)和中分化(G2)癌,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MCM5的表达可能参与卵巢上皮性癌的发生发展过程,其表达水平与肿瘤的分化程度有关,可能做为新的卵巢肿瘤增生标志物。     

PCNA、P16蛋白在卵巢癌组织中的表达及其临床价值的探讨

目的：研究PCNA、P16蛋白在卵巢癌中的表达及临床价值。方法：应用免疫组化法检测89份卵巢癌组织PCNA、P16蛋白的表达。结果：PCNA表达在上皮性,中、低分化以及晚期卵巢癌中的表达显著高于非上皮性,高分化及早期卵巢癌（P＜0．05）,PCNA表达与残存癌灶大小、是否发生淋巴结转移无关（P＞0．05）。在晚期、残存癌灶≥2cm的卵巢癌中P16蛋白的表达明显低于早期、残存癌灶＜2cm者（P＜0．05）;P16蛋白表达与组织类型、组织分化、淋巴结有无转移无关（P＜0．05）。生存分析表明,PCNA、P16蛋白尚不能作为卵巢癌的独立预后因素。结论：肿瘤细胞的过度增殖在卵巢癌的发生、发展中起一定作用。P16蛋白表达的缺失与卵巢癌的进展有关。测定卵巢癌组织P16、PCNA的表达,对客观评价肿瘤的增殖状态,进行“个体化”治疗有指导价值。     

卵巢上皮性肿瘤中survivin bcl-X基因蛋白的表达及其相关性

目的　研究卵巢上皮性肿瘤中survivin、bcl X基因蛋白的表达及其相关性。方法　 2 0 0 0年 9月至2 0 0 2年 9月应用免疫组织化学技术 ,检测正常卵巢组织及良、恶性卵巢上皮性肿瘤中survivin、bcl X基因蛋白表达。结果　survivin及bcl X在恶性卵巢上皮性肿瘤组织中的表达阳性率分别为 6 3 3%和 4 6 9% ,显著高于良性卵巢上皮性肿瘤组织 ( 2 6 9%和 15 4 % )和正常卵巢组织 (阴性 ) (P <0 0 1)。Ⅲ～Ⅳ期恶性卵巢上皮性肿瘤组织中的survivin蛋白表达水平高于Ⅰ～Ⅱ期恶性卵巢上皮性肿瘤组织 (P <0 0 5 )。survivin阳性表达与bcl X的过表达密切相关。结论　survivin基因的异常表达而引起的凋亡抑制在恶性卵巢上皮性肿瘤的发生中起一定作用 ,其过表达或 (和 )bcl X基因蛋白表达阳性 ,提示恶性卵巢上皮性肿瘤预后不良     

端粒酶活性与卵巢上皮性肿瘤临床病理因素相关性分析

目的 探讨端粒酶在上皮性卵巢肿瘤发生发展中的作用,评价端粒酶作为卵巢癌诊断及预后指标的价值。方法 采用端粒酶PCR-ELISA法对25例卵巢上皮性肿瘤包括8例良性(5例浆液性、3例粘液性)、3例交界性(浆液性)和14例恶性(8例浆液性,4例粘液性,2例内膜样),6例正常卵巢表面上皮进行端粒酶活性定量检测。结果 2例良性、2例交界性和12例恶性卵巢上皮性肿瘤及1例正常上皮存在端粒酶活性,端粒酶活性的吸光度(A)平均值分别为0.080±0.070、0.408±0.208、1.659±0.930和0.086±0.060,统计学分析表明恶性卵巢肿瘤中端粒酶活性明显高于良性、交界性肿瘤和正常卵巢组织,端粒酶活性和卵巢上皮性肿瘤组织学类型、临床分期无关;而与肿瘤的分化程度呈负相关。结论 研究结果初步证明端粒酶活性增高在卵巢癌的无限增殖中是一重要环节,并提示端粒酶表达有可能成为卵巢癌早期诊断及判断预后的肿瘤标志物。端粒酶PCR-ELISA法具有定性又定量、特异性较高、敏感性强、简易快速、可避免同位素污染等优点。     

上皮性卵巢肿瘤细胞外基质的表达及意义

目的 :探讨上皮性卵巢肿瘤细胞外基质重要成分纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白成分表达及改变的意义。方法 :采用免疫组化S P法分别研究在良性卵巢上皮瘤、交界性卵巢上皮瘤及上皮性卵巢癌中纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白的表达。结果 :1.良性卵巢上皮瘤、交界性卵巢上皮瘤及上皮性卵巢癌中 ,这 3种成分表达呈由高向低的趋势 ,呈连续线形、间断线形、碎片状及缺失表达 (P <0 .0 5 ) ;2 .上皮性卵巢癌纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白表达与临床分期、病理分级、转移及预后有关 (P <0 .0 5 ) ,三者表达与病理类型无关 (P >0 .0 5 ) ;3.上皮性卵巢癌中纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白表达呈一致性 (P <0 .0 5 )。结论 :纤连蛋白、层粘蛋白和IV型胶原蛋白的改变与上皮性卵巢癌的病理分级、临床分期、转移和预后有关 ,三者对肿瘤细胞均有屏障作用 ,其阳性表达减低或缺失表达表明基膜受损严重 ,预后差 ,可作为判断预后的指标之一。     

巨噬细胞移动抑制因子在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子(macrophagemigrationinhibitoryfactor,MIF)在正常卵巢、卵巢上皮性良性肿瘤、卵巢上皮性癌组织中的表达及其临床意义。方法:用SP免疫组化法,测定5例正常卵巢、8例卵巢上皮性良性肿瘤、42例上皮性卵巢癌组织及21例转移的大网膜或淋巴结中MIF的表达。结果:MIF蛋白在正常卵巢滤泡上皮、卵巢良性肿瘤上皮、上皮性卵巢癌细胞的胞浆中表达,上皮性卵巢癌42例中18例(42·9%)同时有细胞核内的表达。MIF在细胞浆内的表达强度与临床分期有关,III~IV期高于I~II期,两者差异有显著性(P<0·05),而与组织学分化程度无关(P>0·05)。在转移的淋巴结或大网膜组织中MIF表达与原发部位差异有显著性(P<0·05)。结论:MIF与上皮性卵巢癌的发生,尤其是与肿瘤的浸润与转移有关。