妊娠早期外周血和蜕膜CD4+CD25+FoxP3+/CD127-T细胞检测及意义

目的 研究妊娠早期外周血和蜕膜组织中CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127-T细胞的数量变化,并探讨相关性.方法 17例原因不明复发性流产(URSA)患者(URSA组)和20名正常健康早孕者(对照组)于人工流产时分别采集外周血和蜕膜组织,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,分别加入CD4-PE-Cy5.5、CD25-FITC或CD25-APC和细胞表面标记CD127-PE或细胞内标记FoxP3-PE,流式细胞仪检测样本中CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127-T细胞的百分比,并进行线性相关分析.结果 与对照组比较,URSA组蜕膜组织中CD4+CD25+ FoxP3+和CD4+CD25+ CD127-T细胞百分比明显降低(均P<0.05);两组间外周血CD4+CD25+ FoxP3+和CD4+CD25+ CD127-T细胞百分比比较差异无统计学意义.组内比较显示,两组外周血和蜕膜组织中CD4+CD25+FoxP3+与CD4+CD25+CD127-T细胞百分比比较,差异均无统计学意义(均P﹥0.05).相关分析显示,两组CD4+CD25+ FoxP3+与CD4+CD25+ CD127-T细胞的百分比在外周血(r=0.9858, r=0.6870)和蜕膜组织(r=0.6089, r=0.9583)均呈显著正相关(均P﹤0.05).结论 URSA的发生可能与蜕膜CD4+CD25+ 调节性T细胞数量减少有关,而外周血CD4+CD25+调节性T细胞可能不参与URSA的免疫发病机制.细胞表面标记CD127可能成为鉴定和分离CD4+CD25+调节性T细胞的一种新的特异性标记物.     

外周血及蜕膜组织中CD4加CD25加调节性T细胞比例与原因不明复发性流产的关系研究

目的：：探讨外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例与原因不明复发性流产的关系。方法：随机选取自2012年6月到2015年6月,我院门诊部与住院部的原因不明复发性流产患者62例(观察组)和正常妊娠妇女62例(对照组)作为研究对象。采用流式细胞四色荧光法测量两组研究对象外周血及蜕膜组织中的 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例。分析比较两组研究对象外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例情况。结果：观察组患者外周血中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例低于对照组患者外周血中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞的比例,且两组差异具有统计学意义( t ＝2.669,P ＝0.015);观察组患者蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例低于对照组患者蜕膜组织中CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例,两组差异具有统计学意义(t ＝4.986,P ＝0.001)。结论：外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例在早孕期显著升高,参与了正常妊娠的维持,有可能是调控母胎界面局部免疫耐受形成的一个重要因素;外周血及蜕膜组织中 CD4＋CD25＋调节性 T 细胞比例降低可能与 URSA 的发生有关。     

乙型肝炎患者CD4~+CD25~+调节性T细胞检测及意义

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞在乙型肝炎患者发病机制中的作用。方法利用免疫荧光法检测20例携带者、10例慢性乙型肝炎5、例慢性重症乙型肝炎患者的CD4+CD25+调节性T细胞水平,分析与HBV基因型的关系。结果①重型乙型肝炎组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率为(2.52±0.94)%,较慢性乙型肝炎组的(5.25±2.17)%差异有统计学意义(P<0.05),比乙肝病毒携带者组及健康对照组则差异有统计学意义(P均<0.01);②慢性乙型肝炎组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率与无症状乙肝病毒携带者组及健康对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);③乙肝病毒携带者组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率为(8.51±2.82)%,与健康对照组的(8.51±2.82)%比较差异无统计学意义(P>0.05)。④HBV基因型C型组外周血CD4+CD25+调节性T细胞的百分率为(6.42±2.36)%,较HBV基因型B型组的(7.64±2.87)%稍为下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞能抑制T细胞对乙肝病毒的免疫反应,从而抑制乙型肝炎的发生;CD4+CD25+调节性T细胞的水平与病情轻重有一定的关系。     

再生障碍性贫血患者外周血CD4+CD25+ T细胞的检测

目的:通过对外周血CD4+CD25+ T细胞的检测,初步探讨CD4+CD25+ T细胞水平与再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)发病和预后的关系。方法:流式细胞术分别检测20例正常对照、30例初发AA患者、10例治疗有效AA患者和10例治疗无效AA患者的CD4+CD25+ T细胞和CD4+CD25highT细胞水平。结果:4组患者CD4+CD25+ T细胞比例差异无统计学意义(P>0.05);初发AA和治疗无效组AA患者CD4+CD25highT细胞比例均低于正常对照组(P<0.01和P<0.05),但与治疗有效AA患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CD4+CD25highT细胞比例下降是造成AA患者免疫耐受破坏的原因之一,CD4+CD25+ T细胞比例可能并不能反映AA患者的预后状况。     

磁激活分选法双重分离大鼠外周血单个核细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞

目的:应用磁激活细胞分选(MASC)技术从卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中分选出大量高纯度CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg),以研究其在支气管哮喘中的作用。方法:从OVA免疫耐受大鼠外周血中分离出PBMCs,应用MASC技术阴性分选CD4+T细胞,再阳性分选出CD4+CD25+Treg;流式细胞仪检测。结果:分选前的CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞数的11.07%,CD4+T细胞占总数的21.88%;CD4阴性分选后,CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞数的10.95%,CD4+T细胞占总数的89.28%;CD25阳性分选后,CD4+T细胞超过总数的95%,而CD4+CD25+Treg细胞占总数的90.92%,CD4+CD25+Treg细胞纯度大于90%。结论:应用MASC技术成功从OVA免疫耐受大鼠的PBMCs中分选出了高纯度的CD4+CD25+Treg细胞。     

CD4+CD25+调节T细胞与原因不明复发性流产研究进展

近年研究显示,CD4+CD25+调节性T细胞在母胎免疫耐受中起关键作用,原因不明复发性流产的发生与CD4+CD25+调节性T细胞的数量和功能异常有关.现将CD4+CD25+调节性T细胞引起原因不明复发性流产的免疫学机制及临床应用进展作一综述.     

镍接触性皮炎患者外周血CD4~+CD25~+ T细胞的检测及意义

目的研究镍接触性皮炎患者外周血CD4+CD25+T细胞的比例变化,分析其与斑贴试验反应强度之间的关系。方法应用斑贴试验检测镍接触性皮炎患者;采用流式细胞仪检测镍接触性皮炎患者(n=30)外周血CD4+CD25+T细胞的水平。结果镍接触性皮炎患者外周血CD4+CD25+T细胞的水平较正常对照组降低(P<0.01);且较缓解期低(P<0.01);镍接触性皮炎患者外周血CD4+CD25+T细胞的水平与斑贴试验阳性反应强度之间无相关性(P>0.05)。结论镍接触性皮炎患者外周血CD4+CD25+T细胞水平的降低,可能在镍接触性皮炎的发生机制中起着重要作用。     

肝癌患者外周血CD4+/CD25+调节T细胞分析

目的 探讨肝癌患者外周血CD4+/CD25+调节T细胞(Treg)水平的变化特点及其临床意义.方法 采用流式细胞仪检测63例原发性肝癌患者和30例健康人外周血CD4+/CD25+调节T细胞水平,并进行水平比较和分层分析.结果 肝癌组外周血CD4+/CD25+调节T细胞水平(14.06±2.34)%,明显高于健康对照组(6.05±1.57)%(P＜0.05);外周血CD4+/CD25+调节T细胞水平与肝癌病理类型无相关性(P＞0.05);与临床分期密切相关,Ⅰ+Ⅱ期亚组(8.31±1.43)%与健康对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),而与Ⅲ期亚组(13.68±2.31)%、Ⅳ期亚组(18.50±2.98)%比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肝癌患者外周血CD4+/CD25+调节T细胞水平明显升高,且与肿瘤的发生发展密切相关,可作为评估肝癌患者预后的一项指标.     

CD4~+CD25~+细胞研究现状和发展趋势

对自身抗原的免疫反应的调节是一个复杂的过程 ,涉及到自身耐受以及保持对非己抗原产生免疫应答的能力。正常人体内一般都有对自身抗原产生特异性反应的T细胞存在 ,但都由于受到各种耐受机理的严格控制而不会导致免疫性疾病的发生[1] 。过去几年里在诸多自身耐受机理中研究比较深入的是抑制性T细胞的特性和作用。研究表明[2 ] ,CD4+ CD2 5 + 细胞的反应性低下 ,并对CD4+ CD2 5 -细胞具有抑制作用。CD4+CD2 5 + 细胞必须通过其T细胞受体 (TCR)激活才能发挥抑制活性 ,但一旦被激活 ,便不再需要抗原 ,也不需要通过TCR重新活化。因此 ,…     

脓毒症患者CD4~+CD25~+调节性T细胞检测的临床意义

目的探讨脓毒症患者CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的水平与机体细胞免疫状态的关系及其检测的临床意义。方法将脓毒症患者40例按照疾病严重程度分为3组:脓毒症组14例,严重脓毒症组15例,脓毒症休克组11例。所有入选的40例脓毒症患者在入选当天行流式细胞术检测血中CD4+CD25+调节性T细胞的比例和CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平。比较脓毒症组、严重脓毒症组和脓毒症休克组血中CD4+CD25+调节性T细胞比例变化和CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平变化。同时选取20例健康人为对照组。结果健康对照组CD4+CD25+调节性T细胞表达率脓毒症休克组最高,严重脓毒症组次之,脓毒症组最低,三组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒症组CD3+、CD4+和CD4+/CD8+较正常对照组明显升高(P<0.05),CD8+较正常对照组差异不明显(P>0.05)。严重脓毒症组和脓毒症休克患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较正常对照组明显降低(P<0.05),CD8+较正常对照组改变不明显(P>0.05)。结论脓毒症患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞表达增加,可能导致CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平降低,免疫抑制加强。提示CD4+CD25+调节性T细胞在脓毒症的免疫发病机制中可能起着重要作用,对评估患者预后有临床价值。     

外周血CD4^＋CD25^＋CD127^-调节性T细胞在过敏性紫癜中的表达及意义

目的 探讨外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋调节性T细胞在HSP患儿治疗前和治疗后的表达及其临床意义。方法选取HSP患儿4l例作为观察组,选取健康儿童41例作为对照组,检测对照组儿童及观察组患儿治疗前后的CD4^＋CD25^＋CD127^＋值。结果（1）治疗前与对照组比较,CD4^＋CD25^＋CD127^＋明显降低（P〈0．05）;（2）与治疗前比较,观察组患儿的CD4^＋CD25^＋CD127^＋值在治疗后明显升高（P〈0．05）;（3）与对照组比较,观察组患儿治疗后CD4^＋CD25^＋CD127^＋值差异无显著性（P〉0．05）。结论外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋值在HSP患儿治疗前显著降低,给予有效的治疗后其值显著升高,可能在HSP的发生发展过程中调节性T细胞进行了参与。而对于HSP患儿对疾病的有效预测．可以对其CD4^＋CD25^＋CD127^＋值进行测定。     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞CD25及CD127的表达

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血调节性T细胞(Tregs)比例的变化情况,了解Tregs变化在RA发病及炎症活动中的意义.方法 采用流式细胞仪三色荧光抗体标记法分别对25例RA患者和31名健康志愿者(HV)的外周血淋巴细胞进行CD4、CD25及CD127标记,分析比较RA患者组与HV组间淋巴细胞中CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25+CD127-及CD4+CD25highCD127-细胞比例的差异情况,并将RA组相应细胞比例与RA疾病活动性评分(DAS28-4)、压痛关节数、肿胀关节数、晨僵时间、医生和患者对疾病活动性的整体评价(VAS)、血红细胞沉降率、C-反应蛋白行相关分析.结果 RA组外周血淋巴细胞中,CD4+CD25+CD127-和CD4+CD25highCD127-细胞占CD4+T淋巴细胞的百分率分别为(2.53±0.85)%和(0.91±0.32)%,而HV组则分别为(3.22±0.97)%和(1.25±0.41)%.CD4+CD25+CD127+和CD4+CD25highCD127-细胞比例在RA组均明显低于HV组,其组间差异均有统计学意义(均P<0.05);另外,RA患者CD4+CD25+CD127-和CD4+CD25highCD127-T细胞比例均与DAS28-4及压痛关节数存在负相关(P<0.05),CD4+CD25highCD127-T细胞还与肿胀关节数及患者VAS存在负相关(P<0.05).结论 RA患者外周血淋巴细胞存在Tregs比例的降低,Tregs数量的异常可能是RA发病及炎症活动的重要影响因素.     

慢性B淋巴细胞白血病CD4^＋CD25^＋highCD127^Low和CD19^＋-CD23^＋的相关性研究

目的通过研究慢性B淋巴细胞白血病（chronic B cell lymphocytic leukemia,B—CLL）CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low和CD19^＋CD23^＋的相关性,探讨CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low在B—CLL发生发展过程中的作用。方法将20例初次发病的B—CLL患者按临床分期的不同分为O-II期组、III-IV期组,设立正常对照组,应用流式细胞仪检测各组的研究对象外周血中CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CD19^＋、CD19^＋CD23^＋的表达量,比较各组间的差异。结果B—CLL O-II期组、III-IV期组患者外周血中CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CD19^＋、CD19^＋CD23^＋的表达量均明显高于正常对照组;B—CLL患者III-IV期组的CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CDl9^＋、CDl9^＋CD23^＋表达量明显高于O-II期组;CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CDl9^＋CD23^＋有明显的正相关性。结论B—CLL患者外周血中CD4^＋CD25^＋highCD127^Low的表达量增高,与CD19^＋、CD19^＋CD23^＋的表达量增高明显相关,可能是B—CLL患者CD19^＋CD23^＋克隆性增生原因之一．     

宫颈疾病患者外周血CD4+CD25+C-D127-/low Treg细胞的检测及临床意义

目的 检测宫颈癌、宫颈上皮内瘤变患者外周血CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达,分析其临床意义.方法 荧光抗体CD127-FITC、CD4-PECY5、CD25-PE标记T细胞,流式细胞术测定50例宫颈癌患者和49例宫颈上皮内瘤变患者中CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达.结果 与正常对照组[n=33,(8.07±2.18)％]比较,宫颈癌组[n=50,(11.15±1.97)％]、宫颈上皮内瘤变组[n=49,(10.61±2.62)％]CD4+CD25+CD127-low均显著升高,两者比较差异有统计学意义(t=6.018,P＜0.001;t=4.943,P＜0.001);与宫颈上皮内瘤变Ⅰ级组[n=16,(8.96±0.65)％]比较,宫颈上皮内瘤变Ⅱ～Ⅲ级组[n=33,(11.54±2.72)％]显著升高,两者比较有差异统计学意义(t=4.114,P＜0.001);与宫颈癌Ⅰ期组[n=20,(10.34±1.79)％]比较,官颈癌Ⅱ期组[n=30,(11.68±1.97)％]显著升高,两者比较差异有统计学意义(t=2.424,P＜0.05).结论 外周血CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达升高可能在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变发病的发生、发展过程中起一定作用.     

非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞分析

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞（Treg）占CD4^＋T细胞的比例变化,探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测32例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果健康对照纽外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（0．54±0．51）％;NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（1．40±0．98）％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例明显升高,提示与肺癌免l癌逃逸有美。     

CD4+Foxp3+ regulatory T cells converted by rapamycin from peripheral CD4+CD25− naive T cells display more potent regulatory ability in vitro

Background Rapamycin （RAPA） is a relatively new immunosuppressant drug that functions as a serine/threonine kinase inhibitor to prevent rejection in organ transplantation. RAPA blocks activation of T-effector （Teff） cells by inhibiting the response to interleukin-2. Recently, RAPA was also shown to selectively expand the T-regulator （Treg） cell population. To date, no studies have examined the mechanism by which RAPA converts Teff cells to Treg cells. Methods Peripheral CD4＋CD25- naive T cells were cultivated with RAPA and B cells as antigen-presenting cells （APCs） in vitro. CD4＋CD25- T cells were harvested after 6 days and analyzed for expression of forkhead box protein 3 （Foxp3） using flow cytometry. CD4＋CD25＋CD127- subsets as the converted Tregs were isolated from the mixed lymphocyte reactions （MLR） with CD127 negative selection, followed by CD4 and CD25 positive selection using microbeads and magnetic separation column （MSC）. Moreover, mRNA was extracted from converted Tregs and C57BL/6 naive CD4＋CD25＋ T cells and Foxp3 levels were examined by quantitative real-time polymerase chain reaction （rt-PCR）. A total of 1×105 carboxyfluorescein succinimidyl ester （CFSE）-labeled naive CD4＋CD25- T cells/well from C57BL/6 mice were cocultured with DBA/2 or C3H maturation of dendritic cells （mDCs） （0.25×105/well） in 96-well round-bottom plates for 6 days. Then 1×105 or 0.25×105 converted Treg cells were added to every well as regulatory cells. Cells were harvested after 6 days of culture and analyzed for proliferation of CFSE-labeled naive CD4＋CD25- T cells using flow cytometry. Data were analyzed using CellQuest software.Results We found that RAPA can convert peripheral CD4＋CD25- naive T Cells to CD4＋Foxp3＋ Treg cells using B cells as APCs, and this subtype of Treg can potently suppress Teff proliferation and maintain antigenic specificity. Conclusion Our findings provide evidence that RAPA induces Treg cell conversion from Teff cells and uncovers an additional mechanism for tolerance induction by RAPA.     

类风湿关节炎患者外周血CD4+CD25+CD127-调节T细胞的检测及临床意义

目的探讨CD4＋CD25＋CD127-调节T细胞（Treg）在类风湿关节炎中的诊断价值及临床意义。方法选取42例类风湿关节炎（RA）患者和20正常健康者分为两组,采用流式细胞仪检测两组调节T细胞的表达频率,检测两组实验室指标,观察两组实验室指标与调节T细胞的关系。结果与正常对照组相比,RA组白细胞（WBC）、免疫球蛋白A（IgA）、抗链球菌溶血素O（ASO）、类风湿因子（RF）、糖酸蛋白（α1-AGP）、C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）显著升高（P〈0.05或P〈0.01）;血红蛋白（Hb）、CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋T细胞、CD4＋CD25＋CD127-T细胞的表达频率降低（P〈0.05）。Spearman相关分析显示,CD25＋T细胞与Hb、IgM、ESR呈正相关,CD4＋CD25＋CD127-T细胞与IgM呈正相关（P〈0.01或P〈0.05）;CD25＋T细胞与RBC、IgA呈负相关,CD4＋CD25＋T细胞与补体C4呈负相关,CD4＋CD25＋CD127-T细胞与ASO呈负相关（P〈0.05）。结论CD4＋CD25＋CD127-Treg在RA患者的外周血中显著降低,并且与疾病的活动性高度相关,说明调节T细胞可能参与了RA的发病,早期检测可能为RA的诊断及治疗提供依据。     

放射损伤对恶性肿瘤外周血CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的:观察放射治疗过程中不同剂量时患者外周血T细胞亚群和CD4 CD25 调节性T细胞的变化.并探讨其临床意义.方法:用流式细胞仪检测放射治疗中不同剂量时患者外周血T细胞亚群和CD4 CD25 调节性T细胞的水平,并进行分层分析.结果:放疗剂量为30GY、50GY时,恶性肿瘤患者CD3 、CD4 、CD8 T细胞比例及CD4 /CD8 比值与放疗前相比,差异无统计学意义,而早期(Ⅰ、Ⅱ)、进展期(Ⅲ、Ⅳ)患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞的水平与放疗前相比,差异有统计学意义(F=4.66,P=0.041),且与剂量呈正相关.结论:放疗可能对恶性肿瘤患者的免疫功能有一定的损害,尤其是患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞水平升高,且它与剂量呈正相关;放疗后外周血CD4 CD25 调节性T细胞比例比CD4 /CD8 比值更能敏感反应免疫功能状态,可能成为恶性肿瘤患者的更敏感的免疫监测指标.     

前列腺癌患者外周血CD4 + CD25+调节性T细胞及FOXP3 mRNA的表达及临床意义

[摘要] 目的 探讨CD4 + CD25 +调节性T细胞和FOXP3在前列腺癌发病过程中的作用。方法 应用流式细胞术检测30例前列腺癌、40例前列腺增生患者及20例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+ CD25+ 调节性T细胞占CD4 +T细胞的比例, 应用RT-PCR技术检测人外周血PBMC FOXP3基因的表达。结果 前列腺癌患者外周血PBMC中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例高于前列腺增生患者和健康志愿者,前列腺增生患者和健康志愿者之间差异无统计学意义（P>0.05）;前列腺癌患者外周血PBMC中FOXP3 mRNA的表达水平高于非肿瘤患者表达水平( P < 0.05) , 前列腺增生患者和健康志愿者之间差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 CD4+CD25+调节性T细胞及其特异标志物FOXP3在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免疫具有抑制作用, 该细胞群比例的增加可能参与前列腺癌的发生。 结论: CD4+CD25+调节性T细胞及其特异标志物FOXP3在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免疫具有抑制作用, 该细胞群比例的增加可能参与前列腺癌的发生。