我国某地首株O139霍乱弧菌某些特征的研究

我国某地１９９６年６月从一名腹泻病人粪便中分离出首例Ｏ１３９霍乱弧菌，并将该菌与国内外菌株形态，生化和遗传学特性进行了比较研究，结果表明此菌株与国内外Ｏ１３９流行菌株具有相似的表型特性（Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ），形态，生化特性与Ｏ１群相似，但对弧菌抑制剂（Ｏ／１２９）不敏感，不被Ｏ１多价血清凝集；用已知的几种霍乱弧菌毒素基因探针与被测Ｏ１３９菌株ＤＮＡ杂交，结果显示都具有ｃｔｘ，ｚｏｔ，ａｃｅ基因；ＰＣＲ检测ｃｔｘＡ基因与Ｏ１群霍乱流行株具有相同的扩增产物；ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析外膜蛋白所有Ｏ１３９菌株图谱相似；用１６ＳｒＲＮＡ基因探针与ＢｇｌⅠ酶切的染色体ＤＮＡ杂交，结果表明此菌株与中国及国外菌株分属于不同的核糖体基因型（Ｒｉｂｏｔｙｐｅ，ＲＴ），而且与当年的Ｏ１群流行菌株具有相似的ＲＴ型，推测该菌株可能是Ｏ１群的突变株，对新毒株Ｏ１３９的出现应引起我们高度重视。     

霍乱弧菌16SrRNA基因分型研究

利用１６ＳｒＲＮＡ基因探针分析了某地不同时期分离的８８株霍乱弧菌经ＢｇｌⅠ消化的１６ＳｒＲＮＡ基因限制性酶谱,结果发现各菌株的杂交片断范围为２－１２ｋｂ,每个菌株有６－９条杂交带不等。８８株霍乱菌株可分为９个１６ＳｒＮＲＡ基因型（ＲＴ）,其中ＥＶＣ可分为６个ＲＴ,ＶＣＯ１３９分为３个ＲＴ,认为霍乱流行菌株基因型的变迁可能是引起新一次流行的原因。结合ｃｔｘＡＢ基因检测结果,我们认为ＶＣＯ１３９与ＥＶ     

多重PCR在幽门螺杆菌检测及分型中的应用

应用多重ＰＣＲ同时扩增１６ＳｒＲＮＡ和ｃａｇＡ基因来检测幽门螺杆菌感染及其分型。ＰＣＲ产物经ＤＮＡ序列测定证实为转异性扩增，敏感度为１０＾２ＣＦＵ／ｍｌ。４８株Ｈｐ菌株中，Ｉ型菌株（ｃａｇＡ＋）２６株（５４．２％）；５５０份胃粘液标本，Ｈｐ阳性（１６ＳｒＲＮＡ基因＋）２１６份（４７．５％），其中Ｉ型Ｈｐ１３９份（５３．３％）。     

O139霍乱弧菌生物学特性及药物敏感性分析

为了有效，准确地检测霍乱弧菌，在某地水样泻患者的粪便中分离４株Ｏ１３９霍乱弧菌，经对分离株的生物学特性，血清学及药物敏感性进行研究，并与Ｏ１群霍乱弧菌进行比较。结果表明，Ｏ１３９霍乱弧菌具有Ｏ１群同样的生化特性，但不与Ｏ１群霍乱弧菌抗血清凝集，仅与Ｏ１３９霍乱弧菌抗血清在玻片上呈强凝集，试管凝集滴度为１：６４０～１：２５６０，所有菌株都使鸡红细胞凝集，对羊红细胞溶血的作用可变，所有菌株对霍乱Ｏ１群     

应用多重聚合酶链反应检测致病性霍乱弧菌

本研究分别针对霍乱弧菌的外膜蛋白基因 (ｏｍｐＷ )和肠毒素Ａ亚单位基因 (ｃｔｘＡ)设计引物 ,建立的多重聚合酶链反应 (ＰＣＲ)方法 ,可准确地将产毒霍乱弧菌与非产毒霍乱弧菌、副溶血性弧菌、河弧菌、志贺菌、沙门菌和致病性大肠埃希菌加以鉴别。1.菌株 :10株Ｏ1群古典型 (标准株 16 0 17) ,14株Ｏ1群埃尔托型 (标准株 180 2 0 ) ,7株Ｏ139,13株非Ｏ1非Ｏ139,12株副溶血性弧菌 ,7株河弧菌 ,7株沙门菌 (标准株 5 12 5 2 ) ,10株志贺菌 (标准株 5 0 0 71) ,5株ＥＴＥＣ ,7株ＥＨＥＣ(1株Ｏ15 7∶Ｈ7) ,由中国药品生物制品检定所、军事医学…     

O139霍乱弧菌生物学特性及药物敏感性分析

为了有效、准确地检测霍乱弧菌，在某地水样泻患者的粪便中分离４株Ｏ１３９霍乱弧菌，经对分离株的生物学特性、血清学及药物敏感性进行研究，并与Ｏ１群霍乱弧菌进行比较。结果表明，Ｏ１３９霍乱弧菌具有Ｏ１群同样的生化特性，但不与Ｏ１群霍乱弧菌抗血清凝集，仅与Ｏ１３９霍乱弧菌抗血清在玻片上呈强凝集，试管凝集滴度为１：６４０～１：２５６０，所有菌株都使鸡红细胞凝集，对羊红细胞溶血的作用可变。所有菌株对霍乱Ｏ１群特异的ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ＇ｓ噬菌体有抗性，对Ｏ／１２９多粘菌素Ｂ等药物耐药；而对红霉素、环丙氟哌酸等抗生素敏感。Ｏ１３９与Ｏ１群霍乱弧菌的不同特征，可作为鉴别的参考依据，但由于观察的菌株尚少，有待进一步研究。     

从腹泻患者粪便中分离出霍乱弧菌

从腹泻患者粪便中分离出霍乱弧菌建美，罗兰，陈冬梅，钟发，陈景文，陈求刚，陈菊香我院１９９４年７～９月从某地急性腹泻患者粪便中分离出霍乱弧菌７株，其中６株为Ｏ１群霍乱弧菌小川型，均属埃尔托生物型；另１株为非Ｏ１群Ｏ１３９霍乱弧菌。与广州市防疫站复查结果...     

耐四环素非O1群O139霍乱弧菌的报告

耐四环素非Ｏ１群Ｏ１３９霍乱弧菌的报告李端，熊元甫（南昌市卫生防疫站，江西南昌３３０００６）非Ｏ１群Ｏ１３９霍乱弧菌国内外的报道均对四环素敏感，我们分离出一株耐四环素的菌株。１病原学检查某腹泻病人粪便，进行霍乱弧菌分离培养。结果检出１株革兰阴性弧菌，...     

霍乱弧菌及其它致泻弧菌检验现状

霍乱弧菌及其它致泻弧菌检验现状许淑珍霍乱弧菌是引起烈性肠道传染病的病原菌。当前，埃尔托型和Ｏ１３９霍乱弧菌仍在不同国家和地区暴发流行。Ｏ１３９菌株是近３年来发现的引起霍乱流行的新菌型。非Ｏ１群霍乱弧菌和其它弧菌引起的腹泻也明显增多。实验室应加强对霍乱...     

PCR扩增IS6110用于检测痰液中结核分枝杆菌的评价

为评价ＰＣＲ扩增ＩＳ６１１０检测结核分枝杆菌的特异性，用Ｂａｃｔｅｃ培养法对４５例可疑肺结核病人痰样品进行分枝杆菌检测；用４对分别针对ＩＳ６１１０不同区域引物和一对分枝杆菌属特异的１６ＳｒＲＮＡ基因引物对这４５例痰样品及其培养物和２７株已知分枝杆菌属菌株进行ＰＣＲ扩增检测。结果所有分枝杆菌ＤＮＡ均扩增出了１６ＳｒＲＮＡ基因片段，结核分枝杆菌ＤＮＡ均扩增出了ＩＳ６１１０的４个不同区域片段，非典型分枝杆菌ＤＮＡ均未扩增出ＩＳ６１１０片段，但存在假阳性和假阴性     

我国霍乱弧菌毒力协同调节菌毛基因序列分析

目的对我国霍乱弧菌（VC）毒力协同调节菌毛（tcpA）基因进行序列分析.方法 38株VC的tcpA基因经聚合酶链反应扩增、测序和序列分析.结果 13株O139群VC产毒株和15株EVC产毒株（均为流行株）的tcpA类型与EVC标准株N16961为同一类型,共有4个位点碱基发生变异,分为5个亚型.EVC流行株中2 株非产毒株的tcpA类型,1株同N16961,1株为新类型.6株EVC非流行株均为非产毒株,分为2种新类型.2株非O1非O139群VC均为非产毒株,为2种新类型.4种新类型与国外4种类型基因和氨基酸序列比较,同源性为63.8%～84.6%和60.6%～91.7%,趋异性为17.8%～44.6%和8.8%～45.8%,tcpA基因所在的VPI毒力岛的结构是完整的,但部分基因存在一定变异.结论 O139群VC产毒株可能起源于EVC产毒株,然后再进一步分化;在非产毒VC中发现4种新类型tcpA基因.     

产色素O139群霍乱弧菌环境分离株的亲缘关系分析

目的 筛检霍乱弧菌O139血清群产褐色色素的环境分离菌株并分析其遗传近缘关系。 方法 在LBA平板上检测了1992-2010年分离保存的全国1530株O139群霍乱弧菌的色素产生能力,对其中能够产生水溶性褐色色素的菌株的马尿酸氧化酶基因VC1345进行测序,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多基因序列分型分析色素产生菌株之间的亲缘关系。 结果 筛选到不同年份不同地区的16株产色素的非产毒O139群菌株。所有的色素产生菌株具有完全一致的VC1345基因、相似的PFGE带型,多基因序列分型显示仅有2种型别。 结论 分离到的O139群产色素菌株来源于近缘的克隆群,而这些菌株之间已存在一定程度的变异。在水体中的持续存在显示其较强的环境生存能力,这些特征提示在霍乱弧菌的环境监测中需提高对这类菌株的关注。     

O139群霍乱弧菌ctxAB基因序列分析

目的 探讨O130群霍乱JX株的ctxAB基因序列，分析该株基因特点。方法 采用PCR扩增技术，检测含O130群霍乱标本，对ctxAB阳性者进行核苷酸序列测定，分析基因变异情况。结果 发现阳标本中，对其中一株进行了ctxAB基因序列测定，该序列与853（O139群）和N16961（Eltor)同源性为100％，与569B（古典型）同源性99．7％。结论 该研究证明本株与O1群（EVC）遗传关系最近，可能属于B型。     

2株与霍乱弧菌O139诊断血清发生凝集的麦氏弧菌鉴定

目的对2株疑似O139群霍乱弧菌进一步鉴定,以排除或确诊霍乱。方法以试管凝集和交叉吸收实验复核玻片凝集结果,用生化实验和BIOFOSUN 微生物鉴定系统进行生化鉴定,PCR技术检测O139霍乱弧菌特异性脂多糖基因（LPS）。结果玻片凝集阳性,试管凝集1株菌可达原诊断血清效价的1/4,1株菌达1/2,交叉吸收后均证实为非特异性凝集;未检出LPS基因;系统生化鉴定判定为麦氏弧菌。结论2株菌不是O139霍乱弧菌,而是麦氏弧菌。     

霍乱弧菌中VSP-Ⅰ岛的分布和变异特征研究

目的 探讨霍乱第7次大流行基因岛1(VSP-Ⅰ)在霍乱弧菌中的分布和变异特征. 方法 从美国国立生物技术信息中心的GenBank数据库中下载所有霍乱弧菌基因组数据,以霍乱第7次大流行代表菌株N16961的VSP-Ⅰ作为参考序列,筛查所下载霍乱弧菌基因组中的VSP-Ⅰ.使用MUMmer软件进行单核苷酸多态性(SNP)分析,OrthMCL软件进行同源基因分析,BLAST软件进行序列结构变异分析和功能注释. 结果 VSP-Ⅰ广泛存在于霍乱弧菌中,其中霍乱第7次大流行的105株菌株中均携带VSP-Ⅰ,且其序列高度保守;其中94株菌的VSP-Ⅰ完全一致,仅在11株菌中分别存在1~14个SNP位点.而2株非O1非O139群菌株携带VSP-Ⅰ,但和大流行菌株相比,存在插入缺失等序列变异.同时,VSP-Ⅰ有9个共有保守基因, VC0183 虽在所有菌株中均存在,但在2株非O1非O139菌株中长度发生改变.此外,VSP-Ⅰ携带5个与该岛的转移和整合相关的基因(VC0181~VC0185), VC0178 编码马铃薯糖蛋白类似物, VC0180 编码蛋白水解酶,二者可能与毒力相关. 结论 作为霍乱第7次大流行菌株中的特异性基因簇,VSP-Ⅰ已转移至非O1非O139群菌株中,并发生序列的变异.     

江苏省环境来源的O139群霍乱弧菌的核酸特征分析

目的 分析江苏省2003-2005年之间从环境样本中分离到的霍乱弧菌的核酸特征,及其差异的程度.方法 将11株目的菌株的表型特征(包括血清型,耐药谱,生化特征以及El Tor霍乱弧菌的噬菌体分型)和核酸特征(包括霍乱毒素基因ctx-A、zot、ace、tcp-A的分布情况和脉冲场凝胶电泳指纹图谱)结合起来进行比较和分析.结果 11株菌株中有10株O139群霍乱弧菌,1株El Tor小川;其中6株O139同时对5种以上抗生素耐受,2株O139对4种抗生素耐受,1株0139对2种抗生素耐受,另外1株O139(属于PFGE-C型)和1株小川分别只对一种抗生素耐受;11株霍乱弧菌的生化特征没有明显差异;8株O139同时携带4种毒力相关基因,1株0139只携带zot和ace,另外1株O139(05052)和1株小川未携带这4种基因;9株O139的脉冲场凝胶电泳指纹图谱聚为一类,另外1株O139和小川各自聚为一类.结论 10株O139中有1株(属于PFGE-C型)的耐药谱、毒力相关基因分布及PFGE指纹图谱与其他9株不同,而与分离地点相同的小川相似,提示自然环境中的O139群霍乱弧菌存在着差异.     

Territorial waters of the Baltic Sea as a source of infections caused by Vibrio cholerae non-O1, non-O139: report of 3 hospitalized cases

A fatal infection with temporal relation to 2 other febrile infections caused by Vibrio cholerae non-O1, non-O139 (NCV) occurred in Finland in 2003. All infections were associated with contact with seawater. The patient who died had also eaten home-salted whitefish, tested positive for NCV, preceding his symptoms. All patients had compromising factors, and all strains were distinguishable by pulsed-field gel electrophoresis and negative for the ctx gene. These 3 cases illustrate that, despite being uncommon in Finland, NCVs can cause clinically significant and even fatal infections.     

广东省霍乱病例与环境来源霍乱弧菌的

目的比较分析广东省霍乱病例及环境来源O1/O139群霍乱弧菌抗生素敏感性和分子分型特征。方法选取2006-2007年广东省霍乱病例及相关来源、环境（珠江水体和海水产品）来源的O1/O139群霍乱弧菌。采用血清学、药物敏感性试验和分子生物学方法,研究不同来源的霍乱弧菌在菌型分布、药物敏感性、毒素基因携带以及分子分型方面的异同。结果2006-2007年,广东省共分离各类来源O1/O139群霍乱弧菌170株。其中,病例及相关来源菌株37株,环境来源菌株133株（海水产品来源37株、珠江水体96株）。两种来源菌株的菌型构成均以O1群El Tor稻叶型为主;病例及相关来源菌株以产毒株为主,ctxA毒素基因携带率（83.8%）显著高于环境菌株（4.5%）;药物敏感性试验显示,以产毒株为主的病例及相关来源菌株对萘啶酸和复方新诺明的耐药率（78.8%,78.8%）高于以非产毒株为主的环境来源菌株（50.6%,13.9%,P0.05）。环境来源菌株对多西环素的耐药率（17.7%）高于病例及相关来源菌株（0%,P0.05）。O139群菌株对氨苄西林的耐药率（70%）高于稻叶型和小川型菌株（8.9%,0%,P0.01）。脉冲场凝胶电泳（PFGE）聚类分析显示,O139群霍乱弧菌产毒株之间,O1群霍乱弧菌流行株之间以及其他的O1/O139群霍乱弧菌之间,PFGE型别表现为明显的遗传多样性。结论广东省O1/O139群霍乱弧菌来源复杂多样,霍乱防控形势严峻,需要密切注意菌株型别变异情况及菌株变异趋势。     

浙江省非O1、非O139群霍乱弧菌快速检测与毒力基因研究

目的 建立一种快速检测非O1、非O139群霍乱弧菌方法,并对浙江省部分地区海水产品中非O1、非O139 群霍乱弧菌及其携带毒力基因开展快速检测.方法 采用三糖斜面、氧化酶实验、粘丝实验、无盐胨水等简单生化进行初筛,对全部结果阳性的菌株用聚合酶链反应(PCR)方法检测霍乱弧菌外膜蛋白OmpW以及毒力基因ctxA、hl...