RP-HPLC法测定维药白花丹中白花丹醌的含量

目的建立维吾尔药材白花丹中白花丹醌含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Waters XTerra RP C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水溶液;体积流量为1.0mL·min-1;检测波长为270nm;柱温25℃。结果在上述条件下,白花丹醌进样量在0.028 6⁰.457 6μg范围内呈良好的线性关系,加样回收率为100.4%,RSD为1.2%。结论该方法简便、准确、灵敏度高、重复性好,能有效测定白花丹药材中白花丹醌的含量。     

白花丹醌对H22肝癌的抑制作用和对荷瘤小鼠血清中IL-2和TNF-α的影响

目的 研究白花丹醌对荷瘤小鼠细胞因子水平及肿瘤抑制的影响.方法 建立小鼠肝癌H22移植性肿瘤模型,采用Elisa法测定细胞因子白介素-2(IL -2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.结果 20、10、5 mg·kg-1白花丹醌对肝癌H22的生长抑制率分别为29.1、35.4、20.1,白花丹醌能升高荷瘤小鼠血清中细胞因子IL -2、TNF -α的水平.结论 白花丹醌具有体内抗肿瘤活性,其抗肿瘤机制可能与升高机体细胞因子水平有关.     

HPLC法测定云南不同产地白花丹的不同部位中白花丹醌的含量

目的:建立白花丹药材中白花丹醌的反相高效液相色谱测定方法,以分别考察云南不同产地白花丹药材的不同部位中白花丹醌的含量。方法:色谱柱为 Kromasil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(70:30),流速为1.0mL·min~(-1),检测波长为254 nm,柱温为25℃。结果:白花丹醌在25.3～253μg·mL~(-1)范围内,具有良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率为99.0%,RSD=1.4%(n=6)。不同产地白花丹药材地上部分的白花丹醌含量分别为0.046%(嘎洒),0.079%(勐养),0.134%(嘎东),0.032%(曼东),0.047%(曼阁),0.057%(曼老);根部的白花丹醌含量分别为0.842%(嘎洒),1.04%(勐养),1.44%(嘎东),0.763%(曼东),0.639%(曼阁),1.97%(曼老)。结论:本法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于控制白花丹药材质量。     

白花丹醌的药理学研究进展

白花丹醌是我国民间常用药白花丹的主要活性成分,具有抗肿瘤、抗肝纤维化、抗肝损伤、抗炎、抑菌等多种药理学作用。近年来,白花丹醌在抗肿瘤、护肝和抗肝纤维化作用方面已引起了医学界研究者的广泛关注,而白花丹醌在心血管系统的多种药理作用则提示其在防治动脉粥样硬化性疾病方面具有一定的应用前景。本文就白花丹醌的药理作用研究进展作一综述。     

中药单体白花丹醌对鲍曼不动杆菌的耐药逆转作用

目的:探索中药单体白花丹醌对临床分离的鲍曼不动杆菌耐药性的逆转作用。方法:取临床分离的鲍曼不动杆菌53株,检测其对临床常用的14种抗菌药物的敏感性。观察中药单体白花丹醌对标准菌株的直接作用。在确定白花丹醌以及羰基氰化氯苯腙(CCCP)的工作浓度以后,观察对比白花丹醌与阳性药CCCP的外排抑制试验结果。结果:临床分离的53株鲍曼不动杆菌对临床常用的14种抗菌药物耐药率较高,其中氨苄西林、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢西丁耐药率最高,分别为100%、100%、98.1%、98.1%。其余药物耐药率也均在50%以上。白花丹醌对标准质控菌的直接抗菌作用较弱。而白花丹醌与CCCP均显示了对庆大霉素、诺氟沙星、米诺环素和氯霉素的增敏作用,其外排阳性率分别达11.3%和18.9%,3.8%和7.5%,13.2%和17.0%,28.3%和20.8%,两组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:鲍曼不动杆菌临床耐药情况严重,而白花丹醌作为一种中药单体可能具有一定的耐药逆转作用。     

白花丹醌对人乳腺癌细胞mda-mb-231的体外效应

目的 探讨白花丹醌的体外抗肿瘤活性.方法 采用MTT染色法和集落形成法探讨白花丹醌对乳腺癌细胞株mdamb-231的体外抑制生长作用.同时,以人胚肺成纤维细胞株MRC-05为对照,初步探讨了白花丹醌对正常细胞的细胞毒作用.结果 白花丹醌对mda-mb-231有较好的抑制生长作用,IC50=0.263 g·L-1,对乳腺癌细胞克隆原形成的IC50=5.13×10-3g·L-1;而对人胚肺成纤维细胞MRC-05的细胞毒作用弱,IC50=5.13×10-3g·L-1.结论 白花丹醌的细胞毒作用可能具有一定的选择性.     

白花丹醌对H22肝癌腹水小鼠生存期及体重的影响

目的探讨白花丹醌对H22肝癌小鼠生存期及体重的影响。方法取H22肝癌细胞接种于小鼠腹腔,造成肝癌腹水模型,随机分为模型组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组及白花丹醌高、中、低剂量组,造模后第2天连续ig给药10 d,观察对小鼠体重、生存期的影响。结果小鼠造模后第1～3天,各组体重无显著差异(P>0.05);第5～11天开始,白花丹醌高剂量组小鼠的体重较模型组显著较轻(P<0.05),其他各组间无显著性差异(P>0.05)。各给药组生存期较模型组显著延长(P<0.05)。结论高剂量的白花丹醌对H22肝癌腹水模型小鼠体重有明显影响,使其增长缓慢,各剂量组白花丹醌对小鼠生存期具有明显延长作用。     

白花丹不同有机溶剂提取物和白花丹醌对移植性乳腺癌和S180肉瘤的作用

目的初步了解白花丹不同有机溶剂提取物和白花丹醌对BALB/C小鼠移植性EMT-6乳腺癌及KM小鼠移植性S180的作用。方法用动物移植性肿瘤在体实验法。结果①氯仿1g·kg-1剂量组、白花丹醌0.02g·kg-1组可抑制EMT-6乳腺癌在BALB/C小鼠体内生长,与生理盐水组比较,瘤重明显减轻(P<0.05),其抑制率分别为34.2%和41.2%。②氯仿1g·kg-1、0.5g·kg-1剂量组,石油醚1g.kg-1、0.5g·kg-1剂量组,乙酸乙酯1g·kg-1、0.5g·kg-1剂量组均可抑制S180肉瘤在KM小鼠体内生长,与生理盐水组比较,瘤重明显减轻(P<0.05或<0.01),其中以氯仿1g·kg-1剂量组抑制率最高(P<0.01),达55.6%。结论白花丹氯仿提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和白花丹醌有一定抑制移植性EMT-6乳腺癌和S180肉瘤的作用,值得进一步深入研究。     

白花丹醌对TBHP诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用研究

目的：探讨白花丹醌（plumbagin,PLB）对叔丁基过氧化氢（TBHP）诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法：评估PLB对TBHP （75 μmol·L^-1）诱导的活性氧（ROS）介导的H9c2心肌细胞的氧化应激和细胞凋亡的保护作用。结果：用5,10和20 μmol·L^-1 PLB预处理后,可显著恢复TBHP诱导的H9c2细胞中的细胞活力,显著降低肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）活性。TBHP导致心肌细胞凋亡增加,而PLB预处理以剂量依赖性方式抑制TBHP诱导的细胞凋亡。此外,经PLB处理后,微管相关蛋白1a/1B轻链3B （LC3）-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达水平升高,提示PLB能够诱导心肌细胞自噬。结论：PLB对TBHP诱导的心肌细胞损伤具有保护作用,该作用可能与PLB抑制ROS介导的氧化应激、凋亡和自噬作用有关。     

白花丹醌对人肝癌细胞HepG2侵袭和凋亡的影响

目的探讨白花丹醌对人肝癌HepG2细胞侵袭和凋亡的影响。方法人肝癌HepG2细胞进行体外培养,经不同浓度的白花丹醌处理后,MTT法检测细胞的增殖抑制作用;Transwell细胞体外侵袭实验观察细胞的侵袭能力;流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况;免疫组化法检测细胞内Bax、Bcl-2蛋白的表达水平。结果 MTT结果显示,与对照组比较,白花丹醌干预组抑制HepG2细胞增殖,并呈剂量-效应关系(P<0.05);Transwell细胞体外侵袭实验显示,随白花丹醌用药浓度的递增,细胞侵袭能力明显下降,尤其以4、8μmol·L~(-1)明显(P<0.01);流式细胞术结果显示,白花丹醌作用HepG2细胞48 h,4、8μmol·L~(-1)组细胞凋亡率均明显高于对照组;免疫组化显示,随着白花丹醌浓度增加,Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,并呈剂量依赖性(P<0.01)。结论白花丹醌能够抑制HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,同时具有抑制HepG2细胞侵袭的能力。     

三氧化二砷对三阴性乳腺癌细胞增殖及凋亡的抑制作用

目的探讨三氧化二砷对人三阴性乳腺癌细胞HCC1937的抑制作用。方法体外培养人乳腺癌HCC1937细胞,利用MTT法及倒置荧光显微镜观察三氧化二砷对人乳腺癌HCC1937细胞生长的抑制作用。结果不同浓度的三氧化二砷均可抑制人乳腺癌HCC1937细胞的增殖,促进其凋亡。三氧化二砷20μg/m1对肿瘤细胞作用72h,其生长抑制率达80.51%。结论三氧化二砷可有效抑制人乳腺癌HCC1937细胞生长,且呈时间、剂量依赖关系。     

三氧化二砷逆转乳腺癌细胞株MCF-7/ADM多药耐药的研究

目的探讨三氧化二砷(As2O3)体外逆转人乳腺癌细胞多药耐药性的作用及机制。方法采用MTT法检测As2O3的细胞毒作用和处理前后耐药细胞对化疗药物的敏感性,用流式细胞仪检测细胞内阿霉素浓度,通过RT-RCR检测MDR1基因的表达。结果 As2O3在0.25mg/L以下剂量时对MCF-7和MCF-7/ADM耐药细胞株的抑制率均小于15%,半数抑制率(IC50)分别为1.01m/L和1.28mg/L,无细胞毒剂量0.2mg/L的As2O3能部分逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性。同时无细胞毒剂量0.2mg/L的As2O3能使MCF-7/ADM细胞内阿霉素浓度明显增加,MDR1表达下降。结论 As2O3具有体外部分逆转人乳腺癌细胞多药耐药性的作用,可能与增加细胞内药物积累、下调MDR1表达有关。     

全反式维甲酸与亚砷酸联合化疗对急性早幼粒细胞白血病高危患者的疗效

目的观察全反式维甲酸(ATRA)与亚砷酸(ATO)联合化疗对急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的疗效。方法回顾性分析86例不同危险分级的初治APL患者的临床资料。根据治疗前白细胞和血小板数将APL患者分为低、中、高危三组。采用ATRA+ATO+蒽环类药诱导缓解,蒽环类药+阿糖胞苷巩固治疗,ATRA+ATO+甲氨蝶呤(MTX)[部分加用6-巯基嘌呤(6-MP)]维持治疗。结果治疗后,完全缓解(CR)率高达95.3%(82/86)。中位随访37个月,高危组和中低危组无事件生存率及中枢神经系统累积复发率差异均无统计学意义(P>0.05)。维持治疗单用MTX者或MTX+6-MP者CR率均为100%。结论 APL患者尤其是高危患者可以从ATO+ATRA+化疗中受益;该方案作为初治APL的一线治疗方案优势明显。     

维A酸、三氧化二砷、柔红霉素联合诱导治疗急性早幼粒细胞白血病疗效观察

目的研究维A酸、三氧化二砷、柔红霉素诱导治疗急性早幼粒细胞白血病的效果。方法选择初治急性早幼粒细胞白血病患者30例,将其随机分为对照组和观察组,各15例。对照组采用维A酸单药诱导化疗,观察组采用维A酸、三氧化二砷、柔红霉素三药诱导化疗,观察2组的临床疗效。结果观察组达到完全缓解的时间明显缩短,相同治疗时间后外周血中早幼粒细胞明显降低,无维A酸综合征发生,患者耐受性好。结论维A酸、三氧化二砷、柔红霉素三药诱导化疗可作为急性早幼粒细胞白血病高危患者的首选治疗方案。     

Antitumor effect of arsenic trioxide in human K562 and K562/ADM cells by autophagy

Arsenic trioxide (As₂O₃) has been reported to have potent antitumor effects in vitro and in vivo by inducing cell death via cell cycle arrest and apoptosis in leukemia cells, but the mechanisms of As₂O₃-mediated cell death are not fully understood. In this study, we provided in vitro evidence that As₂O₃ was a potent inducer of autophagy in leukemia K562 and its drug-resistant line K562/ADM cells. As₂O₃ significantly activated autophagic cell death (programmed cell death type II) in leukemia cell lines. Numerous large cytoplasmic inclusions, abundant autophagic vacuoles, phagocytizing cytoplasm and organelles were observed in As₂O₃-treated cells using electron microscope. MDC-labeled autophagic vacuoles were observed by fluorescent inverted phase contrast microscopy and the enhanced MDC fluorescent staining was detected by flow cytometry in As₂O₃-treated cells. Furthermore, real-time quantitative RT-PCR revealed that the expression levels of Beclin-1 and LC3 genes, which play key roles in autophagy, increased in As₂O₃ treated samples than in controls, indicating that autophagy can potentially be involved in the antitumor properties of As₂O₃. The expression level of Bcl-2 gene, an anti-apoptotic molecule, decreased in As₂O₃ treated samples than in controls, suggesting that Bcl-2 may be involved in accumulating Beclin-1 and triggering autophagic cell death in As₂O₃-treated leukemia cells. Western blotting also showed that As₂O₃ up-regulated Beclin-1. Altogether, our data provide direct evidence that autophagic cell death is critical for the effects of As₂O₃ on acute myelogenous leukemia cells.     

三氧化二砷对人胃癌细胞株癌相关基因表达

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对人胃癌细胞株癌相关基因的影响，探讨：以As2O3作用于体外培养的人胃癌细胞株，通过免疫组化技术对P53、Cyclin-D,PCNA基因编码蛋白的表达进行检测。结果：经As2O3作用的人胃癌细胞P53、Cyclin-D,PCNA基因编码蛋白表达减少，结论：初步证实As2O3具有下调P53、Cyclin-D,PCNA基因编码蛋白表达，抑制肿瘤的增殖和转移，从而具有抗肿瘤作用。     

亚砷酸联合维甲酸、化疗治疗急性早幼粒细胞白血病的疗效观察

目的观察亚砷酸联合维甲酸、化疗治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效。方法将在我院住院诊治的69例APL患者随机分为治疗组和对照组。治疗组37例,诱导缓解治疗方案为亚砷酸、维甲酸加化疗;对照组32例,治疗方案为维甲酸加化疗,观察2组患者疗效和不良反应。结果治疗组初治诱导缓解治疗完全缓解率为97.2%,高于对照组的87.5%(P<0.05),达完全缓解中位时间为29d,高于对照组的35d,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗相关不良反应治疗组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论亚砷酸联合维甲酸、化疗治疗APL的效果好,安全性高。     

全反式维甲酸和三氧化二砷治疗初治急性早幼粒细胞白血病的疗效观察

目的观察全反式维甲酸(ATRA)联合三氧化二砷(As2O3)治疗初治急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效。方法对应用ATRA和As2O3联合诱导治疗的20例APL患者的完全缓解(CR)率、达CR所需时间和不良反应进行观察,并与单独应用ATRA组30例进行比较。联合用药组治疗方法为ATRA 25mg/(m2.d),0.1%As2O310ml/d直至CR。结果联合用药组与单独应用ATRA组相比,CR率差异无统计学意义(分别为95%、86.7%,均P>0.05);联合用药组获得CR所需的时间短于单独用药组(平均时间分别为24d、45d,均P<0.05),早期死亡率较单独用药组差异无统计学意义(分别为5%、13.3%,均P>0.05);与单独用药组相比,联合用药组的不良反应并未增加。结论联合用药诱导初发APL缓解的疗效优于单用药组,不良反应少,是一种值得推广应用的方案。     

全反式维甲酸联合三氧化二砷治疗急性早幼粒细胞白血病血清血脂变化规律的研究

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)联合三氧化二砷(ATO)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)过程中血清血脂的变化规律。方法回顾分析经全反式维甲酸联合三氧化二砷诱导完全缓解后,两种药物联合巩固治疗2个周期的急性早幼粒细胞白血病住院患者49例。分别于治疗前、完全缓解后(CR)、联合用药巩固治疗第1个周期结束及第2周期结束,检测血清血脂指标-血清三酰甘油(TG)、血清总胆固醇(TC)。并对血脂指标进行统计学分析。结果经ATRA联合ATO治疗完全缓解后,患者血脂与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。完全缓解后巩固治疗1个周期,血清TG及TC水平升高(P<0.05)。完全缓解后巩固治疗2个周期,分别与治疗前、完全缓解后及巩固治疗1个周期比较,血清TG及TC升高(P<0.01)。结论 APL患者经ATRA联合ATO治疗会导致血脂升高。     

Immunotoxicity and biodistribution analysis of arsenic trioxide in C57Bl/6 mice following a 2-week inhalation exposure

In these studies the immunotoxicity of arsenic trioxide (ATO, As₂O₃) was evaluated in mice following 14 days of inhalation exposures (nose only, 3 h per day) at concentrations of 50 μg/m³ and 1 mg/m³. A biodistribution analysis performed immediately after inhalation exposures revealed highest levels of arsenic in the kidneys, bladder, liver, and lung. Spleen cell levels were comparable to those found in the blood, with the highest concentration of arsenic detected in the spleen being 150 μg/g tissue following the 1 mg/m³ exposures. No spleen cell cytotoxicity was observed at either of the two exposure levels. There were no changes in spleen cell surface marker expression for B cells, T cells, macrophages, and natural killer (NK) cells. There were also no changes detected in the B cell (LPS-stimulated) and T cell (Con A-stimulated) proliferative responses of spleen cells, and no changes were found in the NK-mediated lysis of Yac-1 target cells. The primary T-dependent antibody response was, however, found to be highly susceptible to ATO suppression. Both the 50 μg/m³ and 1 mg/m³ exposures produced greater than 70% suppression of the humoral immune response to sheep red blood cells. Thus, the primary finding of this study is that the T-dependent humoral immune response is extremely sensitive to suppression by ATO and assessment of humoral immune responses should be considered in evaluating the health effects of arsenic containing agents.