葡萄糖浓度波动对体外内皮细胞丙二醛和抗氧化因子影响

目的 研究波动性葡萄糖和恒定高葡萄糖对体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的氧化应激因子丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)及超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)含量的影响,探讨波动性葡萄糖造成糖尿病慢性血管并发症的可能机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞株,分为正常对照(normal control,NG)组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L);恒定高葡萄糖(constant high glucose,HG)组(含葡萄糖浓度为25 mmol/L);波动性葡萄糖(fluctuated glucose,FG)组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L与葡萄糖浓度为25 mmol/L 2种条件培养液,每8 h更换1次);NG组和HG组同样每8 h更换培养液,共作用72 h.用分光光度比色法检测MDA、GSH,SOD的含量或活力.结果 FG组与HG组相比,MDA含量明显上升[(7.63±0.42)μmol/L比(6.54±0.35)μmol/L,P<0.05]; GSH、SOD含量或活力明显下降,差异有统计学意义[分别为(78.47±2.77)mg/L比(86.43±2.79)mg/L,P<0.05;(28.57±2.75)U/mL比(33.66±1.71)U/mL,P<0.01]. FG组和HG组与NG组相比,MDA含量明显上升,GSH、SOD含量或活力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05或0.01).结论 波动性葡萄糖可能比持续高血糖对血管内皮损害更大.     

新生儿窒息脐血一氧化氮和血糖水平与其预后关系的探讨

目的探讨新生儿窒息脐血一氧化氮(NO)及血糖变化的临床意义.方法对30例窒息新生儿脐血NO和血糖水平进行检测,并与32例正常新生儿比较.结果窒息组的脐血NO2- (43.74±13.20)μmol/L、血糖(5.63±1.20)mmol/L明显高于对照组脐血NO2- (27.28±9.52)μmol/L和血糖(3.65±0.79)mmol/L (P＜0.01);重度窒息组脐血NO2- (60.17±9.93)μmol/L和血糖(7.25±0.54)mmol/L显著高于轻度窒息组(36.72±6.33)μmol/L和(4.93±0.53)mmol/L(P＜0.01);NO和血糖水平呈显著正相关,而且脐血NO水平与新生儿缺氧缺血性脑病密切相关.结论新生儿窒息脐血NO和血糖水平的测定具有重要临床意义.     

高糖环境对HSkMCs细胞株线粒体融合蛋白2表达及细胞凋亡的影响

目的:探讨高糖对人骨骼肌细胞株(HSkMCs)线粒体融合蛋白2(mfn2)表达及细胞凋亡的影响。方法:体外培养HSkMCs细胞株,将细胞分别以5.55 mmol/L,11.10 mmol/L,22.20 mmol/L葡糖糖培养48 h,检测mfn2mRNA表达及细胞凋亡情况。RT-PCR法测定基因表达,流式细胞技术检测细胞凋亡。结果:以5.55 mmol/L葡萄糖组培养48 h为基础对照,11.10 mmol/L组mfn2表达较对照组下降12.3%(P<0.05);22.20 mmol/L组mfn2表达较对照组降低47.3%(P<0.05);对照组细胞凋亡率为(1.80±0.57)%,11.10 mmol/L葡萄糖组细胞凋亡率为(13.23±1.47)%,22.20 mmol/L葡萄糖组细胞凋亡率为(24.03±3.05)%,均较对照组显著增加(P<0.05)。结论:高糖可诱导HSkMCs细胞mfn2 mRNA表达下调,增加其凋亡。     

姬松茸多糖对运动力竭小鼠肾脏的保护作用研究

目的 探讨姬松茸多糖对运动力竭小鼠肾脏的保护作用.方法 将36只昆明种小鼠按数字表法随机分为对照组、力竭组及姬松茸多糖干预组.力竭运动24 h后,处死小鼠取肾脏,一部分肾脏的匀浆液用于检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;另一部分用于实时定量PCR检测凋亡相关基因bcl-2和bax的表达水平,并计算bcl-2/bax值.结果 与对照组相比,力竭组SOD活性明显降低(P＜0.01),MDA含量明显升高(P＜0.01);而姬松茸多糖组与力竭组相比,力竭SOD活性明显升高(P＜0.01),MDA水平显著降低(P＜0.05).凋亡基因检测结果表明,力竭组与对照组相比,bcl-2的表达水平明显降低(P＜0.01),Bax表达明显升高(P＜0.05),bcl-2/bax比值明显降低(P＜0.01);姬松茸多糖组与力竭组相比,bcl-2表达水平显著升高(P＜0.05),而bax表达水平无明显变化(P＞0.05),bcl-2/bax比值明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 姬松茸多糖可以提高肾脏细胞的抗氧化能力,并能通过调节凋亡相关基因的表达水平来增强肾脏细胞抗凋亡的能力.     

白蛋白联合低氧对NRK-52E细胞凋亡的影响

目的:探讨白蛋白联合低氧对肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡的影响.方法:应用流式细胞技术检测NRK-52E细胞在不同质量浓度白蛋白(0、10、20、30和40 g/L)和常氧(含体积分数为5%CO2的空气)条件下培养24 h的凋亡率,得到最适的白蛋白质量浓度;再应用流式细胞技术检测NRK-52E细胞在30 g/L白蛋白和低氧(体积分数为1%O2、5%CO2和94%N2)联合培养24 h的凋亡率,同时设常氧对照组、低氧对照组和常氧+30 g/L白蛋白培养组.采用RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2和bax mRNA表达.结果:在常氧环境下NRK-52E细胞凋亡率随白蛋白质量浓度的增加而增高(F=55.748,P＜0.001).常氧对照组、低氧对照组和常氧+30 g/L白蛋白培养组及低氧+30 g/L白蛋白培养组NRK-52E细胞凋亡率(F=112.174,P＜0.001)、bax mRNA(F=114.522.P＜0.001)和bcl-2 mRNA(F=63.097,P＜0.001)的表达差异均有统计学意义.低氧+30 g/L白蛋白培养组的凋亡率[(37.36.±4.95)%vs(25.59±3.32)%.P＜0.05)和bax mRNA的表达(2.54±0.19vs1.87±0.19,P＜0.05)高于常氧+30 g/L白蛋白培养组,而bcl-2 mRNA的表达则低于常氧+30 g/L白蛋白培养组[(0.42±0.08)vs(0.66±0.05)](P＜0.05).结论:低氧可加剧向蛋白诱导的NRK-52E细胞凋亡,其机制可能与促进bax mRNA高表达和bcl-2 mRNA低表达有关.     

左归降糖益肾方含药血浆对高糖培养小鼠足细胞凋亡的影响

目的：探讨在高糖作用下,体外培养的小鼠足细胞凋亡及bax、bcl-2表达水平的变化,及左归降糖益肾方含药血浆的调控作用。方法将体外培养的小鼠足细胞随机分为空白组(A组,25 mmoL/L葡萄糖,10%空白血浆)、高糖组(B组,200 mmoL/L 葡萄糖,10%空白血浆)、左归降糖益肾方含药血浆组（C 组,200 mmoL/L 葡萄糖,10%含药血浆）,4-苯基丁酸（4-PBA）含药血浆组（D组,200 mmoL/L葡萄糖,10%含药血浆）。采用间接免疫荧光细胞化学法检测足细胞凋亡情况;MTT自动比色法检测足细胞活力,蛋白质印迹法和逆转录-聚合酶链反应法分别检测bax及bcl-2蛋白或mRNA表达水平的变化。结果与A组相比,B组足细胞活力降低,bax及 bcl-2蛋白或mRNA的表达水平均升高（P＜0.01）;与B组相比,C组、D组足细胞活力升高,bax蛋白或mRNA的表达水平均降低（P＜0.05或P＜0.01）,bcl-2蛋白或mRNA的表达水平均升高（P＜0.01）;与C组比,D组足细胞活力升高（P＜0.05),但bax及bcl-2蛋白或mRNA的表达水平,差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 bax及bcl-2蛋白或mRNA表达水平的升高,是足细胞损伤的分子机制之一;左归降糖益肾方含药血浆可以通过影响bax及bcl-2蛋白或mRNA的表达水平,从而抑制足细胞凋亡。     

bcl-2、bax在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的表达及意义

目的 探讨凋亡蛋白bcl-2、bax在非酒精性脂肪性肝病形成过程中肝细胞凋亡的调控作用.方法 高脂饮食建立非酒精性脂肪肝病模型,流式细胞仪检测高脂饮食组(F组)、正常饮食组(C组)大鼠4、8、12周肝细胞凋亡指数,免疫组织化学法及Western-Blot检测bcl-2、bax在肝组织的表达情况.结果 F组4周肝细胞凋亡百分数(4.20±0.40)与C组肝细胞(4.10±0.30)无明显差异,但F组8、12周肝细胞凋亡百分数明显增加,分别为9.20±0.40、11.60±1.10,C组8、12周分别为4.30±0.30、4.30±0.20,差异有统计学意义(P＜0.01);F组bcl-2、bax蛋白的表达随着时间延长增高,尤以F组8周及12周增加明显,与C组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);随着脂肪肝的进展,bcl-2/bax比率逐渐下降.结论 在NAFL 发生过程中,bcl-2、bax均被诱导,但二者表达的相对比例异常,参与了对NAFL肝细胞凋亡的调控.     

一氧化氮诱导肝癌细胞凋亡过程bcl-2和bax mRNA表达水平的变化

目的 探讨在一氧化氮(NO)诱导肝癌细胞凋亡过程bcl-2和bax mRNA表达水平的动态变化。方法 用NO供体硝普钠(SNP)诱导SMMC-7721和HepG2肝癌细胞株凋亡，RT-PCR的方法检测bcl-2、ba xmRNA表达水平，并采用凝胶分析系统进行半定量分析。结果 1．0mmol/L可降低SMMC-7721和HepG2细胞bcL2、bax mRNA的表达水平，提高bax/bc1-2 mRNA的比值并呈时间依赖性。HepG2细胞bcl-2和bax mRNA降低的幅度较SMMC-7721细胞小(P＜0．05)，开始变化的时间也较SMMC-7721细胞迟。结论 NO诱导肝癌细胞株的凋亡，可能与其bcl-2、bax mRNA表达水平变化导致bax/bc1-2 mRNA比值上升有关。     

神经酰胺对人内皮细胞凋亡及bax、bcl-2表达的影响

目的 观察外源性神经酰胺(C2-ceramide)对内皮细胞凋亡及相关基因bax和bcl-2表达变化的影响.方法 原代培养人脐静脉血管内皮细胞,加药组加入终浓度分别为5、12.5、25、50 μmol/L的C2-ceramide,对照组加入体积分数为0.1%的无水乙醇.采用TUNEL法检测细胞凋亡,用RT-PCR、Western blot技术对bax mRNA、bcl-2 mRNA及蛋白表达进行分析.结果 加药组内皮细胞的凋亡阳性率显著高于对照组(P＜0.05),且具有时间和剂量依赖性;加药组bax mRNA及蛋白的表达较对照组显著升高(P＜0.05),bcl-2 mRNA及蛋白的表达较对照组则显著降低(P＜0.05).结论 外源性神经酰胺通过上调bax及下调bcl-2表达水平,改变bax/bcl-2值,从而诱导内皮细胞凋亡.     

高糖诱导人脐静脉血管内皮细胞损伤及盐酸曲美他嗪对其保护作用的实验研究

目的:探讨盐酸曲美他嗪对体外高糖诱导人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制.方法:将人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC分别培养在含5.5mmol/L葡萄糖(A组)、30mmol/L葡萄糖(B组)、30mmol/L葡萄糖+1μmol/L盐酸曲美他嗪(C组)、30mmol/L葡萄糖+10μmol/L盐酸曲美他嗪(D组)、30mmol/L葡萄糖+100μmol/L盐酸曲美他嗪(E组)的培养基中培养48小时,分别进行细胞活力、内皮素-1(ET-1)分泌量的测定.结果:B、C、D、E组的细胞活力、ET-1的分泌量与A组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);C、D、E组的细胞活力、ET-1的分泌量与B组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:盐酸曲美他嗪对体外高糖诱导损伤的内皮细胞具有保护作用,其作用机制可能通过保护细胞线粒体、清除活性氧、抑制ET-1的分泌而实现对高糖损伤血管内皮细胞的保护效应.     

胞宫虚寒证与胞宫寒凝证的诊治

从临床角度,对胞宫虚寒证和胞宫寒凝证的诊断要点和治疗方法进行了论述和区别,对二者所属的妇科常见病一一作了分析,并提出相应的治则和方药,为临床妇科病的诊治提供了经验和方法。     

论中医腹诊源流与原理

论述了腹诊的起源与发展,并从脏象、经络、气血津液三个方面分析了胸腹的生理、病理意义。胁腹与脏象、经络的关系,对诊腹以判断病位尤为重要,而气血津液理论可以说明证候的虚实,鉴别某些病邪性质。认为作为局部诊法的腹诊,能够反映整体功能状況及其病理变化,体现了整体观的特点。     

大鼠正中神经和桡神经纤维起始细胞的分布与分布模式

将辣根过氧化物酶(HRP)注入大鼠正中神经或桡神经干内,标记细胞出现在注射侧脊髓前角和脊神经节内。正中神经组:出现在脊髓C_4～T_2节段,在前角外侧群中的分布偏向背侧;在脊神经节分布于C_6～T_2节段。桡神经组:出现在脊髓C_4～T_1节段,在前角外侧群中的分布偏向腹侧;在脊神经节分布于C_6～T_1节段。     

胰体尾部肿瘤早期诊断与治疗

目的探讨胰腺体尾部肿瘤的早期诊断和选择合适的治疗方法。方法总结1998年9月—2012年10月收治的29例胰腺体尾部肿瘤患者的临床资料并进行回顾性分析。结果 29例均进行手术治疗,治愈28例,死亡1例。致死原因为胰瘘和多器官功能障碍综合征。胰瘘和腹腔感染是主要的并发症。结论胰腺体尾部肿瘤早期诊断困难,腹部B超和CT检查有助于早期发现本病。手术是胰体尾部肿瘤最佳的治疗方式。关键是采取个体化的手术方式,选择合理的治疗方法可提高治愈率。     

糖尿病大鼠HDL-C和LDL-C的变化及丝胶的调节作用

目的：探讨丝胶对2型糖尿病大鼠低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)的调节作用。方法：48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组12只大鼠。25mg/kg链脲佐菌素腹腔注射3d(1次/d)建立2型糖尿病大鼠模型;模型成功建立后,糖尿病模型组大鼠不再做任何处理,丝胶治疗组大鼠给予丝胶(2.4g/kg/d)灌胃35d,阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.3mg/kg/d)灌胃35d。分别检测各组大鼠的血糖以及血清HLD-C和LDL-C的水平。结果：与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠的血糖、LDL-C明显升高,HDL-C明显降低(P＜0.01,P＜0.05);与模型组大鼠比较,丝胶治疗组、阳性对照组大鼠的血糖、LDL-C明显降低,HDL-C明显升高(P＜0.01)。结论：丝胶可通过提高HDL-C水平、降低LDL-C水平改善糖尿病时血脂代谢紊乱。     

心机械图血流动力学微机自动监测系统的设计与应用

本文报道作者自行设计软件程序与接口,将修复后的生理记录仪与AppleⅠ型微机进行联机监测,组成一个全自动无创性血流动力学智能化监测系统。多道生理记录仪将同步的心电、心音、心尖搏动和颈动脉搏动图输入计算机,进行测量及计算分析,最后打印诊断报告。可自动分析诊断24种心功能状态。通过临床110例应用表明其与临床综合观察诊断符合率达98/%,人机采点相关系数为0.90,人机分析相关系数为0.98,能满足临床及科研要求。     

月之盈缺与气血盛衰实验研究

通过血象实验研究月之盈缺与青少年气血盛衰的规律,结果表明,青少年女性气血盛衰与月节律变化(即月之盈缺),有明显的同步性。即呈中—高—低的变化规律;而青少年男性,呈高—中—低的变化规律。上述青少年气血盛衰的规律,反映了随月之盈缺时问,人体防御外邪能力的变化。说明青少年处于生长发育盛期,阴阳属性明显,易受天时影响,亦是祖国医学“天人相应”理论科学性的有力证据。     

食管癌与结肠癌及其癌旁组织端粒酶活性的检测

①目的 建立测定端粒酶活性的PCR－TRAP方法，并探讨其对食管癌、结肠癌诊断的意义。②方法 应用PCR－TRAP方法，对36例食管癌、40例结肠癌及其癌旁组织进行了粒酶活性的检测。③结果 36例食管鳞状细胞癌组织端粒酶活性阳性检出率为80．50％，癌旁组织阳性检出率为6．00％，二者相比，差异有极显著意义（χ^2＝41．3，P＜0．001）。其中17例伴淋巴结转移中端粒酶活性均呈阳性，而未伴随淋巴结转移的病人中端粒酶活性阳性检出率为63．15％，二者差异有极显著性（χ^2＝7．02，P＜0．01）。40例结肠腺癌组织中端粒酶活性阳性检出率为91．75％，癌旁组织中阳性检出率为5．00％，两者相比差异有极显著性（χ62＝60．26，P＜0．001）；40例结肠癌均为腺细胞癌，其中12例伴淋巴结转移的标本中10例检测出活性，而29例未伴随淋巴结转移的病人中，有27例均为腺细胞癌，其中11例伴淋巴结转移的标本中10例检测出活性，而29例未伴随淋巴结转移的病人中，有27例检出端粒酶的活性，两者相比差异无显著性（P＞0．05）。④ 结论 端粒酶活性增高可能是致食管、结肠组织癌变的重要因素；端粒酶活性的检出可作为食管癌、结肠癌诊断的指标之一。