血管性血友病因子和胎盘生长因子检测在AMI中的临床意义

目的:观察急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction,AMI)患者循环内皮细胞(CEC)核DNA改变的特点,检测血浆中血管性血友病因子(Von Willebrand factor,v WF)、胎盘生长因子(Placentalgrowth factor,PLGF)的含量变化,探讨其临床意义。方法:应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测102例AMI患者(AMI组)和75例健康人(对照组)CEC核DNA的损伤;以酶联免疫吸附实验法(ELISA)进一步检测两组v WF、PLGF的含量。结果:SCGE显示:AMI组患者(93.72±6.75)%CEC核DNA电泳呈明显的"彗星"状,其彗尾DNA含量为(42.22±1.56)%;对照组(10.24±4.33)%CEC核DNA表现为"彗星"状,其彗尾DNA含量为(6.31±2.41)%。AMI组与对照组彗星率、彗尾DNA含量比较差异均有显著性意义(P均<0.001)。AMI组v WF、PLGF的含量显著高于对照组(P<0.01)。结论:AMI组患者血管内皮细胞明显损伤;血浆中v WF、PLGF的含量明显升高,早期检测血浆v WF、PLGF的含量可能有利于AMI的治疗,甚至可以起到预防作用。     

缺血性脑卒中患者外周血单个核细胞DNA氧化损伤及修复

目的检测缺血性脑卒中患者急性期和恢复期外周血单个核细胞的DNA氧化损伤及修复情况,与健康者进行比较,以判断缺血性脑卒中患者DNA氧化损伤水平的变化以及DNA氧化损伤水平与病程的关系。方法急性缺血性脑卒中患者36例,于发病3 d内抽取空腹静脉血10 mL进行8-羟基-2’-脱氧鸟嘌呤核苷(8-OhdG)、神经特异性烯醇化酶(NSE)及单个核细胞的彗星率及彗尾DNA百分比的检测,于病程18～21 d抽血2 mL再检测单个核细胞的彗星率及彗尾DNA百分比。同时选取医院门诊体检人群中与研究对象年龄、性别相匹配的健康者20例作为对照。10 mL空腹静脉血中,5 mL分离外周血单个核细胞,提取DNA,将DNA酶解,高效液相色谱—电化学检测方法检测8-OhdG;3 mL双抗体夹心放射免疫法检测血清中NSE;2 mL分离外周血单个核细胞,应用碱性单细胞凝胶电泳的方法检测单个核细胞的彗星率及彗尾DNA百分比,同时对缺血性脑卒中患者的神经功能缺损评分进行比较。结果缺血性脑卒中患者急性期外周血单个核细胞的8-OhdG和NSE含量均较对照组明显升高(P＜0．01),急性期患者外周血单个核细胞彗星率为90．13%±2．22%,彗尾DNA百分比为60．71%±4．18%。较恢复期患者的细胞彗星率60．89%±2．98%、彗尾DNA百分比39．20%±3．61%明显增高(P＜0．01);恢复期患者神经功能缺损评分较急性期患者明显下降(P＜0．01)。对照组血液中单个核细胞彗星率为6．4%±1．61%,彗尾DNA百分比3．37%±0．63%,较缺血性脑卒中患者明显减少(P＜0．01)。结论缺血性脑卒中患者急性期和恢复期外周血单个核细胞存在DNA氧化损伤。     

急性心肌梗死患者血管紧张素Ⅱ水平对外周血内皮祖细胞的影响

目的:急性心肌梗死(acute myocardial infraction,AMI)患者外周血中血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang-Ⅱ)水平对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的数目变化的影响?方法:入选的28例AMI患者(实验组)和30例冠状动脉造影阴性患者(对照组),用ELISA法检测AMI患者急性期?恢复期以及对照组血清中Ang-Ⅱ?基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)的水平,同时用密度梯度离心法获得单个核细胞,用CD34?VEGF和CD133抗体标定EPCs,用流式细胞仪检测外周血中EPCs占单个核细胞的比率?结果:AMI患者急性期Ang-Ⅱ水平(90.40 ± 6.39)pg/ml明显高于恢复期 (72.57 ± 2.42)pg/ml和对照组(69.14 ± 3.73)pg/ml (P = 0.002 4),同时AMI患者急性期EPCs占外周血单个核细胞的比率为为(0.043 ± 0.004)%,明显高于恢复期(0.024 ± 0.010)% 和对照组(0.012 ± 0.001)%(P < 0.000 1),但AMI患者急性期SDF-1α的水平(171.1 ± 35.81) pg/ml同恢复期(130.30 ± 28.84) pg/ml及对照组(116.50 ± 29.19) pg/ml之间无明显差异(P = 0.370 3)?在AMI患者急性期外周血中EPCs和Ang-Ⅱ水平呈负相关,而与SDF-1α水平无明显相关性?结论:AMI患者急性期循环中的Ang-Ⅱ水平及EPCs数量均升高,但是Ang-Ⅱ抑制了EPCs的数量?     

亚慢性吸入二硫化碳对小鼠生殖细胞损伤研究

目的:研究二硫化碳对小鼠生殖细胞的损伤。方法:以浓度为0,200,400,800mg·m-3的二硫化碳蒸汽给小鼠做静式吸入染毒5周,每天2h。用单细胞凝胶电泳实验和流式细胞术检测二硫化碳对精子细胞的损伤。结果:低、中、高染毒组与对照组小鼠精子细胞彗星的拖尾率分别为48.50%,71.00%,86.50%和23.50%,经χ2检验各试验组与对照组差异有统计学意义(P<0.01);彗星头部百分比分别为(62.9949±8.6242)%,(56.6580±10.5990)%,(36.5432±12.0002)%和(86.8926±5.0219)%,各试验组与对照组彗星头部百分比差异有统计学意义,并且各个试验组之间差异也有统计学意义(P<0.001),尾长分别为(8.6812±4.3330),(14.0392±4.1680),(28.6601±8.3690)和(5.9913±1.9240)μm,中、高剂量组和对照组之间差异存在统计学意义。试验组与对照组生殖细胞的凋亡率分别为12.53%,14.93%,29.09%和11.97%,其中高剂量组与对照组之间差异有统计学意义。结论:亚慢性吸入二硫化碳可以对小鼠精子细胞DNA产生损伤。     

胎盘生长因子和脂联素联合检测在AMI中的临床意义

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)患者胎盘生长因子(placental growth factor,PLGF)和脂联素(adiponectin,APN)含量的变化及联合检测的临床意义。方法:采用酶联免疫法测定52例AMI患者和70例健康对照组血清PLGF和血浆APN的水平,采用全自动生化分析仪检测患者血清肌红蛋白(Mb)和肌钙蛋白T(cTnT)。结果:AMI患者在<6h、12h、24h采血,PLGF水平在6h内升高不明显,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);12h开始增高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);24h明显升高,与6h内及对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01);APN水平在6h内即有明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);24h显著降低,与6h内及对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01);经直线相关分析:PLGF水平与Mb、APN无相关性(P>0.05),与cTnT呈正相关(r=0.67,P<0.05);APN与Mb呈负相关(P<0.05)。结论:PLGF及APN分别是AMI发生的独立危险因素,早期联合检测PLGF和APN有利于对AMI早期心肌坏死程度的评估及危险终末事件发生率的预测。     

脑钠素检测在急性心肌梗死患者早期诊断中的临床意义

目的:探讨血浆脑钠素(BNP)对急性心肌梗死(AMI)患者早期诊断的临床意义。方法:采用酶联免疫吸附(ELISA)方法测定AMI患者入院当时及24h的血浆BNP水平,以健康人为对照,比较各组间BNP的差异。结果:AMI组BNP血浆水平在24h内显著增高(1469.40±346.56),与对照组(32.93±0.42)比较差异有显著性意义(P<0.001);AMI组患者入院当时BNP血浆水平(1432.40±335.36)与24h时(1469.40±346.56)相比无显著性差异(P>0.05)。结论:AMI患者的血浆BNP值明显升高,对AMI的早期诊断有重要意义。     

白细胞计数对早期急性心肌梗死的诊断价值

目的:探讨WBC计数在急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)中的早期诊断价值。方法:选择AMI早期就诊患者47例(胸痛时间<2h,肌红蛋白阴性,无其他炎症相关疾病),分别于入院即刻和胸痛发生后4~8h、12~24h采集静脉血,分别检测WBC、C反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白I(cTNI)与肌红蛋白(Mb)。并于出院后3~12个月,跟踪监测WBC 3次,取其平均值作为自身对照。同时检测健康人群WBC和CRP作正常对照。结果:AMI胸痛发作2h内,在Mb阴性时,WBC即开始升高(9.12±2.18)×109/L,显著高于自身对照(6.49±1.09)×109/L和正常对照组(5.97±1.24)×109/L(P<0.01)。但中性粒细胞与自身对照相比差异无统计学意义(P>0.05);CRP与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在Mb和cTNI阳性后WBC和CRP显著升高(P<0.01),在12~24h达峰值,分别为(12.46±5.28)×109/L和(50.9±21.3)×109/L,同时中性粒细胞也显著升高(P<0.01)。结论:AMI发作早期,Mb和cTNI阴性时,WBC即显著升高,因此WBC计数对早期AMI有一定的诊断价值。     

急性心肌梗死患者纤维连接蛋白的测定及其临床意义

目的　检测纤维连接蛋白(Fn)在急性心肌梗死(AMI)患者中的表达,并探讨其临床意义。方法　AMI 组12例,健康对照组13例。以流式细胞仪检测外周血血小板膜上Fn的表达,用酶联免疫法(ELISA)检测血浆Fn的水平。结果　AMI患者血小板膜上Fn表达为67.88±19.55%,高于正常对照组的14.35±5.31%,差异有显著性(P< 0.01);AMI患者血浆Fn水平为515.17±83.85 mg,/L,高于正常对照组的361.54±68.48 mg/L,差异有显著性(P< 0.01)。结论Fn可能参与了AMI患者动脉血栓的形成。     

肺炎支原体感染患儿CD40、CD40L的检测

目的:观察肺炎支原体肺炎患儿急性期外周血CD40、CD40L的变化,进一步探讨其发病机制。方法:采用流式细胞技术检测34例肺炎支原体肺炎患儿急性期外周血CD40、CD40L的表达;对照组为20例健康体检儿童。结果:肺炎支原体肺炎患儿急性期外周血CD40为(5.87±0.80)%,较对照组(4.12±1.06)%高,差异有统计学意义(P<0.05);CD40L为(2.05±0.22)%,较对照组(3.54±0.36)%低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:肺炎支原体肺炎时存在细胞免疫失调和体液免疫失调。     

D-二聚体定量检测判断缺血性心脑血管疾病急性发病情况的临床研究

目的探讨D-二聚体定量检测在判定缺血性心脑血管疾病急性发作时的价值及临床意义。方法选择住院稳定性心绞痛(SAP)患者23例、不稳定性心绞痛(UAP)患者25例,急性心肌梗死(AMI)患者15例,急性短暂性脑缺血发作(TIA)18例,脑梗塞(CI)30例,非血栓性病人30例作为对照组,采用Microfarad-ualbumin金标法动态检测患者静脉血中的D-二聚体含量。结果UAP组(0.74±0.32)mg/L、AMI组急性期(1.81±0.62)mg/L与SAP组(0.31±0.13)mg/L及对照组(0.26±0.12)mg/L比较存在显著差异(P~*、P~Δ<0.01、P~**、P~(ΔΔ)<0.001),SAP组与对照组比较无明显差异。TIA组(0.99±0.41)mg/L,CI组急性期(0~6天)1.02±0.51mg/L与对照组比较存在显著差异(P<0.001)。亚急性期(7~20天)AMI组(1.45±0.72mg/L)、CI组(2.20±0.71mg/L)D-二聚体水平与急性期比较呈进行性增高。AMI组(0.32±0.12mg/L)、CI组(0.32±0.13mg/L)恢复期(1月以上)与对照组比较无明显差异。结论定量检测D-二聚体有助于准确判断缺血性心脑血管疾病患者急性发病情况并为治疗该类疾病和判断预后提供可靠的临床依据。     

急性心肌梗死患者血管内皮细胞损伤标志物的检测

目的:观察急性心肌梗死(Acute Myocardial Infarction,AMI)患者循环内皮细胞(CEC)核DNA改变的特点,检测血浆中血管性血友病因子(Von Willebrand factor,vWF)、血管内皮细胞蛋白C受体(Vascular Endothelial Cell Protein C Rece...     

冠心病患者血清和肽素水平的检测及其临床意义

目的:探讨和肽素(copeptin)与冠心病(CHD)的关系及临床意义。方法:将94例冠状动脉造影患者分为CHD(组71例)和对照组(23例);CHD组又分为稳定型心绞痛(SAP)组(20例)、不稳定型心绞痛(UAP)组(19例)和急性心肌梗死(AMI)组(32例)3个亚组;并根据Gensini积分,将CHD组分为轻度病变组18例,中度病变组24例,重度病变组29例;将AMI亚组分为AMI后并发心力衰竭组19例和AMI后无并发心力衰竭组13例。应用ELISA法测定所有患者血清和肽素水平。结果:CHD组患者血清和肽素水平明显高于对照组(P0.01);AMI组和UAP组和肽素水平均明显高于对照组、SAP组(P0.01);CHD重度病变组血清和肽素水平均高于对照组和CHD轻度病变组、中度病变组(P0.01);AMI后并发心力衰竭组的和肽素水平明显高于AMI后无并发心力衰竭组(P0.01)。结论:和肽素参与冠心病患者机体应激反应,反映冠心病病情发展的严重程度;和肽素与冠状动脉病变程度存在相关,对于冠脉事件的发生具有预警意义。     

老年冠心病患者外周血血友病因子和内皮细胞的检测及其相关性分析

目的:探讨老年冠心病(CAD)患者血管内皮细胞受损与血友病因子(vWF)的关系。方法:选择27例老年CAD患者和24例正常老年人(NC组),测定其循环内皮细胞(CEC)数、血浆血管性血友病因子(vWF)的水平。结果:老年CAD患者CEC(9.30±4.11)和血浆vWF含量(196.16±32.34)明显高于NC组(2.52±0.91,117.77±18.99,P<0.01);且CEC数量与vWF水平呈正相关(r=0.823,P=0.0001)。结论:老年CAD患者血管内皮的损伤与vWF相关。     

培哚普利对急性心肌梗死伴2型糖尿病患者内皮祖细胞动员及预后的影响

目的观察应用培哚普利治疗急性心肌梗死(AMI)伴2型糖尿病(T2DM)患者的预后,血浆血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子(SDF-1α)水平,骨髓内皮祖细胞(EPC)动员情况。方法将20例AMI伴T2DM患者随机分为培哚普利组(10例,予口服培哚普利4mg/d)及对照组(10例,未予培哚普利)。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,应用流式细胞仪检测AMI不同时间点[急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)前,PCI后1、3、5、7、14和28d]外周静脉血中CD45-/low+/CD34+/CD133+/KDR+早期EPC数量。采用酶联免疫吸附法检测血浆中VEGF、SDF-1α及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果培哚普利组在PCI后7d的外周静脉血中EPC数量为(211±78)个/1×106,显著高于对照组的(147±57)个/1×106(P<0.05),且在PCI后5d较PCI前显著升高(P<0.05)。培哚普利组在PCI后5、7d的血浆中VEGF水平[(172±72)、(183±63)ng/L]均显著高于同时间点的对照组[分别为(105±63)、(77±37)ng/L,P值均<0.05]。培哚普利组在PCI后7d(高峰点)的SDF-1α水平为(3296±680)ng/L,显著高于同时间点的对照组[(2115±570)ng/L,P<0.05]。培哚普利组在PCI后3d(高峰点)的hs-CRP水平为(26.2±6.5)mg/L,显著低于同时间点的对照组[(33.8±10.6)mg/L,P<0.05]。随访6个月时培哚普利组的左心室射血分数(LVEF)为0.491±0.059,显著高于入院时的0.469±0.051(P<0.05);对照组LVEF分别为0.482±0.054、0.479±0.052,差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用培哚普利治疗AMI伴T2DM患者,可改善其组织缺血后SDF-1α、VEGF-EPC动员通路障碍,并改善其预后。     

煤焦沥青烟提取物致大鼠肺泡巨噬细胞DNA损伤作用

目的　研究煤焦沥青烟提取物致大鼠肺泡巨噬细胞 (AM )DNA损伤作用。方法　将大鼠肺泡巨噬细胞分 4组与不同浓度的煤焦沥青烟提取物共育 1h后 ,采用单细胞凝胶电泳技术检测大鼠肺泡巨噬细胞DNA断裂情况。结果　单细胞凝胶电泳后 ,对照组肺泡巨噬细胞无明显细胞拖尾现象 ,而经不同浓度的煤焦沥青烟提取物处理后 ,AM细胞有明显的拖尾现象 ,且随煤焦沥青烟提取物浓度增加 ,AM细胞彗星率上升 ,各组间差异有高度显著性 (P <0 .0 0 1) ,而且损伤的严重程度与作用物浓度呈相关关系 (Spearman相关系数为 0 .6 73,P <0 .0 0 1)。结论　煤焦沥青烟提取物作用于大鼠肺泡巨噬细胞可引起DNA链的断裂 ,单细胞凝胶电泳适于检测肺泡巨噬细胞的DNA链断裂     

脑梗死患者血液中DNA损伤的观察

目的: 应用碱性单细胞凝胶电泳(SCGE)对脑梗死患者急性期、恢复期血液中单个核细胞的DNA损伤与修复情况进行检测,判断脑梗死患者DNA损伤水平与病程的关系. 方法: 急性脑梗死患者24例,分别在发病5 d内及25～28 d抽取空腹静脉血3 mL, 1.5 mL用于SCGE检测,在荧光显微镜下观察单个核细胞的彗星率并分析慧尾DNA的含量. 1.5 mL分离血清,-20℃保存,用于神经元特异性烯醇化酶(NSE)测定,同时选取年龄、性别匹配的健康者20例作正常对照. 结果:脑梗死患者急性期血液中大多数单个核细胞出现彗星样改变,恢复期患者血液中彗星率下降,而同龄健康对照者血液中大多数单个核细胞表现为圆形,仅少数表现为略带拖尾的荧光改变. 急性期脑梗死患者NSE含量较对照组显著增加(P<0.01),而恢复期脑梗死患者NSE含量与对照组无显著差别. 结论: 自由基及DNA损伤修复在脑梗死的发生、发展及病理转归中起重要作用.     

Genistein对受辐射L-02人肝细胞增殖和DNA损伤的影响

[摘要] 目的 探讨金雀异黄素GEN（Genistein）对L-02人肝细胞DNA辐射损伤的防护作用。方法 实验分为正常对照组（N）,不同浓度GEN处理组（G）、单纯辐照组（R）和不同浓度GEN +辐照处理组（G+R）。L-02细胞分别用1,5,10,20μM GEN处理24h后,接受不同剂量X射线（4,6,8,12Gy）照射,继续培养48 h后利用MTT法检测GEN对细胞增殖率的影响,以确定有效辐射剂量及有效药物作用浓度;L-02细胞接受8Gy（300cGy/min）X射线照射后,利用单细胞凝胶电泳检测不同浓度GEN对细胞DNA辐射损伤的保护效果。结果 与N组相比,X射线剂量≧6Gy（300cGy/min）时,细胞增殖率随X射线剂量增加而显著降低（P<0.05）;1μM,5μM,10μM GEN处理细胞后增殖率随干预剂量增加而升高,5μM GEN处理后增殖率显著高于N组（P<0.05）; 照射剂量为6、8及12Gy时,5μＭGEN组细胞增殖率显著高于未处理组（P<0.05）。DNA损伤检测方面,N组和未照射各G组细胞未见拖尾,经8GyX射线照射后24h各组彗星发生率均小于1%,各组间彗星尾长无显著差异;照后48h, 单纯辐射组彗星发生率达到24.2%,彗星尾长达283.6±22.3μm,与单纯照射组相比,各浓度GEN组的彗星发生率和彗星尾长均显著降低（P<0.05）;照后72h,单纯辐射组彗星发生率较48h显著下降（P<0.05）,尾长显著缩短（P<0.05）,1μM、5μMGEN处理组彗星发生率和尾长仍显著低于单纯辐照组（P<0.05）,但10μM及20μMGEN组彗星发生率显著升高（P<0.05）,尾长显著增长（P<0.05）。 结论 低浓度（1μＭ、5μＭ）GEN能有效减轻X射线对L-02人肝细胞的DNA辐射损伤。     

光气对小鼠肺上皮细胞和内皮细胞凋亡的诱导作用

OBJECTIVE: To study apoptosis of pulmonary epithelial cells and endothelial cells in mice with pulmonary edema induced by phosgene exposure. METHODS: Thirty-two mice were divided into normal group and phosgene group with 16 mice in each group. The mice in phosgene group were exposed to phosgene (11.9 mg/L) for 5 min and those in the control group to air. Four hours after exposure, alveolar type II cells were isolated and cultured to observe their apoptosis by electron microscope and flow cytometry. The lung tissues were also taken for DNA gel electrophoresis and TUNEL assay. RESULTS: Apoptotic bodies were observed in alveolar type II cells under electron microscope in phosgene group, which had higher cell apoptosis rate than the control group [(40.26+/-7.74)% vs (1.58+/-1.01)%, P<0.001] as determined by flow cytometry. Ladder-like DNA fragmentation pattern was observed in DNA gel electrophoresis in phosgene group with apoptosis of the pulmonary epithelial and endothelial cells observed by TUNEL. CONCLUSIONS: Phosgene can induce pulmonary epithelial and endothelial cell apoptosis in mice, suggesting that the mechanism of phosgene-induced pulmonary edema involves apoptosis of the lung cells.     

光气对小鼠肺上皮细胞和内皮细胞凋亡的诱导作用

目的 研究光气对肺水肿小鼠肺上皮细胞和内皮细胞凋亡的诱导作用。方法 将32只BALB/C小鼠随机分成正常对照组(16只)和染毒组(16只)2组。正常对照组小鼠以空气为对照,染毒组小鼠给予11.9mg/L剂量的光气,时间为5min。染毒后4h,取小鼠分离、培养肺Ⅱ型细胞用于电镜观察和流式细胞仪检测细胞凋亡,取小鼠肺脏进行DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL染色检测肺组织凋亡。结果 光气染毒肺水肿小鼠电镜下原代肺Ⅱ型细胞出现凋亡小体;流式细胞术显示肺Ⅱ型细胞凋亡率(40.26±7.74)显著高于正常对照组(1.58±1.01,P<0.001);DNA琼脂糖凝胶电泳出现"DNA梯状改变";TUNEL染色检测到肺上皮细胞和血管内皮细胞凋亡。结论 光气染毒可造成肺水肿小鼠肺脏细胞发生凋亡,提示光气造成小鼠肺水肿的发生机制存在细胞凋亡的诱导作用。