新生儿败血症患者外周血CD14~+CD16~+单核细胞亚群检测及意义

目的:探讨新生儿败血症患者外周血中CD14+CD16+单核细胞亚群的比例及其临床意义。方法:用流式细胞术检测抗感染治疗前后新生儿败血症患者及健康新生儿外周血中CD14+CD16+单核细胞亚群的比例。结果:抗感染治疗前败血症组CD14+CD16+单核细胞亚群比例明显高于健康新生儿组(P<0.05);抗感染治疗后败血症组CD14+CD16+单核细胞亚群比例下降,与健康新生儿组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:对感染新生儿行外周血CD14+CD16+单核细胞亚群检测有助于新生儿败血症的诊断及疗效的观察。     

免疫磁珠法纯化人外周血CD4~+T细胞

目的 :采用Dynal免疫磁珠法从人外周血单个核细胞 (MNC)中分离和纯化CD4+ T细胞。结果 :经过流式细胞仪测定纯度达到 ( 96.4± 2 .6) % ,0 .2 %台盼兰染色细胞活力为 ( 96.9± 3 .6) % ,增殖试验表明分离后的CD4+ T细胞对植物血凝素 (PHA)的刺激保持了良好的增殖能力 ,为进一步纯化CD4+ T细胞的生物学特性创造了条件。     

急性脑梗死患者单核细胞CD14+CD16+亚型的表达变化及临床意义

目的探讨急性脑梗死患者单核细胞CD14+CD16+亚型的表达及其临床意义。方法选择发病＜24h入院的36例急性脑梗死患者为脑梗死组、同期在神经内科治疗的32例头晕患者为对照组,检测脑梗死组患者入院当天及第2、5、7~10天以及随访第90天,对照组入院当天的血清单核细胞计数、单核细胞各亚型百分比,分析单核细胞亚型与病情的关系。结果与对照组相比,脑梗死组经典型单核细胞百分比各时间点均无明显变化（均P＞0.05）;中间型单核细胞百分比入院当天及第2、5、7~10天均明显升高（均P＜0.05）;非经典型单核细胞百分比入院第2、5天均明显下降（均P＜0.05）。脑梗死组入院当天单核细胞计数与NIHSS评分呈正相关（r=0.508,P＜0.05）;3个亚型百分比与NIHSS评分均未见相关（均P＞0.05）。与未感染者比较,脑梗死感染患者入院第2、5、7~10天单核细胞计数均明显升高（均P＜0.05）,非经典型单核细胞百分比均明显下降（均P＜0.05）;中间型单核细胞百分比入院当天及第2、5天均明显升高（均P＜0.05）;经典型单核细胞百分比各时间点比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。与预后良好组比较,脑梗死预后不良组入院第2、5天单核细胞计数、中间型单核细胞百分比均明显升高（均P＜0.05）,非经典型单核细胞百分比均明显下降（均P＜0.05）;经典型单核细胞百分比各时间点比较差异均无统计学意义（均P＜0.05）。结论急性脑梗死患者单核细胞CD14+CD16+亚型变化有一定的规律,中间型单核细胞、非经典型单核细胞可能与脑梗死相关感染及预后有关。     

大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的分选和提取

目的 分选提取大鼠脾脏和淋巴结CD4+CD25+调节性T细胞并进行纯度和活性检测.方法 用免疫磁珠两步法既阴性选择和阳性选择分选提取大鼠CD4+CD25+调节性T细胞,流式细胞仪检测细胞纯度,台盼蓝染色计算细胞存活率.结果 免疫磁珠分选提取的CD4+CD25+调节性T细胞纯度在86% 以上,并且活性良好,活细胞百分率大于97%.结论 通过免疫磁珠分选能够提取高纯度高活性的CD4+CD25+调节性T细胞.     

肿瘤细胞对CD4~+CD25~+Treg细胞数量和功能的影响

目的：探讨肿瘤细胞与免疫细胞相互作用对CD4+CD25+Treg细胞数量和功能的影响。方法：建立Lewis肺癌细胞与小鼠脾淋巴细胞共培养体系。Lewis肺癌细胞与不同浓度小鼠脾淋巴细胞共培养,分为4组：实验组Ⅰ（5×105个Lewis肺癌细胞与1×106个淋巴细胞共培养）、对照组Ⅰ（1×106个淋巴细胞单独培养）、实验组Ⅱ（5×105个Lewis肺癌细胞
与2×106个淋巴细胞共培养）、对照组Ⅱ（2×106个淋巴细胞单独培养）;Lewis肺癌细胞与
淋巴细胞共培养不同时间,采用3个时间点：24、48和72 h;Lewis肺癌细胞培养上清与淋巴细
胞共培养,选择培养上清浓度为20%和50%。采用流式细胞术检测了Lewis肺癌细胞与脾淋巴
细胞共培养系统中CD4+CD25+Treg细胞数量变化,通过RT-PCR方法检测了共培养对Foxp
3 mRNA表达的影响。结果：与对照组比较,实验组Ⅰ 中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRN
A表达明显增强（P<0.05）,实验组Ⅱ中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达无明
显变化（P>0.05）;Lewis肺癌细胞与淋巴细胞培养24及48 h可见CD4+CD25+Treg细胞数量及Foxp3
mRNA表达明显升高（P<0.05）,而72 h后变化不明显;20%和50% Lewis肺癌细胞培养上清
均可明显提高CD4+CD25+Treg数量及Foxp3 mRNA表达（P<0.05）。结论：肿瘤细胞及其培养
上清可诱导CD4+CD25+Treg细胞数量增加、功能增强,由肿瘤细胞所引起的CD4+CD25+Treg细
胞产生及功能增强可能是肿瘤逃避免疫监视机制之一。     

外周血CD5~+B淋巴细胞与不明原因自然流产的关系性研究

目的:通过检测不明原因自然流产患者和正常育龄妇女外周血CD5~+B淋巴细胞的含量,探讨CD5~+B淋巴细胞与不明原因自然流产的关系。方法:选择自然流产患者5例,正常育龄妇女5例。运用免疫磁珠法分离外周血中B淋巴细胞,采用流式细胞术检测CD5~+B淋巴细胞的含量。结果:正常育龄组外周血中CD5~+B淋巴细胞的比例为(0.78±0.40)%;自然流产组为(6.64±4.34)%。自然流产组明显高于正常育龄组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CD5~+B淋巴细胞可能参与不明原因自然流产的发病过程。     

免疫磁珠分选白血病KG1a细胞中CD34~+CD38~-干细胞及其特性研究

目的从白血病KG1a细胞中分选CD34+CD38-干细胞并研究其生物学特性。方法免疫磁珠法分选CD34+CD38-细胞,流式细胞术分析细胞表面膜抗原、细胞周期,甲基纤维素培养体系观察其克隆性;以HL60、K562、CD34+CD38+细胞为对照,甲基偶氮唑蓝法检测柔红霉素对CD34+CD38-细胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接种,观察体内成瘤能力。结果分选的CD34+CD38-细胞纯度达95%以上,(69.03±3.25)%处于G0期,克隆形成率为(38.64±2.68)%,明显抵抗柔红霉素;不同浓度柔红霉素作用后,CD34+CD38-、CD34+CD38+、HL60、K562细胞的活性差异有统计学意义(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率显著高于CD34+CD38+细胞(P<0.05)。结论免疫磁珠法分选白血病干细胞简单易行,分选的细胞符合白血病干细胞生物学特性。     

溃疡性结肠炎患者CD4~+CD25~+调节性T细胞的表达及意义

目的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种病因及发病机制迄今尚未完全明确的累及肠道的慢性非特异性炎症,近年来,研究发现免疫异常与其发病密切相关。通过分析UC患者外周血和肠黏膜中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)及其特异性标志物Foxp3的表达特点,探讨CD4+CD25+Treg和Foxp3在UC发病机制中的作用。方法 20例UC活动期患者,15例健康体检者作为正常对照组,分别抽取外周静脉血和经电子肠镜活检肠黏膜组织,以流式细胞术检测外周血单个核淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)和肠固有层单个核细胞(lamina propria mononu-clear cell,LPMC)中CD4+CD25+T细胞和CD4+T细胞比例,应用免疫组化方法检测肠黏膜中Foxp3的表达,并检测血清中IL-10的水平。结果 UC患者外周血中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例明显低于正常对照组(P<0.05),肠黏膜CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例和Foxp3+T细胞表达明显高于正常对照组(P<0.05),两组PBMC和LPMC中CD4+T细胞比例无明显差异(P>0.05),两组血清IL-10水平无显著差异(P>0.05)。结论 CD4+CD25+Treg在UC的发病机制中起重要作用,外周血Treg数量减少可能是疾病发生的重要因素。     

不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血CD4+ CD25+CD127-调节性T细胞的研究

目的 探讨不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血CD4+ CD25+ CD127-调节T细胞的变化及其临床意义.方法 通过流式细胞术动态分析179例恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞的变化.结果 不同TNM分期恶性肿瘤患者随疾病进展外周血CD4+ CD25+ CD127-细胞占CD4+细胞比率升高,在肿瘤Ⅳ期尤其明显;Ⅰ期和Ⅱ期病人CD4+细胞略低于对照组,但差异无显著性,CD4/CD8比值低于对照组,差异有显著性;Ⅲ、Ⅳ期病人CD4+细胞及CD4/CD8比值均明显减低,差异有显著性;各期肿瘤患者CD3+、CD8+、CD19+细胞与对照组比较差异无显著性.结论 恶性肿瘤患者外周血CD4+ CD25+ CD127-细胞占CD4+细胞比率的升高与恶性肿瘤临床分期密切相关,定期检测外周血中上述指标的变化,有利于了解恶性肿瘤患者的病情变化及预后.     

肺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及其临床意义

目的: 探讨肺癌患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞的变化及意义. 方法: 采用流式细胞技术检测60例肺癌患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞的变化,并与健康对照组进行比较. 结果: ①肺癌患者外周血中CD4 CD25 调节性T细胞占CD4 T淋巴细胞总数高于健康对照者[(14.7±1.8)% vs (6.5±1.4)%, P<0.05];②化疗前肺癌患者外周血中CD4 CD25 T细胞明显高于化疗后[(14.7±1.8)% vs (6.8±1.4)%, P<0.05];③同时发现肺癌患者恶性程度越高,转移及分化程度低者CD4 CD25 T的表达水平越高,其预后也越差. 结论:肺癌患者外周循环血中CD4 CD25 T细胞水平较高,可能与肺癌患者免疫功能受损有关,可作为评估肺癌患者预后的一项指标.     

Onset of Coronary Heart Disease is Associated with HCMV Infection and Increased CD14~+CD16~+ Monocytes in a Population of Weifang,China

Objective To investigate the relationship between human cytomegalovirus(HCMV) infection and peripheral blood CD14~+CD16~+ monocytes in the pathogenesis of coronary heart disease(CHD), and to elucidate the mechanism of pathogenesis in CHD by analyzing the correlation between infection,inflammation, and CHD, to provide a basis for the prevention, evaluation, and treatment of the disease.Methods In total, 192 patients with CHD were divided into three groups: latent CHD, angina pectoris,and myocardial infarction. HCMV-IgM and-IgG antibodies were assessed using ELISA; CD14~+CD16~+monocytes were counted using a five-type automated hematology analyzer; mononuclear cells were assessed using fluorescence-activated cell sorting; and an automatic biochemical analyzer was used to measure the levels of triglyceride, cholesterol, high-and low-density lipoprotein cholesterols,lipoprotein, hs-CRp and Hcy.Results The positive rates of HCMV-IgM and-IgG were significantly higher in the CHD groups than in the control group. HCMV infection affects lipid metabolism to promote immune and inflammatory responses.Conclusion HCMV infection has a specific correlation with the occurrence and development of CHD.The expression of CD14~+CD16~+ mononuclear cells in the CHD group was increased accordingly and correlated with acute HCMV infection. Thus, HCMV antibody as well as peripheral blood CD14~+CD16~+mononuclear cells can be used to monitor the occurrence and development of CHD.     

哮喘患儿急性发作期CD4+ CD25+ 调节性 T细胞水平和体质量指数的关系

 【目的】 探讨急性发作期哮喘患儿外周血CD4+ CD25+ 调节性T细胞(Tr)的变化及其与体质量指数(BMI)的关系&;#65377; 【方法】 外周血来自70例哮喘发作组患儿&;#65380;30例缓解组和50例正常对照组小儿&;#65377;将哮喘发作组再分为体质量正常组(40例)和超重组(30例)&;#65377;应用流式细胞术检测患儿外周血的Tr细胞数变化,并计算患儿的BMI&;#65377; 【结果】 急性发作期组患儿外周血Tr水平 [(6.17 ± 1.72)%]明显低于缓解期组患儿[(7.56 ± 1.48)%]和对照组儿童[(7.13 ± 1.48)%](P < 0.05),而缓解期患儿外周血Tr水平与对照组儿童无明显差异(P > 0.05)&;#65377;正常体质量哮喘患儿CD4+ CD25+ Tr水平[(6.34 ± 1.71)%]明显高于超重患儿[(4.74 ± 1.20)%](P < 0.05)&;#65377;哮喘组患儿外周血CD4+ CD25+ Tr水平[(6.17 ± 1.72)%]与其BMI水平(16.00 ± 2.14)呈显著的负相关(rp = -0.814,P < 0.05)&;#65377; 【结论】 外周血Tr水平在哮喘患儿发作期显著降低,而在超重的患儿更低,且其水平与患儿的BMI呈显著的负相关&;#65377;     

CD4+ CD25+调节性T细胞在肺癌中的表达及其临床意义

目的：：探讨CD4+ CD25+调节性T细胞在晚期肺癌中的表达及其临床意义。方法：应用流式细胞术分析42例肺癌患者(肺癌组)外周血CD4+ CD25+调节性T细胞表达水平,与15名健康志愿者作对照。结果：肺癌组患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞数量为(7.17±3.63)%,明显高于对照组的(4.25±2.11)%(P<0.01)。肺癌组患者外周血中调节性T细胞数量在病理类型间差异无统计学意义(P>0.05),晚期肺癌患者外周调节性T细胞数量高于早期患者(P<0.05)。结论：调节性T细胞在肺癌患者中比率明显升高,并与临床进展有关。     

红斑狼疮皮损中CD4^＋和CD8^＋T细胞的表达

目的检测红斑狼疮皮损区T淋巴细胞亚群CD4 和CD8 T细胞的表达情况。方法采用免疫组织化学法对红斑狼疮皮损区淋巴细胞进行检测,并与正常皮肤作对照。结果红斑狼疮患者皮损CD4 T细胞百分数明显高于正常对照组。CD8 T细胞百分数明显低于正常对照组。结论红斑狼疮患者可能存在CD4 T细胞活性增强,CD8 T细胞功能抑制,从而导致免疫紊乱而发病。     

CD4+CD56+ hematodermic neoplasm in a child

CD4~+CD56~+ hematodermic neoplasm (HN) is a rare, highly aggressive systemic neoplasm, which had been described under various names including lymphoblastic lymphoma of natural killer (NK) phenotype, blastic NK cell lymphoma (BNK), leukemic lymphoma of immature NK lineage and CD4~+CD56~+ HN. This malignancy is mainly involved in elderly people and usually a rapidly fatal disease, since consistently effective treatments have not yet been developed. It is relatively rare in children.~(1-6) Herein we report a boy with CD4~+CD56~+ HN.     

CD4+D25+调节性T细胞在晚期食管癌中的表达及临床意义

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)在食管癌中的表达及其临床意义。方法:应用流式细胞术分析60例食管癌患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达水平,与20例健康对照组比较。结果:食管癌患者外周血CD4+CD25+Treg细胞数量增加(15.9±4.1)%,表达高于正常人(5.91±3.7)%(P<0.001)。食管癌患者外周血中Treg细胞数量与患者的病理类型无关(P>0.05),但与淋巴结转移和组织学分化程度有关(P<0.01)。结论:Treg细胞在食管癌患者中比率明显升高,是患者免疫功能紊乱的一个证据。