子宫内膜癌盆腔淋巴结CK19-mRNA的表达及临床意义

目的研究应用逆转录聚合酶链反应方法（RT—PCR）检测CK19-mRNA在子宫内膜癌盆腔淋巴结中的表达及其临床意义。方法取2006年6月～2007年3月于潍坊市人民医院行手术治疗的20例子宫内膜癌患者的130枚盆腔淋巴结，采用RT—PCR方法检测其CK19-mRNA的表达，取子宫内膜癌癌组织做阳性对照，取5例良性病变的子宫组织及盆腔淋巴结10枚做阴性对照。结果CK19-mRNA在20例子宫内膜癌癌组织中均呈阳性表达，在子宫良性病变患者内膜组织及淋巴结中均未表达。20例子宫内膜癌患者术后病理学检测仅1例发现癌转移，而应用RT-PCR检测有7例CK19-mRNA呈阳性表达，即可证实有肿瘤细胞的微转移。结论通过对子宫内膜癌患者盆腔淋巴结中CK19-mRNA的检测，进一步确定其临床病理分期，更有利于判断预后，指导治疗。     

喉癌患者外周血CK19mRNA及CK20mRNA的表达

目的研究喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达,探讨其I临床意义。方法采用巢式RT-PCR技术检测喉癌患者术前外周血中CK19mRNA、CK20mRNA的表达。结果48例喉癌患者外周血中CK19mRNA阳性率为37．5％（18／48）,CK20mRNA阳性率45．8％（22／48）。10例肿瘤组织中CK19mRNA阳性率为100％（10／10）。CK20mRNA阳性率80％（8／10）;10例声带息肉患者外周血为阴性对照,CK19mRNA阳性率为10％（1／10）,CK20mRNA阳性率为0。结合临床病理资料,喉癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA表达与喉癌T分期、临床分期及淋巴结转移存在相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用巢式RT—PCR技术,对喉癌患者外周血单个核细胞CK19mRNA和,或CK20mRNA的检测,在分子生物学水平对喉癌细胞对周围组织的浸润及局部扩散提供了参考,有助于指导临床治疗。     

DC-CIK对卵巢癌细胞杀伤作用及临床治疗安全性评价

目的 树突状细胞(dendritic cells,DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)经体外共培养后,探讨其增殖能力和对卵巢癌细胞的杀伤能力,并对其治疗卵巢肿瘤的安全性进行评价.方法 提取健康志愿者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC),通过不同细胞因子组合,分别诱导培养DC和CIK细胞,并共培养,用苔盼蓝染色计算活细胞扩增倍数,流式细胞术检测细胞表型,乳酸脱氢酶法(LDH)检测细胞毒性,酶联免疫剂吸附法(ELISA)检测细胞分泌因子水平.在卵巢癌患者签署知情同意书后,提取卵巢癌患者PBMC,诱导DC、CIK,并共培养,将质检合格的DC、CIK细胞通过腹腔注射的方式回输入患者体内,根据美国国立癌症研究所发布的《常见不良反应标准》,对不良反应进行判定,评价DC-CIK细胞治疗的近期安全性.结果 DC和CIK细胞共培养后,CIK增殖速度明显快于CIK单独培养,DC和CIK成熟分型明显增加,对肿瘤的杀伤能力比CIK单独培养时更强,且随着效靶细胞比的增加,杀伤肿瘤能力逐渐增强;DC-CIK回输早期,患者并未出现明显副反应.结论 DC-CIK共培养后,细胞增殖能力、成熟分型及协同抗瘤作用均增强;此外,DC-CIK相对安全可行.     

CK19 mRNA在45例乳腺癌患者外周血中的表达

目的 检测CK19 mRNA在乳腺癌外周血中的表达情况,并探讨其与临床病理因素的相关性.方法 采用RT-PCR技术检测45例术前乳腺癌患者、30例乳腺良性病变患者外周血中CK19 mRNA的表达情况.结果 CK19 mRNA在乳腺癌患者中阳性率为62.2%,在30例乳腺良性患者中阳性率为3.3%.乳腺癌患者和良性病变患者比较差异有统计学意义(P＜0.01).CK19 mRNA阳性率与临床分期、淋巴结转移均有关,二者表达呈正相关(P＜0.01).与ER、PR无显著相关性.结论 乳腺癌患者外周血中CK19 mRNA显著高于乳腺良性病变者.     

肝细胞癌中CK7、CK19及AFP的表达相关性研究

目的探讨CK7、CK19在肝细胞癌（HCC）中的表达,以及与HCC患者甲胎蛋白（AFP）表达及临床病理特征的关系。方法收集65例原发性HCC患者的癌组织标本及血清标本,免疫组化检测CK7、CK19表达情况,并用ELISA法检测血清中AFP水平。结果HCC患者癌组织中CK7的表达阳性率为46.2%（30/65）,CK19表达阳性率为18.5%（12/65）。HCC癌组织中可见表达CK7、CK19的卵圆细胞,可同时表达AFP。CK19表达与血清AFP表达水平有显著相关性（P=0.000）。结论人类HCC中同样有卵圆细胞的存在,这部分HCC患者预后较差,AFP及CK19的联合检测可有助于这部分患者的早期诊断。     

食管癌患者外周血CK20、CK19、CEA mRNA的表达及其临床病理意义

目的：研究89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA mRNA的表达,并探讨其临床病理意义。方法：巢式RT—PCR技术检测89例食管癌患者术前外周血中CK20、CK19、CEA mRNA的表达。结果：89例食管癌患者外周血中CK20、CK19及CEA的阳性表达率分别为49．44％、34．83％及52．81％;三基因同时检测时,至少1个基因检测结果为阳性的表达率为71．91％,与食管癌的淋巴结转移和（或）远处转移具有相关性。结论：CK20、CEA可作为检测食管癌患者外周血微转移的生物学标志,RT—PCR联合检测多种标志物可为了解肿瘤的恶性生物学行为、指导临床治疗方案的选择、判断预后及监测疗效提供依据。     

巢式PCR检测胃癌患者外周血CK19 mRNA的临床意义

目的：对外周血CK19 mRNA基因表达的检测,探讨对胃癌患者微转移的诊断价值。方法：采用巢式RT-PCR方法检测63例胃癌患者,20例健康志愿者外周血CK19 mRNA的表达情况。结果：胃癌患者外周血中CK19 mRNA的阳性检出率为36.5%,并与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度有关（P〈0.05）,而与年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、有无淋巴结转移无关（P〉0.05）,而健康志愿者外周血中CK19 mR-NA无1例阳性表达。结论：CK19 mRNA可以作为判断胃癌患者外周血微转移的肿瘤标志物。     

CK19、CK20 mRNA在上皮性恶性肿瘤患者外周血中的表达及其意义

目的：分析上皮性恶性肿瘤患者外周血中CK19、CK20mRNA的表达水平，探讨其临床病理意义。方法：随机选择和收集53例上皮性恶性肿瘤患者的外周血，应用巢式RT－PCR法联合检测其CK19、CK20mRNA表达情况，另取15例上皮性肿瘤组织的为阳性对照，15例非肿瘤患者外周血为阴性对照。结果：53例肿瘤患者外周血中CK19阳性率为35．8％（19／53，CK20阳性率41．5％（22／53），两者至少1项阳性者69．8％（31／53）。15例肿瘤组织中CK20阳性率为100％（15／15），CK19阳性率86％（13／15）；15例阴性对照CK19阳性2例，CK20阳性1例，结合肿瘤的临床病理资料分析，肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA阳性表达与肿瘤浸润深度，临床分期及淋巴结转移存在明显的相关性，而与肿瘤患者的年龄，性别，肿瘤分化程度无明显相关。结论：CK19、CK20mRNA可作为检测上皮性肿瘤外周血微转移的靶基因。联合检测肿瘤患者外周血CK19、CK20mRNA可增加外周血循环癌细胞的检测率。     

CK19在甲状腺乳头状癌的表达及其临床意义

目的 观察CK19在甲状腺乳头状癌及其他甲状腺疾病中的表达,探讨其在乳头状癌与其他甲状腺疾病鉴别诊断的作用.方法 用试剂CK19做免疫组化标记甲状腺乳头状癌32例、甲状腺滤泡性癌15例、甲状腺良性病变20例,对照其表达.结果 CK19在甲状腺乳头状癌的阳性表达率明显高于其他疾病.结论 提示CK19在甲状腺乳头癌与其他疾病相鉴别时具有较重要的作用.     

早期宫颈癌患者外周血中CK19 mRNA的检测意义

目的:探讨CK19 mRNA在早期宫颈癌患者外周血中的表达水平及临床意义.方法:采用RT - PCR技术对47例Ⅰ a～Ⅱa期宫颈癌患者及37例对照组健康体检者行外周血CK19 mRNA检测.结果:在Ⅰ a～Ⅱa期患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率为14.89％ (7/47),对照组外周血中CK19mRNA阳性表达率为0％ (0/37).在Ⅰ a～Ⅱa期中CK19 mRNA表达与淋巴结转移正相关(rs=0.367,P＜0.05),与年龄、病理类型及分化程度无关(P＞0.05).结论:CK19 mRNA表达在早期宫颈癌与淋巴是否结转移相关,与年龄、病理类型及分化程度无关;推测检测此指标可以作为预测宫颈癌淋巴结转移的指标.     

非小细胞肺癌患者DC-CIK过继免疫治疗前后外周血TLR4表达的变化

目的观察细胞因子诱导的杀伤细胞（DC-CIK）过继免疫治疗前后非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血单个核细胞（PBMC）Toll样受体4（TLR4）mRNA表达变化,及脂多糖刺激下PBMC分泌细胞因子的变化,探讨TLR4在DC-CIK过继免疫治疗中的作用。方法对50例采用DC-CIK治疗的NSCLC患者,运用RT-PCR检测治疗前后PBMCTLR4mRNA表达变化,ELISA法检测治疗前后NSCLC患者PBMC在脂多糖刺激下细胞因子（IL-6、IL-8及TNF-α）分泌的变化。结果DC-CIK治疗后NSCLC患者PBMCTLR4mRNA的表达水平较治疗前显著降低（t=6.272,P＜0.01）;脂多糖刺激下PBMC分泌IL-6（t=17.407,P＜0.01）、IL-8（t=15.244,P＜0.01）及TNF-α（t=12.428,P＜0.01）显著减少。结论DC-CIK过继免疫治疗可能通过降低PBMCTLR4mRNA的表达,提高机体抗肿瘤免疫功能。     

乳腺癌患者外周血CK19mRNA检测对辅助化疗有效性监测的临床研究

目的探讨乳腺癌血液微转移发生规律以及辅助化疗对血液微转移的影响。方法以60例乳腺癌术后患者为研究对象,根据临床分期分为3组(0~Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期),运用RT-PCR技术,以CK19mRNA为标志物,分别检测其辅助化疗前后血液微转移发生情况。结果①化疗前血液微转移阳性率为23.33%(14/60),其中0-Ⅰ期0%(0/9)、Ⅱ期16.22%(6/37)、Ⅲ期57.14%(8/14),三组之间差异有统计学意义(P<0.05)。②化疗结束血液微转移阳性率为3.33%(2/60),化疗前后血液阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。结论临床分期越晚,出现微转移可能性越大。辅助化疗能降低血液中微转移阳性率,是减少术后转移改善预后的重要措施。     

Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周血中的表达及临床意义

目的 探讨Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌患者外周中的表达及其在胃癌诊断及预后方面的价值。方法 利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测89 例胃癌患者及健康对照外周血中SurvivinmRNA 和CK19 mRNA 的表达情况,并利用统计学方法分析血清Survivin mRNA 和CK19 mRNA 在胃癌中的诊断和预后价值。结果 RT-PCR 结果发现胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 的表达均高于健康对照组;ROC 曲线显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 为胃癌有效诊断分子靶点;χ2检验显示外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 与胃癌患者的TNM 分期呈正相关;Kaplan-Meier 生存曲线显示Survivin 和CK19 双阳性组的胃癌患者术后5 年生存率低于其他各组。结论 胃癌患者外周血中Survivin mRNA 和CK19 mRNA 表达水平增高,是胃癌早期诊断和判断预后的潜在分子指标。     

胃癌患者外周血中CK-19的表达及其临床意义

目的检测胃癌患者外周血中CK－19和MUC－1的表达,确定其作为早期胃癌微转移分子标志物的可能性;讨论CK—19mRNA对早期胃癌微转移的临床诊断意义。方法研究对象共分为三组,其中2009年3月～2012年3月期间于陕西省安康市中心医院住院的96例初治胃癌患者作为实验组．30例胃良性疾病患者和30例健康人的外周血分别作为对照组。采用RT—PCR法检测实验组及对照组的外周血中CK－19tuRNA及MUC～1mRNA的表达情况并评估目的基闪的表达与临床特征的相关性,对结果进行统计学分析．选取也合适的标本进行PT－QPCR实验。RT—QPCR法检测44例早期胃癌患者外周血中CK－19mRNA的表达量,通过绘制ROC曲线．探索诊断效果最好的临界值并计算AUC。结果①实验组和埘照组中CK－19mRNA阳性表达牢分别为53．13％（51／96）、1．67％（1／60）．差异有高度统计学意义（P〈0．01）,且胃癌组中CK－19mRNA的阳件表达与肿瘤分期和和分化程度有关;胃癌组和对照组中MUC－1mRNA阳性表达率分别为61．46％（59／96）、51．67％（31／60）,差异无统计‘学意义（P〉0．05）。②本实验结果统计的临界值为0．2358,灵敏度为95．45％,准确度为77．37％;AUC为0．897。结论RT—QPCR法检测外周血中的CK－19mRNA,适合作为诊断早期胃癌微转移的重要参考指标。     

动态检测乳腺癌患者外周血中CK19表达的临床研究

目的动态检测乳腺癌患者外周血细胞角蛋白19（cytokeratin 19,CK19）的表达并探讨其临床意义。方法应用流式细胞术（flow cytometry,FCM）动态检测32例乳腺癌、10例乳腺良性疾病及10例健康人外周血CK19的表达。结果32例乳腺癌患者外周血CK19阳性的总表达率为29.73%;外周血CK19的表达与TNM分期呈显著相关（P〈0.05）;与肿瘤大小、淋巴结有无转移、HER-2、ER、PR的表达均无相关性（P〉0.05）;IV期与I、II、III期之间有统计学意义。CK19表达预测远处转移敏感性高达100%,特异性为96.3%;10例良性患者及10例健康人外周血均无CK19表达。结论乳腺癌患者外周血CK19可以作为检测乳腺癌远处转移的敏感特异性指标。     

外周血CK-19评价乳腺癌术后化疗及监控血液微转移

目的以外周血CK-19为指标评价术后化疗作用及其监控血液微转移意义。方法以120例乳腺癌术后患者为研究对象,巢式RT-PCR检测外周血CK-19mRNA,比较化疗前后表达差异及CK-19表达与乳腺癌远处转移关系。结果化疗前血液微转移阳性率为23．33％,化疗后为3．33％,差异有统计学意义（P〈0．01）;CK-19阳性组肿瘤转移率为76．9％,阴性组肿瘤转移率为8．6％,两组差异有统计学意义（P〈0．01）。结论术后辅助化疗能降低乳腺癌血液微转移．外周血CK-19能监控乳腺癌血液微转移。     

贲门癌患者外周血CK-20mRNA基因表达的临床意义

目的 探讨贲门癌早期转移的生物标记物CK－20mRNA基因表达及其临床意义。方法 应用巢式逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）法检测29例贲门癌患者外周血CK－20mRNA的表达情况。结果 29例贲门癌患者中12例外周血CK－20mRNA表达阳性，按UICC国际TNM标准分期外周血CK－20mRNA的表达率分别为：I期0／5，II期2／10，Ⅲ期8／12，IV期2／2。结论 贲门癌患者外周血CK－20mRNA阳性表达可作为贲门癌血行转移的分子指标之一，与TNM分期有一定关系。     

RT-QPCR法检测早期NSCLC患者外周血中CK-19 mRNA的意义

目的:RT-QPCR法探测早期非小细胞肺癌(NSCLC)外周血中CK-19 mRNA的意义?方法:以RT-PCR法从113例NSCLC患者(肺癌组)?50例肺良性病变和50例健康者(对照组)标本中筛选出有CK-19 mRNA表达的标本;再以RT-QPCR法检测表达CK-19 mRNA的标本,通过测定受试者标准曲线下面积(AUC)分析本实验的准确性?结果:①肺癌组和对照组中CK-19 mRNA阳性表达率分别为38.94%(44/113)?1.00%(1/100),差异有统计学意义(P < 0.01),且肺癌组中CK-19 mRNA的阳性表达与肿瘤分期和分化程度有关;②本实验效果的临界值为0.236,灵敏度为95.45%,准确度为77.27%;AUC为0.896?结论:RT-QPCR法检测外周血中的CK-19 mRNA可作为早期NSCLC患者发生微转移时的一个参考指标,但尚需大样本长期追踪观察证实?