全反式维甲酸上调异位子宫内膜间质细胞GJIC功能的机制

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对人异位子宫内膜间质细胞间隙连接细胞间通讯(GJIC)功能的调节作用及其机制.方法:取人子宫内膜异位症(EMs)患者的间质细胞,采用0.1,1,10 μmol/L ATRA于24,48,72,96和120 h分别进行处理,同时设置空白对照组.采用激光共聚焦显微镜检测异位内膜间质细胞的GJIC功能,并检测与GJIc功能密切相关的Cx43,Cx26和Cx32的基因及蛋白表达.结果:经ATRA处理后,1 μmol/L与10 μmol/L处理组的异位内膜间质细胞荧光恢复功能明显增强;0.1 μmol/L处理组的异位内膜间质细胞荧光恢复功能无明显变化.未经ATRA处理的异位内膜间质细胞中无Cx43,Cx26和Cx32的mRNA及蛋白表达;经1,10μmol/LATRA处理后,异位内膜间质细胞中检测到Cx43 mRNA和蛋白表达,但未见Cx26和Cx32的mRNA及蛋白表达.间质细胞的GJIC功能与去磷酸化Cx43蛋白的表达有关.结论:ATRA能选择性的诱导Cx43基因及其去磷酸化蛋白的表达,从而上调异位内膜间质细胞的GJIC功能;ATRA酸可能是治疗EMs的潜在药物.     

全反式维甲酸对异位子宫内膜间质细胞GJIC功能的调节作用

0 引言 间隙连接细胞间通讯（gap junctional intercellular communication,GJIC）是多细胞生物体内最普遍的通讯方式．人子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）异位内膜间质细胞的GJIC功能缺陷,与EMs的发病密切相关．已有研究发现全反式维甲酸（all—trans retinoi cacid,ATRA）可上调某些肿瘤细胞的GJIC功能,但有关ATRA调节异位内膜间质细胞GJIC功能的报道较少．我们建立异位内膜间质细胞的体外模型,采用荧光漂白后恢复技术检测ATRA对异位子宫内膜间质细胞GJIC功能的调节作用,以探讨ATRA用于EMs治疗的可能性．     

全反式维甲酸对裸鼠子宫内膜癌治疗作用的实验研究

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对裸鼠子宫内膜癌的作用及其机制。方法:建立子宫内膜癌裸鼠模型,随机分为5组:ATRA低剂量组(建模第11天予ATRA 20 mg.kg-1.d-1,共20 d)、ATRA高剂量组(建模第11天予ATRA 40 mg.kg-1.d-1,共20 d)、顺铂组(建模第11天予顺铂3 mg.kg-1.d-1,共20 d)、ATRA对照组(建模同时予ATRA 20 mg.kg-1.d-1,每周5次,共4周)、空白对照组(每天灌入食油0.5 ml,共30 d)。治疗期间测量皮下癌瘤大小并绘制生长曲线,观察肿瘤生长抑制率,并用RT-PCR法检测癌组织中肝细胞生长因子c-met的表达。结果:肿瘤生长抑制率ATRA高剂量组(67.34%)明显高于ATRA低剂量组(41.18%)(P<0.05),而与顺铂组(68.06%)相当(P>0.05);ATRA高剂量组与顺铂组死亡率比较无明显差异(P>0.05)。各组裸鼠体重实验前后比较无显著性差异(P>0.05)。裸鼠癌瘤组织中可检测到c-met的表达,ATRA能抑制c-met的表达,ATRA低剂量组、ATRA高剂量组及顺铂组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),ATRA低剂量组、ATRA高剂量组、ATRA对照组之间c-met表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ATRA能够通过抑制c-met的表达抑制HGF/c-met介导的子宫内膜癌增殖,有希望成为治疗子宫内膜癌的药物之一。但ATRA并不能阻止移植瘤的形成,有必要采用联合用药以提高其抑瘤作用。     

全反式维甲酸诱导分化治疗晚期胃腺癌的临床疗效观察

晚期胃腺癌多数失去手术、化疗及放疗的机会,诱导分化治疗为这类患者开辟了全新的治疗途径.1993年2月～1997年5月我们对不能手术、放疗及化疗的晚期胃腺癌26例,用全反式维甲酸进行诱导分化,取得一定的疗效,现报告如下.     

全反式维甲酸对子宫内膜癌细胞增殖影响的实验研究

目的 通过观察全反式维甲酸(ATRA)、肝细胞生长因子(HGF)对子宫内膜癌细胞HEC-2B增殖的影响及检测子宫内膜癌细胞HEC-2B中HGF受体c-met的表达,了解ATRA对子宫内膜癌细胞的作用及其可能机制.方法 体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-2B,用60 ng·ml-1HGF及10-5、10-6、10-7、10-8mol·L-1的ATRA作用于HEC-2B,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法分析细胞的增殖力,实时定量PCR检测ATRA作用前后细胞中HGF受体c-met的表达.结果 单独使用ATRA(10-6mol·L-1)处理HEC-2B,并不能够影响细胞的增殖能力.如果与具有明显促细胞增殖作用的60 ng·ml-1HGF共处理,10-7mol·L-1的ATRA即能够明显抑制前者的促增殖作用(P<0.01),而且表现出一定的量效关系.ATRA能够有效抑制HEC-2B细胞中c-met的转录水平,10-7mol·L-1的ATRA即有明显作用(P<0.01),10-6mol·L-1的作用最为显著(P<0.01),呈现一定的量效关系.经ATRA处理0.5 h后,c-met的转录水平即开始下降,随着处理时间的延长,ATRA的抑制作用趋于明显(P<0.01),有明显的时间依赖性.结论 通过抑制c-met的表达调控细胞的增殖可能是ATRA对子宫内膜癌细胞作用的通路之一.     

全反式维甲酸对人视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用

目的：研究全反式维甲酸（ATRA）对体外培养人视网膜色素上皮（RPE）细胞增生的抑制作用及机制。 方法：采用传代培养的人RPE细胞,分成不同浓度（10^-9、10^-8、10^-7、10^-6和10^-5 mol•L ^-1的ATRA）和不同时间点（6、12、24、48、72和96 h）给药组,通过活细胞计数法、MTT比色法和流式细胞术分别检测ATRA对人RPE细胞增生的影响。 结果：ATRA给药组细胞生存率低于非给药组（P<0.01）。细胞增生的抑制率与药物剂量及时间呈正相关 (r₁=0.9926,P<0.05; r₂=0.9647,P<0.05)。与非给药组比较,ATRA给药组 RPE细胞周期中G₁期细胞增加（P<0.05),而G₀/G₁期细胞数明显减少(P<0.05）。结论：ATRA可能通过阻滞人RPE细胞周期对RPE细胞增生具有剂量依赖和时间依赖的抑制作用。     

全反式维甲酸对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.方法采用MTT法观察和比较MCF-7细胞在ATRA不同浓度和作用时间下的增殖能力.结果ATRA作用浓度为1 μmol/L时,第3、6、9 d的光吸收值均与对照组有显著差异(P<0.01),其中又以第6 d时ATRA对MCF-7细胞增殖的抑制作用最明显.结论ATRA对乳腺癌MCF-7细胞具有增殖抑制作用,且这种作用具有剂量和时间依赖性.     

全反式维甲酸对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法采用MTT法观察和比较MCF-7细胞在ATRA不同浓度和作用时间下的增殖能力。结果ATRA作用浓度为1μmol/L时,第3、6、9d的光吸收值均与对照组有显著差异(P<0.01),其中又以第6d时ATRA对MCF-7细胞增殖的抑制作用最明显。结论ATRA对乳腺癌MCF-7细胞具有增殖抑制作用,且这种作用具有剂量和时间依赖性。     

全反式维甲酸对阿霉素肾病大鼠蛋白尿的抑制作用

目的探讨全反式维甲酸（ATRA）是否对阿霉素肾病大鼠具有降低尿蛋白的作用。方法通过建立阿霉素肾病大鼠模型,随机分3组,即对照组、模型组和干预组。其中模型组、干预组一次性尾静脉注射阿霉素5mg/kg,对照组注射等量生理盐水,注射阿霉素后第2天干预组每天给予20 mg/kg ATRA灌胃,对照组、模型组各予等量花生油灌胃,每周检测24 h尿蛋白定量,4周后处死大鼠,检测尿素氮、肌酐、总胆固醇、甘油三酯和白蛋白及ALT,电镜下观察大鼠肾组织。结果ATRA干预组与模型组相比大鼠尿蛋白明显减少（P〈0.01）,血白蛋白明显增加（P〈0.01）,干预组大鼠电镜下足突融合现象较模型组为轻。结论ATRA能够降低阿霉素肾病大鼠尿蛋白,对肾脏有保护作用。     

丁酸、全反式维甲酸对肺腺癌细胞株A549体外增殖的影响

目的观察丁酸(BA)、全反式维甲酸(ATRA)单用及联合应用对肺腺癌细胞株A549体外增殖的影响.方法采用绘制细胞生长曲线法、MTT比色法.结果经BA、ATRA处理后A549细胞生长曲线趋于平坦,细胞增殖速度、倍增时间降低,72h、120h生长抑制率显著增高,并呈剂量依赖性,其中BA和ATRA联合处理作用后72h、120h生长抑制率分别为(72.77±2.54)%、(84.03±1.58)%,较等浓度单药BA、ATRA显著增强.结论 BA对肺腺癌A549细胞具有与ATRA相近的增殖抑制作用,BA和ATRA联合应用具有良好的协同增效作用.     

全反式维甲酸对人子宫内膜癌细胞MMP-9表达影响的研究

目的全反式维甲酸（all trans retinoic acid，ATRA）对多种肿瘤细胞具有明显的诱导分化作用，对人子宫内膜癌细胞亦如此，本文通过观察ATRA对子宫内膜腺癌细胞株（RL95—2）中基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase 9，MMP-9）的作用，进一步探讨ATRA对肿瘤细胞浸润性的影响。方法体外培养的子宫内膜癌细胞分为两组，一组给予ATRA处理，另一组设为对照组，用免疫组织化学方法检测两组RL95—2细胞中MMP9的表达。结果经ATRA处理后的子宫内膜癌细胞中MMP-9呈阴性表达，未用药组MMP-9呈阳性表达，定位于细胞浆。结论ATRA对体外培养的RL95—2细胞中MMP-9的表达具有抑制作用，可能降低子宫内膜癌细胞的浸润性。     

全反式维甲酸联合奥沙利铂对结肠癌LoVo细胞株增殖、血管新生能力的影响

目的：研究全反式维甲酸联合奥沙利铂对结肠癌LoVo细胞株增殖、血管新生能力的影响。方法：培养结肠癌LoVo细胞株,分为空白对照组（不含FBS的培养基处理）、ATRA组（10^-5 mol/L全反式维甲酸处理）、OHP组（80μg/mL奥沙利铂处理）、联合处理组（10^-5 mol/L全反式维甲酸和80μg/mL奥沙利铂共同处理）。采用MTT法检测细胞增殖能力,real-time PCR检测血管新生因子的mRNA含量,酶联免疫吸附法检测血管新生因子的蛋白含量。结果：（1）细胞增殖能力：联合处理组、ATRA组、OHP组的MTT值均低于空白对照组（P〈0.05）,且联合处理组的MTT值低于ATRA组、OHP组（P〈0.05）;（2）血管新生因子：联合处理组、ATRA组、OHP组的血管内皮生长因子（VEGF）A、VEGFB、VEGFC、转化生长因子（TGF）β1、缺氧诱导因子（HIF）-1α的表达量均低于空白对照组,且联合处理组的VEGFA、VEGFB、VEGFC、TGFβ1、HIF-1α的表达量低于ATRA组、OHP组（P〈0.05）。结论：全反式维甲酸联合奥沙利铂能够抑制结肠癌LoVo细胞株的增殖,降低血管新生因子的表达。     

全反式维甲酸对骨肉瘤细胞OS732生长的影响

目的 观察全反式维甲酸（all—trails—retinoic acid，ATRA）对骨肉瘤细胞OS732生长的影响，并探讨其作用的分子机制。方法 用10^-5 MATRA作用骨肉瘤细胞OS732，6d后，进行细胞形态学观察、活细胞计数、流式细胞仪分析细胞周期、半定量RT—PCR检测细胞周期调控蛋白CyclinD（D1、D2、D3）、CD比、P21^WAF1 mRNA表达的改变。结果 ATRA作用后，OS732细胞胞浆展开，细胞核变小，核浆比例变小；瘤细胞生长减慢，细胞计数为正常对照组的39．5％；G0／G1期细胞明显增多，S期细胞减少，细胞阻滞于G0／G1期；CyclinD1、CyclinD2、CDK4mRNA表达均下降，尤以CycfinD2、CDK4下降最明显，CyclinD3、P21^WAF1mRNA未见明显改变。结论 10^-5M全反式维甲酸可明显抑制骨肉瘤细胞OS732的增殖，并使细胞周期出现G1／G0期阻滞，该作用可能与维甲酸处理后OS732细胞中CyclinD2、CDK4表达的下调以致低磷酸化pRb积累有关。     

全反式维甲酸诱导A549细胞凋亡机制的初步探讨

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制。方法MTT法观察ATRA对肺癌细胞株A549的生长抑制作用,流式细胞仪观察ATRA诱导A549细胞凋亡作用和对细胞周期的影响,Western Blot分析凋亡相关蛋白表达。结果ATRA抑制A549的增殖呈剂量依赖性;ATRA可诱导A549细胞凋亡,凋亡过程伴随caspase-3、caspase-9表达增加,而Bcl-2、Bcl-Xs/LP的表达无明显变化。结论ATRA可明显抑制A549细胞的增殖,可通过上调caspase-9、caspase-3的表达促进A549细胞凋亡。     

全反式维甲酸对骨髓基质细胞黏附功能及JWA基因表达变化的影响

目的探讨全反式维甲酸对骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells, BMSC)黏附功能及JWA基因表达的影响.方法全反式维甲酸(all trans retinoic acid, atRA)作用BMSC后,流式细胞仪检测BMSC细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1, ICAM-1)和血管黏附分子-1(vascular adhesion molecule-1, VCAM-1)的表达,检测共培养条件下BMSC细胞对Jurkat细胞的黏附率及Jurkat细胞生长曲线变化,RT-PCR方法检测BMSC JWA mRNA表达变化.结果 atRA作用后,BMSC表面ICAM-1、VCAM-1蛋白表达增加,BMSC对Jurkat细胞的黏附能力增强,并可促进Jurkat细胞增殖,BMSC内JWA-mRNA表达增强.结论 atRA可增强骨髓基质细胞黏附功能,并上调JWA基因表达.     

全反式维甲酸对卵巢癌细胞系作用的研究

目的：探讨全反式维甲酸（ATRA）对人卵巢细胞生长的抑制作用及可能机制。方法：应用MTT比色法、LDH检测及流式细胞仪周期分析对药物作用后的人卵巢癌腹水细胞系（COC1、COC2）、卵巢癌上皮细胞系（CA-OV3）3种卵巢癌细胞系进行检测。结果：ATRA能抑制卵巢癌细胞生长，当浓度达10μmol/L时，G0、G1期细胞比例增加，G2M、S期细胞比例下降，细胞增殖速度较对照组减缓。MTT及LDH检测提示在ATRA30μmol/L时，癌细胞抑制率最佳。结论：ATRA应用可有效抑制卵巢癌细胞增殖，促进细胞分化，从而达到抑瘤作用，并在ATRA10-30μmol/L时，作用最佳。     

维甲酸诱导前列腺癌细胞DU-145凋亡有关的基因克隆

目的 克隆维甲酸诱导的前列腺癌细胞ＤＵ－１４５凋亡的未知相关基因。方法 以全反式维甲酸（ａｌｌ－ｔｒａｎｓ ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ）诱导前列腺癌细胞系ＤＵ－１４５细胞凋亡,在此基础上,采用基于ＰＣＲ技术的改良消减杂交方法克前列腺癌凋亡相关基因。结果 成功克隆出一条与凋亡可能有密切关系的未夭基因。结果 成功克隆出一条与凋亡可能有密切关系的未知基因ｐｃａｒ,已被ＧｅｎＢａｎｋ收录,登录号为ＡＦ１７４     

全反式维甲酸和苯乙酸钠联合对人肝癌细胞的诱导分化作用

目的　探讨全反式维甲酸 (ATRA)和苯乙酸钠 (Na-PA)两者对人肝癌细胞联合作用 .方法　应用台盼蓝染色、MTT法、流式细胞仪、甲胎蛋白测定等方法检测 ATRA和Na PA两者联合对人肝癌细胞的诱导分化作用 .结果　 10μmol· L- 1 ATRA,2 .5 mmol· L- 1 Na PA及两者联合作用 ,可抑制人肝癌细胞株 SMMC- 772 1细胞的生长 ,使细胞恶性表型向正常转化 ,其联合作用组 7d抑制率达 6 6 .5 % ,并能明显降低甲胎蛋白的分泌量 4 9.2 % ,使细胞周期 G0 / G1 期延长5 8.7% ,S期下降 35 .8% (P<0 .0 5 ) ,影响 DNA合成 ,最终产生抑制增殖诱导细胞分化的作用 .结论　 ATRA,Na PA及两者联合应用均可抑制 SMMC- 772 1细胞生长 ,诱导细胞分化 ,ATRA和 Na PA联合对人肝癌细胞的诱导分化有协同作用 .