榄香烯对B细胞淋巴瘤Raji细胞株的体内外抑制作用

目的:探讨榄香烯对B细胞淋巴瘤Raji细胞株的体内外作用。方法:不同浓度的榄香烯体外作用Raji细胞不同时间,CCK-8法检测增殖抑制作用,Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡,DAPI染色进行细胞核形态学分析,PI单染色法检测细胞周期改变;动物实验观察榄香烯体内抑瘤作用。结果:榄香烯对Raji细胞生长具有明显的抑制作用,呈量效和时效关系;榄香烯能诱导Raji细胞凋亡,呈量效关系;DAPI染色显示榄香烯作用Raji细胞具有凋亡细胞核的特征性核形态;细胞周期分析显示G0/G1期细胞相对增多、S期和G2/M期细胞均相对减少;榄香烯明显抑制Raji细胞在SCID小鼠体内增殖。结论:榄香烯对Raji细胞具有明显的增殖抑制作用,其机制可能是通过G0/G1期阻滞导致细胞凋亡发挥效用的。     

β-榄香烯对肝癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的观察β-榄香烯对体外培养肝癌细胞增殖以及细胞周期的影响。方法肝癌7402细胞体外培养,β-榄香烯干预;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测β-榄香烯对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期。结果肝癌7402细胞经过β-榄香烯干预,其存活率明显降低,并呈剂量依赖性。细胞周期检测结果显示,β-榄香烯干预后,进入S期和G2期细胞明显减少,G1期细胞增多,细胞周期被阻滞于G1期。结论β-榄香烯可明显抑制肝癌细胞的增殖及细胞周期,阻滞细胞从G1期进入S期。     

β-榄香烯对血管内皮细胞增殖及成血管能力的影响

目的观察β-榄香烯对血管内皮细胞增殖,细胞周期以及成血管能力的影响,探讨β-榄香烯对肿瘤血管生成的抑制作用。方法人脐静脉内皮细胞ECV-304体外培养,β-榄香烯干预;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测β-榄香烯对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期;Matrigel胶检测细胞成血管能力。结果ECV-304细胞经过β-榄香烯干预,其存活率明显降低,并呈计量依赖性。细胞周期检测结果显示,β-榄香烯干预后,G1期细胞增多,进入S期及G2期细胞明显减少,细胞周期被阻滞于G1期;接种于Matrigel胶的ECV-304细胞经β-榄香烯干预后,形成管腔数目减少,成血管能力明显降低。结论β-榄香烯可直接干扰血管内皮细胞的增殖及细胞周期,阻滞细胞从G1期进入S期及G2期,并降低其成血管能力。     

榄香烯乳对结肠癌Lovo细胞端粒酶活性、细胞凋亡及细胞周期的影响

目的：探讨榄香烯乳对结肠癌Lovo细胞的作用机制。方法：采用不用浓度的榄香烯乳处理结肠癌Lovo细胞后，分别应用四唑蓝比色试验、端粒重复扩增－微孔板杂交法、琼脂糖凝胶电泳方法及流式细胞仪研究榄香烯乳对结肠癌细胞生长、端粒酶活性、凋亡及细胞周期的影响。结果：榄香烯乳对结肠癌Lovo细胞增殖具有较强的抑制作用，能够抑制端粒酶活性，诱导细胞凋亡，且这种作用呈浓度及时间依赖；且细胞阻滞于G0/G1期。结论：榄香烯乳抑制结肠癌Lovo细胞恶性增殖与抑制端粒酶活性、诱导凋亡及细胞周期阻滞有关。     

杨梅素诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡及凋亡通路的研究

目的研究杨梅素体外对人宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡及凋亡通路的影响。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,MTT和SRB法检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡,计算机分析细胞周期;Western Blot法检测caspase-3、caspase-9和survivin含量。结果杨梅素对HeLa细胞的体外增殖具有抑制作用,并具有浓度和时间依耐性;杨梅素体外诱导HeLa细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在S期;杨梅素促进caspase-3和caspase-9蛋白表达,抑制survivin蛋白表达。结论杨梅素可抑制HeLa细胞的增殖,诱导其凋亡,其凋亡途径同时涉及细胞内途径和细胞外途径。     

苦荞内生真菌产物EE-2抑制HepG2生长及诱导其细胞凋亡

目的研究苦荞内生真菌KQH-2代谢醇提物EE-2对人肝癌细胞的抑制作用及其作用机制。方法采用MTT法考察EE-2对人肝癌细胞HepG2体外增殖的抑制作用,显微镜观察EE-2对HepG2细胞形态的影响,琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA完整性,并利用流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡及细胞周期变化情况。结果用EE-2处理过的HepG2细胞,显微镜观察可见细胞脱壁圆缩,出现凋亡小体;细胞核降解。流式细胞仪检测发现,处理组的DNA直方图上有比对照组加强的SubG1峰,且可将HepG2细胞阻滞于G0/G1期。结论苦荞内生真菌KQH-2代谢醇提物EE-2可诱导人肝癌HepG2细胞的凋亡,且具有细胞周期阻滞作用。     

榄香烯诱导肺癌A549细胞凋亡作用的剂量和时间依赖性研究

目的探讨榄香烯对肺癌A549细胞的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响。方法每批细胞按空白对照组和药物处理组随机分组,检测榄香烯对癌细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞光度分析术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞周期时相分布,同时进行细胞的形态学观察。结果榄香烯存在剂量依赖性和时间依赖性,榄香烯在48 h、72 h对A549细胞周期有明显影响;榄香烯可阻滞A549细胞于S期并诱导细胞凋亡,但细胞凋亡率并不完全与药物浓度成正相关。结论榄香烯对肿瘤细胞具有较强的增殖抑制作用,在一定药物浓度范围内,随药物浓度的增加榄香烯可使细胞凋亡率升高,但超过一定作用浓度,药物的细胞毒作用增强,细胞凋亡率则呈下降趋势。     

黄芪总苷的抑瘤作用及其作用机制

目的　探讨黄芪总苷的抗肿瘤作用及其作用机制。方法　采用小鼠肝癌 (HepA)和肉瘤 (S1 80 )两种小鼠移植瘤的动物模型 ,以瘤重抑制率作指标。体外采用人宫颈癌细胞株HeLa细胞 ,用MTT法测肿瘤细胞的生长 ,流式细胞术及TUNEL法检测细胞周期及细胞凋亡。结果　黄芪总苷显著抑制小鼠肝癌 (HepA)和肉瘤 (S1 80 )的生长 ;体外可显著抑制HeLa细胞的生长 ,使细胞周期阻滞于G0 /G1 期 ,并诱导其凋亡。结论　黄芪总苷对小鼠肝癌 (HepA)与肉瘤(S1 80 )具有抑瘤作用。对HeLa细胞的生长有直接抑制作用。其抗肿瘤作用可能与细胞周期阻滞于G0 /G1 期和诱导细胞凋亡有关     

槐定碱对人结肠腺癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响

目的考察槐定碱对人结肠癌SW620细胞的增殖影响及探讨其诱导凋亡作用。方法MTT法测定槐定碱对SW620细胞的半数抑制浓度;光学显微镜、荧光显微镜及电镜观察细胞凋亡形态变化;流式细胞仪分析细胞周期变化及细胞凋亡率。结果实验结果显示槐定碱对体外培养的SW620细胞增殖具有明显抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,48hIC50=2.8mmol.L-1。凋亡细胞表现为细胞固缩、变圆、核染色质聚集或碎裂、胞质空泡化。DNA ladder结果显示有凋亡引起的"梯状"条带出现。流式细胞仪细胞周期分析结果表明,随着槐定碱作用时间的延长,G0-G1期细胞增多,同时S期细胞比例也相应增高。结论槐定碱对体外培养SW620细胞生长增殖有明显抑制作用,其作用机制与阻滞细胞周期的进程,诱导细胞凋亡相关。     

β-榄香烯诱导人胃癌BAC823细胞凋亡的实验研究

目的探讨β-榄香烯对人胃癌BAC823细胞的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响.方法每批细胞按空白对照组和药物处理组随机分组,其中药物处理组依药物浓度的不同再分为0.01、0.02、0.04、0.08、0.10、0.16 mg·mL-1处理组,作用时间为24 h.采用MTT法检测β-榄香烯对癌细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞光度分析术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞周期时相分布,同时进行细胞的形态学观察.结果①MTT的检测结果显示药物浓度和细胞增殖抑制率间具有正相直线相关关系(P＜0.01),β-榄香烯体外作用24 h,对胃癌细胞的IC50为0.078 mg·mL-1.②FCM检测及细胞形态学观察结果显示β-榄香烯可阻滞BAC823细胞于S期并诱导细胞凋亡,但细胞凋亡率并不完全与药物浓度成正相关.作用时间为24 h时其诱导人胃癌BAC823细胞发生凋亡的最佳浓度是在0.04～0.08 mg·mL-1.结论β-榄香烯对肿瘤细胞具有较强的增殖抑制作用,在一定药物浓度范围内,随药物浓度的增加β-榄香烯可使细胞凋亡率升高,但超过一定作用浓度,药物的细胞毒作用增强,细胞凋亡率则呈下降趋势.     

MEK信号通路活化在榄香烯致人源U87MG胶质瘤细胞增殖抑制及G0/G1细胞周期阻滞中的作用

目的探讨MKK3和MKK6在榄香烯致人U87MG胶质瘤细胞增殖抑制和细胞周期阻滞中的作用。方法以不同浓度榄香烯作用于人U87MG及U251胶质瘤细胞,应用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性。West-ern blot检测MEK信号通路中MKK3和MKK6的总蛋白及磷酸化蛋白含量。通过转染显性负突变质粒DN-MKK3和DN-MKK6,抑制MKK3和MKK6的活性。然后分别行MTT法和流式细胞术检测榄香烯对胶质瘤细胞的增殖抑制和细胞周期阻滞作用。结果榄香烯显著抑制了人胶质瘤细胞的增殖,呈时间和浓度依赖性,并可使细胞中MKK3和MKK6的磷酸化水平上调。抑制MKK3和MKK6的活性则可显著削弱榄香烯的抗胶质瘤增殖和G0/G1细胞周期阻滞作用。结论榄香烯可以通过将胶质瘤细胞的细胞周期阻滞于G0/G1期,进而有效地抑制肿瘤细胞增殖,且MKK3和MKK6信号通路的激活在其中发挥着不可或缺的作用。     

熊果酸对HL60细胞作用机制的初步研究

目的探讨熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化。结果 MTT法证实熊果酸对HL60细胞具有增殖抑制和杀伤效应,并呈浓度和时间依赖性。显微镜下可见HL60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。流式细胞仪检测细胞周期阻滞于G0/G1期。结论熊果酸在体外可抑制急性早幼粒白血病HL60细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

黄芪对喉癌细胞增殖和凋亡的影响

目的体外观察黄芪对人喉癌细胞系Hep-2的抑制增殖和诱导凋亡作用并探讨其作用机制。方法用20、100、200μg/mL的黄芪作用于Hep-2细胞24 h,MTT法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,光学显微镜观察细胞形态学变化。结果 MTT结果显示,黄芪可显著抑制Hep-2细胞增殖且存在剂量依赖性;流式细胞仪检测发现,细胞凋亡率随着黄芪浓度增高逐渐升高,各实验组之间及其与对照组之间比较差异有统计学意义(P<0.05);用药后光镜观察细胞数量减少,荧光显微镜观察可见典型细胞凋亡。结论黄芪可调控喉癌细胞周期,形成G2/M期阻滞,通过抑制增殖和促进凋亡发挥其抗癌作用。     

龙须菜藻红蛋白抗肿瘤活性的研究

目的探讨龙须菜藻红蛋白抗肿瘤活性。方法体内实验以S180荷瘤小鼠为肿瘤模型,检测藻红蛋白粗提物(CPE)对肿瘤生长的抑制作用以及对免疫器官的影响;体外实验采用MTT法检测不同浓度的藻红蛋白(PE)对人宫颈癌HeLa、人食道癌EC109和人血管内皮细胞等细胞的作用,流式细胞仪、Annexin V-FITC/PI双荧光染色法观察藻红蛋白对HeLa细胞周期及细胞凋亡的影响。结果CPE能显著的抑制小鼠S180肉瘤生长,当灌胃剂量在100~300 mg.kg-1范围内时,呈量效关系,其中剂量为300 mg.kg-1时,其抑瘤率达49%,且能极显著地提高荷瘤小鼠的胸腺指数;体外实验表明PE对人宫颈癌细胞HeLa有明显的抑制作用,其抑制率达70%以上,并存在剂量依赖性。PE可阻滞HeLa细胞从G2/M期进入S期,促使细胞凋亡。但PE对人食道癌EC109细胞无作用,对正常的人血管内皮细胞有一定的促生长作用。结论龙须菜藻红蛋白具有体内抑制S180肉瘤生长的活性,体外对培养的不同细胞作用不同,对人宫颈癌HeLa细胞有较强的抑制作用。     

β-榄香烯取代哌嗪酰胺类衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

目的设计合成β-榄香烯取代哌嗪酰胺类衍生物并进行体外抗癌活性筛选。方法通过合成β-榄香烯单氯代物,在其结构中引入取代哌嗪结构来合成β-榄香烯取代哌嗪衍生物,然后再与取代苯甲酰氯或取代苯丙烯酰氯反应制得β-榄香烯取代哌嗪酰胺类衍生物。采用MTT法测定了目标化合物对人宫颈癌细胞、人肝癌细胞、人纤维肉瘤细胞等10种细胞的增殖抑制作用。结果与结论合成了23个未见文献报道的β-榄香烯取代哌嗪酰胺类衍生物。经1H—NMR、MS波谱分析确证结构。其中21个化合物经MTT法测定了体外抗肿瘤活性,结果显示活性大多高于β-槛香烯。     

7-二氟甲氧基-5,4'-二正辛烷氧基金雀异黄素钝化Pim-1对宫颈癌细胞增殖和侵袭的抑制作用

目的 检测7-二氟甲氧基-5,4''-二正辛烷氧基金雀异素(7-difluoromethoxyl-5,4''-di-n-octylygenistein,DFOG)对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其机制。方法 体外培养宫颈癌HeLa细胞,用MTT法检测DFOG对HeLa细胞的增殖抑制作用;用PI染色FCM检测DFOG对HeLa细胞周期分布的影响;用Transwell法检测DFOG对HeLa细胞迁移及侵袭的抑制作用;用Western blotting、siRNA/cDNA转染检测DFOG对HeLa细胞增殖、迁移侵袭抑制作用的可能分子生物学机制。结果 DFOG在体外对HeLa细胞增殖、迁移、侵袭呈浓度依赖性的抑制作用,阻滞细胞周期于G1期,伴随着Pim-1蛋白表达下调,同时Pim-1下游蛋白Cyclin D、Cyclin E、Cyclin A表达下调,而p15和p21蛋白表达上调。用siRNA干扰沉默Pim-1基因,则DFOG对HeLa细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用明显加强;用Pim-1-cDNA转染HeLa细胞,则能部分抵消DFOG对细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论 DFOG通过钝化Pim-1组织细胞与G1期而发挥其抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的作用。     

三七总皂苷对人胃癌细胞株MKN-28增殖和凋亡的影响

目的观察三七总皂苷(Total Saponins of Panax notoginseng,TSPN)对人胃癌细胞株MKN-28增殖和凋亡的影响,探讨其诱导细胞凋亡是否涉及上调死亡受体5(DR5)的表达。方法体外培养人胃癌细胞株MKN-28,平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖性生长能力,PI染色流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析细胞周期和凋亡率,Hoechst 33258染色荧光显微镜观察凋亡细胞的形态,Western Bloting检测分析药物对DR5蛋白表达的影响。结果平皿集落形成法检测显示TSPN对MKN-28细胞生长有抑制作用,且呈浓度依赖性。PI染色FCM结果表明TSPN以时间和浓度依赖性方式诱导MKN-28细胞凋亡,且使细胞周期阻滞于G1期。Hoechst 33258染色荧光显微镜观察可见核染色质凝集,凋亡细胞呈致密浓染,与对照组相比,TSPN处理后,凋亡细胞比例增加,且呈时间和浓度依赖性。Western Bloting检测显示TSPN诱导细胞凋亡的机制涉及上调死亡受体5的表达活性。结论 TSPN在体外对人胃癌MKN-28细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,初步推断TSPN诱发胃癌细胞凋亡与其上调死亡受体5的表达活性有关。     

多西紫杉醇诱导宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的研究

目的：观察多西紫杉醇对体外培养的宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制。方法：不同浓度（1、5、10、20、40μg/mL）的多西紫杉醇处理体外培养的宫颈癌HeLa细胞6、12、24、48、72h后,用MTT法测定其生长抑制率,倒置显微镜及透视电镜观察细胞形态学变化,通过流式细胞术分别测定细胞凋亡率、细胞周期分布,RT-PCR法检测自噬基因Beclin1表达的变化情况。结果：多西紫杉醇呈剂量和时间依赖性抑制宫颈癌HeLa细胞增殖（P〈0.05）;多西紫杉醇10μg/mL处理的HeLa细胞,早期（24h内）可出现明显的细胞自噬性变化,细胞凋亡数明显增加,G2/M期阻滞,且自噬基因Beclin1的表达明显增高。结论：多西紫杉醇具有抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、诱导细胞自噬性凋亡等作用,其机制可能与上调自噬基因Beclin1的表达水平有关。     

β-榄香烯对人肝癌细胞株的体外放射增敏作用

目的通过体外实验探讨β-榄香烯对人肝癌细胞株的放射增敏作用机制。方法用克隆形成法检测不同时间-浓度条件β-榄香烯和／或放射作用后的人肝癌细胞株存活分数，计算放射增敏率（SER）。用流式细胞仪分析不同时间-浓度条件下β-榄香烯对细胞周期和细胞凋亡的影响。结果10、100、1000nmoL／L β-榄香烯作用24h后SER分别为1．32，1．71和1．36。β-榄香烯作用时间和浓度越高，人肝癌细胞G2／M期的比率也越高。100、1000nmoL／L β-榄香烯作用24h后，G2／M期比率明显升高。10nmol β-榄香烯作用24h细胞凋亡百分率20．71％。结论β-榄香烯对人肝癌细胞有放射增敏作用，其作用机制可能与对诱导肝癌细胞凋亡和β-榄香烯对细胞的G2／M期阻滞有关。     

榄香烯对人实体瘤与非实体瘤作用的差异性研究

目的: 研究榄香烯对人实体瘤细胞7402、Hela与非实体瘤细胞K562、HL-60的作用差异性.方法: MTT比色法观察榄香烯对细胞生长抑制作用;荧光显微镜和透射电镜观察细胞结构的改变;DNA凝胶电泳和流式细胞术分析细胞凋亡、周期变化及Bcl-2蛋白表达情况.结果: 榄香烯能诱导7402,Hela和K562,HL-60细胞凋亡,同时都伴有Bcl-2蛋白表达下调.结论: 榄香烯对人实体瘤与非实体瘤有相同的体外抑瘤效应和作用机制.