胃癌细胞株蛙皮素受体的检测

目的 观察胃癌细胞株ＳＧＣ ７９０１细胞蛙皮素受体ｍＲＮＡ和受体蛋白的表达。方法 （１）利用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ观察胃癌细胞株ＳＧＣ ７９０１细胞蛙皮素受体ｍＲＮＡ的表达；（２）利用交联剂（ＤＳＳ）化学交联增强化学发光（ＥＣＬ）自显影观察胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１细胞株受体蛋白的表达。结果 （１）ＲＴ－ＰＣＲ产物经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交与预期的蛙皮素受体ｃＤＮ     

人生长激素受体DNA探针建立及mRNA检测

用多聚酶链反应方法建立了人生长激素受体（ｈＧＨＲ）ＤＮＡ探针。探针片段长度为６７０ｂＰ，两端分别为ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ酶切末端。克隆在ＰＴＺ１９Ｕ质粒上。用此探针检测成人外周静脉血和脐血淋巴细胞的ｈＧＨＲｍＲＮＡ的表达水平，表明成人ｈＧＨＲ基因转录水平显著高于新生儿。     

原位分子杂交检测胃癌雌激素受体mRNA初探

用原位分子杂交法检测１０例胃癌组织的雌激素受体信使ＲＮＡ（ＥＲｍＲＮＡ）均呈阳性，肿瘤组织和瘤旁非肿瘤组织均有阳性信号显示。提示人体多种组织均有不同程度的ＥＲｍＲＮＡ表达：ＥＲｍＲＮＡ和ＥＲ蛋白表达的不一致，可能是由于ＥＲ蛋白合成存在转录后缺陷等。     

CCK-B受体mRNA在结肠癌中的表达

目的研究胃泌素受体(CCK B受体)的mRNA在结肠癌组织和对应癌旁正常组织中的表达水平,探讨CCK B受体参与结肠癌发病的可能机制。方法采用半定量RT PCR法检测23例新鲜结肠癌及相对应的癌旁正常组织CCK B受体的表达水平。结果23例结肠癌组织CCK B受体阳性表达率为87.0%,其表达平均值为0.704±0.134,对应癌旁正常组织CCK B受体阳性表达率为60.8%,其表达平均值为0.215±0.077。CCK B受体在结肠癌组的表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。结论CCK B受体在结肠癌组织中的表达水平较正常组织明显增高,提示CCK B受体可能参与结肠癌的发病。     

肝癌生长抑素受体mRNA表达的研究

生长抑素（SST）是一种广泛存在于人体内分泌系统中环状的多肽类激素，近来SST及其类似物对肝癌诊断及治疗方面的作用正日益受到关注，其多种生物活性的发挥是通过靶细胞膜上的特异性受体介导的。本实验应用逆转录聚合酶链反应（RTPCR）检测原发性及转移性肝癌癌组织、癌旁组织、非癌肝组织、人肝癌细胞株HepG2及人肝细胞QSG-7701中生长抑素受体（SSTR）五种亚型mRNA的表达情况。     

糖皮质激素对胰岛素受体mRNA水平的调节

胰岛素对完整的组织和培养的细胞有着广泛的作用。胰岛素受体受多种激素和多种代谢因素的调节。不过,对受体的调节是否发生在基因表达水平尚不清楚。由于胰岛素受体cDNA的克隆化。有可能直接进行糖皮质激素对胰岛素受体基因表达的作     

蛙皮素与胰腺癌的相关性研究

胰腺癌是一种恶性程度很高的消化道肿瘤,预后很差,因此需要寻找新的有效的诊治方法.蛙皮素(bombesin,BBS)属于胃肠肽类激素,具有生长因子样作用~([1,2]).目前,人胰腺癌是否存在BBS以及BBS对胰腺癌是否具有促生长作用还不十分清楚.本研究通过观察BBS在人胰腺癌组织中的表达和定位,探讨其与临床病理参数间的相关性.     

和肽素、精氨酸受体mRNA检测在急性冠脉综合征诊治中的临床意义

目的探讨和肽素、精氨酸受体(AVPR)2 mRNA对急性冠脉综合征(ACS)患者的临床意义。方法采用病例对照研究,选取大连医科大学附属第一医院2013年5月至2014年12月以胸痛为主诉入院患者共154例。ACS组118例,其中不稳定型心绞痛(UAP)44例,急性心肌梗死(AMI)74例;对照组36例。研究对象均进行血脂、肝功、肾功、B型尿钠肽(BNP)、心肌酶、超声心动图、冠状动脉造影检查。分析和肽素及AVPR2mRNA与冠心病不同分型、冠脉病变程度的关系,并探讨其对AMI的诊断价值。结果 1对照组、UA组、AMI组患者和肽素水平三组间两两比较均有统计学差异(P<0.05),且均依次升高。此外,和肽素水平与AVPR2 mRNA水平呈正相关。2ACS患者Gensini评分2、3组和肽素水平及AVPR2mRNA无统计学差异;但ACS患者2、3组比1组的和肽素水平高,3组比1组的AVPR2 mRNA高,均有统计学差异;ACS患者1、2组的AVPR2 mRNA无统计学差异。3左主干病变和肽素水平最高且分别与单支、双支、三支病变组相比,均有统计学差异;三支、双支病变组比较及三支、单支病变组比较均有统计学差异;单支、双支病变组比较无统计学差异。左主干患者的AVPR2 mRNA水平最高且分别与单支、双支、三支病变组比较,均有统计学差异;而单支、双支、三支病变组两两相比较,均无统计学差异。4和肽素、AVPR2 mRNA及c Tn I水平制作ROC曲线下面积分别为0.855(95%CI为0.792,0.918)、0.779(95%CI为0704,0853)、0.964(95%CI为0.936,0.991)。Logistic回归分析和ROC曲线三者联合检测,AVPR2 mRNA水平并未纳入方程,联合和肽素、c Tn I诊断AMI的ROC曲线下面积为0.972(95%可信区间为0.938,0.996)。提示联合肽素及c Tn I检测有望提高AMI的准确性。结论 1和肽素、AVPR2 mRNA随冠心病的进展而升高,能够在一定程度上反应冠脉病变程度。2AVPR2 mRNA水平与和肽素水平呈正相关;联合c Tn I及和肽素检测有望提高AMI诊断的准确性,为AMI的早期诊断提供参考价值。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血趋化因子受体3 mRNA对类风湿关节炎的临床意义

目的 检测趋化因子受体3(CXCR3)在类风湿关节炎(RA)患者外周血单一核细胞(PBNC)中的表达,并分析其与疾病活动性的相关性.方法 研究建立实时荧光定量(RFQ)-聚合酶链反应(PCR)法测定外周血单个核细胞CXCR3 mRNA含量的方法;检测CXCR3在51例RA患者PBMC中的表达水平,并和32名健康人群进行对照.计量资料采用t检验、单因素方差分析,计数资料采用x2检验或Fisher's精确概率法.结果 RA患者在外周血的CXCR3 mRNA的表达水平明显高于健康对照组(8.8±1.5和7.3±1.9,P<0.05).在活动期与缓解期RA组的比较中发现活动期RA患者CXCR3 mRNA的表达水平也明显高于缓解期RA患者(9.4±1.0和8.0±1.6,P<0.05).而且活动期RA患者中外周血CXCR3 mRNA 表达水平与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)有密切的相关性,且存在正相关关系(r=0.824和0.765,P<0.05).RA患者中外周血CXCR3 mRNA表达水平与类风湿因子(RF)、抗角蛋白抗体(AKA)、抗核周因子(APF)抗体及抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体无显著相关性(P>0.05).结论 RFQ-PCR检测CXCR3 mRNA含量的方法具有较好的灵敏度和可重复性;RA患者CXCR3 mRNA表达含量升高,提示CXCR3可能参与了RA的发病过程.活动期RA患者CXCR3水平明显升高,并且和ESR、CRP呈正相关,提示CXCR3可作为观察病情活动性的指标和疗效、评价预后的指标.     

蛙皮素和生长抑素对人胃癌BGC-823细胞生长的影响及受体后信息传递

目的:观察蛙皮素(BBS)和生长抑素(SS)对人低分化胃癌细胞株BGC-823的生长调控作用,测定细胞内环磷酸腺苷(cAMP)含量、蛋白激酶C(PKC)活性及PKC亚型的表达,探讨受体后信息传导途径．方法:BGC-823细胞在含100 mL／L小牛血清的RPMI 1640培养液中,于37℃,50 mL／L CO2条件下培养,分别加入不同浓度的BBS或SS,应用MTT法观察细胞的增殖程度．应用放射免疫分析方法测定细胞内cAMP含量,应用[γ-32p]ATP掺入外源性底物的方法测定PKC活性,应用Western blot方法分析PKC亚型α,β1,β,及ε的表达．结果:BBS能促进BGC-823细胞的生长,且与剂量呈正相关(r=0．878,P<0．05),这种促生长作用可被其受体拮抗剂所拮抗;BBS能促进细胞内cAMP的产生(r=0．68,P<0．01)及增加PKC活性,PKCα表达明显增加,而β1,β2及ε则无明显表达;SS能显著抑制BGC-823细胞的生长,呈剂量依赖关系(r=0．831,P<0．01);SS能显著抑制BBS的促细胞生长作用,但无明显的剂量依赖关系;SS可使细胞PKC活性明显下降,呈剂量依赖关系(r=-0．74,P<0．01)．结论:经特异性受体介导,BBS能促进胃癌细胞BGC-823的生长;其受体后信息传递途径可能涉及cAMP-PKA系统及DG-PKC系统, PKCα在BBS的受体后信息传递中可能起重要作用:SS可能通过降低PKC活性抑制BGC-823细胞的生长,同时可抑制BBS的促胃癌细胞生长作用．     

甲状腺激素受体mRNA在脑发育过程中的表达变化

目的动态观察甲状腺激素受体(thyroid hormone receptor,TRs)mRNA在脑发育过程中的表达变化.方法用RT-PCR半定量法检测3月龄、5月龄人胎各脑区TRs异构体mRNA表达变化.结果 3月龄、5月龄人胎大脑、小脑、海马、丘脑、脑干及脊髓均有TRs异构体mRNA表达,其中3月龄胎脑各脑区TRs异构体mRNA表达以TRα1、TRα2为主,TRβ1次之.5月龄胎脑各脑区TRs异构体mRNA表达中以TRβ1、TRα2为主,TRα1次之.TRs异构体mRNA在大脑、小脑、海马处表达相对丰富.实验中发现的与TRα 2始终伴行的特异条带经测序证实,除在371-412位氨基酸处比TRα2少42个氨基酸,余序列二者完全相同,确认为TRα3.结论在脑发育过程中,TRs异构体mRNA呈时空性表达,参与调节CNS的分化、成熟.验证了人TRα3与TRα2编码区的差异序列.     

人类生长抑素受体mRNA在原发性肝癌中的表达

人类生长抑素受体(hSSTR)作为基因型肿瘤的标志物之一,正日益受到研究者广泛的重视.hSSTR在多种肿瘤组织中呈高密度分布,可介导生长抑素类似物(SSA)抑制肿瘤的生长.     

胃癌雌激素受体α、β与孕激素受体mRNA的表达及意义

目的观察胃癌雌激素受体（ER）α、β及孕激素受体（PR）mRNA的表达,并探讨其意义。方法采用sybrgreen荧光定量PCR法检测30例胃癌组织ERα、B及PR的mRNA表达,观察不同病理预后因素与其表达的关系。结果胃癌组织中ERa、B及PRmRNA表达水平分别为1．948±2．905、1．477±1．367、5．520±8．430,以PRmRNA为最高。低分化腺癌及分化程度低的胃癌组织ERβmRNA表达高（P均〈0．05）。ERdmRNA、PRmRNA与病理类型及分化程度无相关关系。结论ERβmRNA的表达差异与胃癌的病理类型和分化程度有关。     

雌二醇对大鼠成骨细胞凋亡受体mRNA表达的影响

目的建立成骨细胞体外培养模型，并研究雌二醇（E2）对体外培养大鼠成骨细胞主要凋亡受体mRNA的调节作用，探讨E2抑制成骨细胞凋亡的机制。方法用新生大鼠颅盖骨进行成骨细胞的原代培养并进行纯化和鉴定；应用TNF-α（200U／ml）以及TNF-α＋E2（10^-8mol／L）进行刺激；用AO-EB染色观察成骨细胞凋亡并计数和计算凋亡率；应用RT—PCR的方法测定成骨细胞的Fas、FasL、TNFR1、TNFR2 mRNA的相对表达量。结果10^-8mol／L的E2明显抑制由TNF-α诱导的成骨细胞Fas、TNFR1 mRNA的表达（P〈0．01），但是对FasL、TNFR2 mRNA的表达没有影响（P〉0．05）。结论雌激素可以通过调节成骨细胞凋亡受体的表达来改变成骨细胞对致死性细胞因子如TNF-α．和FasL等的凋亡敏感性，从而抑制其凋亡。选择性抑制成骨细胞凋亡受体的表达可能有助于增加成骨。     

肝癌患者周围血白蛋白mRNA检测

目的肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）预后差，唯有在ＨＣＣ转移前行手术切除才为其最佳的治疗选择，而用形态学方法找血中极其微量的ＨＣＣ细胞是非常困难的。为了更好确定周围血中ＨＣＣ细胞。方法采用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测了２１例ＨＣＣ患者和２２例对照者的周围血白蛋白ｍＲＮＡ。结果发现晚期ＨＣＣ患者阳性率高，且与临床分期有关，有肺或门静脉累及者的阳性率较无肝外转移者高（Ｐ＝０．００３２）；血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）＜２００μｇ／Ｌ和＞２００μｇ／Ｌ的ＨＣＣ患者阳性率之间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论该方法对ＨＣＣ早期微小转移有预示的可能，对ＨＣＣ患者预后的评估方面起一定的作用，尤其对血清ＡＦＰ阴性或低值的ＨＣＣ患者能起到补充诊断。     

尿液mRNA检测在肾脏病中的应用

研究肾活检标本目的基因表达已成为获取肾脏病病理改变信息的一种重要手段,大量研究已证实了该技术在多种肾脏疾病研究中的可行性[1].然而,实际操作中一些不能忽视的问题限制了其在常规检查中的应用.首先,肾活检属创伤性检查,具有造成严重并发症的风险;其次,利用多次肾活检对同一患者实施动态监测往往不可行;再次,并非所有罹患肾脏疾病的人适合行肾活检(例如孤立肾及出血倾向);此外还存在穿刺取材偏差造成结果错误的可能性.     

蛙皮素与胃癌和大肠癌的相关性研究

目的 观察蛙皮素在人胃癌和大肠癌中的表达、定位与肿瘤生物学行为的相关性。方法 1997年1月至2000年12月收集中国医科大学附属第一医院人胃癌和大肠癌组织，采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶方法（S—P方法），观察蛙皮素在胃癌及大肠炎组织以及正常胃肠组织中的表达。结果 131例胃癌组织中，92例蛙皮素呈阳性表达；其癌旁黏膜中有4例染色阳性。146例大肠癌中，111例有蛙皮素的阳性表达，而在癌旁黏膜未见表达。结论 蛙皮素在人胃癌和结肠癌组织中过度表达，推测可能与癌发生和细胞分化有关。     

蛙皮素与胃癌和大肠癌的相关性研究

目的观察蛙皮素在人胃癌和大肠癌中的表达、定位与肿瘤生物学行为的相关性。方法1997年1月至2000年12月收集中国医科大学附属第一医院人胃癌和大肠癌组织,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶方法(S-P方法),观察蛙皮素在胃癌及大肠炎组织以及正常胃肠组织中的表达。结果131例胃癌组织中,92例蛙皮素呈阳性表达;其癌旁黏膜中有4例染色阳性。146例大肠癌中,111例有蛙皮素的阳性表达,而在癌旁黏膜未见表达。结论蛙皮素在人胃癌和结肠癌组织中过度表达,推测可能与癌发生和细胞分化有关。