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1.
目的:观察A549细胞转导TK基因在体外和体内的表达。方法:将已构建的 转录病毒表达载体PLXSN-TK用电转化法转化A549细胞,原位杂交检测TKmRNA在A549-TK和由它接种裸鼠形成肿瘤组织中的表达。斑点杂交检测外源基因在细胞中整合,并体外观察A549-TK对GCV的敏感性。结果:原发杂交表明A549-TK细胞及其形成肿瘤组织TKmRNA表达阳性,对照细胞无表达,斑占杂交证明A549-TK 相似文献
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HSV1—TK/GCV系统对人肺腺癌细胞S549生物学特性的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 观察转TK基因肺癌细胞对丙氧鸟苷(GCV)的敏感性及TK/GCV系统杀灭肿瘤机制。方法 观察转TK基因,转空载体A549细胞(下分别简称A549-TK、A549-pLXSN)和A549细胞形态学改变、生长增殖特性。GCV对3种细胞生长抑制(MTT法)。电镜、流式细胞仪观察A549-TK、A549细胞经50μmol/L GCV作用3d后细胞凋亡。结果 转基因细胞变为不规则,呈多角型,透亮度下降 相似文献
3.
ACV治疗转TK基因人肺腺癌细胞A549裸鼠皮下成瘤的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 观察活体内转TK基因肺腺癌细胞对ACV(无环鸟苷)的敏感性。方法 转TK基因肺腺癌细胞A549-TK、亲代细胞A549分别接种于裸鼠腹部皮下左右侧成瘤后,给予腹腔注射ACV治疗2周,测量治疗前后肿瘤大小,并做病理观察。结果 A549-TK细胞接种的肿瘤治疗前后体积增大不明显(P〉0.05);A549细胞接种的肿瘤治疗后体积明显大于治疗前,光镜发现A549-TK细胞接种的肿瘤有局部坏死,胞核裂 相似文献
4.
HSV1-TK基因转导人肺腺癌细胞A549体内外表达的研究 总被引:2,自引:2,他引:0
目的:观察TK基因转导A549细胞后在体外和体内的表达.方法:将已构建的逆转录病毒表达载体PLXSN-TK用电穿孔法转化A549细胞,原位杂交检测TKmRNA在A549-TK细胞和由它接种裸鼠形成肿瘤组织中的表达.斑点杂交检测外源基因在细胞中整合.并体外观察A549-TK细胞对GCV的敏感性.结果:原位杂交表明A549-TK细胞及由其所形成的肿瘤组织中TKmRNA表达阳性,对照细胞无表达,斑点杂交证明A549-TK细胞中有TK基因整合.A549-TK细胞对GCV的敏感性是亲代细胞的46倍.结论:TK基因在A549-TK细胞中表达阳性,转基因细胞对GCV敏感. 相似文献
5.
内皮素—1及其基因在早期STZ糖尿病大鼠肾组织中的表达及其意义 总被引:2,自引:0,他引:2
为探讨内皮素-1(ET-1)及其基因在早期STZ糖尿病大鼠肾脏组织的表达及其人意义,作者采用免疫组化ABC法和原位杂交技术检测了24只早期STZ糖尿病大鼠肾组织中ET-1及ET-1mRNA的定位及半定量表达。实验分为4组,每组6只。结果:ET-1和ET-1mRNA的分布一致,主要分布于肾小球内皮细胞、系膜细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞及肾小以细胞之中。随质中ET-1和ET-1mRNA的表达高于波细 相似文献
6.
增生性瘢痕增生过程中转化生长因子β表达的动态研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过对34例不同时期增生性瘢痕组织标本进行了TGFβ-mRNA斑点杂交和原位杂交检测,结果发现:随着增生瘢痕的发生,发展成熟,TGFβ-mRNA的总表达量明显呈由强至弱的变化,在1至6个月瘢痕组织内表达丰富,9个月时明显减弱,12个月以后的瘢痕组织及正常皮肤对照标本中含有少TGFβ-mRNA表达的定位检测显示,除真皮层组织细胞有部分表达外,许多瘢痕表皮基底细胞内有较强表达,由此可见,(1)TGFβ 相似文献
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低密度脂蛋白对肾小珠系膜细胞,TGF—β和FN mRNA表达的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:观察低密度脂蛋白(LDL)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(MSC)生长及转化生长因子β(TGF-β)和纤维连接蛋白(FN)基因表达的影响。方法:体外培养的MSC培养液中加入LDL共同孵育,采用^3H-TdR渗入法检测MSC增殖情况,应用Northern blot检测TGF-β mRNA、FN mRNA的表达,应用斑点杂交法检测抗TGF-抗体对FN mRNA表达的影响。结果(1)LDL刺激MS 相似文献
8.
目的 构建含TK基因逆转录病毒载体并检测其在转染细胞中的表达,为肺癌基因治疗积累实验资料。方法从 PHSV106质粒中切下约2.4kb TK基因片段,插入逆转录病毒载体PLXSN多克隆位点,酶切筛选正、反向连接质粒。正 向连接子电穿孔法转化肺癌细胞A549,用PCR、细胞原位杂交法分别检测TK基因整合和表达。结果 经酶切鉴定得到 正向连接子,电穿孔法转导A549细胞,经G418筛选出了转基因细胞,TK基因已整合在转染细胞中并阳性表达。结论 成功构建了含TK基因逆转录病毒载体,转导该载体的肺癌细胞可表达TK基因。 相似文献
9.
转移性和非转移性乳腺癌组织中KAI1基因的表达 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:探讨肿瘤转移抑制基因KAI1与乳腺癌转移的相关性。方法:运用原位杂交法观察KAI1 mRNA在转移性和非转移性乳腺癌组织中的表达。结果:在无淋巴结转移的12例乳腺癌病例中KAI1 mRNA阳性表达为9例,有淋巴结转移的8例中阳性表达1例。前者阳性率显著高于后者(P〈0.05)。结论:KAI1基因的低表达或不表达可能是某些高转移潜能乳腺癌的特征。 相似文献
10.
应用分子斑点杂交、原位杂交技术,观察了大鼠烧伤早期肾脏各时相点的内皮素-1(ET-1)mRNA的表达和定位变化。结果表明:烧伤早期肾脏ET-1mRNA含量明显上升,分布有所变化,且为肾脏自身分泌释放(自分泌/旁分泌)。文中还简要讨论了上述变化的原因 相似文献
11.
增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及TGF-β_1 mRNA的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨增生性瘢痕(H)和瘢痕疙瘩(K)组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及TGF-β1基因表达改变的相互关系及临床意义。方法:总RNA抽提试剂盒抽提总RNA,斑点杂交检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原及TGF-β1mRNA稳态水平的改变。结果:H和K组织中TGF-β1mRNA(1.197±0.237,1.204±0.243)表达均高于正常瘢痕和正常皮肤(0.327±0.081,0.331±0.078),P<0.01;K选择性地Ⅰ型前胶原mRNA表达增强,而H组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA表达均增强,导致KⅠ、Ⅲ前胶原mRNA比值明显高于H(8.164±0.300,1.666±0.201,P<0.01)。结论:K和H组织中胶原蛋白基因表达类型及强度不同,提示在K和H发生发展中具有不同的分子机理:TGF-β1在增生性瘢痕疙瘩的发病机理中具有不同的分子机理;TGF-β1在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机理中具有一定作用。 相似文献
12.
四君子汤体外对ConA诱导的小鼠脾细胞表达IL—3mRNA的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
用斑点杂交法分析了四君子汤体外对ConA诱导的小鼠脾细胞表达IL-3mRNA的影响。结果四君子汤使鼠脾细胞表达IL-3mRNAD 20h左右达高峰,有效剂量范围较大(25mg/ml ̄400mg/ml),尤以100mg/ml浓度效果为佳,提示四君子汤促进造血的作用与其提高T细胞表达IL-3mRNA有关。 相似文献
13.
感染日本血吸虫小鼠CD4^+,CD8^+T细胞凋亡相关基因转录水平 总被引:1,自引:0,他引:1
探讨日本血吸虫感染过程中,宿主CD4^+和CD8^+细胞凋亡的相关基因TG-β在转录水平上的变化。方法:用地高辛标记的探针作原位杂交,观察促凋亡基因TGF-β在CD4^+和CD8^+细胞的TGF-βmRNA的表达随感染时间的延长而升高,感染后10周起CD4^+T细胞TGF-βmRNA的表达明显高于CD8^+细胞,差异有显著性意义。结论在日本血吸虫感染过程中,CD4^+细胞凋亡比率超过CD8^+细胞 相似文献
14.
严重体表烧伤早期大鼠肾脏内皮素—1的基因表达 总被引:3,自引:2,他引:1
应用分子斑点杂交,原位杂交技术,观察了大鼠烧伤早期肾脏各时相点的内皮素-mRNA的表达和定位变化。结果表明:烧伤早期肾脏ET-mRNT含量明显上升,分布有所变化,且为肾脏自身分泌释放。文中还简要讨论了上述变化的原因。 相似文献
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目的:探讨食管癌组织中Ⅰ行溶酶原激活物抑制剂(PAⅠ-1)的表达特征。方法:采用定量的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测基因的表达。结果:食管癌组织中PAⅠ-1的mRNA的表达水平显著高于正常粘膜组织(P〈0.01),组织原位杂交显示PAⅠ-1的mRNA主要分布于肿瘤细胞的胞浆中。结论:RAⅠ-1的mRNA在食管癌中的表达上调,RT-PCR的定量分析可用于肿瘤诊断的辅助方法。 相似文献
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目的:观察急性胆管炎时大鼠肝组织ICAM-1与循环PMN表面CD11b,CD18的表达变化。方法:应用原位分子杂交和斑点杂交技术胆道感染时ICAM-1 mRNA在肝组织的定位及转录表达强度;用流式细胞仪测定PMN表达CD11b及CD18的阳性率。结果:IAM-1mRNA原位杂交显示胆道感染3h后肝窦内皮细胞,枯否细胞和肝小叶中央静脉内皮细胞阳性反应增强,12h阳性反应最强。 相似文献
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为了明确类胰岛素生长因子Ⅱ(IGFⅡ)基因mRNA在肾母细胞瘤中的表达及分布,采用原位杂交组化方法检测42例肾母细胞瘤细胞和10例正常肾组织IGFⅡ基因mRNA。结果:28例肾母细胞瘤组织IGFⅡ基因mRNA高表达,10例正常肾组织全部低表达,2组间差别显著(P<001);母细胞优势型肾母细胞瘤IGFⅡ基因mRNA表达水平显著高于上皮优势型和间质优势型(P<001);在母细胞优势型和混合型肾母细胞瘤中,有间变肿瘤IGFⅡ基因mRNA水平显著高于无间变肿瘤(P<005)。提示:IGFⅡ基因可能在肾母细胞瘤的增殖和分化中起重要作用。 相似文献
19.
探索大鼠严重烧伤肾组织内皮素-1(ET-1)动态变化规律。方法用凝固汽油烧伤Wistar大鼠背部制成30%TBSAⅢ度烧伤模型,观察正常对照、烧伤后1、3、6、12、24小时共6组动物的肾静脉血浆、肾皮质、外髓、内髓ET-1浓度变化,肾组织ET-1光镜和电镜免疫组织化学变化,肾组织ET-1mRNA斑点杂交和原位杂交变化。结果烧伤后1小时肾静脉及肾组织各层ET-1较对照组明显上升(P<0.01),6小时达到高峰,24小时仍明显高于正常。免疫组织化学显示ET-1增强部位主要在血管内皮细胞及平滑肌细胞、系膜细胞、肾小管上皮细胞,且内皮细胞内ET-1分泌颗粒聚积在细胞基底面,而小管上皮细胞基底面、管腔面均有ET-1分泌颗粒。斑点杂交及原位杂交均显示ET-1mRNA烧伤后1小时明显升高,3小时达高峰,24小时仍高于正常,主要分布与免疫组织化学结果一致。结论严重烧伤早期肾脏ET-1的分泌和基因表达明显增强。 相似文献