丹芍化纤胶囊治疗糖尿病肾病的实验研究

目的：观察丹芍化纤胶囊治疗对糖尿病肾病（DN）有无改善作用。方法：用链脲佐菌素（STZ）诱导SD大鼠糖尿病模型,每日分别予以依那普利（10 mg/kg）及丹芍化纤胶囊（0.8 g/kg）灌胃治疗,共观察8周。测定各组大鼠血糖、血肌酐、尿肌酐水平及24 h尿蛋白量,光镜下观察大鼠肾组织结构变化。结果：与正常对照组比较,糖尿病组及两治疗组的血糖、血肌酐、尿肌酐等指标明显改变（P〈0.05或P〈0.01）。丹芍化纤胶囊治疗组和依那普利治疗组大鼠24 h尿蛋白含量显著低于糖尿病模型组（P〈0.05）。HE及PAS染色光镜观察显示糖尿病模型组与两治疗组肾脏组织均有不同程度的肾小球基底膜增厚及纤维化,肾小管上皮细胞水变性和坏死,肾间质纤维组织增生及淋巴细胞浸润等病理改变,但两治疗组肾脏组织的损伤程度明显轻于糖尿病肾病模型组。结论：丹芍化纤胶囊治疗可减轻糖尿病肾病大鼠尿蛋白的排出量,并对糖尿病肾脏病变有一定的保护作用。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏细胞因子表达的影响及意义

目的探讨氯沙坦治疗糖尿病肾病的作用及其机制。方法采用单侧肾切除的STZ诱导的糖尿病大鼠，观测其肾脏形态、功能的变化。同时，采用荧光实时定量RT-PCR方法检测TGF—β1、CTGF、PAI-1等细胞因子在糖尿病大鼠肾脏中的表达情况。结果与正常组（NC组）相比，8周时糖尿病肾病组（DN组）大鼠的肾脏肥大指数（KW／BW）、平均肾小球体积（VG）、尿白蛋白排泄率（UAER）、肌酐清除率（Ccr）均升高。DN组肾皮质CTGF、PAI—1、FN表达水平也显着增高（p〈0．05）；与DN组相比较，氯沙坦治疗组的上述指标则均明显下降（p〈0．05）。结论氯沙坦可通遏抑制TGF—β1、CTGF、PAI-1等细胞因子的表达，对糖尿病人鼠肾脏起到保护作用。     

高糖对人近端肾小管上皮细胞TGF-β1、PAI-1基因表达的影响

目的观察高糖（HG）对人近端肾小管上皮细胞（HKC）分泌转化生长因子β1（TGF-β1）和纤溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）mRNA表达水平的影响。方法采用数字表法随机分为低糖组（5.5mmol／L,LG组）和HG组（25mmol／L）,分别培养于HKC中,于培养0、24和48h时收获细胞,并采用RT-PCR法检测两组HKC分泌TGF-β1和PAI-1 mRNA的表达水平。结果HG组培养24h和48h时的HKC分泌TGF-β1和PAI-1 mRNA表达水平均较LG组明显升高（均P〈0.01）。且两组培养48h时的上述指标均较24h时明显升高（均P〈0.O01）;经Spearman相关分析显示,HKC分泌PAI-1和TGF-β1 mRNA的表达水平之间存在正相关性（r=0.802,P〈0.01）。结论HG可刺激HKC分泌TGF-β1和PAI-1 mRNA表达水平的增高。     

TGF-β1对大鼠肾小球系膜细胞PAI-1表达的影响

目的：观察不同浓度重组人转化生长因子-β1（TGF-β1）对大鼠肾系膜细胞增殖情况和纤溶酶原激活物(PAI-1)抑制物表达水平的影响。方法：采用MTT和流式细胞仪检测细胞增殖,Western blotting和RT-PCR法检测PAI-1的表达水平。结果：与对照组相比,0.1和0.5 μg·L^-1 TGF-β1诱导肾小球系膜细胞增殖,增殖率分别为(146.6±10.2)%和(134.6±14.5)%,PAI-1 mRNA和蛋白表达增强;而5和25 μg·L^-1 TGF-β1诱导的细胞增殖率为(75.2±13.2)%和(67.5±11.1)%,PAI-1 mRNA和蛋白表达无明显变化。结论：低剂量TGF-β1促进大鼠系膜细胞增殖、诱导PAI-1表达;高剂量TGF-β1则抑制系膜细胞增殖。     

PAI-1在糖尿病肾病患者中的变化

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）患者血浆纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）和组织型纤溶酶原激活物（t-PA）活性水平的变化及其与糖尿病肾病（DN）的关系.方法 选择133例T2DM患者,根据尿蛋白排泄率（UAER）分为无DN组67例、DN微量白蛋白尿组51例、DN临床蛋白尿组15例,正常对照组27例.测定其血浆t-PA、PAI-1的活性水平.结果 T2DM各组患者血浆PAI-1水平均显著高于正常对照组,且随着UAER的增高而递增（P＜0.05,P＜0.01）;DN患者血浆PAI-1活性与UAER、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、空腹胰岛素（FINS）、胆固醇（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、甘油三酯（TC）、体重指数（BMI）呈显著正相关;t-PA活性在各组间差异无显著性.结论 DN患者血浆PAI-1活性增高;胰岛素抵抗、高TG、高LDL、高TC血症及肥胖等因素可能与PAI-1活性增高有关.     

胰岛素抵抗、PAI-1与糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨胰岛素抵抗(IR)程度、血浆组织纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平与2型糖尿病肾病(DN)患者病情严重程度的相关性。方法连续收集2010年1月至2012年11月在我院肾内科病区及内分泌科病区住院并诊断为DN的患者122例,按尿蛋白排泄率(UAER)水平分为微量白蛋白尿组(60例)和大量白蛋白尿组(62例)两组,检测DN患者血浆空腹胰岛素(Fins)、PAI-1水平并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),比较两组患者上述指标的差异,采用多因素Logistic回归分析方法分析HOMA-IR、PAI-1水平、低密度脂蛋白、总胆固醇、高血压、性别等多个自变量与DN患者病情严重程度(UAER>200μg/min)的相关性。结果大量白蛋白尿组DN患者血浆Fins、PAI-1水平及HOMA-IR均明显高于微量白蛋白组(P<0.01),Spearman相关分析显示DN患者HOMA-IR与PAI-1呈正相关(r=0.495,P<0.05),多因素Logistic回归分析显示HOMA-IR,PAI-1与糖尿病病程均是DN严重程度的独立预测因子。结论胰岛素抵抗、PAI-1是DN形成和发展的重要因素,两者相互作用加重DN的病情。     

宫颈癌中PAI-1、TGF-β1的表达及临床意义

目的：探讨纤溶酶原激活物抑制物1-（PAI—1）、转化生长因子-β1（TGF-β1）在宫颈癌中的表达及其在宫颈癌发生、发展中的作用。方法：采用Envision二步免疫组织化学方法检测宫颈癌石蜡包埋组织（63例，分为原位癌组、高分化组、中低分化组）与正常宫颈石蜡包埋组织（15例．对照组）中PAI—1、TGF-β1的表达。结果：（1）PAI-1在对照组、宫颈原位癌组、高分化组、中低分化组中的阳性表达率分别为0（0／15）、75．00％（6／8）、51．85％（1427）、82．14％（23／28）；对照组0（0／15）与宫颈癌组68．25％（43/63）间PAI—1蛋白阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．01）；宫颈癌各组间PAI—1蛋白阳性表达串差异有统计学意义（P〈0．01），PAI—1与病理分级有相关性。（2）TGF-β1在对照组、宫颈原位癌组、高分化组、中低分化组的细胞胞浆中的阳性表达率分别为13．33％（2／15）、95．00％（2／8）、48．15％（13，27）、71．43％（20，／28）：对照组13．33％（2／15）与宫颈癌组55．56％（35／63）间TGF-β1蛋白阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．01）；TGF—β1存各组间细胞胞浆中阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．01），与病理分级有关；而在各组细胞外基质中的阳性表达率分别为13．33％（2／15）、37．50%（3／8）、22．22％（6／27）、42．86％（12／28）；对照组与宫颈癌组33．33％（21/63）间基质中TGF-β1表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）在宫颈癌中TGF-β1对PAI-1的表达有正协同作用（r=0．282．P〈0．05）；其表达率与年龄、民族无关。结论：在宫颈癌组织中PAI-1、TGF-β1的异常表达提示与肿瘤的发生、发展密切相关，并促进肿瘤的浸润与转移，联合检测PAI—1、TGF-β1有可能成为预测子宫颈癌发展及预后的重要指标。     

vWF、PAI-1与糖尿病肾病关系的研究进展

糖尿病发生时,体内凝血及纤溶功能会发生一系列变化。血管性假性血友病因子(vWF)作为凝血功能的指标,是血管内皮细胞损伤的标志物。纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的水平能反映纤溶活性。糖尿病并发微血管病变尤其是糖尿病肾病时,两者的水平显著升高。vWF、PAI-1与糖尿病肾病关系的研究对于认识糖尿病肾病的发生机制及对糖尿病肾病的诊断和治疗有重要的临床意义。     

丹芍化纤胶囊对基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的：探讨丹芍化纤胶囊抗大鼠肝纤维化的作用及对基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠80只分为正常组、肝纤维化模型组、自然恢复组、低剂量治疗组、高剂量治疗组,除正常组外,其余采用四氯化碳(CCl4)、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周,然后两治疗组分别予以低剂量(0．5g／kg)、高剂量(1g／kg)丹芍化纤胶囊灌胃8周。实验结束后测定肝脏指数、血清透明质酸(HA)及谷丙转氨酶(ALT),光镜下观察肝组织纤维化程度,检测尿羟脯氨酸(Hyp)排出量,同时免疫组织化学SABC法检测肝组织MMP-1的表达。结果：治疗组与肝纤维化模型组及自然恢复组比较,肝脏指数、血清HA及ALT显著下降,肝纤维化程度显著减轻,尿Hyp排出明显增加,肝脏MMP-1表达显著增加。以上结果均以高剂量组较低剂量组改善明显。结论：丹芍化纤胶囊增加大鼠肝组织中MMP-1的表达,可能是其抗纤维化作用的机制之一。     

糖尿病大鼠肾脏PAI-1、TIMP-1表达的变化

目的:动态观察纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)在糖尿病大鼠肾脏中的表达,探讨PAI-1及TIMP-1在糖尿病肾病(DN)肾纤维化发生、发展过程中的作用.方法:链脲菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病肾病,免疫组织化学的方法动态观察糖尿病.肾病发生、发展过程中大鼠肾脏PAI-1、TIMP-1及纤维连接蛋白(FN)表达.结果:PAI.1、TIMP.1及FN表达从糖尿病2周起较正常对照组明显增多(P<0.01),PAI-1和TIMP-1阳性表达主要位于肾小管上皮细胞胞浆内,FN阳性表达主要位于肾小管间质和肾小球,且随着糖尿病进展有逐渐增加的趋势.结论:PAI-1和TIMP-1在肾小管上皮细胞的高表达可能参与了糖尿病肾病过程中肾纤维化的形成.     

芪术胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1和CTGF表达的影响

目的 观察芪术胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏保护作用.方法 采用单侧肾脏切除和腹腔注射链脲佐菌素的方法来建立大鼠糖尿病肾病模型,随机分为正常（NC）组、模型组（DM）、芪术胶囊（QZ）组、氯沙坦钾（LSTJ）组;成模1周后,QZ组按 1 g·kg-1给药,LSTJ组按 1.67 mg·kg-1给药.实验8周末观察各组大鼠血尿素氮BUN、血肌酐（Scr）、糖化血红蛋白（HbAlc）、胱抑素（CysC）以及24 h尿蛋白定量,并进行肾组织病理形态学观察以及免疫组化法检测肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）与结缔组织生长因子（CTGF）的蛋白表达.结果 与DM组相比：QZ组大鼠血清 BUN、Scr、HbAlc、Cys-c和24 h尿蛋白定量明显减低,肾组织病理形态学改变程度均明显改善,大鼠肾小球TGF-β1和CTGF表达均减弱.结论 芪术胶囊可以减少尿蛋白,降低血糖,改善肾功能,下调肾组织TGF-β1和CTGF表达,起到保护肾脏,延缓DN进展的作用.     

丹芍化纤胶囊治疗大鼠肝纤维化对金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的影响

目的：探讨丹芍化纤胶囊对大鼠实验性肝纤维化TIMP-1表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠80只分为正常组、肝纤维化模型组、自然恢复组、低剂量治疗组、高剂量治疗组,除正常组外,其余采用CCl4、饮酒、高脂低蛋白饮食等复合病因刺激制备肝纤维化动物模型8周,然后两治疗组分别予以低剂量(0．5g／kg)、高剂量(1g／kg)丹芍化纤胶囊灌胃治疗8周。实验结束后测定肝脏指数、血清透明质酸(HA)及谷丙转氨酶(ALT),光镜下观察肝组织纤维化程度,检测尿羟脯氨酸(Hyp)排出量,同时用免疫组化SABC法检测肝组织中TIMP-1的表达。结果：治疗组与肝纤维化模型组、自然恢复组比较：肝脏指数、血清HA及ALT显著下降;肝纤维化程度显著减轻;尿Hyp排出明显增加;治疗组肝组织中TIMP-1的表达与肝纤维化模型组和自然恢复组相比则显著降低。结论：丹芍化纤胶囊能够抑制肝纤维化组织中TIMP-1的表达,从而提高MMP-1的活性,促进细胞外基质的降解,这可能是丹芍化纤胶囊抗肝纤维化作用的机制之一。     

益肾汤联合肾衰一体化治疗对慢性肾衰竭患者血清TGF-β1及PAI-1的影响

【目的】探讨益肾汤联合肾衰一体化治疗对慢性肾衰竭患者血清转化生长因子β1(TGF-β1)及纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的影响。【方法】将128例慢性肾衰竭患者随机分为对照组和观察组,每组各64例。对照组给予肾衰一体化治疗,观察组给予益肾汤联合肾衰一体化治疗,疗程为2个月。观察2组患者治疗前后血清炎性细胞因子、肾功能指标、肾脏血流动力学指标、血管内皮生长因子（VEGF）、血清TGF-β1和PAI-1水平、中医证候积分和主观综合性营养评分以及生活质量健康调查简表（SF-36）评分的变化情况,并评价2组患者的临床疗效。【结果】（1）治疗2个月后,观察组的总有效率为89.1%(57/64),对照组为70.3%(45/64),组间比较,观察组的疗效明显优于对照组（P<0.01）。（2）治疗后,2组患者的血清白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平均较治疗前明显降低（P<0.05）,且观察组的血清IL-6、MCP-1和ICAM-1水平均明显低于对照组（P<0.01）。（3）治疗后,2组患者的血清肌酐（Scr）和尿素氮...     

橙皮苷对IgA肾病大鼠肾脏组织中PAI-1蛋白表达的影响

目的 探讨橙皮苷对IgA肾病大鼠纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)表达的影响.方法 60只雄性SD大鼠,随机分为正常组,模型组和橙皮苷治疗组,每组20只,模型建立成功后给予相应药物治疗,于治疗4、8周后处死大鼠各半,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),肾脏病理学,同时半定量PCR和Western Blot测定PAI-1蛋白和mRNA表达水平.结果 造模期间模型组、治疗组与正常组相比,大鼠第6周末开始出现镜下血尿(P<0.05),橙皮苷治疗后,有一定下降(P<0.05);与正常组相比,模型组血清24 h UP、Scr、BUN、IL-2和PAF明显升高(P<0.05),治疗组治疗4周后明显下降(P<0.05),治疗8周后进一步降低;PLT和PT在治疗前后没有明显变化;与正常组相比,模型组APTT明显降低(P<0.05),治疗4周后明显升高(P<0.05),治疗8周后进一步升高;光镜下正常组大鼠肾小球形态正常,模型组肾小球系膜细胞和系膜基质中重度增生,橙皮苷治疗后肾小球系膜细胞和系膜基质增生得到明显缓解;与正常组相比,模型组PAI-1蛋白和mRNA表达明显降低,橙皮苷治疗4周后明显升高(P<0.05),治疗8周后基本和治疗4周后一致.结论 橙皮苷可明显减少血尿、减轻病理改变,改善肾功能,其机制可能是橙皮苷通过增加PAI-1的产生而发挥作用的.     

益气化瘀化痰法对肺纤维化大鼠TGF-β1、PAI-1的影响

目的探讨益气化瘀化痰法对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的影响。方法采用气管内一次性注射博来霉素5mg/kg诱导生成肺纤维化大鼠模型。将105只SD大鼠分为:正常对照组、模型组、益气组、化瘀组、化痰组、益气化瘀化痰组、激素组。正常对照组和模型组采用生理盐水灌胃,其余各组于造模后28d分别给予益气汤、化瘀汤、化痰汤、益气化瘀化痰汤30g.kg-1.d-1灌胃,激素组给予皮下注射氢化可的松20mg.kg-1.d-1干预,2个月后处死各组大鼠,ELISA法检测各组大鼠血浆PAI-1含量,Western blot法检测各组大鼠肺组织TGF-β1蛋白表达。结果益气组、化瘀组、化痰组及益气化瘀化痰组大鼠血浆PAI-1含量水平较模型组均降低(P<0.05),其中益气化瘀化痰组降低最显著(P<0.05);益气组、化瘀组、化痰组及益气化瘀化痰组大鼠肺组织TGF-β1蛋白表达较模型组均减弱(P<0.05),尤以益气化瘀化痰组减弱最明显(P<0.05)。结论益气、化瘀、化痰法能显著改善博来霉素所致大鼠肺纤维化的程度,其机制可能与抑制TGF-β1及PAI-1的表达有关。     

云南灯盏花胶囊对慢性肾功能衰竭大鼠TGF-β_1与PAI-1 mRNA表达及肾功能的影响

目的:研究中药复方制剂云南灯盏花胶囊对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠肾功能及肾组织纤维化的影响。方法:60只SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、苯那普利组和灯盏花组。应用Platt 5/6肾切除方法制备CRF模型。苯那普利组予盐酸苯那普利(0.29 mg/100 g)灌胃,灯盏花组予灯盏花胶囊(0.3 g/100 g)灌胃,正常组及模型组予等量生理盐水灌胃,疗程12周。检测各组大鼠血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量;RT-PCR方法检测各组大鼠肾组织肿瘤生长因子-β1(TGF-β1)、血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的mRNA表达。结果:灯盏花组及苯那普利组大鼠血清肌酐、尿素氮浓度和24 h尿蛋白定量与模型组比较均明显降低(P0.05),且灯盏花组大鼠血清肌酐、24 h尿蛋白定量均低于苯那普利组(P0.05)。灯盏花组、苯那普利组大鼠肾组织TGF-β1和PAI-1 mRNA表达均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),且灯盏花组TGF-β1和PAI-1 mRNA表达水平低于苯那普利组(P0.05)。结论:云南灯盏花胶囊能改善CRF大鼠的肾功能,抑制肾组织纤维化。     

糖尿病肾病蛋白尿与尿TGF-β1水平的关系

目的 探讨2型糖尿病肾病患者蛋白尿与尿TGF-β1水平的关系.方法 88例糖尿病肾病患者,慢性肾脏病(CKD)Ⅱ～Ⅳ期,根据24 h尿蛋白定量分为两组,其中组1患者40例,24 h尿蛋白定量>1.5 g/24 h;组2患者48例,24 h尿蛋白定量<1.5 g/24 h.ELISA法检测尿TGF-β1水平,并进行组间比较;对24 h尿蛋白定量与尿TGF-β1水平进行直线相关分析.结果 组1和组2患者24 h尿蛋白定量分别为(2.1±0.5) g/24 h和(1.3±0.2) g/24 h,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);组1患者尿TGF-β1水平明显高于组2,为(82±27) pg/mL vs (57±20) pg/mL,组间比较差异有统计学意义(P<0.01);组1患者尿TGF-β1水平与蛋白尿呈显著正相关(r＝0.51, P<0.05).结论 糖尿病肾病蛋白尿增多与尿TGF-β1水平增高相关;尿TGF-β1水平测定可能是预测临床糖尿病肾病预后的一种比较实用的方法.     

PAI-1在糖尿病大鼠肾脏表达的动态观察

目的:动态观察大鼠糖尿病肾病发生、发展过程中纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)在肾脏的表达变化,旨在探讨PAI-1在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾纤维化发病机制中的作用.方法:链脲菌素(streptozocin,STZ)诱导大鼠糖尿病肾病,以免疫组织化学及荧光实时定量PCR(RT-PCR)的方法动态观察糖尿病肾病发生、发展过程中大鼠肾脏PAI-1蛋白及mRNA的表达.结果:PAI-1蛋白表达从糖尿病2周起较正常对照组明显增多(P＜0.05),且随着糖尿病进展有逐渐增加的趋势,阳性表达主要位于肾小管上皮细胞的胞浆内.用RT-PCR的方法检测大鼠肾脏PAI-1 mRNA的表达,结果显示16周DN组大鼠肾组织中PAI-1 mRNA的表达显著高于正常对照组大鼠(P＜0.05).结论:PAI-1表达上调可能参与了糖尿病肾病中肾脏纤维化形成的过程.     

罗格列酮对高糖条件下大鼠肾脏成纤维细胞TGF-β1和PAI-1mRNA表达的影响

目的:观察罗格列酮(RGZ)对高糖环境下大鼠肾脏成纤维细胞(NRK)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)mRNA表达的影响,探讨RGZ对糖尿病肾病的保护作用及其机制.方法:体外培养NRK细胞,分成正常对照组(NG,含1 000 mg/L D-葡萄糖)、高糖组(HG,含4 500 mg/L D-葡萄糖)、HG RGZ(5 μmol/L)组、HG RGZ(10 μmol/L)组和HG RGZ(15 μmol/L)组,作用24 h后,提取细胞RNA,用RT-PCR检测各组TGF-β1和PAI-1 mRNA的表达情况.结果:HG组细胞TGF-β1和PAI-1 mRNA水平较NG组显著升高,RGZ可抑制这种高表达,其作用呈剂量依赖性.结论:RGZ可以改善高糖导致的肾脏成纤维细胞的损害,具有一定的肾脏保护作用.