SLP-2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系

目的 探讨SLP-2蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系.方法 收集18例新鲜配对的食管鳞状细胞癌及正常食管上皮组织,应用Western blot法检测SLP-2蛋白的表达水平.将220例配对的食管鳞状细胞癌组织和正常食管上皮组织构建组织芯片,采用免疫组化SP法检测SLP-2蛋白的表达情况,并分析SLP-2蛋白的表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征之间的关系.结果 Western blot法检测结果显示,SLP-2蛋白在18例新鲜食管鳞状细胞癌组织中的高表达率为72.2%.免疫组化染色结果显示,SLP-2蛋白在220例食管鳞状细胞癌组织中的高表达率为54.1%,明显高于其在正常食管上皮组织中的高表达率(3.6%,P＜0.001).SLP-2蛋白的高表达与食管鳞状细胞癌的浸润深度相关(P=0.033),而与其他临床病理特征均无关(均P＞0.05).结论 SLP-2可能作为一个新的肿瘤相关基因在食管鳞状细胞癌的发生发展过程中发挥着重要作用;SLP-2蛋白的高表达与食管鳞状细胞癌的侵袭转移密切相关.     

4．1B蛋白在食管鳞状细胞癌中的异常表达及其分子机制

目的: 研究4.1B蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及异常表达的分子机制.方法: 采用免疫组织化学法检测110例石蜡包埋食管鳞状细胞癌及癌旁组织中4.1B蛋白的表达水平.随机选取其中29例,应用微卫星PCR技术检测4.1B等位基因的杂合子丢失情况.应用甲基化特异PCR技术检测33例新鲜食管鳞状细胞癌手术标本的4.1B基因启动子区域的甲基化状态.结果: 食管鳞状细胞癌组织中4.1B蛋白的阳性表达率为60.9%(67/110),癌旁正常组织的阳性表达率为94.5%(104/110),2组之间差异有统计学意义(X2=35.945,P<0.01).食管鳞状细胞癌高、中、低分化组的阳性表达率分别为74.4%(29/39)、61.8%(21/34)和45.9%(17/37),3组之间差异有统计学意义(X2=6.453,P<0.05).在20.7%(6/29)的食管鳞状细胞癌组织中,分别于D18S481、D18S62和D18S391这3个微卫星位点检测到4.1B等位基因的杂合子缺失.在33例新鲜手术标本中,有69.7%(23/33)的食管鳞状细胞癌组织检测出4.1B基因启动子区域的甲基化.结论: 4.1B蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁正常组织,食管鳞状细胞癌的分化程度与其表达量呈正相关;启动子区域的异常甲基化可能是4.1B蛋白阴性表达的重要原因.     

蛋白水解诱导因子在食管鳞状细胞癌中的表达

目的:研究蛋白水解诱导因子(proteolysis-inducing factor,PIF)在食管鳞状细胞癌中的表达及意义.方法:应用免疫组化方法,检测PIF在107例食管鳞状细胞癌病人癌组织以及其中35例癌旁正常组织以及8例食管良性疾病标本中的表达情况,并探讨PIF表达与食管癌临床分期、肿瘤分化程度的关系.结果:食管鳞状细胞癌组织中存在PIF表达,其表达与食管良性疾病对照组中的表达差异有统计学意义(P<0.05),肿瘤组织中表达PIF的个体其癌旁正常组织中亦有PIF表达,PIF表达在肿瘤分化、是否侵及浆膜层、有无淋巴结转移和肿瘤分期中的差异无统计学显著性(P﹥0.05).结论:食管鳞状细胞癌组织中存在PIF表达,其表达与肿瘤分化、是否侵及浆膜层、有无淋巴结转移和肿瘤分期无关.     

Foxo1与Ki-67在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

目的:探讨Foxo1和Ki-67蛋白在食管鳞状细胞癌组织及食管正常鳞状上皮组织中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法,检测食管鳞状细胞癌(36例)组织及食管正常鳞状上皮(12例)组织中Foxo1和Ki-67蛋白的表达情况.结果:Foxo1蛋白在食管鳞状细胞癌及食管正常鳞状上皮组织中的阳性表达率分别为75.00%、16.67%,而Ki-67的阳性表达率分别为83.33%、0.Foxo1和Ki-67在食管鳞状细胞癌中的阳性表达率均明显高于食管正常鳞状上皮(P<0.01).Foxo1蛋白的表达随肿瘤分化程度增高而显著增高(P<0.01),而Ki-67的表达随肿瘤分化程度增高而降低(P=0.107).Foxo1和Ki-67蛋白的表达与其他临床病理特征无明显相关性(P>0.05).结论:在食管鳞状细胞癌中,Foxo1及Ki-67蛋白表达明显高于食管正常鳞状上皮组织,且随肿瘤分化程度的增高Foxo1的表达显著升高,而Ki-67的表达则显著降低.提示Foxo1和Ki-67在食管鳞状细胞癌肿瘤细胞分化过程中发挥着不同作用,其作用机制不同.     

食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子蛋白和mRNA的半定量表达

目的 探讨食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子(NS)蛋白和mRNA的半定量表达情况.方法 应用免疫组化SABC法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测62例食管鳞状细胞癌组织及其相对应的31例癌旁不典型增生组织和62例正常食管黏膜组织中NS蛋白和mRNA的半定量表达情况.结果 正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织和食管鳞状细胞癌组织中,NS蛋白阳性表达率分别为17.7%(11/62)、41.9%(13/31)和69.4%(43/62),组间比较,差异有统计学意义(χ2=33.676,P＜0.01).食管鳞状细胞癌组织中,NS蛋白阳性表达率与其组织学分级、侵袭程度及淋巴结转移密切相关(均为P＜0.05),而与年龄、性别和病理分型无关(均为P＞0.05).食管鳞状细胞癌组织中,NS mRNA的相对含量(0.971±0.121)高于癌旁不典型增生组织(0.913±0.085)和正常食管黏膜组织(0.866±0.103),组间比较,差异有统计学意义(F=14.829,P＜0.01).不同组织学分级、不同侵袭程度及有无淋巴结转移的食管鳞状细胞癌组织之间,NS mRNA的相对含量差异均有统计学意义(均为P＜0.05),NSmRNA的相对含量与年龄、性别和病理分型无关(均为P＞0.05).结论 食管鳞状细胞癌组织中,NS mRNA的表达升高,其高表达与食管鳞状细胞癌的发生发展有关.     

食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1和MMP-2的表达及其相关性研究

目的 检测食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1和MMP-2蛋白的表达及其相关性,探讨二者与食管鳞状细胞癌浸润转移的关系.方法 应用免疫组织化学S-P法检测62例食管鳞状细胞癌、31例癌旁不典型增生及62例正常食管黏膜组织中KiSS-1及MMP-2蛋白的表达.结果 食管鳞状细胞癌、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中KiSS-1蛋白的阳性表达率分别为56.5%、67.7%和90.3%(P<0.05);食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1蛋白阳性表达率与患者的性别、年龄及肿瘤的组织学分级无关(P>0.05),而与浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05).食管鳞状细胞癌、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中MMP-2蛋白的阳性表达率分别为71.0%、54.8%和22.6%(P<0.05);食管鳞状细胞癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率与肿瘤的分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄无关(P>0.05).食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1及MMP-2蛋白的表达呈负相关(rs=-0.418).结论 KiSS-1对食管鳞状细胞癌的浸润及转移有抑制作用;MMP-2则对食管鳞状细胞癌的转移有促进作用,联合检测KiSS-1和MMP-2蛋白的表达有望成为判定食管鳞状细胞癌浸润及转移能力的重要指标之一.     

ANGPTL3和MMP-2、MMP-9在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨血管生成素样蛋白3(angiopoietin-like protein 3,ANGPTL3)和基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases-2,MMP-2) 及MMP-9在食管鳞状细胞癌中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测52例食管鳞状细胞癌组织、癌旁组织和正常食管组织中ANGPTL3和MMP-2、MMP-9的表达。结果食管鳞状细胞癌组织中ANGPTL3、MMP-2和MMP-9的表达与癌旁组织和正常食管组织中的比较差异均有统计学意义(P< 0.05)。结论ANGPTL3和MMP-2、MMP-9在食管鳞状细胞癌中呈高表达,其联合检测有助于判断食管鳞状细胞癌生物学行为。     

Foxol与Ki-67在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

  目的  探讨Foxol和Ki-67蛋白在食管鳞状细胞癌组织及食管正常鳞状上皮组织中的表达及其临床意义。  方法  采用免疫组织化学SP法, 检测食管鳞状细胞癌(36例)组织及食管正常鳞状上皮(12例)组织中Foxo1和Ki-67蛋白的表达情况。  结果  Foxol蛋白在食管鳞状细胞癌及食管正常鳞状上皮组织中的阳性表达率分别为75.00%、16.67%, 而Ki-67的阳性表达率分别为83.33%、0。Foxol和Ki-67在食管鳞状细胞癌中的阳性表达率均明显高于食管正常鳞状上皮(P < 0.01)。Foxol蛋白的表达随肿瘤分化程度增高而显著增高(P < O.01), 而Ki-67的表达随肿瘤分化程度增高而降低(P=0.107)。Foxol和Ki-67蛋白的表达与其他临床病理特征无明显相关性(P > 0.05)。  结论  在食管鳞状细胞癌中, Foxol及Ki-67蛋白表达明显高于食管正常鳞状上皮组织, 且随肿瘤分化程度的增高Foxol的表达显著升高, 而Ki-67的表达则显著降低。提示Foxol和Ki-67在食管鳞状细胞癌肿瘤细胞分化过程中发挥着不同作用, 其作用机制不同。      

Bub1在食管鳞状细胞癌组织和正常食管黏膜的表达及临床意义

目的:观察Bub1 mRNA及Bub1蛋白在食管鳞状细胞癌和正常食管黏膜组织中的表达差别,探讨Bub1在食管鳞状细胞癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法:收集40例食管鳞状细胞癌标本及相应的食管切缘正常黏膜组织,利用免疫组化染色及原位杂交技术检测Bub1蛋白和Bub1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织和正常食管黏膜组织中的表达。结果:与正常黏膜组织相比较,Bub1 mRNA及Bub1蛋白在食管鳞状细胞癌组织中表达水平明显降低(P<0.005),且Bub1 mRNA及Bub1蛋白的表达水平与食管鳞状细胞癌分化程度及有无淋巴结转移相关(P<0.05)。结论:Bub1表达水平高低可能与食管鳞状细胞癌的发生发展及淋巴结转移具有一定关系。     

Bmi-1蛋白在食管鳞状细胞癌中表达及临床意义

  目的  观察Bmi-1蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达, 探讨Bmi-1与食管鳞状细胞癌的相关性。  方法  应用免疫组织化学法检测南京医科大学附属淮安第一医院2005年1月至2006年2月间168例食管鳞状细胞癌组织和30例正常食管黏膜组织Bmi-1蛋白的表达。  结果  食管鳞状细胞癌组织和正常食管黏膜组织中Bmi-1蛋白的阳性表达率分别为66.1%(111/168)、23.3%(7/30), Bmi-1蛋白阳性表达率在食管鳞状细胞癌组织和正常食管黏膜组织中差异具有统计学意义(P < 0.001), Bmi-1蛋白表达与食管鳞状细胞癌组织学分级、TNM分期和淋巴结转移具有相关性(P=0.016, P=0.004, P < 0.001), Bmi-1阴性组的5年生存率显著优于Bmi-1阳性组(P < 0.001)。  结论  Bmi-1表达异常在食管鳞状细胞癌发生发展中具有重要作用, 检测Emi-1的表达对判断食管鳞状细胞癌的预后具有重要意义。      

lncRNA NUP50-AS1 在食管鳞癌组织中的表达及其对Eca109 细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）NUP50-AS1 在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell cancer, ESCC）组织及细胞株中的表达及其对人食管癌Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：选取自2015 年1 月至2016 年12 月河北医科大学第四医院生物标本库的49 例ESCC手术患者的癌组织和相应癌旁组织,qRT-PCR检测ESCC癌组织、癌旁组织及5 种食管癌细胞株（TE1、TE13、Eca109、Kyse150 和Kyse170）中NUP50-AS1 表达水平。shRNA 转染NUP50-AS1 后,选用sh2 -NUP50-AS1 进行后续功能实验。采用MTS法、克隆形成实验检测敲减NUP50-AS1 表达对Eca109 细胞增殖的影响,划痕实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞迁移的影响,Transwell 小室实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞侵袭的影响。结果：NUP50-AS1 在ESCC组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(2.003±0.870 vs 1.000±0.000,P<0.05）;NUP50-AS1 在ESCC组织中的表达水平与淋巴结转移及TNM分期相关（均P<0.01）,NUP50-AS1 在5 株食管癌细胞系中相对表达量均明显上调（P<0.05）,其中Eca109 细胞的NUP50-AS1 表达水平最高。转染后,sh2-NUP50-AS1 转染组干扰效率最高,敲低NUP50-AS1 可明显抑制Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论：ESCC组织中lncRNA NUP50-AS1 表达明显高于癌旁组织,且与癌症分期和淋巴结转移有关,敲减其表达明显抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,NUP50-AS1 的高表达可能与ESCC的发生发展密切相关。     

过表达lncRNA LINC00886 抑制食管鳞状细胞癌Eca109 细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的: 检测lncRNA LINC00886 在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织及细胞系中的表达及其对Eca109 细胞体外增殖、迁移及侵袭的影响。方法: 收集2014 年6 月至2016 年12 月河北医科大学第四医院生物标本库69 例ESCC手术患者的癌及对应的癌旁组织标本,以及ESCC细胞系Eca109、TE13、TE1、Kyse150、Yes-2 和Kyse170,用qPCR 法检测LINC00886 在ESCC组织及细胞系中的表达情况。分别用pIRES2-LINC00886、pIRES2-NC转染Eca109 细胞,用qPCR法检测pIRES2-LINC00886 转染Eca109细胞后LINC00886 的过表达效率;用MTS、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell 侵袭实验分别检测过表达LINC00886 对Eca109 细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果: 在ESCC组织中LINC00886 表达水平明显低于癌旁组织（P<0.01）,其表达水平与肿瘤TNM分期和淋巴结转移相关（均P<0.05）。LINC00886 在ESCC 细胞中的表达水平也低于对照组（均P<0.01）。转染pIRES2-LINC00886 后,Eca109 细胞中LINC00886 的表达水平显著高于对照组（均P<0.05）。与对照组相比,过表达LINC00886 明显抑制Eca109 细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。结论: lncRNA LINC00886 低表达可能与ESCC的发生发展相关,过表达LINC00886可抑制ESCC细胞的增殖、迁移与侵袭能力。     

IQGAP1 在食管鳞状细胞癌中的表达及其对TE-2 细胞恶性生物学行为的影响

[摘要] 目的：探讨具有IQ 结构域的GTP 激酶活化蛋白1（Ras GTPase-activating-like protein, IQGAP1）在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）组织与细胞中的表达及其对TE-2 细胞增殖及侵袭能力的影响。方法: 收集2015 年1 月至2016 年12 月郑州大学附属肿瘤医院125 例ESCC手术切除的癌及癌旁组织标本,以及ESCC细胞系TE-2、TE-3、ECA109 和正常食管上皮细胞株Het-1A。用免疫组化染色法检测癌组织中IQGAP1 的表达,分析其表达水平与临床病理特征的关系;用qPCR和Western blotting 检测ESCC细胞中IQGAP1 mRNA和蛋白的表达。用si-IQGAP1（阳性转染组）、si-CTRL（阴性对照组）质粒转染TE-2 细胞,用MTT法、Transwell 小室法和Western blotting 分别检测沉默IQGAP1 对TE-2 细胞增殖、侵袭能力以及上皮钙黏蛋白和神经钙黏蛋白表达的影响。结果: IQGAP1 在ESCC组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织（P<0.05）,其高表达与肿瘤分期和分级密切相关（均P<0.05）;IQGAP1 mRNA和蛋白在TE-2、TE-3、ECA109 细胞中表达水平显著高于Het-1A细胞（均P<0.05）。沉默IQGAP1 后,与阴性对照组和空白组比较,阳性转染组TE-2 细胞中IQGAP1 mRNA及蛋白的表达水平明显下降（均P<0.05）;细胞的增殖和侵袭能力显著降低（均P<0.05）,上皮钙黏蛋白表达水平升高（P<0.05）,神经钙黏蛋白表达水平下降（P<0.05）。结论: IQGAP1 在ESCC组织中高表达,敲减IQGAP1 可抑制ESCC细胞的增殖和侵袭能力,其在ESCC的发生发展过程中起重要的作用。     

长链非编码RNA HAGLROS在食管鳞癌组织中的表达及其对食管鳞癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA HAGLROS在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌患者临床病理参数之间的关系,分析HAGLROS对食管鳞癌细胞增殖及转移的影响.方法 运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HAGLROS在42对食管鳞癌组织与癌旁食管正常组织及食管上皮细胞Het1A及食管鳞癌细胞EC109和KYSE30...     

NRAGE影响人食管癌细胞放射抗性的作用及其机制研究

背景与目的：食管癌是全球威胁人类生命和健康的常见恶性肿瘤之一，中国每年食管癌发病人数占全球发病总人数的一半以上，以食管鳞癌最为常见。放疗是食管癌三大治疗手段之一，而放射抗性是导致其治疗失败的主要原因。神经营养因子受体相互作用MAGE类药物（neurotrophin receptor-interacting MAGE homolog，NRAGE）在放射抗性细胞株TE13R120中表达量明显高于亲本TE13细胞，且NRAGE亚细胞定位变化可能参与食管癌细胞放射抗性的形成。通过基因转染构建NRAGE稳定表达的食管癌细胞系，以进一步明确NRAGE基因与食管鳞癌细胞放射抗性的关系，分析该基因影响放射抗性的具体机制。方法：通过基因转染构建NRAGE稳定表达的食管癌细胞系。采用细胞克隆形成实验检测细胞放射敏感性，采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡；细胞划痕、Transwell侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力，采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitive polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞中β-catenin表达情况。组间差异采用t检验或方差分析。结果：实验分为转染过表达组（Eca109/NRAGE组）和空白对照组（Eca109组）。Eca109/NRAGE细胞中NRAGE的表达量明显高于Eca109（t=29.65，P<0.05）。照射后Eca109/NRAGE细胞的放射抗性显著高于Eca109。流式细胞术检测结果显示，Eca109/NRAGE细胞中对射线抵抗性最强的S期细胞比例增加，对射线最敏感的G ₂ /M期减少。Eca109/NRAGE细胞凋亡率较Eca109细胞降低（t=3.268，P<0.05）。Eca109/NRAGE细胞迁移和侵袭能力均高于Eca109。RTFQ-PCR和Western blot检测结果显示，β-catenin的mRNA表达及蛋白水平在Eca109/NRAGE细胞中明显高于Eca109（t=15.87，P<0.05）。结论：NRAGE参与Eca109细胞放射抗性的形成，改变细胞的细胞周期分布和凋亡情况，影响细胞迁移及侵袭能力并可能影响食管癌细胞的放射敏感性，该作用可能与激活Wnt/β-catenin信号转导通路有关。     

FAM83H在食管鳞癌中的表达及对癌细胞生物学行为的影响

背景与目的：食管鳞癌是常见的消化道恶性肿瘤,基因异常表达参与食管鳞癌的恶性生物学行为。探讨转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）诱导的FAM83H在食管鳞癌组织中的表达水平,以及其表达水平与临床病理学参数之间的关系,初步研究FAM83H对食管癌细胞生物学行为的影响。方法：用TGF-β1处理食管癌细胞Eca109后,在倒置显微镜下观察Eca109细胞形态学的变化。应用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）检测TGF-β1处理前后食管癌细胞中上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关标志物以及FAM83H表达水平的变化。应用RTFQ-PCR检测FAM83H在不同食管癌细胞系、67例2015—2017年河北医科大学第四医院生物样本库收集的食管鳞癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,并分析其表达水平与临床病理学参数之间的关系。应用MTS实验以及transwell小室迁移、侵袭实验检测FAM83H在体外对食管癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果：TGF-β1处理后,Eca109细胞的形态变为细长梭形、纺锤形,呈现出明显的间充质细胞形态;Eca109细胞中E-cadherin表达水平降低,而N-cadherin、vimentin、Snail、Twist 1表达水平均显著升高（P<0.05）。同时,TGF-β1处理后,FAM83H表达水平上调（P<0.01）。FAM83H在食管鳞癌组织中表达升高（P<0.05）,与食管鳞癌患者病理学分化程度相关（P<0.05）。FAM83H在食管癌细胞系中表达升高（P<0.01）。转染针对FAM83H的小干扰RNA后,可以显著抑制FAM83H的表达水平（P<0.05）。在体外FAM83H促进食管癌细胞的增殖、迁移及侵袭（P<0.05）。结论：TGF-β1诱导EMT过程以及FAM83H表达,FAM83H表达水平升高可能与食管鳞癌的发生、发展相关,且在体外促进食管癌细胞的增殖、迁移及侵袭。     

长链非编码RNAXLOC_005009对食管鳞状细胞癌生物学特性的影响

目的:探讨长链非编码RNA XLOC_005009基因对食管鳞状细胞癌(ESCC)的体外增殖、迁移、侵袭和细胞周期与细胞凋亡等生物学特性的影响.方法:收集2015-2016年河北医科大学第四医院肿瘤研究所57例ESCC患者手术切除的癌组织及癌旁组织标本.应用实时荧光定量PCR检测XLOC_005009基因在人ESCC细胞系Eca 109、Kyse 170与ESCC组织及其癌旁组织的表达,构建pcDNA3.1-XLOC_005009过表达质粒并转染Eca109、Kyse170细胞,应用MTS法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室、流式细胞术分别检测转染前后细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭、细胞周期与凋亡的变化.结果:XLOC 005009 mRNA在食管癌组织中的表达明显低于癌旁组织(0.06±0.06 vs 0.21±0.19,P＜0.05),且食管癌细胞XLOC 005009 mRNA表达亦均低于对照组(P＜0.05).转染过表达质粒的Eca109和Kyse 170细胞XLOC_005009基因表达显著高于对照组(Eca109细胞:039±0.17 vs0.02±0.00;Kyse170细胞:0.35±0.08 vs 0.01±0.01,均P＜0.05).与对照组相比,XLOC_005009基因过表达Eca 109和Kyse170细胞增殖能力细胞显著减弱(P＜0.05);克隆形成率显著减少(P＜0.05);穿膜细胞数显著减少[Eca109细胞:(146.40±34.47) vs(193.00±26.33);Kyse170细胞:(157.80±32.51)vs (269.00±29.89),均P＜0.05];Eca109细胞迁移率无显著变化,Kyse170细胞迁移率明显减小(P＜0.05);S期细胞比例增加,细胞凋亡影响不明显.结论:XLOC_005009低表达与食管癌的发生发展密切相关,XLOC_005009过表达可抑制食管癌细胞的体外增殖、侵袭与迁移能力.     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖促进食管鳞癌细胞的增殖和迁移

目的:评估牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Pg-LPS）对食管鳞癌细胞增殖、迁移能力的影响，探索其可能的机制。方法:培养Het-1A和EC109细胞，实验组加入不同浓度Pg-LPS，对照组加入等量培养基。分别采用CCK-8、Transwell迁移实验或细胞划痕实验检测两组细胞增殖、迁移能力的变化；qRT-PCR、Western blot技术检测增殖、迁移相关基因表达量的改变。结果:Het-1A细胞经Pg-LPS作用24 h、48 h后，其光密度值较对照组显著上升。EC109细胞在5 μg/mL及10 μg/mL的Pg-LPS作用后24 h、48 h与对照组相比光密度值上升；1 μg/mL的Pg-LPS作用24 h后光密度值较对照组上升，差异有统计学意义（P<0.05），而作用48 h后，无明显统计学差异（P>0.05）。Pg-LPS作用后，Het-1A细胞穿膜数量多于对照组，EC109细胞相对覆盖面积高于对照组。Pg-LPS作用后Het-1A和EC109细胞增殖、迁移相关基因mRNA及ARTN蛋白表达量较对照组明显升高。结论:Pg-LPS可以促进Het-1A和EC109细胞的增殖、迁移；Pg-LPS作用于细胞后ARTN的表达量增加，进一步促进AKT1、CCND1、MTA1、CXCR4表达，可能是Pg-LPS影响食管鳞癌细胞增殖和迁移的机制之一。     

PTPN6 基因对人食管鳞状细胞癌Eca109 和Yes-2 细胞恶性生物学行为的影响

[摘要] 目的：探讨非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶6（non-receptor protein tyrosine phosphatase 6,PTPN6）基因在不同食管鳞状细胞癌细胞株中的表达及其对Eca109、Yes-2 细胞恶性生物学行为的影响。方法：应用qPCR 法检测不同食管鳞癌细胞株（TE1、Eca109、Kyse150、Kyse170、Yes-2）中PTPN6 mRNA的表达水平,以pcDNA3.1-PTPN6 质粒分别瞬时转染食管鳞癌细胞株Eca109和Yes-2,应用qPCR和Wb法检测PTPN6 mRNA和蛋白的表达水平,并应用MTS、克隆形成实验、划痕实验和Transwell 法检测过表达PTPN6 基因对食管鳞癌细胞恶性生物学行为的影响。结果：PTPN6 基因在5 种食管鳞癌细胞侏中表达均明显下调（均P<0.05）。与转染空载体的对照组相比,经pcDNA3.1-PTPN6 转染后,Eca109 和Yes-2 细胞均高水平表达PTPN6（P<0.05 或P<0.01）;过表达PTPN6 基因后,Eca109 和Yes-2 细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显被抑制（均P<0.05）。结论：PTPN6 基因高表达能抑制食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其可能是影响食管鳞癌细胞生物学特性的一个重要因素。     

下调ERp57抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:分析内质网驻留蛋白57(ERp57)在食管鳞癌组织中的表达情况以及下调ERp57对食管癌细胞TE-1生物学功能的影响。方法:GEPIA数据库分析食管癌中ERp57的表达;通过荧光定量PCR和Western blot检测临床食管癌标本及细胞株中ERp57的表达;利用shRNA沉默TE-1细胞内ERp57后,通过CCK8检测细胞增殖、TUNEL检测细胞凋亡、划痕检测细胞迁移、Transwell检测细胞侵袭。结果:食管癌组织中ERp57的mRNA和蛋白的表达水平均高于癌旁组织(P<0.05),食管癌细胞中ERp57的mRNA及蛋白的表达高于食管上皮细胞(P<0.05)。沉默ERp57使TE-1细胞的增殖能力减弱、凋亡比例增加,并减弱了TE-1细胞的迁移及侵袭能力。结论:沉默ERp57表达能够抑制食管癌细胞TE-1的增殖、迁移、侵袭,可为食管癌研究提供理论依据。