北京地区幼儿血细胞参数范围的调查

目的调查北京地区1至3岁健康儿童指血血常规各项参数的范围，为临床诊断提供参考。方法用日本SySmexXS-800i全自动五分类血细胞分析仪检测1407名1至3岁健康儿童手指血常规，得出12项血细胞参数，将这些结果进行统计分析，并与文献进行比较。结果幼儿末梢血参考范围白细胞（4．7～10．1）×109／L，红细胞（4．0—5．6）×1012／L，血红蛋白109—142g／L，红细胞比积31．9％-43．3％，平均血红蛋白含量24．7～30．7pg，平均血红蛋白浓度330—365g／L，平均红细胞体积男68—86．5fL，女72～88．7fL，红细胞平均分布宽度男10．5％-17．5％，女10．9％-16．3％，血小板数（147—466）×109／L，平均血小板体积5．3—11．0fL，血小板平均分布宽度10．6—19．8fL，血小板比积0．12％～0．36％。结论儿童血常规参考范围与年龄、性别及地域等因素有关，幼儿需建立独立的血常规参考范围。     

强效免疫细胞疗法治癌与防癌的临床应用

目的探讨强效粒细胞及扩增强效粒细胞的灭癌活性。方法通过改良灭癌活性检测法,筛选强效免疫细胞,应用人类白细胞抗原（HLA）抗体检测法Antigen Tray—LATM和LATI240检测HLA抗体,PCH—SSP方法检测HLAI、Ⅱ类抗原,阳性者弃用。选取的强效粒细胞少量多次周围静脉输入。结果强效粒细胞及扩增强效粒细胞的灭癌活性均强于自然杀伤（NK）细胞、淋巴因子激活杀伤（LAK）细胞、肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）的灭癌活性,且其总有效率明显高于NK细胞、LAK细胞及TIL[55．1％（932／1691）、55．3％（178／322）比35．5％（11／31）、33．3％（12／36）、40．0％（14／35）,P〈0．05],10年生存率及生活质量改善均突出。结论应用免疫细胞的天然灭癌活性治疗肿瘤的人体强效粒细胞治疗是肿瘤生物治疗的核心疗法,该法所选取细胞的灭癌活性高低决定疗效,而强效免疫细胞（粒细胞）显示了最高的灭癌活性。     

全自动尿沉渣分析仪对胸腔积液中红细胞和白细胞的检测价值

目的：探讨全自动尿沉渣分析仪对胸腔积液中红细胞和白细胞的检测价值。方法使用UF-1000i全自动尿沉渣分析仪对208份不同类型的胸腔积液进行红细胞和白细胞计数（仪器法）,并与显微镜手工计数（手工法）进行比对。结果以手工法结果将标本按细胞数量分为三个组别,分别是A组细胞＜200×10^6个/L,B组细胞（200～1000）×106个/L,C组细胞（1000～3000）×10^6个/L。仪器法对胸腔积液中红细胞计数,不受胸腔积液中有无分类不明细胞（团）影响,与手工法差异无统计学意义（无分类不明细胞的A、B、C三组t值分别是0．189、0．249、0．246,均P＞0．05;含分类不明细胞（团）的B、C组t值分别是0．229、0．201,均P＞0．05）。但仪器法对白细胞计数结果受胸腔积液中分类不明细胞（团）影响,A、B、C三组检测结果均假性升高,与手工法差异有统计学意义（三组t值分别是3．544、3．098、1．986,均P＜0．05）,当胸腔积液中无分类不明细胞时,其白细胞计数结果与手工法差异无统计学意义（ A、B、C三组t值分别是0．883、0．140、0．182,均P＞0．05）。结论 UF-1000i全自动尿沉渣分析仪对胸腔积液中白细胞计数有局限性,必须结合镜检进行报告。     

哮喘患者诱导痰嗜酸细胞趋化因子的改变及其意义

目的探讨嗜酸细胞趋化因子（嗜酸细胞趋化因子）在嗜酸细胞性气道炎症和气流阻塞发生中的作用。方法收集支气管哮喘（A组）急性发作期患者45例和健康对照者（B组）25例,分别给予肺功能检测和痰诱导检查。用酶联免疫吸附法（EHSA）测定诱导痰上清液中嗜酸细胞趋化因子浓度。结果A组诱导痰嗜酸细胞占白细胞百分比（EOS／Leu％）与B组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;A组嗜酸细胞趋化因子浓度与B组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。A组EOS／Leu％、嗜酸细胞趋化因子浓度与一秒钟用力呼气容积占预计值百分比（FEVI％）均呈负相关;A组嗜酸细胞趋化因子浓度与EOS／Leu％呈正相关。结论嗜酸细胞趋化因子可能通过对嗜酸细胞（EOS）的选择性趋化作用使其释放一系列炎性介质参与了嗜酸细胞性气道炎症和气流阻塞的发生机制。     

慢性髓性白血病的反义寡核苷酸治疗

慢性髓性白血病（Chronic myeloid leukemia,CML）是造血干细胞的疾患,表现为在外周血中含有大量未成熟的粒细胞、嗜碱性细胞、血小板以及能引起脾大的白细胞减少症。发病率为（1～2）／100000,占成年人白血病的15％左右。     

乳腺癌辅助化疗的同时使用粒细胞集落刺激因子可致急性髓性白血病（AML）或骨髓增生异常综合征（MDS）

应用Cox比例危险模型对1991～1999年年龄〉65岁的Ⅰ～Ⅲ期乳腺癌患者在化疗的同时使用粒细胞集落刺激因子（G—CSF）或粒细胞-巨嗜细胞集落刺激因子（GM—CSF），发生AML或MDS的危险比率进行了评估。在5510例接受化疗的患者中，有906例（16％）接受G—CSF或GM-CSF，64例（1．16％）在癌症复发前确诊患有AML或MDS。     

前列腺增生伴急慢性炎症特殊表现1例

患者，男，46岁，主诉排尿困难5年，突然不能排尿1d，无发热。血常规示：白细胞计数9．3×10^9／L[正常参考值（4．0～10．0）×10^9／L]，中性粒细胞77．6％（正常参考值50．0％～75．0％），淋巴细胞17．4％（正常参考值20．0％～40．0％）。     

咳喘宁对支气管哮喘患者外周血白细胞计数的影响

目的观察咳喘宁对支气管哮喘患者外周血白细胞计数的影响。方法采用随机临床对照观察方法，咳喘宁治疗152例为治疗组，以桂龙咳喘宁胶囊治疗146例为对照组，观察两组患者治疗前后症状评分，嗜酸粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞计数的变化，并比较两组的临床疗效。结果与治疗前比较，治疗后两组白天及夜间哮喘症状评分、嗜酸粒细胞计数明显下降（P〈0．01），淋巴细胞、中性粒细胞计数差异均无统计学意义（P〉0．05）；治疗组治疗后白天及夜间哮喘症状评分低于对照组（P〈0．01），临床总有效率为98．6％，明显优于对照组89．0％（P〈0．01）。结论咳喘宁可减少嗜酸粒细胞计数，改善慢性炎症反应，疗效优于桂龙咳喘宁胶囊。     

银杏苦内酯对过敏性豚鼠气道内低密度嗜酸性粒细胞增多的调制作用

用卵蛋白吸入诱导豚鼠哮喘动物模型（哮喘组），然后，进行支气管肺泡灌洗，分析支气管肺泡灌洗细胞学改变。哮喘组支气管肺泡灌洗液中的细胞总数、嗜酸性粒细胞绝对计数及低密度嗜酸性粒细胞比例均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１）。哮喘动物模型在吸入抗原激发之前，用血小板活化因子特异性拮抗剂银杏苦内酯（ＢＮ５２０２１）预处理后，支气管肺泡灌洗液中细胞总数、分类和嗜酸性粒细胞数量均与哮喘组差异无显著性。但低密度嗜酸性粒细胞比例却显著降低（Ｐ＜０．０５）。用地塞米松预处理动物模型（激素组）后，支气管肺泡灌洗液中的细胞总数、嗜酸性粒细胞数、细胞分类及低密度嗜酸性粒细胞比例均降至正常对照组水平。结果表明：银杏苦内酯能显著减少哮喘动物气道内“活化”状态的低密度嗜酸性粒细胞，可能是一种有用的哮喘抗炎药物。     

肺炎支原体感染与小儿咳嗽变异性哮喘相关性与探讨

目的探讨肺炎支原体感染在小儿咳嗽变异性哮喘发病中的相关性。方法选择212例咳嗽变异性哮喘患儿为观察组,180例反复上呼吸道感染患儿为对照组,检测血清肺炎支原体IgM抗体、外周血嗜酸性粒细胞计数和血清总IsE水平,比较两组患儿肺炎支原体IgM抗体阳性率及肺炎支原体IgM抗体阳性患儿外周血嗜酸性粒细胞计数和血清总IgE水平。结果观察组肺炎支原体IgM抗体阳性率为35．8％（76／212）,对照组是14．4％（26／180）,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。两组患儿5～12岁组血清肺炎支原体IgM抗体阳性率较1—5岁组高（P〈0．05）。观察组肺炎支原体IgM抗体阳性患儿的血清总IgE水平和外周血嗜酸性粒细胞计数均明显高于对照组患儿,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论肺炎支原体是小儿咳嗽变异性哮喘发生的危险因素,肺炎支原体容易诱发咳嗽变异性哮喘,两者关系密切。     

人参总甙及单体对脐血CD34+细胞体外增殖及分化的影响

目的：探讨人参总甙、人参皂甙单体对脐血CD34^ 细胞体外增殖及分化的影响。方法：用MethoCult^TM H4435半固体培养基加入不同浓度的人参总皂甙(GS)、Rgl、Rbl，计数CFU—E、BFU—E、CFU—GM集落。结果：GS、人参皂甙单体Rg1、Rb1具有刺激脐血CD34^ 细胞集落形成的作用，人参皂甙单体的作用优于GS。不同浓度的人参皂甙对脐血CD34^ 细胞集落刺激不同，但其集落形成能力明显高于对照组。GS的最佳浓度为50mg／L，Rg1和Rb1最佳浓度为5mg/L。高浓度的GS、Rgl、Rb1集落形成能力下降，但并不显示抑制作用。结论：人参总甙、人参皂甙单体能促进造血干或祖细胞增殖，并且能诱导定向分化，具有类似生长因子和协同生长因子作用。     

EGFR纳米抗体抑制雌激素依赖的人子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖与迁移

纳米抗体是骆驼来源的一种轻链缺失的抗体,具有与单克隆抗体相似的抗原结合特异性和亲和力,此外还具有分子量小、稳定性好、易于制备等优点,因而具有巨大的生物医药应用价值。本研究利用基因工程技术在大肠杆菌中成功制备出了高纯度的EGFR纳米抗体(antiEGFRnano)。CCK-8法检测细胞增殖及迁移实验(细胞划痕实验和Transwell法检测)证明,重组的EGFR纳米抗体具有显著的抑制子宫内膜癌细胞增殖及迁移的活性,这为靶向EGFR治疗子宫内膜癌提供了一种全新的思路和方法。     

大鼠肝实质及非实质细胞分离和质量检测

目的　探索分离肝实质细胞及非实质细胞的合理条件。方法　应用胶原酶 /蛋白酶E消化分离和低速离心技术 ,以细胞活率、细胞产量和细胞纯度等指标检测细胞质量。结果　在 37℃ ,0 5g·L-1的胶原酶作用 30min ,80 0r·min-1离心条件下 ,肝实质细胞产量 (98× 10 9± 4× 10 9·L-1)、纯度 (97%± 2 % )和活率 (>90 % )最好。胶原酶和蛋白酶E合用 ,肝非实质细胞产量最高 (2 8 6× 10 9± 3 7× 10 9·L-1) ,Kupffer细胞纯度合理 (16 0 %± 3 5 % ) ,且Kupffer细胞含量符合体内正常分布。结论　本实验方法分离细胞对于进一步研究肝实质 ,尤其肝非实质细胞功能有实际意义。     

新化合物D261抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖及其作用机制

<正>肺癌是当今恶性肿瘤死亡率最高的癌症。早期肺癌主要以手术治疗为主,并辅以放疗化疗。但是化疗药物毒副作用大,且抗药性在一些肿瘤靶向性药物中逐渐显现。因此,亟需新的抗肿瘤药物。天然产物是小分子新药的主要来源。我们在对天然小分子化合物的筛选过程中发现D261(从固体发酵物中提取,纯度大于95%)具有潜在的抗肿瘤活性,且对非小细胞肺癌的抑制作用最显著。因此,本文对D261影响非小细胞肺癌NCI-H460及其相关机制作了初步     

四丁基丙二胺对人MG63骨髓瘤细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响

目的分析新多胺类似物四丁基丙二胺(tetrabutylpropanediamine,TBP)对人骨髓瘤MG63细胞生长的影响及其机制。方法 MTT法用于分析细胞增殖,流式细胞分析用于细胞周期和凋亡细胞鉴定,琼脂糖凝胶电泳用于分析DNA片段化,Western blot用于分析细胞凋亡相关蛋白的表达水平,Transwell技术用于分析细胞的迁移能力。结果TBP明显抑制MG63细胞的增殖和迁移能力,抑制效应呈时间和剂量依赖性。流式细胞分析发现,TBP干扰细胞周期,导致G1和G2期细胞比例升高,但S期细胞比例明显下降,同时凋亡细胞数量大幅增加。TBP处理后,细胞染色体DNA出现凋亡细胞典型的DNA片段化现象,细胞质中促凋亡蛋白Bax和细胞色素C含量明显升高。结论 TBP具有抑制人骨髓瘤MG63细胞增殖的药理活性,其机制与抑制细胞周期和诱导细胞凋亡有关,提示TBP具有用于临床骨髓瘤治疗的潜在价值。     

杨梅酮对人肺腺癌A549细胞凋亡和细胞周期的影响

目的检测杨梅酮对体外人肺腺癌细胞A549细胞凋亡和细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪分别检测各组的细胞早期凋亡率和细胞周期百分率。结果杨梅酮能显著增加A549细胞早期凋亡率和G0/G1期的细胞比例,并且细胞凋亡率与杨梅酮浓度具有较好的量效关系。结论杨梅酮能显著增加体外人肺腺癌细胞A549细胞早期凋亡率,并可使A549细胞周期阻滞在G0/G1期。     

白细胞介素－1对粒系细胞和红系细胞的正负调节作用

应用重组人白细胞介素－１β（γｈＩＬ－１β）对小鼠骨髓和外周血粒系细胞与红系细胞作用的研究表明：ＩＬ－１单剂量腹腔注射后ｄ７红系造血细胞明显减少，网织红细胞在ｄ８显著下降。５～１０万Ｕ·ｋｇ－１剂量范围内ＩＬ－１促进粒系细胞的增殖和分化成熟。应用流式细胞仪对骨髓细胞周期分析显示骨髓大体积细胞在注射ＩＬ－１后ｄ３Ｓ期细胞明显增多。我们的结果表明ＩＬ－１抑制红系造血细胞的分化增殖，在适当的剂量范围内促进粒系细胞的增殖和分化成熟。其作用的分子基础是诱导造血细胞的细胞周期变化。     

新型化合物F-2对人肺癌NCI-H520细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的：探讨新型化合物F-2对人非小细胞肺癌NCI-H520细胞增殖迁移及凋亡的影响。方法： CCK-8实验检测肺癌细胞增殖情况;采用划痕实验检测化合物对H520细胞迁移的情况;倒置显微镜观察化合物刺激对细胞形态的影响;流式细胞术实验检测化合物对细胞凋亡的影响;Western blot实验检测化合物对细胞迁移及凋亡相关蛋白表达的影响。结果：化合物对H520细胞增殖有明显的抑制作用,且与浓度和时间呈依赖性关系。划痕实验结果表明化合物能够明显抑制肿瘤细胞迁移,并且western blot 实验结果表明化合物处理H520细胞后可上调Ｅ-cadherin的表达,下调N-cadherin蛋白的表达。Annexin-V／PI双染法结果显示,化合物可诱导H520细胞发生凋亡,且随着药物浓度增加凋亡率上升,并且增加了BaX/BcL-2蛋白表达比率。结论：化合物能够明显抑制肺癌细胞的增殖、迁移及诱导细胞凋亡,可能是通过阻断肿瘤细胞EMT过程,调节细胞凋亡过程中相关基因表达从而发挥抗肿瘤作用。     

王不留行提取物对内皮细胞增殖、迁移及其黏附的作用评价

目的体外分析王不留行抑制人微血管内皮细胞(HMEC)增殖、迁移和黏附的有效部位。方法SRB法测定药物干预细胞增殖的IC50和药物作用时间与药效学的关系;划线灼伤法研究细胞迁移;体外基质胶分析药物对细胞黏附能力的影响;HE染色观察药物对细胞染色体的影响。结果王不留行有效部位对HMEC增殖抑制的IC50为3.60mg.L-1,加药4h后起作用。加药48h后HMEC迁移受到明显抑制(迁移率为40.33%,对照组迁移率为77.68%)。加药组细胞黏附受到明显抑制,且呈浓度依赖关系。结论王不留行提取物能明显抑制内皮细胞增殖、迁移及黏附,因此具有潜在的价值用于抑制血管生成。