价廉简易的疟疾检验法:特异性DNA探针

由美国、泰国和巴西科学家组成的国际研究小组发明了一种在发展中国家现场诊断疟疾的新方法。该小组认为对疟疾的一种DNA新探针大大有助于此病的流行病学研究,因为此方法可以大规模检验标本。世界上约有1/3的人受到疟原虫感染,只有找到一种测定疟原虫的便宜简单的方法,从而能鉴定感染中心,才能达到控制、预防和根除疟疾的目的,也才能评价防治计划的作用。用显微镜做血涂片检查诊断疟疾费时间,而且需要受过训练的技术人员,才能识别感染。较新的免疫测试法虽在提供感染疟疾有关信息方面取得了进展,但血中疟原虫消失后,疟疾抗体仍然存在,因此免疫试验不能区别过     

恶性疟疾11例分析

随着改革开放和经济发展 ,国内国际交往活动日益增多 ,人员流动变得极为频繁。加之受全球气候逐渐变暖的影响 ,近年来恶性疟疾的发病在我国北方屡见不鲜。本文 11例恶性疟疾均为末稍血经显微镜检查确认为恶性疟原虫感染。其中多数病历有明确的疫区生活史 ,或者与疫区来的带疟原虫患者有一起生活史 ,这就提醒广大医务工作者 ,对来自疫区的反复发热、头疼、关节痛的病人应疑为本病 ,给予鉴别诊断     

恶性疟疾11例分析

随着改革开放和经济发展,国内国际交往活动日益增多,人员流动变得极为频繁.加之受全球气候逐渐变暖的影响,近年来恶性疟疾的发病在我国北方屡见不鲜.本文11例恶性疟疾均为末稍血经显微镜检查确认为恶性疟原虫感染.其中多数病历有明确的疫区生活史,或者与疫区来的带疟原虫患者有一起生活史,这就提醒广大医务工作者,对来自疫区的反复发热、头疼、关节痛的病人应疑为本病,给予鉴别诊断.     

西安地区恶性疟疾18例分析

西安地区既往无恶性疟疾的报道。近年来作者在西安地区两所医院陆续发现恶性疟疾18例。18例末梢血均经显微镜检查确认为恶性疟原虫感染,其中2例骨髓片中也发现有恶性疟原虫。18例中17例有明确的疫区生活史,提醒医务工作者,对来自疫区的发烧、头痛、关节痛患者,应疑及本病。     

企业与市场

美国FDA批准新的疟疾快速血液检测方法6月27日,由Inverness Medical Innova- tions公司研发的新血液检测方法Binax Now获美国FDA批准。这种检测方法能在15分钟内确定疟疾感染,比老的方法更快速、更容易使用。标准的实验室检测需在显微镜下确定血液样本中的疟原虫,而Binax Now检测通过放置于浸渍片上的几滴血液就能提供结果,并可区分最危险的疟原虫和毒性较低的疟原虫。检测结果可通过标准显微镜评估而被证实。与显微镜诊断相比,Binax Now检测的准确率为95%。     

疟疾PCR检测不同保存时间的滤纸血斑的结果

疟疾的诊断迄今仍以显微镜检查疟原虫作为常规。镜检虽直观但也有明显缺陷--检出率不同，难达到流行病学的监控要求。近几年来，PCR技术以其高灵敏度、高特异性等优点广泛在生物学检测上应用，亦不断有用于疟疾诊断的报道。目前，在疟疾诊断方面，以制作滤纸血斑的方法来保存样本和提取疟原虫DNA模板应用较广且简便[1～4]。如果样本存放时间过长，是否容易引起疟原虫细胞降解而破坏其DNA链，从而影响到PCR的检出率。本次实验通过对已保存有1年、3年、5年的疟原虫阳性滤纸血斑进行检测，初步探讨PCR对不同存放年限滤纸血斑检出率的影响情况。     

快速免疫色谱法诊断恶性疟原虫试验研究

快速免疫色谱法疟疾诊断卡(澳卡)是澳大利亚ICT诊断技术公司开发的疟疾诊断方法,其检测人体未梢血中的疟疾富组氨酸旦白抗原,从而达到检查疟原虫目的。在云南省勐腊县的研究表明,以显微镜检查为对照,在87例受检发热病人中,诊断的敏感度和特别度分别为96.55％和100％,整个试验约需5分钟,与间日疟无交叉反应。适合于在各疟区使用,以达到早期诊断的目的。     

1例卵形疟原虫合并新型冠状病毒共感染病例报告

目的 本文报道卵形疟原虫合并新型冠状病毒共感染病例1例,在早期诊断、及时进行抗病毒和抗疟疾治疗的策略下成功治愈出院,为卵形疟原虫合并新型冠状病毒共感染的临床诊治提供参考。方法 收集该病例的流行病学史、临床表现、治疗情况及实验室检查等资料进行分析。结果 该患者有疟疾、新冠疫区旅行史,入院后反复发热,伴头痛、疲乏、咽喉不适及肌肉酸痛。实验室检查提示肝功能异常、血红蛋白浓度下降、淋巴细胞和血小板计数减少,血液疟原虫检查提示胶体金法阴性、镜检法可见疟原虫、PCR法为卵形疟原虫阳性,鼻咽拭子新型冠状病毒核酸检测阳性,肺部CT可见右肺下叶炎性条索灶,诊断为卵形疟疾合并新型冠状病毒肺炎,经过抗病毒、抗疟疾治疗后治愈出院。结论 卵形疟原虫合并新型冠状病毒共感染临床表现复杂,实验室检查易漏检,早期诊断、及时采取针对性治疗能取得良好效果。     

双重PCR用于高疟区疑似疟疾病人诊断效果评价

目的对高疟区＂三热＂疑似疟疾病人双重PCR检测与传统镜检法检测的比较,探讨双重PCR应用于临床诊断疟疾的前景。方法在高疟区门诊采集就诊的＂三热＂疑似疟疾病人末梢滤纸血,用chelex-100提取DNA模板进行双重PCR检测,同时与显微镜镜检厚血膜查找疟原虫进行比较。结果在334例疑似疟疾病例的血样中,双重PCR检测疟原虫敏感性为96.1%、漏检率为3.9%。镜检法检测疟原虫敏感性为86.1%、漏检率为13.9%。结论双重PCR在诊断疟疾上比传统镜检法敏感性高,适合于临床实验室对疟疾诊断。     

万孚疟疾RDT胶体金法在济宁地区的应用评价

目的 通过采集2014年1月—2016年10月济宁地区的疟原虫阳性诊断数据,对RDT胶体金法在疟疾低传播区的应用进行评估。方法 本研究包括济宁地区272名输入性发热的疑似患者数据。采用广州万孚疟疾快速诊断试剂(胶体金法),进行快速而简单的检测,然后以PCR结果为标准,并与显微镜镜检结果进行比较分析。结果 272份血样采用镜检法、RDT胶体金法和PCR检测疟疾感染,阳性率分别为13.6%、15.1%和14.3%,三种检测方法阳性率差异无统计学意义(χ²=0.89,P>0.05);以PCR为标准,镜检法漏诊率5.1%,误诊率5.1%,灵敏度94.9%,特异性100.0%,阳性预测值100.0%,阴性预测值99.1%。RDT胶体金法漏诊率0,误诊率4.9%,灵敏度97.4%,特异性98.7%,阳性预测值92.7%,阴性预测值99.6%。结论 在疟疾低发病和低传播地区,疟原虫RDT胶体金法在检测输入性疟疾感染较显微镜镜检有更高的灵敏度和阴性预测值,可作为显微镜检查的辅助工具,适于在基层大规模的推广应用。     

疟疾诊断方法的研究进展

疟疾是一种严重危害人类健康的蚊媒传染病．迄今为止,显微镜镜检（厚血膜,薄血膜）仍是疟疾诊断的金标准。但是显微镜镜检做为一种诊断方法又存在一些问题。由于疟原虫形体小,形态相似,难以染色和检出,要有经验的人员才能做到正确的诊断;同时,镜检费时费力,小适合人规模样品的检测[１］七十年代初,随着免疫学技术的发展,间接荧光抗体[１,２］和 ＥＬＩＳＡ[３］均很快在疟疾诊断中得到应用。然而,这些方法也有自身的缺点：首先难以区分是现在还是以前的疟疾感染;其次,疟疾流行区人群的循环抗体水平高,用血清学检测流行区个体…     

薄血膜及滤纸片干血滴分离疟原虫DNA方法的比较

DNA检测以特异性强、敏感性高、简便快速 ,被广泛应用于疟疾的诊断及普查。疟原虫 DNA的分离方法虽多 ,但多以静脉血分离为主 [1 ] 。有学者应用指尖取血制作滤纸片干血滴及静脉全血制作的薄血膜进行疟原虫 DNA的分离 [2 ] 。本文就两种方法对疟原虫 DNA的分离进行比较 ,探讨其应用价值。1　材料与方法1.1　血样制备1.1.1　恶性疟原虫血样品制备 :用采自非疟疾流行区、经姬姆萨染色显微镜检查确诊恶性疟原虫阴性的正常人静脉血对人工培养的恶性疟原虫 FCR3株进行倍比稀释 ,制成恶性疟原虫浓度分别为 1.5× 10 4/μl、1.5× 10 3/μl、…     

非洲赤道几内亚儿童疟疾感染实验室检测及临床诊治分析

目的评价荧光定量PCR法和显微镜镜检法在疟疾临床检测及虫种鉴定中的应用,了解不同型别儿童疟疾病例的临床特征,指导疟疾高发地区门诊对疟疾的早期识别、快速诊断和尽早治疗。方法收集在几内亚首都马拉博医院儿科就诊的150例疑似疟疾患儿的末梢血样,应用荧光定量PCR和镜检法对样品进行同步检测,对两种检测方法进行分析评价,并根据不同型别疟疾病例的临床资料,分析不同型别疟疾病例的临床特征。结果荧光定量PCR法检出阳性率为84.00%,镜检法检出率为74.67%,差异有统计学意义(P0.05);且PCR法在疟原虫密度大于(l~5)×102copy/m L时,可对感染的疟原虫虫种做准确的鉴定,鉴别出恶性疟、三日疟、卵形疟、间日疟的例数分别为93、19、12、2,与镜检法的82、17、11、2例比较,在恶性疟虫种鉴别上差异有统计学意义(P0.05),但在其他虫种鉴别中差异无明显差异(P0.05)。该地区儿童疟疾病例以恶性疟原虫感染为主,临床主要表现为发热、贫血、咳嗽、呕吐、腹泻、抽搐等,死亡10例,其中恶性疟9例。结论在疟疾感染检测和疟原虫型别鉴定中,荧光定量PCR法较传统的镜检法在灵敏度及特异性方面更具优势,对马拉博地区疟疾病例的快速诊断及早期治疗具有重大意义。     

疟疾诊疗指南

疟疾是疟原虫感染所致的地方性传染病,主要流行于热带和亚热带地区。尽管世界卫生组织（WHO）在2021年6月宣布我国通过了消除疟疾认证,但随着国际交流的日益频繁,我国面临的输入性疟疾的威胁将长期存在。为促进临床医师深入了解并合理治疗疟疾,提高疟疾诊治的水平,我们邀请国内感染病及寄生虫病领域相关专家共同编写了疟疾诊疗指南。该指南对疟疾的病原学、流行病学、发病机制、临床表现、实验室检查、诊断及鉴别诊断、治疗、护理、预防等方面进行介绍,并重点强调了应对不同临床状况时的治疗方案,以便临床医师合理应用。     

输血性疟疾

疟疾通常由感染性按蚊叮咬传播,但也可通过输血而输入带疟原虫血液感染疟疾,称为输血性疟疾。近年来,随着热带地区输血量的增加以及温带地区和疟疾流行区之间旅游业的发展,输血传播疟疾的危险性也逐渐增加。据报道,国内发生的输血性疟疾也有逐年增多的趋势。输血性疟疾常因原发病被忽视,新感染疟疾得不到及时诊断和治疗,导致受血者的原发病情加重,造成恶性循环,出现不良后果。输血性疟疾不仅发生于输用全血以后,而且输用血液成分也会发生。也可因皮下或肌肉注射时,由于被带有疟原虫的血液污染了注射器而造成感染。血液来源大多为无症状而又具有免疫力的疟原虫携带     

疟原虫镜检的一些研究(摘要)

疟防工作中正确、快速地诊断疟疾极为重要,迄今为止,确诊疟疾仍然赖于镜检病原体的方法,即常用的厚、薄血膜检查疟原虫的方法。1980年世界卫生组织亦曾提出“在疟疾的寄生虫调查方面只有厚血膜用作常规检查”。但在常规厚血膜染色过程中,溶血、染色和冲洗等步骤往往使疟原虫腐蚀破     

多重巢式聚合酶链反应在疟疾混合感染检测与分型中的应用

目的:应用能够同时检测恶性疟(P.falciparum)、间日疟(P.vivax)、卵形疟(P.ovale)、三日疟(P.malarie)及其混合感染的多重巢式PCR方法,对疑似疟疾混合感染样本进行检测,评价其在疟原虫混合感染及分型中的应用价值,旨在为疟疾流行病学调查、疟疾混合感染的确诊提供一种快速高效、特异性强、灵敏度高的实验室诊断方法,为传统的镜检法提供有效的补充。方法:根据恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫和三日疟原虫的18SSU rRNA基因序列设计5对引物(1对通用引物、4对特异性引物),以等比例混合的4种疟原虫核酸为模板,建立疟疾多重巢式PCR检测方法,并应用该法对28份疑似疟疾混合感染样本进行检测及测序验证,将其结果与镜检法比较。结果:28份疑似混合感染样本中混合感染样品数为6例,其中恶性疟和间日疟混合感染样品5例,恶性疟和卵形疟混合感染样品1例。结论:本研究建立的多重巢式PCR检测方法能够同时用于恶性疟、间日疟、卵形疟、三日疟及其混合感染样本的检测,在疟疾混合感染的确诊与分型上较镜检法有明显的优势和更高的应用价值。     

42例间日疟患者血小板值变化相关分析

目的 研究间日疟患者血小板计数的变化,探讨疟原虫与血小板减少之间的关联性.方法 选取42例间日疟患者,机械与手工联合进行血小板计数.结果 42例患者经油镜检查疟原虫,均证实为间日疟.其中33例患者有血小板计数的降低,占患者总数的78.6%,所有患者平均血小板计数65×1012/L.结论 疟原虫感染可以引起血小板减少,与血小板减少相关联.在临床上高热患者的诊断中,重视血小板减少患者的疟原虫检查,可以提高疟疾患者的确诊率,减少漏诊,对疟疾的早期诊断、早期治疗都能起到积极的作用.     

新加坡诺氏疟原虫警报

我们报告1例在新加坡这个从来一个没有疟疾的国家发现了自然感染诺氏疟原虫的病例。确认诊断使用经过验证的特异性引物的PCR（聚合酶链式反应）的方法。在工业化的国家，自由放养的灵长类动物是人感染诺式疟原虫的潜在来源，在新加坡诺式疟原虫的感染需要与发热疾病进行鉴别诊断。     

中缅边境居民疟疾感染的疟原虫抗原检测、镜检和PCR筛查

目的 了解云南省沧源县抵边村寨居民和境外周边居民疟疾感染情况，比较疟原虫抗原检测（RDT）、镜检和PCR在低疟区和消除区居民疟疾筛查效果，为预防疟疾消除后再输入提供依据。方法 2020年8月—2021年3月，在中缅边境地区云南省临沧市沧源佤族自治县班老乡、缅甸掸邦第二特区勐冒县班歪区梅不老乡、缅甸掸邦第二特区南邓特区拥摸和大岩乡3个调查点，采集调查对象指尖血，运用RDT、疟原虫显微镜检查法、荧光定量PCR与巢式PCR法检测疟原虫感染情况。结果 共采集1 040人份血样，含中国居民606人、缅甸居民434人。其中男性506人，女性534人，年龄0～<5、5～<15、15～<30、30～<45、45～<60和≥60岁分别有51、283、187、232、205和82人。经疟原虫抗原检测试剂盒法检测1 040人均为阴性，疟原虫显微镜检查法检出间日疟阳性1份，疟原虫检出率为0.10%，荧光定量PCR与巢式PCR检出间日疟阳性1份，疟原虫检出率为0.10%。其中，缅甸掸邦第二特区勐冒县班歪区梅不老乡检出间日疟1例，疟原虫检出率为0.35%，云南省临沧市沧源佤族自治县班...