垂体腺瘤中凋亡抑制基因survivin的表达和bcl-2、p63相关性的研究

目的：通过检测垂体腺瘤中的凋亡细胞，研究新的凋亡抑制基因survivin在垂体腺瘤组织中的表达及其与bcl-2和p53基因表达的相关性，探讨垂体腺瘤的发生与细胞凋亡的关系，以及survivin、bcl-2、p53基因在垂体腺瘤AP发生中的调控作用。方法：应用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)和免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法)检测8例正常垂体组织和48例不同分化程度的垂体腺瘤组织的细胞调亡和survivin、bcl-2、p53基因的表达。统计学分析采用SPSS10．0软件系统进行处理，检验水准取α=0．05。结果：本组48例垂体腺瘤标本中，43例有不同程度的凋亡发生，凋亡细胞发生率为89．6％(43／48)。在非侵袭性垂体腺瘤组织中细胞凋亡指数(apoptosis index，AI)平均为12．6％，在侵袭性垂体腺瘤组织中AI为2．7％，两者相比差异具有统计学意义(P<0．05)。survivin基因在正常垂体组织中不表达；48例垂体腺瘤组织中，32例表达阳性，占66．7％；其中侵袭性垂体腺瘤survivin基因的阳性表达率为81．5％(22／27)，非侵袭性垂体腺瘤为47．6％(10／21)，两者相比，差异有统计学意义(P<0．05)。分泌型(功能性)垂体腺瘤中survivin基因表达阳性率为70％(21／30)，无分泌型(无功能性)垂体腺瘤为61．1％(11／18)，两者相比差异无统计学意义(P>0．05)。垂体腺瘤组织中bcl-2基因表达阳性、阴性者中，survivin基因表达阳性率分别为79．3％(23／29)和47．4％(9／19)，两者相比较，差异有统计学意义(P<0、05)。p53基因表达阳性、阴性者中，survivin基因表达阳性率分别为91．7％(11／12)和58．3％(21／36)，两者相比较，差异有统计学意义(P<0．05)。结论：survivin基因过度表达抑制细胞凋亡(AI降低)，在垂体腺瘤的发生发展过程中起一定作用，提示侵袭性强，预后不良。survivin基因的表达与垂体腺瘤组织中bel-2、p53基因的异常表达密切相关。     

垂体腺瘤中凋亡抑制基因survivin的表达和bcl-2、p53相关性的研究

目的 :通过检测垂体腺瘤中的凋亡细胞 ,研究新的凋亡抑制基因survivin在垂体腺瘤组织中的表达及其与bcl- 2和 p5 3基因表达的相关性 ,探讨垂体腺瘤的发生与细胞凋亡的关系 ,以及survivin、bcl- 2、p5 3基因在垂体腺瘤AP发生中的调控作用。方法 :应用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术 (TUNEL)和免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 -过氧化酶连接法 (SP法 )检测 8例正常垂体组织和 4 8例不同分化程度的垂体腺瘤组织的细胞调亡和survivin、bcl- 2、p5 3基因的表达。统计学分析采用SPSS10 .0软件系统进行处理 ,检验水准取α=0 .0 5。结果 :本组 4 8例垂体腺瘤标本中 ,4 3例有不同程度的凋亡发生 ,凋亡细胞发生率为 89.6 % (4 3/ 4 8)。在非侵袭性垂体腺瘤组织中细胞凋亡指数 (apoptosisindex ,AI)平均为 12 .6 % ,在侵袭性垂体腺瘤组织中AI为2 .7% ,两者相比差异具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。survivin基因在正常垂体组织中不表达 ;4 8例垂体腺瘤组织中 ,32例表达阳性 ,占 6 6 .7% ;其中侵袭性垂体腺瘤survivin基因的阳性表达率为 81.5 % (2 2 / 2 7) ,非侵袭性垂体腺瘤为 4 7.6 % (10 / 2 1) ,两者相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。分泌型 (功能性 )垂体腺瘤中survivin基因表达阳性率为     

Survivin凋亡抑制基因在垂体腺瘤中的表达及其与bcl-2、p53相关性的研究

目的 :探讨凋亡抑制基因survivin在垂体腺瘤中的表达 ,及其与bcl 2和p5 3表达蛋白的相关性。方法 :采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白 过氧化酶连接法 (SP法 ) ,检测survivin、bcl 2、p5 3基因表达蛋白在 8例正常垂体组织及 3 8例垂体腺瘤组织中的表达。结果 :survivin基因表达蛋白在正常垂体中无表达 ,3 8例垂体腺瘤中 ,2 3例表达阳性 ,占 60 5 %病理分型中PRL型、GH型、混合型阳性表达率分别为 12 /17、7/13、4/8三者比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。垂体腺瘤bcl 2表达蛋白的阳性与阴性中 ,survivin蛋白表达阳性率分别为 15 /17、8/2 1。两者比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) :而p5 3表达蛋白的阳性和阴性中 ,survivin蛋白表达阳性率分别为 2 /6,2 2 /2 3 ,两者相比 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) :survivin基因蛋白的表达阳性率与垂体腺瘤组织中的bcl 2蛋白表达密切相关 ,与p5 3蛋白表达无相关性。结论 :survivin蛋白表达的异常而引起细胞凋亡抑制 ,在垂体腺瘤的发生中起一定作用 ,其过度表达提示垂体腺瘤增生极度活跃 ,survivin蛋白表达与垂体腺瘤中bcl 2蛋白的异常表达密切相关     

人类垂体腺瘤中的基因突变

由于人类垂体腺瘤是单克隆细胞起源，故提示基因突变在肿瘤生成中发挥着重要作用。目前发现包括生长激素腺瘤癌基因gsp的表达，癌基因p53表达异常，MEN-1缺失和P16的高甲基化等，在垂体腺瘤发生发展和侵袭性生长中发挥作用     

慢性胃炎脾胃虚实证候胃粘膜细胞凋亡及相关蛋白的研究

为探讨脾胃虚实证候与胃粘膜细胞凋亡的相关性，采用辨证分型，以胃粘膜细胞凋亡指数（AI）、凋亡基因相关蛋白p53、Bcl-2、Fas等为指标进行研究，结果：①脾胃虚证和实证均表现为胃粘膜Al增加（P〈0．05），虚证组高于实证组（P〈0．05）；②脾胃虚证组和实证组p53、Bcl-2表达高于对照组（P〈0．01～0．05）；③脾胃实证组Fas表达高于对照组（P〈0．05）。说明慢性胃炎从正常到实证到虚证的发展过程中，细胞凋亡逐步增多；p53、Bcl-2、Fas的表达参与细胞凋亡的调控，与证候形成的复杂性有关。     

抑制 HOTAIR 的表达促进替莫唑胺引起的垂体腺瘤细胞凋亡

目的：探索长链非编码RNA（long noncoding RNA ,lncRNA）HOTAIR在替莫唑胺引起的垂体瘤细胞凋亡中的功能。方法体外培养垂体腺瘤细胞系 HP75细胞和GH3细胞,使用替莫唑胺处理 HP75细胞和GH3细胞后,采用实时定量PCR法检测细胞中 HOTAIR的表达;采用RNA干扰（RNA interference ,RNAi）技术敲低内源性 HOTAIR的表达;并应用MTT法检测敲低内源性HOTAIR后细胞增殖能力的改变,应用流式细胞术检测敲低内源性 HOTAIR后替莫唑胺对垂体腺瘤细胞凋亡的影响。结果替莫唑胺能够引起垂体腺瘤HP75细胞和GH3细胞显著的凋亡,并且在此过程中HOTAIR的表达显著降低;采用RNAi技术能够显著地抑制垂体腺瘤细胞系中HOTAIR的表达;敲低HOTAIR后,细胞的增殖能力受到明显的抑制,如果同时使用替莫唑胺处理细胞,细胞的凋亡率出现显著地升高。结论敲低内源性 HOTAIR的表达能够促进替莫唑胺引起的垂体腺瘤细胞凋亡,二者具有协同作用。     

垂体腺瘤的血管生成、瘤细胞的凋亡与侵袭性的关系

目的　探讨微血管密度 (Microvesseldensity,MVD)、瘤细胞凋亡 (Apoptosis)与肿瘤侵袭性的关系。方法应用EnVision二步法免疫组化技术检测 5 8例垂体腺瘤的微血管密度 (MVD) ;应用流式细胞术 (Flowcytometry ,FCM)对 38例垂体腺瘤 (12例侵袭性腺瘤 )检测瘤细胞凋亡情况 ;分为侵袭组和非侵袭组进行统计学分析 ,并对MVD与瘤细胞凋亡进行相关性分析。结果　侵袭性垂体腺瘤MVD为 6 .78± 1.6 7;非侵袭性垂体腺瘤MVD为 3.72± 1.0 2 ;差异有显著性 (P <0 .0 1)。肿瘤细胞的凋亡百分比 ,侵袭性为 11.5 2± 6 .77(% ) ,非侵袭性为 6 .0 5± 4 .82 (% ) ,两者相比有显著性差异 (P <0 .0 1)。侵袭性垂体腺瘤细胞凋亡率高 ,垂体腺瘤的异倍体率为 6 3.2 % ,其中侵袭性垂体腺瘤为 87.5 % ,非侵袭性腺瘤为 4 5 .5 % ,两者相比有显著性差异 (P <0 .0 5 )。直线相关分析显示 ,MVD与瘤细胞凋亡呈显著正相关 (r=0 .6 12 ,P <0 .0 5 )。结论　侵袭性垂体腺瘤MVD增高、DNA倍增明显 ,同时肿瘤细胞凋亡也增加。     

食管癌组织中癌细胞凋亡和相关基因表达的临床研究

目的　探索食管癌组织中癌细胞凋亡和相关基因p2 1、p5 3、Bcl- 2表达的关系。方法　采用免疫组化法检测 4 0例食管癌手术切除标本中p2 1、p5 3、Bcl- 2的表达及细胞凋亡的变化。结果　 4 0例食管癌组织中p2 1、p5 3和Bcl- 2的阳性表达率分别为 5 2 .5 % (2 1 4 0 )、80 % (32 4 0 )和 6 0 % (2 4 4 0 ) ,癌细胞凋亡指数 (AI)为 (2 0 35±1 30 2 ) % ,p2 1阳性表达时凋亡指数高于其阴性表达 ,p5 3阳性表达时凋亡指数低于其阴性表达。结论　p2 1和p5 3的阳性表达与癌细胞凋亡有密切关系 ,检测p2 1和p5 3的表达水平可以协助判断食管癌的分化程度及预后     

垂体腺瘤细胞增殖、凋亡与侵袭性生长关系的研究

目的 探讨垂体腺瘤细胞的增殖、凋亡与侵袭性生长的关系。 方法 对37例侵袭性垂体腺瘤及30例非侵袭性垂体腺瘤患者采用免疫组化SP法测定增殖细胞核抗原(PGNA)、B细胞淋巴瘤(Bcl-2)及相关基因(Bax)蛋白产物的表达。 结果 侵袭性垂体腺瘤患者与非侵袭性垂体腺瘤患者比较 ,PCNA、Bcl-2和Bax的表达水平均明显增高(均P<0.05)。结论 垂体腺瘤的侵袭性生长与PCNA、Bcl-2和Bax的异常表达有关 ,是肿瘤细胞不断增殖和凋亡抑制的结果     

大肠腺瘤—癌序列细胞凋亡及其调控基因p53的研究

目的研究细胞凋亡及其调控基因p53在大肠腺瘤—癌序列中的变化,以探讨其在大肠癌发生中的作用。方法利用DNA断裂原位标记法(缺口末端标记技术,TUNEL法)和免疫组织化学方法(SP法),对60例大肠腺瘤(腺瘤组)和60例大肠腺癌(腺癌组)的活检组织分别进行细胞凋亡和p53蛋白表达的检测,并采用30例正常大肠粘膜作对照组。结果对照组细胞凋亡指数(AI)显著高于腺瘤各组和腺癌组(P<0.01);腺瘤各组均高于腺癌组(P<0.01)。p53在三组中的表达差异有高度显著性(P<0.01)。在腺瘤和腺癌组中,p53阴性者的AI均高于其阳性者(P<0.05或0.01)。结论从正常大肠粘膜到腺瘤、腺癌的过程中细胞凋亡逐渐减少,表明细胞凋亡受抑制可能在大肠癌的发生发展过程中起着重要的作用。p53蛋白的表达在从正常大肠粘膜到腺瘤、腺癌的过程中逐渐增多,提示p53基因突变可能在大肠腺瘤转化为腺癌的过程中起促进作用。     

电化学疗法与恶性淋巴瘤细胞凋亡与相关基因表达

目的：探讨电化学疗法（ECT）与肿瘤细胞凋亡的关系。方法：采用Tunel法和免疫组化S－P法,分别检测肿瘤未治疗对照组和ECT组B细胞淋巴瘤组织的细胞凋亡率和p53,bcl-2基因的表达。结果：ECT组肿瘤细胞凋亡率（5．18）显著高于对照组（1．05）,p53,bcl-2在ECT组表达分别为80％,25％,在对照组表达分别为15％,90％,ECT组中p53表达与癌细胞凋亡率呈正相关,而bcl-2则与癌细胞凋亡率呈负相关。结论：ECT可诱导癌细胞凋亡,其发生可能与p53和bcl-2基因调控有关。     

侵袭性垂体腺瘤的生物学特性

目的：侵袭性是恶性肿瘤的生物学特性,而部分人垂体腺瘤也具有这一特征。本研究旨在观察该类腺瘤细胞ＤＮＡ倍体特征和增殖活性。方法：应用流式细胞技术和细胞图像分析技术,对３２例经手术治疗的垂体腺瘤患者进行检测。结果：从细胞ＤＮＡ倍体角度分析,发现垂体腺瘤的侵袭性和异常ＤＮＡ倍体垂体腺瘤细胞比例密切相关。结论：侵袭性垂体腺瘤具有恶性生长倾向。     

金属硫蛋白抑制阿霉素引起的心肌细胞凋亡作用研究

目的 研究锌诱导的金属硫蛋白(MT)对阿霉素(DOX)所致心肌细胞凋亡的的抑制作用并探讨其作用机制.方法 雄性C57BL小鼠随机分成4组(每组7只),即对照组、锌处理组、给药组和锌预处理给药组.各组小鼠连续2 d皮下给予ZnSO4 300 μmol/kg(锌处理组和锌预处理给药组)或等量生理盐水(对照组和给药组),第3 d单次腹腔注射DOX 15 mg/kg(给药组和锌预处理给药组)或等量生理盐水(对照组和锌处理组).DOX给药后第4 d处死小鼠,采用血红素镉饱和法测定心脏组织MT含量,ELISA法测定心肌凋亡指数,蛋白印迹分析(Western blot)测定心肌组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平.结果 与对照组相比,DOX引起小鼠心脏质量下降10%,且显著引起小鼠心肌细胞凋亡;经锌诱导后,心脏组织MT水平提高约25倍,且MT高表达能抑制DOX引起的凋亡细胞增加;进一步的研究发现,Bax蛋白表达水平在DOX给药后明显升高,而MT高表达抑制了Bax的表达升高;Bcl-2蛋白表达水平各组间的差异无统计学意义.结论 锌诱导的MT高表达能抑制DOX引起的心肌细胞凋亡,其作用机制主要与抑制DOX引起的Bax蛋白表达升高以及Bax/Bcl-2比值增加有关.     

垂体柄与垂体腺瘤显微解剖关系的临床观察

目的 观察垂体柄与肿瘤的解剖关系。以利术中保护垂体柄免受损伤。方法 在鞍膈平面,以鞍结节与鞍背两者中点的连线为标准,判断垂体柄的侧别位置,再将鞍膈平面视做时钟面板,进而判断垂体柄 的时钟位。结果 71例观察中,垂体柄居左侧17例,右侧41例,后中位13例。其中46例以时钟位判断,5时位13例,6时位11例,7时位7例,4时位5例,3时位4例,2、8及11时钟位各为2例。结论 垂体柄的位置与肿瘤在鞍内的生长方向有关,与向鞍上扩展无关,垂体柄可作为寻找正常垂体组织的标志。     

冬虫夏草对乳腺癌细胞凋亡的诱导及相关基因表达的调控

目的:明确中药冬虫夏草(cordyceps sinensis,CS)对人乳腺癌细胞凋亡的影响及凋亡相关基因表达的调控。方法:应用MTT比色法检测CS对乳腺癌细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡;采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达水平的改变。结果:CS对人乳腺癌细胞株MCF-7生长有抑制作用,且呈时间/浓度依赖性;CS使MCF-7细胞发生细胞凋亡,流式细胞仪DNA直方图上出现了凋亡峰,且凋亡率呈浓度依赖性;细胞NDA裂解成180～200bp及其倍数的片段,电泳得到特有的梯形条带;随着药物浓度的增加,Bcl-2表达逐渐减弱,Bax表达逐渐增强。结论:CS可诱导乳腺癌细胞凋亡,为CS的抗肿瘤应用提供了理论依据,CS可能通过调控Bcl-2、Bax基因表达而诱导凋亡。     

垂体腺瘤手术入路选择

目的　探讨不同手术入路切除垂体肿瘤优缺点。方法　 95例垂体肿瘤选择不同手术入路 :经额下入路 73例 ;经额颞入路和翼点入路 10例 ;经蝶入路 7例 ;经双额前颅窝扩展入路和额眶蝶联合入路 5例。结合文献对各种手术入路进行回顾性分析。术后对病人分 0 .5、1、3、5年不同时间随访以确定疗效。结果　经额下入路 73例 ,全切除 2 8例 (38.36 % ) ,大部分和部分切除 45例 (6 1.6 4% ) ,死亡 3例 ,复发 16例。经额颞入路和翼点入路 10例 ,全切除 4例 (40 % ) ,大部分切除 6例 (6 0 % ) ,死亡 1例 ,复发 1例。经蝶入路 7例 ,全切除 3例 (42 .86 % ) ,大部分切除 4例 (5 7.14% ) ,死亡 1例 (鼻漏术后继发颅内感染 ) ,复发 1例。经双额前颅窝扩展入路和额眶蝶入路 5例 ,全切除 3例 (6 0 % ) ,大部分切除 2例 (40 % ) ,无死亡及复发。结论　垂体肿瘤手术时 ,一般采用经蝶显微外科手术入路 ,创伤小、恢复快、效果好 ;垂体肿瘤向鞍旁一侧生长时应选择额颞及翼点入路 ;对巨大或侵袭性垂体腺瘤适宜经双额前颅窝扩展入路和额眶蝶联合入路 ,该入路视野宽阔 ,全切除率高 ,复发及死亡率低 ;经额下入路手术视野小 ,全切除率低 ,易复发。     

球状脂联素对晚期糖基化终产物诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的蛋白表达影响

目的:研究球状脂联素(gAd)抑制晚期糖基化终产物(AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的相关蛋白表达。方法:体外用AGEs培养HUVECs,经四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定细胞活性,Annexin V-FITC/PI双染标记法检测细胞凋亡,免疫印记法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果:AGEs作用HUVECs,经MTT和流式细胞仪检测,细胞凋亡具有AGEs浓度依赖性。相同浓度AGEs作用HUVECs时,gAd预处理组与非预处理组比较,明显抑制HUVECs凋亡。免疫印记结果显示gAd预处理组与非预处理组比较,gAd可明显抑制Bax蛋白表达,增强Bcl-2蛋白表达。结论:gAd可通过激活Bcl-2、抑制Bax蛋白表达,拮抗AGEs诱导HUVECs凋亡。     

缺氧刺激对人骨髓间充质干细胞凋亡基因Bcl-2和Bax的影响

目的探讨缺氧刺激对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)凋亡基因Bcl-2和Bax的影响。方法本研究将hBMSCs按不同氧浓度分为对照组(20%O_2)和低氧组(2%O_2),检测不同作用时间缺氧对hBMSCs抑凋亡基因(Bcl-2)和促凋亡基因(Bax)蛋白表达的影响。结果与对照组比较,低氧组各时间点hBMSCsBcl-2蛋白表达有明显的下调,hBMSCs Bax蛋白表达有明显的上调,差异有统计学意义(P<0.05)。且12 h时变化最明显,总体上呈现出时间依赖性特点。结论缺氧培养对hBMSCs的Bcl-2有明显的抑制作用,对hBMSCs的Bax有明显的促进作用,促使骨改建平衡向破骨方向倾斜。