阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎血清学应答的预测因素分析

目的探讨基线血清TNFα、ALT、HBVDNA载量及24周HBV血清学标志物等因素对阿德福韦酯（ADV）治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎（CHB）48周时患者血清学应答的预测价值。方法203例HBeAg阳性CHB患者口服ADV治疗48周,10mg/d。采用ELISA测定HBV血清学标志物和基线血清TNFα水平,荧光定量PCR检测HBVDNA,Logistic回归分析影响HBeAg阳性患者血清学应答的因素。结果203例患者治疗24周时HBV DNA转阴率为31．5％（64／203）,ALT复常率为59．1％（120／203）,HBeAg转阴率为15．8％（32／203）,HBeAg转换率为8．9％（18／203）,应答率为13．3％（27／203）;治疗48周时HBV DNA转阴率为58．6％（119／203）,ALT复常率为78．3％（159／203）,HBeAg转阴率29．6％为（60／203）,HBeAg转换率为16．7％（34／203）,应答率为25．6％（52／203）。Logistic回归分析发现,48周HBeAg转阴的患者较未转阴者的24周HBV DNA转阴率、HBeAg转阴率及转换率、基线TNFα水平高（P值分别为0．017、0．001、0．029和0．040）;48周HBeAg转换的患者较未转换者的24周HBeAg转换率高,而基线HBVDNA低（P值分别为0．000和0．004）。结论24周HBVDNA转阴率、HBeAg转阴率和转换率,及基线TNFα水平可以预测48周HBeAg转阴率,而24周HBeAg转换率和基线HBV DNA载量可以预测48周HBeAg转换率。     

慢性乙型肝炎T淋巴细胞HLA-DR抗原表达与HBV DNA和HBeAg含量关系的初步分析

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者HBV DNA、HBeAg含量不同时外周血T淋巴细胞人白细胞抗原DR（HLA-DR）的表达情况.方法 收集2008年9月-2009年10月杭州市第六人民医院134例CHB患者,另外选取36名健康体检者作为对照.用流式细胞仪检测所有研究对象外周血CD3＋HLA-DR＋、CD4＋HLA-DR＋和CD8＋HLA-DR＋T淋巴细胞HLA-DR抗原的表达;实时荧光定量PCR法检测血清HBV DNA含量,化学发光法定量检测血清HBeAg含量.所有患者根据血清HBV DNA载量分为HBV DNA阴性组（≤103拷贝/mL）、低载量组（＞103～105拷贝/mL）、中载量组（＞105～107拷贝/mL）和高载量组（＞107～109拷贝/mL）;根据血清HBeAg含量分为HBeAg阴性组（≤1 PEIU/mL）、低含量组（＞1～100 PEIU/mL）、中含量组（＞100～1 000 PEIU/mL）和高含量组（＞1 000～10 000 PEIU/mL）.组间比较采用t检验和单因素方差分析.结果随着HBV DNA、HBeAg含量的升高,CD3＋HLA-DR＋、CD4＋HLA-DR＋和CD8＋HLA-DR＋细胞百分比降低,其中CD8＋HLA-DR＋细胞百分比降低尤为明显.与HBV DNA阴性组比较,高载量组CD3＋HLA-DR＋、CD4＋HLA-DR＋和CD8＋HLA-DR＋细胞百分比均明显减少,差异具有统计学意义（t=3.686、4.592和3.216,P值均＜0.01）;中载量组CD4＋HLA-DR＋和CD8＋HLA-DR＋细胞百分比均明显减少,差异具有统计学意义（t=3.761和2.862,P值均＜0.01）;低载量组CD8＋HLA-DR＋细胞百分比明显减少,差异有统计学意义（t=2.215,P值＜0.05）.与HBeAg阴性组比,HBeAg高含量组、中含量组CD3＋HLA-DR＋、CD4＋HLA-DR＋和CD8＋HLA-DR＋细胞百分比均明显减少,差异具有统计学意义（t高含量=3.144、2.222和4.035;t中含量=3.311、2.362和3.374,P值均＜0.05）;HBeAg低含量组CD8＋HLA-DR＋细胞百分比明显减少,差异具有统计学意义（t=2.029,P值＜0.05）.结论 联合检测患者血清HBV DNA、HBeAg含量以及T淋巴细胞HLA-DR抗原表达不仅有助于评价CHB患者的免疫状况,对疾病进展和临床疗效评价也具有一定的指导意义.     

血清HBsAg、HBcrAg和HBV DNA预测慢性乙型肝炎肝脏病理状态的评价

目的评价血清乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒核心相关抗原（HBcrAg）和乙型肝炎病毒DNA（HBV DNA）预测慢性乙型肝炎（CHB）患者肝脏不同病理学分级和分期的有效性。 方法共选取CHB患者211例,其中HBeAg阳性和阴性分别为125例和86例。血清HBsAg、HBeAg和HBcrAg分别采用化学发光微粒子免疫法和化学发光酶免疫法检测,血清HBV DNA采用实时荧光定量PCR检测。 结果HBeAg阳性患者,血清HBsAg、HBcrAg和HBV DNA与肝脏病理学分级和分期均呈显著负相关（P均< 0.05）;HBeAg阴性患者,血清HBcrAg和HBV DNA与肝脏病理学分级和分期均呈显著正相关（P均< 0.01）。Bayes逐步判别分析显示,HBeAg阳性患者,仅血清HBsAg符合判别肝脏不同病理学分级和分期的方程纳入自变量的标准（F > 3.84）,Fisher判别函数预测肝脏病理学分级G1、G3和分期S1、S4的正确率分别为62.7%、58.8%和63.8%、69.6%;HBeAg阴性患者,血清HBV DNA和HBcrAg分别符合判别肝脏不同病理学分级和分期的方程纳入自变量的标准（F > 3.84）,Fisher判别函数预测肝脏病理学分级G1、G3和分期S1、S4的正确率分别为79.3%、66.7%和71.7%、75.0%。 结论血清HBsAg对HBeAg阳性患者以及血清HBV DNA和HBcrAg分别对HBeAg阴性患者的肝脏病理学分级G1、G3和分期S1、S4有显著的预测意义。     

丙氨酸氨基转移酶持续正常的乙型肝炎病毒感染者肝脏病理与临床特征

目的研究丙氨酸氨基转移酶（ALT）持续正常的乙型肝炎病毒（HBV）感染者的肝脏病理与临床特征的关系。方法比较和分析87例行肝脏穿刺组织检查的ALT持续正常的HBV感染者的年龄、性别、血清HBVDNA水平、HBeAg、肝脏炎性反应分级及纤维化程度。并对不同血清ALT水平的肝脏炎性反应分级及纤维化程度进行比较。结果炎性病变在性别构成和年龄方面比较差异无统计学意义,肝脏炎性反应分级与HBeAg（＋）及血清HBVDNA水平无关（P〉0．05）,但炎性反应分级G0级患者血清ALT水平（12．8±3．7）U／L与G1级和G2级患者血清ALT水平（26．7±4．3）U／L和（32．7±6．2）U／L比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。肝组织纤维化分期S2期患者年龄与S0期和S1期患者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。肝组织纤维化分期与血清HBVDNA水平无关,但纤维化程度高者以HBeAg（-）者为多,差异有统计学意义（P〈0．05）,且血清ALT在正常范围内较高水平患者的肝组织纤维化程度明显高于低水平患者（P〈0．01）。结论多数ALT持续正常的HBV感染者肝脏组织学有轻度炎性反应,同时不伴或伴有轻度纤维化。血清ALT持续处于正常范围内较高水平患者可能纤维化程度较重,对可检测到病毒载量的持续ALT正常的慢性HBV感染者建议行肝脏病理学检查,必要时仍需抗病毒及抗肝纤维化治疗。     

慢性乙型肝炎患者肝细胞HBV ccc DNA与血清HBV DNA及肝纤维化程度的相关性

目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者肝细胞HBV ccc DNA含量与血清HBV DNA、肝组织纤维化程度的相关性及在抗病毒治疗中的临床意义。方法对48例未接受抗病毒治疗CHB患者（A组）和6例经聚乙二醇化干扰素α-2a规律抗病毒治疗48周CHB患者（B组）进行肝组织活检以检测肝纤维化分期,并应用real time-PCR检测肝细胞HBV ccc DNA含量。分析A组患者肝细胞HBV ccc DNA与肝纤维化程度以及两组患者肝细胞HBV ccc DNA与血清HBV DNA相关性,分析B组患者HBV ccc DNA变化。结果肝细胞cccDNA及血清DNA水平均与肝组织纤维化程度呈负相关,但HBV ccc DNA相关性更强（r=-0.465,P=0.008）。肝细胞HBV ccc DNA与血清HBV DNA不存在相关性（r =0.057, P =0.418）。B组患者肝细胞HBV ccc DNA较对照组（自A组中选取性别、年龄及HBV DNA无差异患者共12例）显著下降,其中3例患者血清HBV DNA载量低于检测下限,但肝细胞仍可检出HBV ccc DNA。结论肝细胞HBV ccc DNA与肝纤维程度呈负相关,而血清HBV DNA水平不能反映肝内病毒复制的程度。CHB患者抗病毒治疗需要长期进行才可能完全清除肝细胞内HBV ccc DNA。     

慢性乙型肝炎患者肝组织 HBV cccDNA含量与血清 HBV 标志物和病毒载量的相关性

乙型肝炎病毒共价闭合环状 DNA （ HBV cccDNA）是嗜肝病毒持续感染和HBV复制的突出标志,也是评价HBV感染状态及治疗效果最客观、敏感的指标。监测肝脏内 HBV cccDNA的含量对于病情判断、疗效和预后评估均具有重要意义。本研究通过检测拉米夫定初治后患者肝组织内HBV cccDNA 的含量及血清 HBsAg、HBeAg、HBV DNA等水平,探讨肝组织内HBV cccDNA的含量与HBV血清学标志物和病毒载量的相关性。     

轻度慢性乙型肝炎患者肝组织中MMP-2和TIMP-2的表达及其意义

目的 探讨轻度慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织中的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的表达及临床意义.方法 选取2006年12月至2011年12月温州医学院附属第二医院感染内科收治入院的慢性HBV感染者68例为研究对象,将其分为轻度慢性乙型肝炎(CHB)组(35例)和慢性HBV携带组(33例).采集患者血清,行HBV血清学标志物、HBVDNA、肝纤维化血清学指标检测及肝穿刺活检,光镜下观察肝组织.采用免疫组织化学染色法检测MMP-2和TIMP-2的表达,并进行阳性表达评分及肝组织纤维化分级.用SPSS 17.0软件进行统计学分析.结果 轻度CHB组和慢性HBV携带者组血清肝纤维化指标透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(PC Ⅲ)和Ⅳ型胶原(CⅣ)的差异无统计学意义(t=1.35,1.65,1.88和1.89,P＞0.05).轻度CHB组肝组织中MMP-2和TIMP-2评分分别为(4.42±1 37)和(3.89±1.12)分,慢性HBV携带组分别为(3.61 ±1.23)和(3.31±1.07)分,差异有统计学意义(t=2.56和2.18,P＜0.05).CHB组的MMP-2/TIMP-2比值为1.15±0.17,而慢性HBV携带组为1.08-±0.11,两组比较差异有统计学意义(t=2.04,P＜0.05).MMP-2和TIMP-2评分与纤维化分级的相关系数分别为0.372(P =0.002)和0.439(P =0.000).结论 轻度CHB患者的肝组织中MMP-2和TIMP-2表达增加,且与纤维化分级具有相关性,可用于评估患者肝纤维化的程度.     

慢性乙型肝炎患者肝细胞内HBcAg分布与血清病毒学指标的相关性研究

目的探讨慢性乙型肝炎患者肝细胞内HBcAg分布规律与血清病毒学指标的相关性。方法对958例慢性乙型肝炎患者的血清学、病毒学、免疫组织化学等资料进行对比分析。结果在肝细胞内HBcAg不同分布类型之间,血清HBeAg阳性率及HBV DNA载量均存在显著性差异（χ2值分别为364.01和417.41,P〈0.001）。其中,此两项指标以HBcAg核型和混合型分布组最高,HBcAg阴性组最低,而HBcAg浆型分布组的HBeAg阳性率及HBV DNA载量则介于上述两组之间。结论 HBcAg在受染肝细胞内的分布与血清病毒学指标之间具有明显的相关性,随着HBcAg分布态势由受染肝细胞核向细胞浆漂移到最终不能检测到,HBeAg阳性率及HBV DNA载量呈逐渐降低的趋势。     

HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者的临床和病理对照

目的探讨HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)患者的临床和肝组织病理损伤特点。方法经肝活检病理诊断为CHB患者548例,分为HBeAg阳性与HBeAg阴性2组,分别统计患者年龄、肝组织炎症活动度(G分级)、纤维化程度(S分期)、肝活检前后2周肝功能(ALB、GLB、TBil、ALT、AST、GGT)峰值、血清HBVDNA载量、肝组织病理改变与临床之间的关系。结果肝组织G分级、S分期与肝功能改变有相关性(P均0.01),肝功能明显异常者肝组织病理损伤亦重;S分期与G分级有相关性(P0.01),S分期随G分级升高而加重。HBeAg阳性者较HBeAg阴性者平均年龄小,ALT、AST水平及HBVDNA载量高(P均0.01)。HBeAg阴性者肝组织G分级、S分期与患者年龄有相关性(P均0.05),与HBVDNA载量有显著相关性(P均0.01);而HBeAg阳性者G分级、S分期与患者年龄、HBVDNA载量无相关性(P均0.05)。结论CHB肝功能改变可以反映肝脏病理损害程度,S分期随G分级升高而加重。HBeAg阳性与HBeAg阴性CHB患者临床表现有所不同:HBeAg阴性CHB患者年龄较大,ALT、AST水平及HBVDNA载量较低。除肝功能改变外,患者年龄、血清HBVDNA载量可作为HBeAg阴性CHB患者肝脏病变程度的预测指标。     

人类白细胞抗原-DRB1基因多态性与山西省家族性乙型肝炎预后的相关性研究

目的探讨人类白细胞抗原（human lymphoeyte antigen,HLA）-DRB1等位基因多态性与山西省家族性乙型肝炎临床转归及乙型肝炎病毒（HBV）复制状态的相关性。方法采用前瞻性临床流行病学研究方法,以山西省家族性乙型肝炎家庭中的295位成员为研究对象,将其分为健康对照组、慢性无症状携带（ASC）组、慢性乙型肝炎（CHB）组及肝硬化组。采用聚合酶链反应．序列特异性寡核苷酸探针技术（polymerase chain reaction—sequence specific oligonucleotide probe,PCR—SSOP）结合荧光磁珠流式检测技术,进行HLA—DRB1等位基因检测。采用,检验或Fisher’s确切概率计算法比较HLA—DRB1各等位基因频率在各组间以及在HBV DNA不同载量下的分布情况,组间计量资料比较采用方差分析,相关疾病的等位基因风险率以相对危险系数（RR）表示。结果HLA—DRB＊04基因频率在健康对照组为0．159,明显高于ASC组（0．069）和CHB组（0．079）,差异具有统计学意义（χ^2分别为4．892和4．072,P值均〈0．05）;HLA—DRB1＊07等位基因在CHB组和肝硬化组的频率分别为0．131和0．154,明显高于健康对照组（0．049）,差异具有统计学意义（χ^2值分别为4．140和5．529,P值均〈0．05）;HLA—DRB1＊13等位基因频率在健康对照组为0．037,高于CHB组（0）,2组比较差异具有统计学意义（χ^2=3．316,P〈0．05）。HLA—DRB1＊15等位基因频率在ASC组为0．206,在肝硬化组为0．115,2组比较差异具有统计学意义（χ^2=4．287,P〈0．05）。其他各等位基因频率在各组间差异无统计学意义。患者年龄在ASC、CHB及肝硬化3组间的差异有统计学意义（F=33．38,P〈0．01）;HBV DNA阳性组的HLA—DRB1＊07基因频率（0．167）高于HBV DNA阴性组（0．096）（χ^2=5．268,P=0．002）。结论HLA—DRB1＊07与家族性HBV易感性有关,可能是山西省家族性乙型肝炎易感基因或连锁基因。HLA—DRBI＊04及HLA—DRB1＊13与家族性乙型肝炎抗性相关,可能是山西省家族性乙型肝炎抗性基因。     

脂联素与慢性乙型肝炎肝纤维化的关系研究

目的研究脂联素在慢性乙型肝炎病毒感染患者中的表达,并对部分患者抗病毒治疗前后的脂联素水平进行对比,探讨脂联素与慢性乙型肝炎肝纤维化的相关性。方法ELISA法定量检测血清脂联素水平,免疫组织化学法以及RT-PCR法检测肝活检组织脂联素的表达,同时检测患者肝功能以及HBVDNA变化,并对患者肝脏穿刺前后的纤维化程度进行比较。结果血清脂联素水平在慢性乙型肝炎肝硬化患者中的表达[（20．65±1．29）mg／L]高于肝纤维化0～1级、2级以及3级的患者[分别为（8．57±0．28）、（12．22±0．64）、（15．22±0．77）mg／L],P〈0．01。血清脂联素水平与肝纤维化分级呈正相关（r=0．976,P〈0．01）,与血清转氨酶水平及血清HBVDNA滴度无关（P〉0．05）;血清脂联素水平与肝硬化呈独立相关（相对危险度为1．07,95％可信区间为1．00～1．14。P=0．02）。在抗病毒治疗后,患者肝纤维化程度改善以及获得持续病毒学应答的患者血清脂联素水平降低。结论血清脂联素在慢性乙型肝炎肝纤维化的进展过程中发挥了作用,血清脂联素水平在抗病毒治疗后显著下降,并与肝纤维化改善有关。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者三年的疗效观察

目的探讨拉米夫定（lamivudine,LAM）长期治疗HBeAg阳性和HBeAg阴性的两组慢性乙型肝炎（CHB）患者相关指标之间的关系。方法将63例入院诊断为CHB的患者分为HBeAg阳性CHB患者组（30例）及HBeAg阴性CHB患者组（33例）,拉米夫定100mg/d治疗,进行3年的随访观察,同时检测HBV血清标志物、HBV DNA、ALT、AFP等生化指标,并进行χ2检验来分析两组之间的关系。结果 63例CHB患者中,HBeAg阳性患者30例（47.6%）,HBeAg阴性33例（52.4%）。拉米夫定治疗两组患者间ALT复常率、HBV DNA阴转率、肝细胞癌发生率及HBsAg阴转率两组比较差异均无统计学意义;其YMDD变异率、肝硬化的发生率两组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。HBeAg阳性组YMDD变异率为43.3%,显著高于HBeAg阴性组的18.2%（χ^2=4.720,P〈0.05）;HBeAg阴性组肝硬化患者占37.0%,显著高于HBeAg阳性组的5.9%（χ^2=3.866,P〈0.05）。结论拉米夫定治疗HBeAg阳性CHB患者较HBeAg阴性患者更易发生YMDD变异,HBeAg阴性CHB患者较HBeAg阳性患者更易发生肝硬化。     

拉米夫定与阿德福韦酯初始联合与单药优化治疗慢性乙型肝炎96周临床疗效比较

目的观察拉米夫定（LAM）与阿德福韦酯（ADV）初始联合与单药优化治疗慢性乙型肝炎患者96周的临床疗效。方法选择2007-2009年安徽医科大学第一附属医院的155例慢性乙型肝炎患者,所有患者采用随机数字表法分为LAM治疗组（53例）、ADV治疗组（50例）和LAM＋ADV联合治疗组（52例）,每24周检测患者肝肾功能、HBV血清学标志物和血清HBVDNA载量。单用LAM或ADV组中应答不佳或病毒学突破患者分别在24、48和72周加用ADV或LAM进行优化治疗。多组计量资料组间比较,正态分布且方差齐性采用单因素方差分析,非正态分布采用秩和检验;二分类Logistic回归分析影响产生早期病毒学应答的因素。结果治疗24周时,LAM组、ADV组以及LAM＋ADV组的完全病毒学应答率分别为66．0％（35／53）、34．0％（17／50）和90．4％（47／52）,差异有统计学意义（X^2=35．282,P〈0．01）;治疗96周时,三组患者的完全病毒学应答率分别为96．2％（51／53）、86．0％（43／50）和100．0％（52／52）,组间比较差异无统计学意义（X^2=19．115,P〉0．05）。治疗96周时,LAM组、ADV组以及LAM＋ADV组的ALT累计复常率分别为86．8％（46／53）、82．0％（41／50）和94．2％（49／52）,比较差异无统计学意义（X^2=3．613,P〉0．05）,但ALT水平在三组间的差异有统计学意义（X^2=11．195,P〈0．01）。治疗96周时,LAM组、ADV组以及联合治疗组的HBeAg血清学转换率分别达到31．3％（10／32）、20．7％（6／29）和38．7％（12／31）,但差异无统计学意义（X2=2．313,P〉0．05）。LAM组无早期应答1例,发生病毒学突破11例;ADV组无早期应答19例,发生病毒学突破1例;联合组无1例发生早期无应答和病毒学突破。Logistic回归显示,24周完全病毒学应答与基线HBeAg、初始治疗方案和基线HBVDNA载量相关。分层评价发现,对于HBeAg阳性、HBVDNA〉6．28×10^6拷贝／mL和AⅡ≤5x正常值上限（ULN）的患者,LAM、ADV单药治疗和初始联合治疗24周时的完全病毒学应答率比较差异有统计学意义（X^2=7．726、10．921和6．100,P〈0．05或〈0．01）;对于基线HBVDNA〉6．28×10^6拷贝／mL的患者,ADV单药治疗24周,无1例产生完全病毒学应答。结论LAM＋ADV联合治疗具有更强的抗病毒活性和改善肝功能的能力,可提高病毒学应答率和降低耐药变异率,尤其对HBeAg阳性、HBV高载量和ALT≤5×ULN的患者更值得推荐使用。     

慢性HBV感染者不同免疫状态下及抗病毒治疗后外周血T细胞亚群比例和细胞因子水平特点

目的：观察不同免疫状态的慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者及抗病毒治疗后外周血CD4^＋T、CD8^＋T细胞比例、CD4^＋/CD8^＋比值及血清中细胞因子IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ水平的变化特点及与HBeAg血清学转换的相关性。方法纳入79例处于不同免疫状态的慢性HBV感染者（其中非活动性HBV携带期15例、免疫耐受期20例、免疫活化期44例）及21例健康对照者为研究对象,采用流式细胞术检测其外周血CD4^＋T、CD8^＋T细胞比例。对其中33例免疫活化期患者进行核苷（酸）类似物抗病毒治疗并随访至48周。分别于治疗前（T0期）及治疗后4周（T1期）、8周（T2期）、12周（T3期）、24周（T4期）和48周（T5期）采集外周血,流式细胞术检测各时间点患者外周血CD4^＋T、CD8^＋T细胞比例。同时对部分患者血清标本中的细胞因子水平进行检测。结果在慢性HBV感染者中,免疫活化组患者外周血CD4^＋T细胞比例及CD4^＋/CD8^＋比值显著低于健康对照组（P均＜0.05）,而CD8^＋T细胞比例显著高于健康对照组（F =3.610,P ＜0.05）。抗病毒治疗后,△T0～T1、△T0～T2期,HBeAg血清学转换组外周血CD8^＋T细胞比例升高率显著高于未转换组（P均＜0.05）;△T0～T5期,HBeAg血清学转换组外周血CD4^＋T细胞比例升高率显著高于未转换组（Z =-2.200,P ＜0.05）。免疫活化组患者血清IL-10、IFN-γ水平均显著高于对照组和免疫耐受组（P均＜0.05）。免疫活化组患者抗病毒治疗后12周及24周,血清IL-10水平显著下降（t=3.037、3.180,P均＜0.05）,与ALT水平、HBV DNA载量呈正相关关系（P均＜0.05）。结论慢性HBV感染者在不同免疫状态下外周血T细胞亚群比例及血清细胞因子水平表现不同,免疫活化期患者与健康对照者比CD4^＋T比例及CD4^＋/CD8^＋下降,CD8^＋T比例升高,血清IL-10水平显著升高。HBeAg阳性患者,核苷（酸）类似物抗病毒治疗过程中外周血CD8^＋T细胞和CD4^＋T细胞的比例升高可能有助于预测HBeAg的血清学转换。     

PD-1和PD-L1表达与慢性HBV感染者肝脏病变程度的相关性

目的研究程序性死亡分子-1(programmed death-1,PD-1)及其主要配体(programmed death-1ligand,PD-L1)表达与肝脏病变程度的关系,并探讨其临床意义。方法不同临床类型慢性HBV感染者137例,含慢性乙型肝炎(CHB)患者102例,活动性肝硬化(LC)患者25例,慢加急性肝衰竭(ACLF)患者10例。其中,102例CHB患者中有22例行肝组织活检,炎症分级为G1～G4,纤维化程度分为S0～S4。健康对照10例。取新鲜血液分离外周血单个核细胞(PBMCs),流式细胞仪检测PBMCs表面PD-1和PD-L1阳性细胞比例以及人白细胞抗原(HLA)型别;对HLA-A2阳性者的PBMCs加入重组HBcAg体外培养7d,加入PE标记的HBV抗原表位肽-五聚体复合体(含HBV抗原表位肽为HB-cAg18-27),流式细胞仪计数CD8+T细胞数以及CD8和PD-1双阳性细胞。ELISA检测PBMCs培养上清液中IFN-γ。比较CHB、LC、ACLF三组间以及不同肝组织病变程度患者间PD-1、PD-L1、CD8+细胞数量和PD-1表达水平、IFN-γ水平的差异。结果在CHB、LC和ACLF组PD-1在PBMCs表面的表达阳性率分别为(55.4±16.5)%、(54.3±21.9)%、(45.5±26.5)%,与健康对照组比较,P值分别为0.000、0.001、0.071;三组PD-L1表达阳性率分别为(41.7±17.7)%、(33.4±17.9)%、(26.6±11.8)%,和对照组比较,P值分别为0.006、0.252、0.854。62例HLA-A2阳性患者的CD8+T细胞比例分别为(1.6±1.0)%、(3.1±1.6)%和(3.3±1.7)%,LC组和ACLF组明显高于CHB组(P0.05);PD-1阳性细胞占CD8+T细胞的比例各组间比较无统计学差异;三组PBMCs培养上清液中IFN-γ含量比较无统计学差异。不同肝组织炎症和纤维化程度的CHB患者间PD-1、PD-L1表达虽无明显统计学差异,但PD-L1在炎症G1和纤维化S0的患者中的表达较其他组患者高。结论慢性HBV感染者PD-1和PD-L1表达明显上调。肝脏病变程度与PD-1表达水平无关,但与HBV特异性CD8+T细胞数量及PD-L1表达相关。     

原发性肝癌与乙型肝炎病毒基本核心启动子和前C区基因变异的相关性

目的 研究原发性肝癌（PLC）与HBV基本核心启动子（BCP）和前C区基因变异的相关性。方法对144例HBsAg（＋）PLC患者的血清进行HBV标志物和HBVDNA检测,对HBeAg（-）但HBVDNA（＋）的样本再采用实时荧光定量PCR进行前C区和BCP区基因变异检测。随机选取120例慢性乙型肝炎（CHB）患者作为对照组。结果PLC患者血清HBV标志物中HBeAg（＋）46例,占31．94％,HBeAg（-）98例,占68．06％。在98例HBeAg（-）患者的血清中,HBVDNA（＋）56例,占57．14％,其中前C1896变异43例,占76．79％,BCP1762／1764基因变异50例,占89．29％,共同变异38例,占67．86％。PLC患者中的前C1896和BCP1762／1764基因变异率高于CHB患者,且差异有统计学意义（X^2值分别为9．36和5．77,P值均〈0．05）。结论PLC的发生可能与前C区和BCP区基因变异有关。     

恩替卡韦对肝移植受者血清及外周血单个核细胞内HBV DNA的抑制作用

目的 研究恩替卡韦对乙型肝炎相关性终末期肝病患者肝移植术后血清及外周血单个核细胞（PBMC）内HBV DNA的抑制作用. 方法 选取从2007年8～12月的20例HBsAg阳性肝移植受者作为研究对象（围手术期组）,给予口服恩替卡韦每天0.5 mg联合肌注乙肝免疫球蛋白作为HBV再感染的预防方案,分别于术前1 d和术后1、4、12周采用实时荧光定量PCR法检测血清及PBMC内HBV DNA定量.同时回顾性分析2006年8月至2007年8月共34例行同种异体原位肝移植,术后长期使用恩替卡韦联合肌注乙肝免疫球蛋白的患者（随访组）,随访时间4.0～22.5个月,同样的方法检测血清及PBMC内HBV DNA定量.结果 20例受者血清HBV DNA在恩替卡韦治疗12周时全部转阴.术前1 d和术后1、4、12周PBMC内HBV DNA阳性率分别为85.0%（17/20）和45.0%（9/20）、45.0%（9/20）、40.0%（8/20）,术后1周与术前比较差异有统计学意义（P=0.004）,但1周以后阳性率无显著变化;围手术期PBMC内HBV DNA定量均值分别为104.07±2.07和101.69±1.96、101.51±1.72、101.30±1.63拷贝/106细胞,同样术后1周与术前比较差异有统计学意义（P=0.01）,但随术后时间的延长,下降趋缓,术后4周后定量值的下降差异无统计学意义（P〉0.05）.随访组平均随访13.6个月,均未发现HBV再感染（血清HBV DNA均阴性）,PBMC内HBV DNA阳性率为32.4%（11/34）,定量均值101.03±0.26拷贝/106细胞.结论 恩替卡韦对肝移植术后血清及PBMC内HBV DNA均具有较好的抑制效果,但PBMC内HBV DNA下降趋势在术后4周后即维持在相对稳定状态,不能完全被清除.     

慢性乙型肝炎病毒感染者外周血T细胞亚群及NK细胞的特点及意义

目的探讨慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者外周血T细胞亚群及NK细胞的特点及临床意义。方法采用流式细胞术检测各研究组,包括慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）组33例、乙型肝炎失代偿期肝硬化（1iver cirrhosis,LC）组20例、慢性乙型重型肝炎（chronic severe hepatitis B,CSH）组17例及健康对照组（Control）20例的外周血T细胞亚群及NK细胞相对计数,并检测肝功能、HBVDNA含量及HBV血清标志物。结果按Control、CHB、LC、CSH顺序,CD3^＋T细胞、CD8^＋T细胞百分比依次升高,而CIM^＋T细胞、CD4^＋／CD8^＋比值及NK细胞百分比依次降低,且CHB、LC、CSH组与Control组及CHB组与CSH组相比,差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．008）。CHB患者的CD3^＋T细胞与血清总胆红素（total bilirubin,TB）、HBVDNA含量（log_10）呈正相关（P〈0．001;P〈0．001）;CD8^＋T细胞与HBVDNA含量（log_10）呈正相关（P=0．007）,NK细胞与HBVDNA含量（log_10）（P=0．001）呈负相关。CHB组乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性者的CD4^＋T细胞及CD4^＋／CD8^＋比值低于HBeAg阴性者（P=0．018;P〈0．001）,而HBVDNA含量（log_10）和CD8^＋T细胞高于HBeAg阴性者（P=0．012;P=0．019）。结论慢性HBV感染者外周血T细胞亚群及NK细胞相对值紊乱,且与临床类型、病情、血清HBVDNA水平及HBeAg相关。