人脑胶质瘤细胞系CHG-5的建立及其生物学特性的分析

目的：建立一人脑胶质瘤细胞系并探讨其生物学特性。方法：取胶质瘤新鲜手术标本,经组织块法培养并克隆、建株,采用光镜、电镜、免疫组化、流式细胞术、染色体分析及异种移植瘤实验对细胞株生物学特性进行观察。结果：原位肿瘤、细胞株及移植瘤标本经电镜证实为星形细胞源性,免疫组化呈ＧＦＡＰ、Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ及ＶＥＧＦ阳性,异种移植成瘤率高。与ＳＨＧ－４４细胞比较,ＧＦＡＰ表达强,Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ 表达弱。结论：ＣＨＧ－５为一恶性胶质瘤细胞系,且其生物学特性可能与ＳＨＧ－４４细胞有所不同。该细胞高表达血管生成因子     

去甲二氢愈创木酸对恶性胶质瘤细胞裸鼠移植瘤的作用

探讨去甲二氢愈创木酸对恶性胶质瘤细胞裸鼠移植瘤的作用,方法采用光镜和电镜观察移植瘤细胞的形态变化,用流式细胞仪进行细胞周期分析;用免疫组化检测肿瘤细胞中ＧＦＡＰ、ＰＣＮＡ的蛋白表达情况。结果（１）ＮＤＧＡ可明显降低裸鼠移植瘤的成瘤率;（２）ＮＤＧＡ能抑制移植瘤细胞的生长和诱导其分化,使细胞增殖受阻于Ｇ１→Ｓ期。结论：ＮＤＧＡ在体内与体外有相同的抗胶质瘤作用。     

脑胶质细胞瘤体内侵袭性的实验研究

目的 探讨胶质瘤的体内侵袭和转移特性。方法 利用体外转染有绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）基因的大鼠Ｃ６脑胶质瘤细胞移植模型,将携有增强型绿色荧光蛋白（ＥＧＦＰ）基因的pＥＧＦＰ－N３质粒体外转染Ｃ６细胞,筛选能稳定表达ＧＦＰ的瘤细胞克隆,并做流工细胞仪和电镜检测。将阳性转染和未转染瘤细胞以立体定向法植入ＳＤ大鼠脑实质仙,建立大鼠移植瘤模型。４周后处死大鼠并作脑连续石蜡切片,相邻切片分别行苏木素－伊红（ＨＥ）及免疫组织化学染色和荧光显微镜（激发光波长为４８８mm)检测。对移植瘤细胞行原代培养,以检测荧光基因在体内的保存情况。结果 阳性转染的Ｃ６瘤细胞的ＥＧＦＰ在大鼠脑内获得稳定表达,在荧光显微镜下较易于区分肿瘤与非肿瘤区,并能发现侵袭至远处的单个瘤细胞,其敏感性及特异性明显优于ＨＥ染色或免疫组化方法。结论 ＧＦＰ基因体外转染Ｃ6胶质瘤细胞并行大鼠脑内移植,是一种较好的研究脑胶质瘤侵袭性的体内实验模型。     

成釉细胞纤维肉瘤间叶细胞的电镜和免疫组化研究

为探讨成釉细胞纤维肉瘤（ＡＦＳ）间叶细胞的本质及特征,作者爱采免疫组化和电镜技术,对３例ＡＦＳ间叶细胞进行了研究,并与６例成釉细胞纤维瘤比较。结果显示：ＡＦＳ的间叶细胞主要由成纤维细胞构成,此外尚有少许未分化间叶细胞和细胞,偶见肌纤维母细胞。成纤维细胞仅表现Ｖｉｍｅｎｔｉｎ阳性,肌纤维母细胞呈Ｖｉｍｅｎｔｉｎ,ＨＨＦ３５及α－ＳＭＡ阳性,组织细胞ＰＧ－Ｍ１和ＫＰ１标记均一,可能是炎症或钢疫反应的产     

鼻腔和副鼻窦神经组织肿瘤的临床病理与免疫组化研究

报道鼻腔及副鼻窦神经组织肿瘤２４例，包括嗅神经母细胞瘤９例，脑膜瘤４例，胶质瘤３例，化学感受器瘤１例，神经鞘瘤３例和神经纤维瘤４例，除作ＨＥ和特殊染色外，还根据鉴别诊断的需要选作了多种抗体（ＮＳＥ，Ｓ－１００，ＮＦ，Ｋｅｒａｔｉｎ，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ，ＧＦＡＰ，ＥＭＡ，ＣＥＡ和ＬＣＡ）的免疫组化染色。着重分析了上述肿瘤的病理形态免疫组化特征，就其病理诊断和组织发生进行了讨论。     

鼻腔和副鼻窦神经组织肿瘤的临床病理与免疫组化研究

报道鼻腔及副鼻窦神经组织肿瘤２４例，包括嗅神经母细胞瘤９例、脑膜瘤４例、胶质瘤３例、化学感受器瘤１例、神经鞘瘤３例和神经纤维瘤４例。除作ＨＥ和特殊染色外，还根据鉴别诊断的需要选作了多种抗体（ＮＳＥ，Ｓ－１００，ＮＦ，Ｋｅｒａｔｉｎ，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ，ＧＦＡＰ，ＥＭＡ，ＣＥＡ和ＬＣＡ）的免疫组化染色。着重分析了上述肿瘤的病理形态和免疫组化特征，就其病理诊断和组织发生进行了讨论。     

血管内皮生长因子165反义RNA治疗人脑胶质瘤的实验研究

目的 探讨应用血管内皮生长因子１６５（ＶＥＧＦ１６５）反义ＲＮＡ治疗人脑胶质瘤的可行性。方法 构建和鉴定反义ＶＥＧＦ１６５真核表达载体;将其转染入人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４,检测其转染前、后的生物学性状;比较转染前、后ＳＨＧ４４细胞的裸鼠皮下致瘤性;分别应用免疫印迹、免疫组织化学、微血管计数、电镜和流式细胞仪检测上述改变。结果 成功构建反义ＶＥＧＦ１６５真核表达载体并在ＳＨＧ４４细胞获得表达,该细胞     

应用免疫组化S—P法对鼻腔原发性恶性黑色素瘤的进行诊断和？…

目的 探讨鼻腔原发性恶性黑色素瘤的诊断和鉴别诊断。方法 应用免疫组化Ｓ－Ｐ法对１４例鼻腔原发性恶性黑色素瘤进行Ｓ１００、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ＨＭＢ４５、ＬＣＡ、ＧＦＡＰ、Ｃｙｔｏｋｅｒａｔｉｎ、ａｃｔｉｎ、ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ进行联合标记,并仔细观察ＨＥ组织切片的组织结构特点和细胞形态特点。结果 鼻腔原发恶性黑色素瘤的阳性结果,Ｓ１００（１４／１４）、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ（１４／１４）、ＨＭＢ４５（１２／     

人肝癌裸小鼠原位移植模型的建立与鉴定

人肝癌裸小鼠原位移植模型的制备，是将肿瘤切除标本先接种到裸小鼠（ＢＡＬＢ／ＣＡ）皮下，待移植瘤稳定传代后，再植入同种裸小鼠肝内。皮下和原位移植瘤经光镜、电镜观察均保留人肝癌组织形态学特点。免疫组化染色显示人ＡＦＰ及ＨＢｓＡｇ阳性，细胞图像分析ＤＮＡ含量呈异倍体。但是肝癌最具特征性的生物学行为，如腹腔浸润转移、腹水等表现仅见于原位移植瘤模型。本模型的建立方法实用可靠。同时表明原位移植瘤模型在肝癌研究中更为理想。     

人肝癌细胞系HCC—9204的建立及其特性研究

作者用组织块培养法，对１２例肝细胞肝癌手术标本进行培养，并对能存活的细胞进行形态学观察，ＬＤＨ同工酶谱和ＡＦＰ检查，核型分析，对数求解和放射自显影测定细胞增殖周期，异种移植及生物学特性研究。结论：ＨＣＣ－９２０４是一株人体肝癌细胞系，可用于肝癌防治研究。     

pEGFP-HPV16E6/E7表达载体的构建及转染角朊细胞的瞬时表达

目的：构建ｐＥＧＦＰ－ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７表达载体,观察其在角朊细胞中的瞬时。方法：基因重组技术,基因转染技术。结论 ｐＥＧＦＰ－ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７表达载体便于观察,转染细胞中ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７－ＧＦＰ融合蛋白的表达民政部及蛋白定位,适用于对ＨＰＶ１６Ｅ６／Ｅ７分子生物学特性及致瘤机理的研究。     

人肺鳞癌细胞系CHLH-1建立

目的:建立人肺鳞癌细胞系,探讨其生物学特性.方法:取人肺鳞癌新鲜手术标本,经组织块体外培养并克隆建系,命名为CHLH-1.采用光镜、电镜、染色体核型分析及异种移植瘤实验对细胞系生物学特性进行观察.结果:原位肿瘤、细胞系及移植瘤标本经光镜、电镜证实该细胞系具有鳞状上皮性恶性细胞特征,并观察了其体外生长曲线、倍增时间和分裂指数;染色体核型分析众数为60～68,为亚三倍体;裸鼠皮下异种移植形成移植瘤.结论:根据细胞系特征显示该细胞系是一新建的肺鳞癌细胞系.     

成釉细胞纤维肉瘤间叶细胞的电镜和免疫组化研究

为探讨成釉细胞纤维肉瘤（ Ａ Ｆ Ｓ）间叶细胞的本质及特征, 作者采用免疫组化和电镜技术,对３例 Ａ Ｆ Ｓ间叶细胞进行了研究,并与６例成釉细胞纤维瘤进行比较。结果显示： Ａ Ｆ Ｓ的间叶细胞主要由成纤维细胞构成,此外尚有少许未分化间叶细胞和组织细胞, 偶见肌纤维母细胞。成纤维细胞仅表现 Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ 阳性。肌纤维母细胞呈 Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ, Ｈ Ｈ Ｆ３５及 α Ｓ Ｍ Ａ 阳性。组织细胞 Ｐ Ｇ Ｍ１ 和ｋｐ１标记均阳性, 可能是炎症或免疫反应的产物。与成釉细胞纤维瘤比较, Ａ Ｆ Ｓ间叶细胞具备较高的 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 阳性标记率, 提示 Ａ Ｆ Ｓ的增生活性较高。     

腺癌样瘤组织起源的免疫组化研究

目的 探讨腺瘤样瘤的组织起源。方法 应用免疫组化ＳＰ法检测２３例附睾泉瘤样瘤中Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和上皮膜抗原（ＥＭＡ）的表达情况。结果 本组瘤细胞均表达Ｖｉｍｅｎｔｉｎ，ＥＭＡ除１例阴性表达外、余均阳性表达，说明该肿瘤具有向上皮和间叶双向分化的能力。结论 支持腺瘤样瘤可能起源于胚胎残存的Ｍｕｅｌｌｅｒｉａｎ间叶成分的假说。     

腺瘤样瘤组织起源的免疫组化研究

目的探讨腺瘤样瘤的组织起源。方法应用免疫组化ＳＰ法检测２３例附睾腺瘤样瘤中Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和上皮膜抗原（ＥＭＡ）的表达情况。结果本组瘤细胞均表达Ｖｉｍｅｎｔｉｎ，ＥＭＡ除１例阴性表达外、余均阳性表达，说明该肿瘤具有向上皮和间叶双向分化的能力。结论支持腺瘤样瘤可能起源于胚胎残存的Ｍüｌｅｒｉａｎ间叶成分的假说。     

星形胶质瘤中的Laminin阳性细胞

本研究以１５例星形胶质细胞瘤，２例脑膜瘤的瘤组织为材料，经４％多聚甲醛常规固定，冰切４０μｍ，每１例相邻切片分别用ＬＮ和ＧＦＡＰ抗体孵育，用免疫组化ＡＢＣ法观察基膜素（ＬＮ）和胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）在星形胶质细胞瘤中的表达及分布。结果发现在各级星形胶质瘤中均见有ＬＮ和ＧＦＡＰ阳性细胞；同１例ＬＮ和ＧＦＡＰ生细胞的形态，数量，分布及染色强度基本相似；其染色类型有两种：一种为胞体及突起均着色，呈     

人大肠癌多药耐药细胞LoVo/5-FU的建立及其生物学特性的初步研究

目的建立人大肠癌ＬｏＶｏ细胞多药耐药细胞株ＬｏＶｏ／５－ＦＵ,并探讨其生物学特性及耐药机制。方法人大肠癌细 胞系 ＬｏＶｏ在体外经 ２．５μｇ／ｍｌ５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）作用,成功诱导 ＬｏＶｏ／５－ＦＵ耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它 们对５－ＦＵ、丝裂酶素（ＭＭＣ）、阿霉素（ＡＤＭ）、顺铂（ＤＤＰ）、氨甲喋呤（ＭＴＸ）和阿糖胞苷（ＡｒａＣ）等６种药物的敏感性。 用噻唑蓝（ＭＴＴ）法、光镜及扫描电镜观察两种细胞形态及结构并绘制出细胞体外生长曲线。免疫组化ＬＳＡＢ法检测细 胞中Ｐ２６－Ｂｃｌ－２的表达。应用原位ＤＮＡ末端转移酶标记法检测５－ＦＵ在两种细胞中诱导的细胞凋亡。结果ＬｏＶｏ／５－ＦＵ 细胞株对５－ＦＵ、ＭＭＣ和ＡＤＭ均有耐药性,且对５－ＦＵ的耐药程度较亲本细胞提高。与亲本细胞相比,耐药细胞株生长 慢,倍增期延长,汇合密度低,异型性明显。免疫组化ＬＳＡＢ法提示,ＬｏＶｏ／５－ＦＵ细胞的凋亡与Ｐ２６－Ｂｃｌ－２过度表达有 关。ＬｏＶｏ细胞原位ＤＮＡ末端转移酶标记阳性率高于ＬｏＶｏ／５－ＦＵ。结论ＬｏＶｏ／５－ＦＵ多药耐药细胞株耐药性稳定,在相 同条件下与敏感细胞株ＬｏＶｏ相比,细胞凋亡受到抑制,提示ＬｏＶｏ／     

丙型肝炎患者外周血单个核细胞HCV和Fas抗原检测

目的：探讨丙型肝炎（丙型）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）内丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＶＡｇ）及Ｆａｓ抗原（ＦａｓＡｇ）表达状况及意义。方法：采用ＨＣＶ核心区及ＮＳ３区单克隆抗体,对２８例慢性丙肝患者ＰＢＭＣｓ进行免疫组化检测,并同步检测ＦａｓＡｇ。结果：ＨＣＶＡｇ及ＦａｓＡｇ阳性率分别为８５．７％（２４／２８）和８２．２（２３／２８）,经相关分析显示。两者表达呈显著正相关（ｒ＝０．５４６,Ｐ〈０．     

体外检测近交系小鼠HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞方法的建立

通过磷酸钙法用含ＨＢＶＳ基因的质粒ｐＲｃ／ＣＭＶＳ与含筛选标记基因－ｎｅｏ基因的质粒ｐＳＶ２－ｎｅｏ对ＢＡＬＢ／Ｃ近交系小鼠肥大细胞瘤细胞株Ｐ８１５细胞进行了质粒共转染，并经Ｇ４１８筛选得到了Ｇ４１８抗性细胞，即Ｐ８１５－Ｓ细胞，斑点杂交和免疫组化实验分别证实Ｐ８１５－Ｓ细胞内有ＨＢＶＳ基因的存在；Ｐ８１５－Ｓ细胞浆内和膜上有ＨＢｓＡｇ的表达。表明了Ｐ８１５－Ｓ细胞要作为体外检测ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠Ｈ     

人肝癌细胞系HCC－9204的建立及其特性研究

目的和方法：作者用组织块培养法，对１２例肝细胞肝癌手术标本进行培养，并对能存活的细胞进行形态学观察，ＬＤＨ同工酶谱和ＡＦＰ检查，核型分析，对数求解和放射自显影测定细胞增殖周期，异种移植及生物学特性研究，结果：１例获得长期体外生长的能力，将其命名为ＨＣＣ－９２０４，无论形态学观察，还是ＬＤＨ同工酶谱的变化，均符合肝癌细胞的一般特征，并具有体外分泌ＡＦＰ的能力，染色体众数为７８～８０条各群染色体均增加，而以Ｃ，Ｅ群增加最为明显，并恒定出现Ｍ＿２ｄｅｒ（４）ｔ（４；１９）和Ｍ＿８ｄｅｌ（１３）两种标记染色体，增殖周期约为２０ｈ，异种移植成瘤率１００％．结论：ＨＣＣ－９２０４是一株人体肝癌细胞系，可用于肝癌防治研究．