抑癌灵抗肿瘤作用的实验研究

目的:探讨抑癌灵抗肿瘤作用及其作用机制.方法:采用动物体内抑瘤实验、病理学形态学观察该药在体内对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用;采用血清药理学实验观察该药在体外对MGC-803胃癌细胞的抗增殖作用.结果:抑癌灵对小鼠S180实体瘤有明显的抑制作用;3剂量组抑制率分别为15%,35%和54%.病理检查结果显示实验组与对照组相比,组织坏死范围、淋巴细胞和中性白细胞浸润数量及血管反应数量明显增多.血清药理学实验结果表明,灌服抑癌灵的含药血清对MGC-803胃癌细胞株生长有明显抑制作用,与阴性对照组相比有显著差异(P＜0.01).结论:抑癌灵对小鼠S180肉瘤有抑瘤作用,其抑瘤作用可能是通过淋巴细胞浸润和抑制血管生成来实现;灌服抑癌灵含药血清对MGC-803胃癌细胞株生长有抑制作用.     

补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notch1/Jagged1信号通路的影响

目的:通过体外细胞实验研究补肾抑瘤汤对前列腺癌细胞增殖的干预作用及其机制。方法:首先按照血清药理学方法,给予SD大鼠连续灌胃用药7 d,取血制备空白血清和补肾抑瘤汤含药血清;然后以人前列腺癌细胞PC-3为模型研究补肾抑瘤汤含药血清对前列腺癌细胞增殖及Notch1/Jagged1信号通路的影响,噻唑蓝(MTT)比色法检测补肾抑瘤汤含药血清(2.5%,5%,10%,15%)处理PC-3细胞后不同时间点(12,24,36 h)的细胞增殖情况,分别应用逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分析补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notch1,Jagged1 mRNA和蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,经补肾抑瘤汤含药血清处理12,24,36 h后,PC-3细胞增殖受到了不同程度的抑制,其中以36 h的抑制作用最为显著(P0.01);补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notch1,Jagged1 mRNA和蛋白表达均有抑制作用,尤其是补肾抑瘤汤10%,15%含药血清组抑制效果明显(P0.05,P0.01)。结论:补肾抑瘤汤含药血清能明显抑制PC-3细胞增殖,作用可能与调控Notch1/Jagged1表达有一定相关性。     

蒿芩清胆加减方含药血清诱导Lewis肺癌细胞分化研究

目的:观察蒿芩清胆加减方含药血清对Lewis肺癌细胞的分化诱导作用,并初步探索其作用机制.方法:蒿芩清胆加减方含药血清,体外培养Lewis肺癌细胞,通过不同浓度血清作用于细胞进行干预.观察给药后细胞形态学变化.用MTT抑瘤实验,琥珀酸脱氢酶(SDH),乳酸脱氢酶(LDH)的测定,细胞周期的测定,观察细胞分化的情况.结果:光镜下血清组培养瓶中贴壁细胞数量呈减少趋势,以高剂量组细胞形态和数量改变趋势明显.MTT比色法显示含药血清浓度越高,抑制作用越强.SDH活性显示蒿芩清胆加减方血清组系使Lewis肺癌细胞内的SDH活性明显上升,并以高剂量组作用最为明显.LDH活性显示蒿芩清胆加减方血清高剂量组降低细胞内LDH活性最明显.结论:蒿芩清胆加减方含药血清作用于Lewis肺癌细胞株后,细胞具有向正常细胞生理状态分化成熟的趋势.     

益肺清化颗粒对Lewis肺癌小鼠血管内皮细胞生长因子及其受体的影响

目的观察益肺清化颗粒对LewiS肺癌荷瘤小鼠瘤体中的血管内皮细胞生长因子（VEGF）及其受体（KDR）含量的影响,以期阐明其抑瘤的作用机制。方法80只C57BL／6近交系小鼠右腋皮下接种LewiS瘤细胞悬液0．2mL（细胞浓度为1×10^7个／mL）,随机分为空白组、对照组、益肺清化颗粒低剂量组、益肺清化颗粒中剂量组、益肺清化颗粒高剂量组、吉非替尼组、吉非替尼＋益肺清化颗粒中剂量组、环磷酰胺（CTX）组。每组10只。实验第2日开始给药,除CTX组第3日及第7日给药2次外,其余各组均给药14d。实验第15日处死小鼠,取瘤,以蛋白质印迹法（WesternB10t）检测瘤组织VEGF及其受体KDR的表达。结果益肺清化颗粒低、中剂量组VEGF表达低于对照组（P〈0．01）,吉非替尼组VEGF表达低于对照组（P〈0．05）,益肺清化颗粒高剂量组、吉非替尼＋益肺清化颗粒中剂量组、CTX组VEGF表达低于对照组（P〈0．001）;益肺清化颗粒低、中、高剂量组,吉非替尼组及CTX组KDR表达与对照组比较均有所降低（P〈0．05）。结论益肺清化颗粒可降低VEGF及其受体KDR的表达,进而发挥抑瘤作用。     

益肺饮含药血清对肺癌A549细胞增殖凋亡的影响

目的:研究中药复方益肺饮不同浓度含药血清对肺癌A549细胞增殖凋亡的影响。方法:将SD小鼠分为2组,分别灌胃益肺饮和0. 9%氯化钠注射液,获得5%、10%、15%、20%的益肺饮含药血清和10%无药血清。A549细胞进行培养后分为实验组、对照组和空白对照组,实验组加入不同浓度的含药血清,对照组加入10%无药血清,空白对照组加入10%胎牛血清。采用CCK-8法观察各组血清对A549细胞的增殖影响;采用流式细胞仪检测不同浓度含药血清对A549细胞凋亡的影响。结果:与空白对照组相比,各浓度益肺饮含药血清对A549细胞均有明显的增殖抑制作用(P 0. 05),其抑制率随药物浓度递增而增强,5%含药血清组与20%含药血清组相比,差异有统计学意义(P 0. 05)。流式细胞术检测结果表明,不同浓度下含药血清组凋亡率明显优于对照组及空白对照组(P 0. 05);不同浓度含药血清组组内比较,5%、10%、15%各浓度之间两两比较差异有统计学意义(P 0. 05),但15%与20%浓度组比较,差异无统计学意义(P 0. 05)。结论:益肺饮含药血清对肺癌A549细胞具有明显的增殖抑制、诱导凋亡的作用,并具有一定的浓度依赖性。     

扶正合剂含药血清对肺癌细胞生长及耐药基因表达的影响

目的：探讨扶正合剂对肺癌细胞生长及耐药基因表达的作用。方法：选择人肺腺癌细胞株A549／DDP为模型，采用血清药理学及MTT、免疫组化及流式细胞法，进行肺癌细胞生长率、凋亡率及耐药基因LRP的表达。结果：扶正合剂荷瘤动物含药血清能够显著提高DDP抑制肺癌细胞生长的作用，促进肿瘤细胞的凋亡，与0％含药血清比较，差别有统计学意义（P〈0．05）；与0％含药血清比较，其对肺癌细胞A549／DDP肺耐药蛋白LPR表达有显著的抑制作用（P〈0．01），而正常兔血清对LRP的表达差别无统计学意义（P〉0．05）。结论：扶正合剂药物血清有抑制肺癌细胞生长，促进肺癌细胞凋亡，抑制肺癌细胞耐药基因表达的作用，正常动物含药血清无此作用，二者有显著性差异。     

肺瘤平膏通过PI3K/Akt通路抑制肺癌细胞上清诱导的骨髓源性内皮祖细胞管腔形成活性研究

目的探讨肺瘤平膏对肺癌细胞培养上清诱导的骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)增殖、管腔形成能力以及PI3K/AKT信号通路的影响。方法采用密度梯度离心法分离SD大鼠骨髓单个核细胞,并进行体外诱导培养,摄取Dil-Ac-LDL与结合FITCUEA-1双染实验、免疫荧光化学鉴定其表面抗原CD133与血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)等方法对其进行鉴定。分别设置浓度效应组(空白对照组、肺瘤平膏高剂量组和低剂量组大鼠血清分别处理)和时间效应组(肺瘤平膏高剂量组大鼠含药血清分别处理0、12、24、48 h)。利用MTT法、Matrigel法检测EPCs增殖和管腔形成能力。应用Western blot法检测各组EPCs中NF-κB、p-Akt及PI3K p85蛋白的表达量。结果骨髓单个核细胞培养7 d后,多呈圆形、短梭形等形态,贴壁生长,且95%以上的细胞呈Dil-Ac-LDL和FITC-UEA-1双染阳性,且同时阳性表达CD133和VEGFR2。肺瘤平膏高剂量组大鼠含药血清处理EPCs 48 h后,细胞增殖率明显低于空白对照组(P<0.01),且肺瘤平膏对EPCs增殖的抑制作用具有时间依赖性和剂量依赖性。经Matirgel实验,肺瘤平膏高剂量组大鼠含药血清作用48 h后EPCs管腔形成数量也少于空白对照组(P<0.05)。经Western blot法检测,肺瘤平膏高剂量组EPCs中NF-κB、p-Akt及PI3K p85蛋白表达量低于空白对照组(P<0.01)。结论肺瘤平膏含药上清可抑制A549肺癌细胞培养上清诱导的骨髓源性EPCs增殖和管腔形成活性,PI3K/AKT信号通路可能在其中发挥着一定作用。     

女贞子对HepG2肝癌细胞相关基因去甲基化作用的研究

目的:探讨中药女贞子含药血清对肝癌细胞Hep G2的癌基因BCL-2、C-MYC甲基化作用和抑癌基因p16的去甲基化作用。方法:制备女贞子含药血清,体外培养肝癌细胞系Hep G2,MTS法检测含药血清对肝癌细胞生长的抑制作用,甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR)法检测BCL-2、C-MYC和p16基因的甲基化情况,q RT-PCR法检测BCL-2、C-MYC和p16基因的m RNA表达情况。结果:MTS法结果显示,2.5%、5%、10%、20%浓度女贞子含药血清在24、36、48 h作用时间下,均有一定抑制肝癌细胞生长的作用,浓度在2.5%和作用时间为48 h时抑癌效果最好。MSP法结果显示,与空白含药血清组相比,女贞子含药血清C-myc和Bcl-2基因的甲基化和非甲基化条带都均未有显著的变化;P16基因的非甲基化条带也无显著差异,但是女贞子给药血清组相对于空白血清组的P16甲基化条带强度减弱。RT-PCR法结果显示女贞子含药血清显著促进C-MYC、BCL-2和P16基因m RNA的水平(P0.01或P0.05)。结论:女贞子含药血清具有抑制肝癌细胞增殖的作用,并在一定程度上可能逆转p16基因的高甲基化作用。     

复方苦参注射液对肺癌和肝癌细胞抑瘤作用研究

目的 通过观察复方苦参注射液对肺癌LAC、Lewis细胞,肝癌Hep、H22肿瘤细胞体内、外的抑瘤效果,探讨其在治疗恶性肿瘤中的药理作用.方法 采用MTT法检测复方苦参注射液对肺癌LAC细胞的体外抑制率;以实体瘤模型观察该药对Lewis肿瘤细胞和H22肿瘤细胞的抑瘤作用;以腹水瘤模型观察其对肝癌HEP肿瘤细胞生长的影响.结果 复方苦参注射液对LAC细胞生长的抑制与含药血清的浓度及作用时间呈一定的相关性;复方苦参注射液高、中、低剂量组对Lewis肺癌的抑瘤率分别为46%、32.8%和22.3%(P＜0.01),对H22肿瘤细胞的抑瘤率分别为37.9%、30.6%和24.2%(P＜0.01);对Hep腹水型肝癌的抑瘤率分别为34.8%、17.5%和15.6%(P＜0.01),与血清对照组比较,均具有显著性差异.结论 复方苦参注射液对LAC细胞体外生长具有抑制作用;对实体瘤Lewis肺癌、H22肿瘤的生长均能产生明显的抑制作用;对Hep肝腹水癌细胞的生长亦有一定的抑制作用.     

噻唑蓝法检测半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的抑制作用

目的观察半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测PG细胞增殖的状况。结果不同浓度的半枝莲含药血清对肺癌细胞PG增殖有抑制作用,且呈明显的时效和量效关系。结论半枝莲含药血清在体外可有效抑制肺癌细胞PG的生长,具有一定的细胞毒作用。     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据,泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究,医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合,以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

往来寒热证58例辨证论治探讨

收集我院门诊自2000年10月至2003年9月接诊的往来寒热证患者58例,实验室检查排除疟疾(血涂片均未找见疟原虫),分别从少阳辨证论治33例,从膜原辨证论治25例,疗效满意。     

《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变

目的:探讨《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变。结果:1963年版《中华人民共和国药典》中石斛来源为兰科石斛属Dendrobium植物的新鲜或干燥茎;1977—2000年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、环草石斛、马鞭石斛、黄草石斛或铁皮石斛;2005年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、铁皮石斛或马鞭石斛;2010年版《中华人民共和国药典》石斛的来源为金钗石斛、鼓槌石斛或流苏石斛,铁皮石斛也从石斛项下都单列出来。讨论:石斛药材基源的变化、铁皮石斛的单列体现出石斛用药的科学性。但铁皮石斛与石斛的性味、功效一致,值得商榷;DNA条形码、分子标记技术等新方法可以应用到石斛药材的鉴别中。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。     

姜黄根茎不同部位的理化指标分析

目的：研究姜黄根茎不同部位外在物理性状和内在化学成分的差异,为姜黄药材的等级划分提供数据基础。方法：在姜黄道地产区收集样品,每份样品按母姜、子姜一级、子姜二级进行分类,分别测定根茎的长度、宽度、厚度、质量、颜色值［明亮度（L*）、红绿度（a*）和黄蓝度（b*）］及双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素、挥发油含量。结果：不同部位姜黄根茎的长度、宽度、厚度、质量、折干率差异较大,其中宽度、厚度、质量在鲜品和干品间差异均有统计学意义;子姜二级的折干率显著低于母姜与子姜一级。姜黄不同部位颜色值表现出相同的变化趋势,姜黄鲜品断面颜色值a*的变异系数最大,颜色值b*次之,颜色值L*最小,姜黄干品粉末颜色值b*的变异系数最大,颜色值L*、a*变异系数较小。姜黄不同部位的姜黄素类成分含量存在差异,子姜一级的双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素、姜黄素含量均高于母姜和子姜二级。结论：综合以上指标,姜黄子姜一级的理化品质最佳。     

咳嗽六经辨治初探

六经皆有咳嗽,寒热皆可致咳,治疗上不可拘于一理一方,当穷究其机,辨证施治,方能事半功倍。以六经辨证为纲,分析《伤寒杂病论》对咳嗽的有关论述,以期提高咳嗽的临床疗效。