免疫亲和色谱分离纯化PSP贝毒GTX23,的研究

目的:分离纯化有毒塔玛亚历山大藻中麻痹性贝毒GTX2,3组分。方法:采用免疫亲和色谱方法,对有毒塔玛亚历山大藻中麻痹性贝类毒素进行分离纯化。结果:通过HPLC检测,免疫亲和柱有效的将麻痹性贝毒的GTX2,3与GTX14,分离,获得了一定数量但具有高纯度的麻痹性贝毒GTX23,。结论:初步建立了免疫亲和色谱技术对麻痹性贝类毒素GTX23,分离纯化的方法。     

贝类麻痹性毒素的检测

海洋软体动物贝类麻痹性毒素（paralytic shellfish poison，PSP）的检测方法，通用的方法为生物测定法，即根据小鼠注射贝类提取液后的死亡时间，查出相应的鼠单位并进行体重校正后，计算确定每100g贝肉中PSP毒素的含量。这种方法的局限性是以小鼠活体实验为基础，判定贝类产品的毒性大小。由于小鼠个体差异，使得检测结果具有高变异性和低敏感性。因此，欧盟对贝类产品PSP含量，特别规定了允许80μg／100g的限量。目前，我国检测PSP含量的方法SN0352—95《出口贝类麻痹性贝类毒素（PSP）检验方法》和SC／T3023—2004无公害食品《麻痹性贝类毒素的测定》仍采用小鼠生物测定法。为了准确检测贝类等水产品中PSP毒素的含量，本次用ELISA法进行实验，取得了满意的结果，方法如下：     

电压敏感荧光染料在鱼贝类毒素检测中的应用初探

目的建立快速、简便、能反映样品整体毒性的鱼贝类毒素筛查方法。方法以神经母细胞瘤细胞为实验材料,采用电压敏感荧光染料bis-oxonol,根据膝沟藻毒素2,3(GTX2,3)、短裸甲藻毒素(BTX)和河豚鱼毒(TTX)的毒理特点,观察不同浓度毒素作用下细胞荧光的变化。结果 GTX2,3的浓度在2～200ng/ml范围内,TTX的浓度在20～600ng/ml范围内,BTX的浓度在15～400ng/ml范围内,培养体系荧光强度与毒素的浓度之间存在很好的线性关系。结论利用电压敏感荧光染料法可实现对GTX2,3、TTX和BTX的快速检测。     

宁波地区织纹螺毒性特征探索研究

目的了解宁波地区有毒织纹螺毒素的类型、分布、消长及毒素来源。方法小鼠生物法测定织纹螺毒性;ELISA法及HPLC等检测织纹螺石房蛤毒素(STX)、膝沟藻毒素(GTX)、河豚鱼毒素(TTX)。结果从长期监测点采集的127份织纹螺样品中检出毒螺63份,检出率49.6%,样品的毒性高峰和低谷分别出现在1991年和1988年。不同栖息地毒螺检出率差异有统计学意义(P0.01)。3类不同来源样品毒螺检出率及毒性差异也有统计学意义(P0.05)。半褶织纹螺、红带织纹螺、正织纹螺带毒机率较高,且毒性强。检出织纹螺STX、GTX和TTX毒素。结论宁波地区织纹螺毒素由TTX或贝类麻痹性毒素(PSP)中的STX和GTX组成,部分样品TTX和STX两种毒素共存。查清了宁波市织纹螺带毒情况、地域分布及织纹螺品种与毒性相关性。监测结果提示长期以来宁波市织纹螺总体保持一定的毒性,食用易引起中毒事件的发生。     

麻痹性和腹泻性贝类毒素的检测方法研究进展

该文综述了目前国内外关于麻痹性贝类毒素和腹泻性贝类毒素的主要检测方法,如小鼠生物法、高效液相色谱法及相关联用技术和免疫测定法等,分别阐述各类检测方法的原理及存在的优缺点。该文还对新兴检测技术的发展进行了概述,并在此基础上阐述了麻痹性贝类毒素和腹泻性贝类毒素检测技术的发展趋势,为我国水产品安全检测提供参考。     

一起织纹螺引起麻痹性贝类中毒的调查分析

目的：了解我市首次发生麻痹性贝类中毒的原因，从而进行针对性预防。方法：采用鼠单位的检测方法来测定麻痹性贝类毒素的毒力。结果：此次中毒的原因是由于食用织纹螺引起的麻痹性贝类中毒，织纹螺毒性大小在2500-9400MU/100g。结论：防治重点为建立麻痹性贝类中毒的疫情报告制度及定期监测制度。     

连云港市贝类中毒的流行特征

目的了解贝类中毒的致病因子和流行病学特征,为防制此类事件发生提供依据.方法对1991年来发生在连云港市,因食用含有麻痹性贝类毒素的荔枝螺、泥螺引起中毒并致死亡的6起贝类中毒的流行病学特征、临床表现及毒素性质进行分析.麻痹性贝类毒素检验方法按SNO 352-95进行.结果从中毒者食剩的荔枝螺和泥螺均检出麻痹性贝类毒素,该样品提取液可在1～6 min内致小白鼠死亡,毒素含量≥18万mU(100 g螺肉).结论 6起贝类中毒均由麻痹性贝类毒素引起.     

ICR和昆明种小鼠生物法检测麻痹性贝类毒素毒性差异比较

[目的]了解痹性贝类毒素小鼠生物法检测采用ICR和昆明神小鼠的差异. [方法]用平行法对ICR和昆明种小鼠进行了20个批次的织纹螺麻痹性贝类毒素生物法比对试验. [结果]两个品系动物试验结果的变异系数为8％,t检验结果表明两种品系动物的差异无统计学意义.两个品系动物比对试验结果表明具相关性且回归系数有显著性意义,但绝对值有一定的差异. [结论]ICR和昆明种小鼠痹性贝类毒素小鼠生物法检测结果具有很强的相关性和线型关系,但在两组数值的绝对值的差异值得关注.     

麻痹性贝类毒素中毒的流行病学特征

目的 :探讨麻痹性贝类毒素中毒的流行病学特征。方法 :依据“GB14 938- 94食物中毒诊断标准及技术原则”分析流行特征 ,应用小白鼠生物测定法检测麻痹性贝类毒素。结果 :1991年以来连云港市及国内福建等省市发生的麻痹性贝类毒素中毒 ,其毒贝除连云港市一起由时螺引起 ,其他均为半褶织纹螺。宁夏银川的有毒织纹螺则来自于千里之外的连云港市。结论 :为保障海贝的食用安全 ,应对贝类进行安全监测。     

柱前衍生HPLC-FLD法测定水产品中3种麻痹性贝类毒素

目的建立水产品中3种麻痹性贝类毒素成分(GTX2,3、dcSTX和STX)的柱前荧光衍生高效液相色谱(HPLC-FLD)检测方法。方法样品用1%乙酸提取,C18固相萃取柱净化,2%H2O2荧光衍生,以Symmetry?C18柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱分离,以乙腈和0.1mol/L甲酸铵(595)作为流动相,流速1.0mL/min,荧光检测器激发波长340nm,发射波长395nm。结果该法在10~500μg/L范围内线性关系良好,平均加标回收率为72.5%~88.6%,RSD为2.8%~4.7%。方法的检出限分别为dcSTX 3μg/kg、STX 10μg/kg和GTX2,34μg/kg。结论本方法灵敏度高、结果可靠,为检测水产品贝类麻痹性毒素的含量提供了一种高效便捷的方法。     

Cluster analysis of toxins profile pattern as a tool for tracing shellfish contaminated with PSP-toxins

Paralytic shellfish poisoning (PSP) is one of the most lethal biotoxin-induced diseases worldwide, which may pose serious public health threat and potential devastating economic damage on fisheries industry in the affected region(s). To prevent the importation of PSP contaminated shellfish to a community, detailed documentation on the supply chain and routine surveillance systems are, in principle, crucial measures to protect people from this intoxication. However, difficulties have always been encountered on the traceability of the source/origin of contaminated shellfish.In the present study, we reported the potential application of PSP-toxins profiles with similarity analysis that can be used to identify epidemiological linkage between shellfish samples collected from markets and patients during a PSP outbreak. PSP-toxins were identified and quantified by ion-pair chromatographic separation followed by post-column oxidation to fluorescent imino purine derivatives. Samples from a PSP incident and other surveillance samples collected in our past 7-year record were also compared for their similarity in PSP-toxins profiles patterns. Molar distributions (nmol%) of 10 PSP-toxins were analyzed by Unweighted Pair Group Method with Arithmetric averages (UPGMA). Three prominent clusters emerged with similarity levels reaching over 80% for each, suggesting that each group of samples probably originated from a same source/batch. The PSP-toxins profiles and toxicities determined from surveillance samples could provide premonitory clues on the occurrences of PSP incident and outbreak with corresponding toxin profiles in the later time. Due to species-specific characteristics of PSP-toxins composition and profile in shellfish under varieties of environmental and physiological conditions, PSP-toxins profile can be a specific and useful biochemical indicator for tracing PSP contaminated shellfish provided that spatio-temporal occurrence patterns of toxins profiles are available in a databank for inter-laboratory comparison and standardized methodologies such as consentaneous toxins extraction and identification criteria are used for analysis and comparison.     

Risk to human health associated with marine toxic algae

Among the about 5000 of marine algal species, some 75 produce algal toxins. These latter mainly belong to the taxa first of dynoflagellates and then diatomes. The so far known human intoxications have been associated with mollusc consumption. The main poisoning syndromes have been termed, on the basis of the observed symptoms, as paralytic, diarrhetic, neurotoxic and amnesic and shorthened as: PSP (paralytic shellfish poisoning), DSP (diarrhetic shellfish poisoning), NSP (neurotoxic shellfish poisoning), ASP (amnesic shellfish poisoning), respectively. This paper is a review of the problem of human health implications associated with marine toxic algae, with particular reference to the situation of the Mediterranean and the Italian coastal areas.     

广州市售贝类麻痹性贝毒和腹泻性贝毒污染状况分析

目的对广州市售双壳经济贝类麻痹性贝毒(PSP)和腹泻性贝毒(DSP)污染状况进行为期一年的抽样调查,了解其食用安全性。方法采用AOAC推荐的小鼠生物检测法进行PSP和DSP的毒力测定,采用HPLC进行PSP成分分析,根据FAO、日本和欧盟水产食品卫生要求及我国渔政渔港监督管理局制订的贝类安全食用标准对贝类水产品的食用安全性进行评价。结果在所调查的7种贝类中,有2种染有PSP,毒素含量在安全食用范围内,毒力大小随季节而变化,春冬两季含量相对较高;7种贝类中有6种共计36个样品染有DSP,有10个样品毒素含量超出安全食用标准,春冬两季染毒率较高。结论广州市售贝类PSP含量和检出率整体水平较低;DSP检出率稍高,毒素含量也较高,应引起有关部门的关注,加强DSP监测工作。     

Paralytic shellfish poisoning --- southeast Alaska, May--June 2011

On June 6, 2011, the Section of Epidemiology (SOE) of the Alaska Division of Public Health was notified of a case of paralytic shellfish poisoning (PSP) in southeast Alaska. In collaboration with local partners, SOE investigated and identified a total of eight confirmed and 13 probable PSP cases that occurred during May--June 2011. Warnings to avoid noncommercially harvested shellfish were broadcast on local radio and television and displayed at beaches and in post offices, government offices, and businesses throughout the region. Commercially harvested shellfish, which are tested for the presence of PSP-causing toxins, were safe. Because the risk for PSP is unpredictable, persons who consume noncommercially harvested Alaskan shellfish should know that they are at risk for PSP, and suspected cases should be reported promptly to SOE to initiate control measures in the affected area.     

应用细菌回复突变试验研究贻贝中麻痹性贝毒的致突变性

目的 了解贻贝中麻痹性贝类毒素的致突变性。方法 采用TA97、TA98、TAl00、TAl02测试菌株,在-S9和+S9条件下分别对0.0029～1.83 μg STX/皿剂量范围内的贻贝中麻痹性贝类毒素进行检测。结果 在2种不同的条件下,各剂量水平的4种测试菌株都能正常生长;所有剂量的回变菌落数与对照组相比均无1倍及以上的显著增加,且无剂量-反应关系。结论 在该试验条件下,贻贝中麻痹性贝毒未见致突变性作用。     

宁波市有毒织纹螺地域分布分析

目的了解宁波市有毒织纹螺的分布。分析各栖息地有毒织纹螺的毒性变化，为控制织纹螺中毒提供依据。方法采用美国分析化学家学会（AOAC）和中国进出口检验检疫（CIQ）的小鼠生物测试法，以美国食品药物管理局（FDA）的贝类麻痹性毒素（PSP）标准，判定本地织纹螺毒性的强弱，按年观察结果。结果1986～2003年，宁波市127份被检织纹螺中毒素平均含量最高的年份为1991年，达11900MU／100g螺肉，最低年份为1988年，其毒素含量也达403MU／100gN肉，其他年份的毒性波动在一定范围内。不同栖息地毒螺检出率镇海区为31．43％，北仑区为39．29％，宁海县为73．08％，奉化市为25．00％，经统计学处理差异有统计学意义（P〈0．01）；除宁海外，其余3个县（市、区）毒螺检出率差异无统计学意义（P〉0．05）。从新增织纹螺栖息地象山采集的30份织纹螺样品，毒素测定值均≤400MU／100g肉，未检出毒螺。结论宁波市各栖息地的织纹螺带毒严重，是一种引起织纹螺中毒的原因食物。各栖息地织纹螺毒性存在差异，以宁海县的织纹螺带毒最普遍。毒螺的分布和毒性的强弱与地域相关。织纹螺毒素的毒性可消长，但无规律性。     

一起赤潮后海产品麻痹性贝类毒素衰减结果分析

目的 以2017年漳州沿海一起赤潮引起的麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisoning,PSP)中毒事件为研究起点,研究贝类海产品中的PSP在自然条件下的衰减情况。方法 在漳浦佛昙和龙海港尾海域采集牡蛎和贻贝进行PSP检测。结果 2017年6月8日相关海域海产品最大毒素总毒力为21 056.7 μg/kg,2017年6月26日海产品PSP总毒力值衰减86%以上,2017年7月20日海产品PSP总毒力值衰减97%以上,2018年12月所有海产品中PSP均未检出。结论 本次赤潮发生后,漳浦佛昙和龙海港尾两个海域贝类海产品约需45天净化周期方可食用,相关海域约需18个月净化至贝类毒素完全消失。     

麻痹性贝毒在广州市售经济贝类中污染状况分析

目的通过对广州市黄沙海产品批发市场7种经济贝类为期一年的麻痹性贝毒(PSP)污染状况的调查分析,了解海产品食用的安全性。方法毒性测定按照AOAC小白鼠法进行,成份分析利用高效液相色谱(HPLC),安全性评价采用联合国粮农组织(FAO)及我国渔政渔港监督管理局制定的贝类安全食用标准(4MUg肉)。结果在调查的84份贝样中,染毒贝整体毒力(消化腺与肉的加权平均毒力)低于4MUg肉,毒素最高含量仅为184MUg肉,所有贝类均在安全食用范围之内。染毒贝类主要为栉孔扇贝(ChlamysMimachlamysnobilis)和嵌条扇贝(Pectenalbicans)。毒素在2个种9份样品的消化腺中检出,某些样品肌肉组织出现小白鼠毒性反应。一份样品消化腺中毒素含量高达1452MUg,高效液相色谱(HPLC)分析表明,该样品毒素成份主要为B1、GTX23、GTX14及C类。结论广州市市售鲜贝PSP含量和检出率整体水平均较低;贝中消化腺毒素含量及检出率明显高于肌肉,个别腺体毒素含量超出标准。毒素分布存在季节性差异,春季毒素比较强,夏秋季检出率高。因此有针对性的加强贝毒监测非常必要。     

双壳贝类麻痹性贝毒抗性机制的研究

麻痹性贝毒(PSP)是一类神经肌肉麻痹剂,可以阻断电压门控钠离子通道,造成神经系统传输障碍而产生麻痹作用。某些双贝壳类对PSP毒素具有耐受性和抗性,其抗性机制可能与代谢速率、生物转化和钠通道突变等有关,其中钠通道突变是双壳贝类对PSP毒素产生抗性的最重要的分子机制。