艰难梭菌肠道感染BALB/c小鼠模型的建立及简易评价

目的 建立简单、可重复的实验室小鼠艰难梭菌感染模型.方法 分别采用链霉素、氨苄西林和万古霉素配制抗生素溶液,经3天自然饮水法破坏BALB/c小鼠肠道正常菌群,更换正常饮水1天后用艰难梭菌进行肠道感染,观察BALB/c粪便细菌载量、小鼠存活状况.结果 经链霉素处理的BALB/c小鼠粪便中艰难梭菌芽孢数最多,万古霉素处理的...     

我国艰难梭菌流行特征和研究进展

艰难梭菌被认为是抗生素和医疗机构相关性腹泻的主要病原,被美国疾病预防控制中心列为抗生素相关的紧迫公共卫生威胁之一。 近10年来,我国艰难梭菌感染的发生率显著上升,艰难梭菌的研究也日益深入,本研究旨在结合已有报道和研究成果,对我国艰难梭菌的流行特征进行总结,并展望领域内的热点问题,以期对未来研究提供参考。     

艰难梭菌感染1例

1 临床资料患者男,75岁。2013年9月5日因“胰腺癌”收入我院肝胆外科,于9月12日行“胰十二指肠切除术”,术程顺利。2013年9月16日—10月1日患者间歇发热,体温波动于36．8～37．8℃。9月16日体格检查,心肺未见明显异常,腹平,切口愈合良好,发热原因待查。先予头孢甲肟（2 g,静脉滴注,2次／d）抗感染治疗;9月18日换用头孢曲松-他唑巴坦（2 g,静脉滴注,2次／d）抗炎治疗;9月21日,肺 CT 示“左肺上叶后段、两肺下叶出现散在炎症,两侧胸腔积液及胸膜增厚”,上腹 CT 示“少量腹水,局部包裹性积液形成”,腹腔引流为浑浊液体,改用比阿培南（0．3 g,静脉滴注,2次／d）。9月25日,胆汁培养为“屎肠球菌”,上腹 CT 示“腹水较前增多,肝内胆管积气”,增加比阿培南剂量（0．3 g,静脉滴注,3次／d）,并联合盐酸去甲万古霉素（0．4 g,静脉滴注,2次／d）抗感染治疗,患者发热仍未见明显好转;10月1日再次更换抗生素为头孢曲松-他唑巴坦（2 g,静脉滴注,2次／d）,10月5日患者病情平稳,无发热,体温36．8℃,即停用抗生素及其他治疗。     

艰难梭菌感染治疗方法

艰难梭菌为革兰阳性厌氧芽孢杆菌,可引起艰难梭菌相关性腹泻（CDAD）,导致一系列的肠道感染症状。CDAD的发病率在全球范围内不断提高,尤其是高产毒株在北美地区造成了医院内的暴发流行,引起了世界范围的关注。近年来,国外相继出现了耐甲硝唑和万古霉素的艰难梭菌的报道,传统的治疗方法面临严重挑战,一些新的治疗方法应运而生。本文将对CDAD的治疗方法及其进展做一简要综述。     

应重视艰难梭菌感染的检测

艰难梭菌(Clostridium difficile)为革兰阳性厌氧产芽孢杆菌,是人类肠道中的正常菌群之一.艰难梭菌本身没有侵袭性,其中部分细菌(产毒株)可通过分泌毒素A、毒素B和(或)二元毒素从而引起抗生素相关性腹泻、结肠炎甚至致死性伪膜性肠炎,统称为艰难梭菌感染(Clostridium di ficile infection,CDI).艰难梭菌为医院获得感染性腹泻最主要的病原菌,在抗生素相关性腹泻病因中艰难梭菌亦占20％～30％;而伪膜性肠炎则几乎100％由艰难梭菌所致.肠道外CDI如败血症等则极为罕见.不仅仅是抗菌药物,其他影响肠道正常菌群平衡、降低艰难梭菌定植抵抗能力的因素,如老年、胃肠道手术、应用抗肿瘤药物、长期住院和免疫功能缺陷等均为CDI的危险因素.     

艰难梭菌感染实验室诊断的研究进展

艰难梭菌（C d ）是革兰阳性厌氧芽孢杆菌,能引起伪膜性肠炎等感染性疾病（CDI）。近年来随着抗生素的广泛使用和NAP1／027克隆株在世界范围内传播,CDI发病率和严重程度不断增加。在加拿大、美国和英国相继导致医院内及社区流行,已被公认为发达国家重要的医院内感染病原菌之一［1］。住院患者长期使用抗生素可杀灭肠道内敏感细菌,破坏肠道微生态平衡,导致Cd过度生长并释放毒素,与CDI密切相关的毒素包括T cdA和T cdB。美国感染病协会2010年版的CDI诊断标准包括：（1）有腹泻症状,24 h内排未成形便大于或等于3次;（2）大多数患者近8周内使用过抗生素;（3）粪便中检出产毒型Cd或Cd毒素,或结肠镜检或组织病理检查发现伪膜性肠炎［2］。其中腹泻症状与抗生素使用为非特异指标;病理学检查为有创操作,不适于常规开展。因此,准确、快速的实验室检验结果对CDI诊断和治疗具有重要意义。现有的CDI检测方法种类较多,它们各自有优势和局限性,本文对CDI实验室诊断的研究进展作一综述。     

3种不同方法检测艰难梭菌芽孢率的比较

目的了解艰难梭菌检测的芽孢率并进行比较。方法采用平板涂布法、相差显微镜计数法和孔雀绿染色法3种检测方法对艰难梭菌ATCC 43596和VPI 10463经培养96 h和120 h后的芽孢率进行了比较分析。结果显示平板涂布法芽孢检出率最高为(25.3%、15.6%),变异较大(SD=7.1%,4.3%);相差显微镜计数法和孔雀绿染色法结果相近分别为(13.3%、9.4%)、(13.4%、9.8%),变异较小(SD=1.9%、0.8%)、(SD=1.4%、0.9%)。结论在选用平板涂布法检测芽孢率时,建议联合相差显微镜法或者孔雀绿染色法以减少偏移。     

艰难梭菌感染病原学检测技术

<正>艰难梭菌感染(Clostridiodes dif?cile infection,CDI)是指艰难梭菌引起的感染性疾病,主要表现为腹泻、腹痛、发热等。近年来,CDI的发病率呈逐年上升趋势,表现为复发率,严重程度及病死率增高^[1-2]。2011年美国疾病控制和预防中心流行病学调查发现,艰难梭菌是医疗保健感染最常见的病原体,达到12.1%^[3]。自2000年以来,CDI死亡率也逐年上升,在地方性流行期间为4.5%～5.7%,在大流行期间为6.9%～16.7%^[4]。儿童CDI的发病率总体呈上升趋势,约为13.8例/100000人,71%来自社区感染^[5]。但目前很多医院对CDI的检测手段十分有限,且诊断率不高,     

艰难梭菌感染：一种新的威胁

艰难梭菌是住院患者抗生素相关性腹泻的重要病因。近年来,由于艰难梭菌高毒力株的出现,导致感染人数明显增多,疾病严重程度增加,已成为一种新的威胁。艰难梭菌感染（clostridium difficile infection,CDI）的诊断应结合临床表现和实验室检查两方面。合理使用抗菌药物是减少CDI最根本有效的方法,另外,应加强院内感染控制措施以控制感染的传播。     

艰难梭菌感染防治措施的研究进展

艰难梭菌是革兰阳性厌氧芽孢杆菌,芽孢位于菌体次极端,可在体外存活数月以上[1].艰难梭菌可在人体肠道无症状定植,也可引发轻度至重度腹泻、伪膜性肠炎(PMC),严重者可导致死亡.艰难梭菌通过产生肠毒素A(TcdA)和细胞毒素B(TcdB)这两种毒素致病,TcdA 和 TcdB 是导致上皮细胞坏死和炎症的主要原因[2].抗菌药物是艰难梭菌感染(CDI)的首选治疗手段,也是公认的艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)的危险因素,长期使用抗菌药物会导致肠道菌群失调,引起芽孢萌发[3].     

艰难拟梭菌重命名及相关致病因子研究进展

基于表型特征、化学分类学及系统发育学等研究,艰难梭菌已被归入拟梭菌属,并重命名为艰难拟梭菌.近年来,随着多重耐药艰难拟梭菌不断出现,导致抗生素治疗失效以及感染复发病例明显上升.目前欧美部分国家已建立完善的艰难拟梭菌感染监控体系及相应的临床诊疗指南,但我国相关工作起步较晚.同时,我国仍存在抗生素使用不规范甚至滥用等现象,...     

5岁以下腹泻患者分离的艰难梭菌分子型别和耐药特征分析

目的 分析中国部分地区5岁以下腹泻患儿分离的艰难梭菌的分子型别和耐药特征,为后续研究及临床用药提供数据支持.方法 收集2010-2020年云南、山东、上海、陕西、河南和北京6省市5岁以下腹泻患儿的粪便标本,通过厌氧培养分离和鉴定艰难梭菌.使用聚合酶链式反应(PCR)方法进行毒素基因检测、多位点序列分型(MLST)和核糖...     

检测艰难梭菌耐莫西沙星gyrA基因点突变的双重荧光PCR方法的建立和评价

目的 建立一种检测艰难梭菌耐莫西沙星gyrA基因点突变的双重荧光PCR方法.方法 设计针对艰难梭菌gyrA基因的特异性引物,并针对莫西沙星耐药株和敏感株的gyrA基因突变位点设计不同的TaqMan-MGB探针,优化可同时检测ATT、ACT突变点的双重荧光定量PCR方法,验证该方法的灵敏性、特异性和重复性,并进行应用评价...     

杭州市富阳区住院腹泻患者艰难梭菌感染及菌株分子特征分析

目的了解浙江省杭州市富阳地区住院腹泻患者艰难梭菌感染情况,研究感染患者临床危险因素及分离菌株的分子特征。方法收集2017年5月至2018年2月就诊于第一人民医院的228例腹泻患者的粪便标本,通过厌氧培养进行艰难梭菌菌株分离和鉴定,进行多位点序列基因分型,以琼脂稀释法测定菌株耐药性,对患者临床资料进行统计分析。结果228份标本共检测出产毒型艰难梭菌41株,其中31株为医院获得性腹泻;阳性患者平均年龄67.8岁,主要来自消化内科（34.1%）和肾内科（19.5%）。 ST2、ST3和ST54为主要基因型。 所有菌株对万古霉素、甲硝唑、四环素、哌拉西林敏感。 临床资料统计分析显示,＞60周岁、患基础性疾病和有抗生素用药史的阳性患者数量远高于阴性患者比例（χ2＝4.229、9.022、5.767,P＝0.023、0.001、0.009）。结论杭州市富阳区住院腹泻患者艰难梭菌感染患者主要来源于院内感染。 患有基础性疾病、8周内有抗生素用药史的老年患者为感染的危险因素;在院内感染防控中需进一步加强监测。     

艰难梭菌医院感染管理:监测与防控

近年来,全球艰难梭菌感染（CDI）的发病率不断上升, 实施有效的监测是控制CDI发生和传播的关键。 CDI监测的内容主要包括病例定义、标准化诊断、病例来源定义、CDI的发病情况以及防控建议。 本综述总结有效的CDI监测的关键组成部分,并提供一些切实可行的防控建议,有助于国家及医院进行标准化监测和防控。     

恶性肿瘤患者两种化疗模式下医院感染情况比较

目的:比较恶性肿瘤患者两种化疗模式(住院化疗和日间化疗)医院感染的发生情况.方法:回顾性调查比较恶性肿瘤患者住院化疗和日间化疗医院感染发生率及住院时间.结果:日间化疗患者感染总发生率低于住院化疗患者(χ2=39.607 9,P<0.01),日间化疗Ⅲ期胃癌患者感染发生率低于住院化疗患者(χ2=4.559 4,P=0.0327),日间化疗患者Ⅲ期肺癌患者感染发生率低于住院化疗患者(χ2=38.556 1,P<0.01);日间化疗患者平均住院时间(1 d)少于住院化疗患者(11.82 d)(P<0.05).结论:日间化疗与住院化疗比较,可明显降低医院感染发生率,缩短住院时间,值得推广应用.     

TaqMan实时荧光定量PCR检测艰难梭菌

目的 建立特异敏感的实时荧光定量PCR方法,用于艰难梭菌的快速检测;评价基于纯培养艰难梭菌和粪便中艰难梭菌的2种标准曲线;并应用该荧光定量PCR法对急性艰难梭菌感染（CDI）的小鼠进行粪便含菌量检测评价。方法 针对艰难梭菌基因组中16S rRNA序列设计特异性引物和探针,建立一套快速检测艰难梭菌含量的实时荧光定量PCR方法,验证方法的特异性、灵敏性;绘制艰难梭菌纯菌浓度梯度稀释标准曲线和粪便中同浓度梯度艰难梭菌的标准曲线,比较两者的差异;用艰难梭菌高毒株NAP1/027感染用抗生素处理的C57BL/6小鼠,建立CDI小鼠模型,同时应用该荧光定量PCR和活菌培养法定量检测小鼠粪便中的艰难梭菌含量变化。结果 建立的TaqMan实时荧光定量PCR具有较高的灵敏性和特异性,生成标准曲线的相关系数为0.999 8,斜率为-3.400 4;用纯培养艰难梭菌和粪便中艰难梭菌分别制备标准曲线,结果表明2种标准曲线定量检测结果差异无统计学意义。建立CDI小鼠模型,应用该荧光PCR能有效、准确的检测出粪便中艰难梭菌的含量,可替代费时费力的活菌培养计数法。结论 用纯培养艰难梭菌来制备标准曲线不影响对含菌粪便标本的准确定量检测,荧光定量PCR能准确快捷地检测CDI小鼠粪便中的艰难梭菌含量,比活菌计数更快速和方便,可用于艰难梭菌感染小鼠模型中小鼠肠道内艰难梭菌定植的定量检测。     

艰难梭菌核酸检测方法应用进展

艰难梭菌是一种广泛存在于人和动物肠道中的厌氧革兰阳性芽孢杆菌。 近年来,由于抗生素滥用艰难梭菌感染人数大量增加,发病率和病死率急剧上升,准确的诊断对于最佳治疗手段和预防措施来说至关重要。 因此高灵敏度与特异度、省时省力的核酸检测方法逐渐引起重视。 本研究就目前最新通过美国食品药品监督管理局批准以及其他经典的实验室自建艰难梭菌核酸检测方法的应用进行介绍和比较,为艰难梭菌的检测提供参考。     

2种检测乙型肝炎病毒表面抗原的酶联免疫吸附试验试剂盒的性能比较

目的:比较2种不同孵育时间的检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒的性能差异。方法:使用同一厂商生产的2种不同孵育时间(30min和60min)的HBsAgELISA试剂盒同时检测血清样本,比较2种试剂盒的检测精度、抗干扰能力和检测结果的一致性。结果:2种试剂盒的检测精度没有统计学差异,批内变异系数(CV)均小于10%,批间CV均小于15%;血红蛋白