熊去氧胆酸具有促进家兔胆固醇结石形成的作用

根据文献报道 ,熊去氧胆酸具有利胆和溶石作用 ,临床上也主要用于胆囊炎和胆结石病人的治疗 ,据此本人采用家兔胆固醇结石模型观察熊去氧胆酸的溶石作用 ,结果发现熊去氧胆酸对家兔胆固醇结石非但没有溶石作用 ,反而具有促进家兔胆固醇结石形成的作用。1　材料方法1 .1　动物、试剂、饲料新西兰家兔 ,♀ ,体重 2 .1～ 2 .3ｋｇ,由上海市松江实验动物良种场提供。熊去氧胆酸片 ,由上海市中药一厂提供 ,批号为Ａ2 0 0 0 0 90 2。高胆固醇饲料组成[1 ] :1 .2 %的胆固醇 ,98.8%的普通饲料1 .2　方法♀新西兰家兔 32只 ,♀体重 2 .1～ 2 .3ｋｇ ,…     

致石饲料致动物胆固醇结石模型造模要素及中医药防治的数据挖掘

目的:定量研究致石饲料致胆固醇结石动物模型的造模要素,为提高造模效率及评价药物有效性提供方法学参考。方法:选取1993—2016年期间研究致石饲料致胆固醇结石动物模型的文献,录入动物种别、致石饲料配方、成石率、测试指标、受试药物等重要信息,定量统计和分析造模要素。结果:常用豚鼠、小鼠、兔等动物;致石饲料常用胆固醇、脂肪等,其中豚鼠最常用的致石饲料配方为90.00%全价饲料、1%胆固醇、2%猪油、5%蔗糖和2%酪蛋白,连续喂养49 d,成石率平均为87.40%;小鼠最常用的配方为83.50%全价饲料、1%胆固醇、15%脂肪、0.5%胆酸,连续喂养45 d,成石率平均为89.48%;兔最常用的配方为98.80%全价饲料、1.2%胆固醇,连续喂养50 d,成石率平均为72.40%;犬喂食含0.3%胆固醇的致石饲料,连续42 d,成石率为100%;树鼩喂食含胆固醇20%、蔗糖20%、大油(猪油)15%、蛋黄20%、玉米粉25%的致石饲料,连续喂养42 d,成石率为100%;金黄地鼠喂食含葡萄糖74.3%、酪蛋白20%、食盐5%、维生素0.5%和氯化胆碱0.2%的致石饲料,连续21 d,成石率为50%。常测试的指标为,胆汁中TC、TBIL、LDL、BA、PL、HDL等,血清中TC、TG、TBIL、LDL、BA、HDL、CKK等。造模的同时给药,常用药物包括鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸和中药复方,涉及甘草、大黄、白芍、金钱草、柴胡、茵陈等77种药材。结论:致石饲料常用于制造胆固醇结石动物模型,但配方及其成石率差异大、成本高、耗时长,中医药有利于肝胆系统功能恢复,防止成石性胆汁的产生,评价指标主要涵盖脂质、肝功能及胆道动力学等。     

调宁蛋白在胆固醇结石形成中的作用及疏肝利胆方药的干预机制

目的:探讨疏肝利胆方药防治胆石病的作用机制。方法:将受试豚鼠随机分为四组,即正常组、模型组、疏肝利胆中药组、熊去氧胆酸西药组。后三组采用高胆固醇致石食饵诱发法建立豚鼠胆结石动物模型,其中疏肝利胆中药组、熊去氧胆酸西药组分别给予相应药物进行防治实验,连续7周后,分别对实验豚鼠胆结石生成情况、胆囊组织调宁蛋白(Cap)的蛋白表达进行观察。结果:疏肝利胆方药防治组能有效防止胆结石的生成(与模型组比较P<0.01),并且其效果优于熊去氧胆酸西药组(P<0.01)。模型组动物胆囊组织Cap蛋白表达水平较正常组显著升高(P<0.01),疏肝利胆中药组和熊去氧胆酸西药组胆囊组织Cap蛋白表达水平虽均高于正常组(分别为P<0.01,P<0.05),但与模型组比较,其胆囊组织Cap蛋白表达水平都呈明显降低(均P<0.01),且疏肝利胆中药组和熊去氧胆酸西药组两组胆囊组织Cap蛋白表达水平比较无显著性差异(P>0.05)。结论:疏肝利胆中药能显著降低胆结石的形成,其作用机制可能与下调胆囊平滑肌组织调宁蛋白的水平,提高胆囊平滑肌收缩能力有关。     

京尼平苷对地鼠胆固醇结石形成的影响

目的观察京尼平苷预防给药对地鼠胆固醇结石形成的影响.方法用高脂肪高蛋白致石饲料造成地鼠胆固醇结石模型,阳性对照药物熊去氧胆酸80mg/kg和京尼平苷50,100mg/kgig,每天预防给药,给药30d后作胆囊内容物涂片检查观察地鼠的成石率,检测胆汁脂类成分计算胆汁成石指数.结果模型组的成石率为100%,成石指数(LI)大于1;京尼平苷50和100mg/kg组的成石率分别为40%(P＜0.05)和25%(P＜0.01),LI均小于1,熊去氧胆酸组的成石率与LI与京尼平苷100mg/kg组相近.结论京尼平苷对地鼠胆固醇结石的形成可能具有抑制作用.     

升清胶囊对L-02肝细胞胆固醇沉积模型LXR-α、FXR及ABC转运蛋白表达的影响

目的探讨升清胶囊治疗胆石病的可能作用机制。方法选用人L-02肝细胞分为正常组,模型组,升清胶囊高、中、低剂量组及熊去氧胆酸高、中、低剂量组。除正常组外其余各组采用LXR激动剂诱导建立胆固醇沉积模型,各给药组每孔分别加入相应2 ml含10%药物血清,正常组和模型组每孔加入2 ml含10%空白血清进行培养。24 h后观察各组肝细胞上清液及细胞总胆固醇含量及肝细胞LXR-α、FXR、ABCA1、ABCG5及ABCG8 mRNA及蛋白表达。结果模型组上清液和肝细胞总胆固醇含量,LXR-α、FXR、ABCA1、ABCG5、ABCG8 mRNA蛋白较正常组均升高(P0.01)。升清胶囊和熊去氧胆酸各剂量组总胆固醇含量及LXR-α、FXR、ABCA1、ABCG5、ABCG8 mRNA蛋白表达有不同程度的下降,其中升清胶囊和熊去氧胆酸片在降低LXR-α及ABCA1蛋白方面呈剂量依赖性,以高剂量组效果最好(P0.05或P0.01);并且在下调LXR-αmRNA表达方面,升清胶囊高剂量组效果优于熊去氧胆酸高剂量组(P0.01)。结论升清胶囊可能通过降低LXR-α、FXR及其直接靶基因ABCA1、ABCG5、ABCG8 mRNA及蛋白表达,从而改善肝细胞内胆固醇沉积,抑制结石的形成和发展。     

金茵溶石汤联合熊去氧胆酸片与熊胆舒肝利胆胶囊治疗胆囊胆固醇结石30例

目的:观察金茵溶石汤联合熊去氧胆酸片与熊胆舒肝利胆胶囊对胆囊胆固醇结石的临床疗效及消溶变化的影响。方法:将符合肝胆气郁证胆囊胆固醇结石病例90例,随机分为观察组(金茵溶石汤联合熊去氧胆酸片、熊胆舒肝利胆胶囊)、对照组1(熊去氧胆酸片联合熊胆舒肝利胆胶囊)和对照组2(熊去氧胆酸片)各30例,治疗6个月后评价各组临床证候疗效及结石消溶效果。结果:金茵溶石汤联合熊去氧胆酸片与熊胆舒肝利胆胶囊治疗胆囊胆固醇结石具有较好的临床疗效和结石消溶效果,证候疗效总有效率为96.7%,结石消溶总有效率为90%。三组溶石疗效依次为观察组对照组1对照组2。结论:金茵溶石汤联合熊去氧胆酸片与熊胆舒肝利胆胶囊治疗胆囊胆固醇结石临床疗效及结石消溶效果显著,值得推广应用。     

清热化湿疏肝祛瘀法对急性肝内胆汁淤积大鼠肝组织Ntcp、Bsep及Mrp2表达的影响

目的:观察清热化湿疏肝祛瘀法配伍的中药复方对急性肝内胆汁淤积大鼠肝组织Ntcp、Bsep及Mrp2表达的影响。方法:使用异硫氰酸萘酯(ANIT)诱导大鼠急性肝内胆汁淤积,并以5g/kg·d的清热化湿疏肝祛中药复方干预,同时以熊去氧胆酸(90mg/kg·d)为对照,于ANIT给药后24、48及72h随机处死模型组及药物干预组中1/3数量的大鼠,取肝组织行免疫组化检测Ntcp、Bsep及Mrp2蛋白表达。结果:模型组24、48、72h肝组织Ntcp、Bsep及Mrp2蛋白表达均较正常组明显下降(P0.05,P0.01);复方组24及48h的Ntcp蛋白表达较模型组明显增加(P0.05);复方组及熊去氧胆酸组三个时相点Bsep、Mrp2蛋白表达较模型组明显增加(P0.05,P0.01)。结论:清热化湿疏肝祛瘀法中药能够上调ANIT诱导的急性肝内胆汁淤积大鼠肝脏细胞Ntcp、Bsep和Mrp2的表达,这可能是其防治急性肝内胆汁淤积的重要作用机制之一。     

胡椒碱对胆囊胆固醇结石模型小鼠肝脏组织LRH-1相关信号通路蛋白表达的影响

目的:观察胡椒碱对胆囊胆固醇结石模型小鼠肝脏组织肝脏核受体类似物-1(LRH-1)相关信号通路蛋白表达的影响,并探讨其相关机制。方法:将90只雄性C57BL/6小鼠随机分成正常组,模型组,熊去氧胆酸组(90 mg·kg~(-1)),胡椒碱低、中、高剂量组(20,40,60 mg·kg~(-1)),每组15只,灌胃给药4周。除正常组外,其余各组均采用含2%胆固醇的高脂饲料喂养4周建立胆囊胆固醇结石模型。肉眼观察各组结石形成情况;测量胆囊容积,检测血清中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肝脏组织LRH-1,B类-Ⅰ型清道夫受体(SRBI),腺苷三磷酸结合盒转运体G5(ABCG5),ABCG8的蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠肝脏组织LRH-1,SRBI,ABCG5,ABCG8 mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠成石率明显升高(P 0. 05),胆囊容积明显升高(P 0. 05),血清中TC,TG和LDL-C含量明显升高(P 0. 05),血清中HDL-C含量明显下降(P 0. 05),肝脏组织中LRH-1,SRBI,ABCG5,ABCG8的蛋白和mRNA表达明显升高;与模型组比较,熊去氧胆酸组和胡椒碱中、高剂量组小鼠成石率明显降低(P 0. 05),胆囊容积均明显降低(P 0. 05),血清中TC,TG和LDL-C含量明显降低(P 0. 05),血清中HDL-C含量明显升高(P 0. 05),肝脏组织中LRH-1,SRBI,ABCG5,ABCG8的蛋白和mRNA表达明显降低(P 0. 05)。结论:胡椒碱中、高剂量组可能通过抑制肝脏组织LRH-1/SRBI及LRH-1/ABCG5/ABCG8信号通路的表达,改善脂质代谢异常,进而能够抑制高胆固醇饲料诱导的C57BL/6小鼠胆囊胆固醇结石的形成,且胡椒碱高剂量组优于胡椒碱中剂量组。     

茵陈四逆散联合熊去氧胆酸胶囊治疗肝胆气郁型肝内胆管结石随机平行对照研究

[目的]观察茵陈四逆散联合熊去氧胆酸胶囊治疗肝内胆管结石疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将48例住院患者按抽签法简单随机分为两组。对照组24例熊去氧胆酸胶囊,10mg/kg,1次/d,口服。治疗组24例茵陈四逆散(柴胡、猪苓、泽泻、白术各9g,白芍12g,枳实、甘草各6g,茯苓15g,茵陈50g,白茅根30g),1剂/d,水煎300m L,早晚口服;或磨粉开水送服,3g/次,2次/d;熊去氧胆酸治疗同对照组。连续治疗14d为1疗程。观测临床症状、胆绞痛、肝区痛、肝脾肿大、梗阻性黄疸、不良反应。治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组显效10例,有效13例,无效1例,总有效率95.83%。对照组显效7例,有效9例,无效8例,总有效率66.67%。治疗组疗效优于对照组(P0.05)。[结论]茵陈四逆散联合熊去氧胆酸胶囊治疗肝内胆管结石效果显著,值得推广。     

中西药联用综合治疗肝内胆管结石60例

目的 探讨肝切除结合术后口服胆宁片中西医结合综合治疗肝内胆管结石的疗效.方法 肝切除术后患者分为2组,治疗组（胆宁片加熊去氧胆酸）60例,对照组（熊去氧胆酸组）50例,治疗时间为0,5 a.观察2组术后病人肝功能恢复情况、症状缓解率、残石率和结石复发率.结果 2组时术后患者肝功能的影响无明显差异;治疗组在改善胁痛、腹胀、纳差、恶心呕吐等临床症状有效率方面高于对照组.结论 2组相比在防治肝内胆管结石患者肝切除术后残留结石的功效无差异,但对减少患者术后结石复发有一定疗效.     

茵陈五苓散抗大鼠动脉粥样硬化作用机理探讨

目的探讨茵陈五苓散对动脉粥样硬化大鼠的作用机理。方法70只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、茵陈五苓散组、绞股蓝组。采用高脂饲料喂饲法复制大鼠动脉粥样硬化模型,治疗1个月后分别检测血脂、血液流变学、主动脉组织学及超微结构变化、血管平滑肌细胞(VSMC)bcl-2 mRNA的表达。结果茵陈五苓散降低总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇,升高高密度脂蛋白胆固醇,降低血液黏度、红细胞压积、血小板黏附率,维持主动脉组织结构,下调基因bcl-2 mRNA的表达均优于绞股蓝。结论茵陈五苓散具有良好的抗动脉粥样硬化作用,其下调相关基因bcl-2 mRNA的表达可能是其作用机理。     

茵连化浊解毒汤对胆结石小鼠血生化指标、胆汁代谢谱的影响及其机制分析

目的 研究茵连化浊解毒汤对胆结石小鼠血生化指标、胆汁代谢谱的影响及机制.方法 选择C57BL/6雄性小鼠,随机分为对照组(普通饲料喂养)、模型组(高脂高热量高胆固醇饲料喂养)、实验组(高脂高热量高胆固醇饲料喂养并给予茵连化浊解毒汤干预).检测血生化指标、胆汁内代谢产物、肝脏内胆汁酸代谢蛋白的表达.结果 模型组小鼠血液中...     

胆胃舒颗粒预防胆囊结石及对胆囊收缩素受体(CCK-AR)基因表达的影响

目的:观察利胆健脾方胆胃舒颗粒对胆囊结石的预防作用及其作用机制。方法:实验用短毛雄性豚鼠90只,随机分为3组,每组30只,空白组:喂养普通饲料每天40g/只;模型组:喂养胆固醇结石诱石饲料40g/天/只;治疗组喂养胆固醇诱石饲料40g/天/只,并胆胃舒颗粒溶液灌胃2mL(含300mg胆胃舒颗粒)。实验2个月后观察胆囊内结石情况、胆囊收缩功能、及胆囊、胃窦平滑肌CCK-AR最大结合容量;结果:胆囊结石情况:空白组3.33%(1/30);模型组92.59%(25/27);治疗组:10.71%(3/28)。胆囊收缩功能:空白组为66.83%±5.34%;模型组43.06%±4.27%;治疗组67.93%±6.82%;胆囊平滑肌CCK-AR基因表达:空白组0.862±0.112;模型组0.521±0.083;治疗组0.792±0.098。结论:利胆健脾法可降低胆囊结石的形成,其作用机制可能通过提高胆囊CCK-AR基因表达,从而加强胆囊收缩功能,促使胆汁流动,防止胆囊结石的发生。     

高效快速降脂动物模型研究

探讨斑马鱼作为降脂药物筛选模型的可行性以及盐酸小檗碱(BBR)对高脂斑马鱼的影响。用含4%胆固醇饲料喂养3月龄斑马鱼0,2,4,8,14,20,25,30 d,检测血清总胆固醇含量的变化;测定对照组、高胆固醇组、0.01%辛伐他汀组、0.1%BBR组和0.2%BBR组斑马鱼血清总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)的水平;RT-PCR检测肝脏HMGCR,LDLR和CYP7A1a mRNA的表达水平;油红O染色检测肝脏中脂肪含量的变化。结果显示4%胆固醇喂养斑马鱼后血清TC水平升高且有时间依赖性,20 d基本达到稳定水平;BBR组斑马鱼血清TC,TG和LDL-c水平显著下降,肝脏HMGCR mRNA的表达下降,LDLR和CYP7A1a mRNA的表达升高,脂肪含量减少。4%胆固醇饲料喂养斑马鱼20 d即可建立高脂斑马鱼模型,研究结果为进一步开展降脂药物的筛选奠定基础。     

养肝利胆颗粒对胆固醇结石小鼠肝脏中PPAR-γ及CYP7A1表达的影响

目的:观察养肝利胆颗粒对胆固醇结石小鼠肝脏PPAR-γ及CYP7A1表达的影响。方法:38只C57BL/6雌性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=15)和养肝利胆颗粒组(n=13)。其中后两组小鼠采用高脂饮食诱发法建立胆固醇结石模型。造模过程中,养肝利胆颗粒组小鼠予养肝利胆颗粒2.1g/(kg.d)灌胃治疗。8周后观察各组小鼠的成石率,并用Western Blotting法检测肝脏中PPAR-γ及CYP7A1的表达。结果:养肝利胆颗粒组成石率显著降低(P<0.01),小鼠肝脏PPARγ及CYP7A1表达增强。结论:养肝利胆颗粒可通过增强肝脏PPARγ及CYP7A1的表达,从而发挥防治胆石病的作用。     

茵陈对肝内胆汁淤积湿热证大鼠利胆退黄作用机制的研究

目的通过研究茵陈对肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝组织中胆盐输出泵(BSEP)基因表达的影响,从分子水平探讨茵陈利胆退黄的作用机制。方法 45只雄性SD大鼠随机分为3组:正常组、模型对照组和茵陈组。检测治疗后大鼠血清生化指标、肝脏组织病理的变化和肝脏BSEP的表达。结果治疗后茵陈组大鼠体质量增加明显高于模型对照组(P<0.05)。茵陈组大鼠血清TB、DB、ALT、AST、ALP、TBA浓度低于模型对照组(P<0.05);HE染色显示茵陈组大鼠肝脏的病理损害轻于模型对照组。免疫组织化学染色显示茵陈组大鼠比模型对照组有更多的BSEP阳性细胞。荧光定量RT-PCR法显示模型对照组大鼠肝组织中BSEP mRNA表达明显低于茵陈组(P<0.05)。结论茵陈能有效改善肝内胆汁淤积湿热证大鼠的肝功能、减轻病理损害,并能上调肝脏BSEP的表达。     

电针“丰隆”穴对高脂血症大鼠血脂、肝脏组织中ATP结合盒转运子A1 mRNA和蛋白表达的影响

目的:探讨电针"丰隆"穴对高脂血症大鼠血脂的影响及作用机制。方法:40只健康SD大鼠随机分为空白组、模型组、饮食控制组、电针组及电针+饮食控制组,每组8只。空白组喂普通饲料,其余4组采用高脂饮食饲料饲喂法建立高脂血症大鼠模型,造模28d后,饮食控制组、电针+饮食控制组改用普通饲料喂养,其余3组饲喂方法不变,同时电针组及电针+饮食控制组电针"丰隆"穴,疏密波,频率2Hz/100Hz,强度2mA治疗30min,每日1次,治疗28d。治疗结束后,检测各组大鼠血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,并用原位杂交法、实时定量聚合酶链反应法及免疫印迹法检测各组大鼠肝脏组织中ATP结合盒转运子A 1(ABCA 1)mRNA和蛋白水平。结果:模型组大鼠TC、LDL-C水平较空白组显著上升(P<0.01),肝脏ABCA 1mRNA和蛋白含量均显著降低(P<0.01);与模型组比较,电针组、电针+饮食控制组大鼠TC、LDL-C水平显著降低,肝脏ABCA 1mRNA和蛋白含量均显著升高(P<0.01);与饮食控制组比较,电针+饮食控制组大鼠TC、LDL-C水平显著降低,肝脏ABCA 1的mRNA和蛋白含量均显著升高(P<0.01)。结论:电针"丰隆"穴可通过上调高脂血症大鼠肝组织ABCA 1蛋白及mRNA表达,促进由其介导的胆固醇逆转运,降低胆固醇负荷而防治高脂血症。     

茵陈对肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝组织NTCP表达的影响

目的:通过研究茵陈治疗后,肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝组织中钠-牛黄胆酸盐共转运多肽(Na+/tauro-cholate Cotransporting Polypeptide,NTCP)的表达,从而探讨茵陈的利胆退黄的作用机制。方法:选用雄性SD大鼠45只,随机分为3组:正常组、模型对照组和茵陈组。观察大鼠的体重、肝功能、肝组织病理变化和肝脏NTCP的表达。结果:治疗后茵陈组大鼠的体重(199.11±3.54)g高于模型对照组(182.80±5.89)g,P<0.05。茵陈组大鼠血清TB、DB、ALT、AST和ALP水平分别为[(17.76±3.72)μmol/L,(10.17±1.47)μmol/L,(77.18±6.86)U/L,(218.18±32.06)U/L,(230.49±28.84)U/L],明显低于模型对照组[(34.72±3.65)μmol/L,(19.33±3.27)μmol/L,(123.73±18.51)U/L,(353.78±63.08)U/L,(355.49±63.08)U/L],P<0.05。苏木精-伊红染色法显示茵陈组大鼠肝细胞的坏死、炎症、水肿程度明显好于模型对照组大鼠。免疫组化染色示茵陈组大鼠NTCP阳性表达肝细胞表达多于模型对照组。荧光定量RT-PCR检测显示茵陈组大鼠肝细胞NCTP mRNA表达(2-△△CT值为2.46±0.71)高于模型对照组(2-△△CT值为1.48±0.38),P<0.05。结论:茵陈能增加肝内胆汁淤积湿热证大鼠的体重,有效改善胆汁淤积、肝功能及减轻肝脏病理损害。茵陈能提高肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝细胞NTCP的表达。