糖尿病患者低密度脂蛋白亚组分颗粒大小及氧化易感性的分析

目的研究糖尿病(DM)患者低密度脂蛋白(LDL)亚组分颗粒直径及氧化易感性的异常特征,探讨其动脉粥样硬化(AS)高发生率的机制。方法超速离心分离30例DM患者及26例对照组的血浆LDL,采用2%～16%聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳法分析LDL颗粒直径及图形,并分析其抗氧化能力。结果①DM患者LDL颗粒直径为(26.31±0.72)nm同对照组(26.41±0.95)nm之间无差异,两组间A型、B型LDL图形亦相同。②LDL颗粒直径同血浆TG水平呈负相关(r=-0.32,P<0.05)。③DM患者LDL抗氧化能力下降。结论DM患者AS的高发生率与其LDL易于氧化的特性相关联。     

冠心病患者低密度脂蛋白亚组分的分布及氧化易感性的研究

根据低密度脂蛋白（ＬＤＬ）颗粒的大小、密度不同，分成Ａ型和Ｂ型两个亚组分。以Ｂ型为主的ＬＤＬ是动脉粥样硬化（Ａｓ）发生的强危险因素［１，２］。冠心脏病（ＣＨＤ）患者ＬＤＬ氧化易感性同Ａｓ发生程度相关［３］；健康人群中Ｂ型ＬＤＬ亚组分较Ａ型易于氧化［４...     

饮食脂肪对低密度脂蛋白氧化修饰的影响

研究不同饮食脂肪对人体低密度脂蛋白（ＬＤＬ）氧化修饰的影响，结果表明：食用富含亚油酸的饮食后，ＬＤＬ氧化修饰过程较食用富含油酸的饮食加快，氧化速率分别为１６．４０±０．８５和１３．１６±０．６８ｎｍｏｌ·ｍｇ－１蛋白．ｍｉｎ－１（Ｐ＜０．０２），共轭烯键浓度分别为４１６．２４±１２．６０和３７９．２９±１１．０６ｎｍｏｌ·ｍｇ－１（Ｐ＜０．０５）；氧化率和共轭烯键浓度与ＬＤＬ亚油酸含量呈显著正相关．结果提示食用含亚油酸丰富的油脂同时，补充足量抗氧化剂对抑制ＬＤＬ氧化、防治动脉粥样硬化具有重要意义．     

氧化修饰低密度脂蛋白与颈动脉粥样硬化程度的关系

目的观察氧化修饰低密度脂蛋白(Ox-LDL)与颈动脉粥样硬化(CAS)程度的关系。方法通过复式超声确诊CAS患者78例,并根据CAS程度将患者分为轻、重两组。对照组32例。采用硫代巴比妥酸反应物法测定Ox-LDL含量。结果CAS组Ox-LDL含量为(1.46±0.46)nmol/ml。CAS轻组Ox-LDL含量为(1.30±0.37)nmol/ml。CAS重组Ox-LDL含量为(1.88±0.60)nmol/ml。对照组Ox-LDL含量为(0.39±0.25)nmol/m1。CAS组Ox-LDL含量显著高于对照组(P＜0.01)。CAS重组Ox-LDL含量显著高于CAS轻组(P＜0.01)。结论Ox-LDL水平可反映CAS的程度。     

氧化低密度脂蛋白自身免疫与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是一种与脂质代谢异常、血液凝固失调以及与遗传、环境等基础因素有关的血管慢性炎症共同造成的疾病过程。血中修饰低密度脂蛋白浓度升高是动脉粥样硬化发展的重要危险因素，破裂的斑块脂质核心非常丰富，几乎占总的斑块体积的40％左右。现已有多种证据表明体内存在氧化型低密度脂蛋白(oxidized LDL，OX-LDL)及其自身抗体，抗OX-LDL自身抗体不仅为体内确实存在OX—LDL提供了证据，     

转铁蛋白对Cu2+,Fe2+介导的LDL氧化修饰的影响研究

目的 :观察转铁蛋白 (transferrin ,Tf)对Cu2 + 、Fe2 + 介导的体外人血浆低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰的影响。方法 :采用一次性密度梯度超离心法分离正常人血浆LDL并与CuSO4 及FeSO4 在 37℃温育不同时间 ,使LDL在体外氧化修饰。抗氧化组在温育前加入不同浓度的Tf。检测各组LDL中脂质过氧化产物丙二醛 (MDA) ,维生素E(VitE)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 :①LDL与Cu2 + 或Fe2 + 温育后 ,MDA含量显著升高 (P <0 .0 0 1) ,并呈明显的时间效应。②在Cu2 + 或Fe2 + 修饰前加入不同浓度 (10 0、2 0 0、4 0 0 μg ml)的Tf能使LDL中MDA生成明显减少 ,VitE含量下降明显减缓 ,并显著提高SOD活性 ,呈现一定的浓度依赖性。当Tf浓度为 4 0 0 μg ml时 ,MDA生成抑制率分别为 71.6 5 % ,79.86 % ;SOD活性提高率分别为 14 1.5 5 % ,14 6 .6 9% ;VitE降低减缓率分别为 6 9.5 2 % ,85 .10 %。结论 :Tf对Cu2 + 或Fe2 + 介导的LDL氧化修饰具有明显的抑制作用 ,因而可能参与机体对AS的防治。其作用途径可能与阻断Cu2 + 或Fe2 + 诱导的自由基生成 ,保护内源性抗氧化物质SOD、VitE的活性有关     

维生素C对LDL氧化修饰和已受到氧化修饰LDL的作用

本文观察了维生素C(VC)对低密度脂蛋白(LDL)氧化修饰及对已受到氧化修饰LDL的作用。在Cu~(2+)与LDL温育前加入VC,能使硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)的生成及琼脂糖电泳迁移率增加,使荧光物质的强度受到抑制,防止维生素E含量减低。但当Cu~(2+)与LDL温育3h后加入VC,再继续温育24h,与不加VC相比,TBARS 含量和琼脂糖电泳迁移率无明显差异。结果说明VC对LDL氧化修饰有抑制作用,对已受到氧化修饰的LDL(O-LDL)无阻断作用。     

氧化LDL对人脐静脉内皮细胞Connexin37表达的影响

目的研究氧化低密度脂蛋白（Ox—LDL）对体外培养的人脐静脉内皮细胞缝隙连接蛋白Connexin37基因表达的影响。方法常规人脐静脉内皮细胞体外培养并传代。根据Ox—LDL的不同浓度分为对照组（不加Ox—LDL）及50、100、200mg／L干预组,干预24h后通过RT-PCR方法检测并比较各组内皮细胞Connexin37mRNA的表达。根据Ox—LDL干预的不同时间分为对照组（不加Ox—LDL）以及50mg／LOx—LDL干预6、12、24、48、72h组,检测比较各组Connexin37mRNA的表达情况;并检测比较对照组和100mg／L Ox-LDL干预组间Connexin37蛋白的表达水平。结果50、100、200mg／L的Ox—LDL干预24h后均能引起内皮细胞Connexin37mRNA表达的显著减少（P〈0.01）,以50mg／L的Ox—LDL干预效果最明显（P〈0.01）.50mg／L的Ox-LDL干预12h后Connexin37mRNA的表达开始显著下降（P〈0．01）,24h下降最明显（P〈0．01）,48h仍下降（P〈0．05）,至72h时恢复到刺激前水平。100mg／L的Ox—LDL干预24h后内皮细胞Connexin37蛋白表达水平显著降低（P〈0.01）。结论Ox-LDL可以抑制人脐静脉内皮细胞Connexin37mRNA和Connexin37蛋白的表达。     

低密度脂蛋白亚组份的分离及初步应用

目的：探讨低密度脂蛋白（ＬＤＬ）亚组份不同特性在动脉粥样硬化中的作用。方法：采用密度梯度超速离心法分离不同密度ＬＤＬ亚组份；分析冠心病（ＣＨＤ）患者和健康人群ＬＤＬ亚组份分布特征。结果：密度梯度超速离心法直接分离出血清中不同密度的ＬＤＬ亚组份，随着密度逐渐增加，电泳迁移率逐渐增大。ＣＨＤ组总ＬＤＬ１、ＬＤＬ２、ＬＤＬ３、ＬＤＬ４显著增高；ＬＤＬ１～４占总ＬＤＬ比例（％）分别为１４．１±４．１、２３．１±７．５、２８．６±９．２、３４．２±１３．７，而对照组为２１．５±１３．５、２１．８±８．７、２７．４±１０．９、２９．３±１３．６，冠心病患者ＬＤＬ分布向小而重ＬＤＬ亚组份倾移。结论：小而重ＬＤＬ亚组份是冠心病发生的危险因素。本法亦为ＬＤＬ亚组份的特性在动脉粥样硬化中的作用研究提供可靠方法     

糖尿病大鼠低密度脂蛋白糖化率与动脉壁胶原含量变化的关系

为探讨糖尿病大鼠低密度脂蛋白糖化率与动脉壁胶原含量变化的关系,将糖尿病大鼠并分为糖尿病（ＤＭ）,糖尿病氨基胍治疗组（ＡＧ）和对照组（Ｃ）。测定血糖（ＢＧ）、甘油三酯（ＴＧ）、胆固醇（ＴＣ）、低密度脂蛋白（ＬＣＬ）、糖化低密度脂蛋白（Ｇ－ＬＤＬ）及其糖化率（Ｋ）、糖化血红蛋白（ＨｈＡｌｃ）、动脉壁Ⅳ型胶原（ＣＩＶ）和Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）。ＤＭ组和ＡＧ组的ＢＧ水平高于Ｃ组（Ｐ〈０．０１）,但各组间的Ｔ     

血压正常高值对动脉内膜中膜厚度(IMT)的影响

目的:用血压正常高值男性作为观察对象,探讨血压正常高值时血压升高在亚临床动脉粥样硬化、脂蛋白的氧化和心脏重塑几方面的早期影响。方法:健康男性(年龄46±5岁)分成两组,血压正常高值组(收缩压130～140mmHg或舒张压85～89mmHg,n=32例)和正常血压组(<130/85mmHg,n=36例)。用检测低密度脂蛋白(LDL)胆固醇内共轭双稀来测量体内氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。结果:与正常血压组比较,血压正常高值组的颈动脉内膜中膜厚度(IMT)增厚(0.58±0.06)vs(0.75±0.07)mm,P<0.001,肱动脉内膜中膜厚度(IMT)增厚(0.45±0.05)vs(0.57±0.07)mm,P<0.001,ox-LDL水平增高(29±9)vs(47±17)mol/L,P<0.001,但内皮功能和左心室重量两组无差异。经相关性分析,颈动脉IMT与24h收缩压(P<0.001)及ox-LDL(P=0.002)相关。结论:血压正常高值者的IMT增厚,ox-LDL增高;血压正常高值男性的IMT增厚与ox-LDL水平升高相关。     

血凝素样氧化低密度脂蛋白受体与内皮细胞p38丝裂素活化蛋白激酶关系的研究

目的探讨血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)活化人脐静脉内皮细胞p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路中的作用。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用不同浓度的ox-LDL孵育,通过W estern印迹检测LOX-1、p38MAPK蛋白水平,逆转录聚合酶链法观察LOX-1 mRNA表达,并以LOX-1特异阻断性抗体(JTX92)预处理内皮细胞,检测p38MAPK蛋白水平。四氮唑蓝法观察ox-LDL对细胞活力的影响。结果ox-LDL引起内皮细胞形态结构的改变,而且抑制内皮细胞的生长(P<0.05);ox-LDL呈浓度依赖性地上调LOX-1蛋白和mRNA表达(均P<0.05),并呈浓度依赖性激活p38MAPK通路,不同浓度ox-LDL(25μg/m l,50μg/m l,100μg/m l)组p-p38MAPK蛋白质表达水平均明显高于对照组(48±7,79±15,113±14 vs 24±5,P<0.01);JTX92+ox-LDL(100μg/m l)组p-p38MAPK蛋白水平明显低于ox-LDL(100μg/m l)组,(58±13 vs 113±14,P<0.01)。结论ox-LDL通过LOX-1途径激活p38MAPK信号通路,LOX-1上调是ox-LDL致动脉粥样硬化的重要环节。     

高脂血症LDL亚类与血脂关系的研究

目的研究健康成人和高脂血症患者LDL各亚类组成,并进一步分析LDL亚类、血脂水平与动脉粥样硬化、冠心病之间的相关性。方法通过非变性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳—免疫印迹法分析了87例高脂血症患者及81例正常人血清LDL各亚类含量,分布以及平均直径。结果与对照组相比,高脂血症患者血清TC、TG、LDL-C、apoB100,sdLDL水平均有显著升高;HDL-C、apoAI水平及LDL平均直径均有显著降低。两组女性HDL-C均显著高于男性,而LDL-C则显著低于男性。女性高脂血症患者及对照组女性的sdLDL均显著低于同组男性。高甘油三酯血症患者TG及sdLDL水平均显著高于高胆固醇血症患者,TC、LDL-C水平及LDL平均直径均显著低于高胆固醇血症患者。结论性别差异和血脂水平对LDL亚类分布有显著影响。血清TG水平升高作为sdLDL含量升高的主要危险因素,在AS和CHD的发生发展中起主要作用。血浆sdLDL亚类的检测对AS和CHD的早期诊断有积极意义。     

氧化修饰对低密度脂蛋白结构和组成的影响

本文用Cu~(2+)引发低密度脂蛋白(LDL)的脂质过氧化反应,探讨了脂质过氧化修饰对LDL结构及组成的影响。在无EDTA的情况下,LDL(1mg/ml)与Cu2~(2+)(10umol/L)37℃温育:2hLDL原有的黄色消失,8h有不溶物质产生。硫代巴比妥酸(TBARS)在短期内有大幅度上升,80％以上呈游离状态。维生素正在2h内下降60％,6h下降88％。游离氨基减少,琼脂糖电泳迁移加快,二者呈负相关(r=-0.99)。荧光物质含量则随温育时间的延长而增加。在修饰程度较低时,apoB以降解为主,修饰程度升高时,降解的apoB又可重新聚合成为大分子。与Cu~(2+)(脂质过氧化)修饰相比,用丙二醛(MDA)(10mmol/L)直接修饰的LDL,仅游离氨基减少,电泳迁移加快。     

高脂膳食诱发家兔血清LPO升高及LDL、VLDL和HDL在活体内的氧化修饰

为探讨高脂膳食对家兔血清过氧化脂质（ＬＰＯ）升高和ＬＤＬ、ＶＬＤＬ，特别是ＨＤＬ氧化修饰的影响。正常对照组（ｎ＝８）喂以普通饲料，高脂实验组（ｎ＝８）用高胆固醇饲料（普通饲料加５％猪油，另每只兔加喂０．５ｇ胆固醇）喂养１２周。兔血清ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＨＤＬ用密度梯度超速离心法分离得到。ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＨＤＬ的氧化修饰用琼脂糖凝胶电泳、２３４ｎｍ光吸收及ＴＢＡＲＳ荧光检测进行鉴定。结果显示：高脂实验组兔血清的ＴＣ、ＴＧ和ＬＰＯ均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），而ＨＤＬ－Ｃ则显著降低（Ｐ＜０．０５）；同时，高脂实验组的ＬＤＬ、ＶＬＤＬ和ＨＤＬ的电泳迁移率增加，其２３４ｎｍ光吸收及ＬＰＯ含量均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。表明高脂膳食在诱发家兔血清ＴＣ、ＴＧ显著增高的同时，不仅可引起血浆ＬＤＬ及ＶＬＤＬ的氧化修饰，而且还可引起ＨＤＬ在活体内的氧化修饰