高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠血浆游离脂肪酸与肿瘤坏死因子α的动态变化

目的：观察高脂饮食饲养下的大鼠血浆游离脂肪酸和肿瘤坏死因子α的浓度变化特点，分析其与胰岛素抵抗之间的关系。方法：实验于2005-03／04在解放军第四军医大学实验动物中心完成。选择健康清洁级雄性SD大鼠16只，以随机数字表法将大鼠分成2组，即对照组和高脂饮食组，各8只。①对照组给予普通饲料喂养（热量15kJ／g，脂肪占总热量12％）。②高脂饮食组给予高脂饲料喂养（热量22kJ／g，脂肪占总热量56％）。实验期间每天称取饲料消耗量，每7d空腹称大鼠质量及尾部取血1次。血浆胰岛素和肿瘤坏死因子α浓度以放免法测定，血浆葡萄糖以葡萄糖氧化酶法测定，胰岛素抵抗程度以HOMA模型胰岛素抵抗指数表示。结果：全部16只大鼠在实验过程中均无死亡，全部进入结果分析。①高脂饮食组HOMA-胰岛素抵抗指数21，28d与本组0d值比较明显升高（2.38&;#177;0.10，2，44&;#177;0．19，2，00&;#177;0.23，P〈0．01），与对照组同期比较亦明显升高（2．02&;#177;0，18，2．06&;#177;0.11，P〈0.01）。②高脂饮食组游离脂肪酸浓度21，28d与本组0d基础值比较明显升高f（0.62&;#177;0.05），（0．68&;#177;0.05），（0.55&;#177;0．05）mmol／L，P〈0.05]，与对照组同期比较亦明显升高[（0.54&;#177;0.06），（0.57&;#177;0.07）mmol／L，P〈0.051；且游离脂肪酸水平与HOMA-胰岛素抵抗指数呈正相关关系（r=0．61，P〈0.01）。③两组动物血浆肿瘤坏死因子α均无变化。结论：①游离脂肪酸的升高与胰岛素抵抗指数产生密切相关，结果数据尚难以分清因果关系。②高脂饮食喂养的大鼠胰岛素抵抗指数产生与血浆肿瘤坏死因子α的水平升高无关。     

高脂饲料和高果糖餐分别诱导胰岛素抵抗大鼠模型的胰岛素敏感性

目的：建立高脂饲料和高果糖餐诱导的胰岛素抵抗大鼠模型。分别评定两种动物模型的胰岛素敏感性。方法：实验于2004-03／06在南京中医药大学第一临床医学院中医内科急难症研究所完成，选用Wistar雄性大鼠72只，适应性饲养1周后，随机分为3组，即空白组、果糖模型组和高脂模型组，每组24只。空白组继续以普通标准大鼠饲料喂养，饮用自来水；果糖模型组以100g／L的果糖水取代自来水喂养；高脂模型组以高脂饲料取代普通标准大鼠饲料喂养，连续6周。每周测量各组大鼠的体质量、血压。6周结束时，分别测定各组大鼠葡萄糖耐量、血清游离脂肪酸、三酰甘油、血浆胰岛素，同时以正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术，结合输注^3H-2DG测定股四头肌葡萄糖摄取率评定大鼠的胰岛素敏感性。胰岛素敏感性指数=1n 1／（空腹血糖&;#215;空腹胰岛素）。结果：纳入72只大鼠全部进入结果分析，无脱失。①各组大鼠体质量、血压比较：与空白组大鼠比较。高脂模型组体质量显著增加（t=2．819-11．430，P〈0．01），果糖模型组血压显著升高（t=4．743-14．510。P〈0．01）。②各组大鼠糖耐量比较：果糖模型组和高脂模型组大鼠的葡萄糖耐量显著低于空白组（t=2．833，4．030，P〈0．05，P〈0．01）。③各组大鼠血清三酰甘油、游离脂肪酸、血浆胰岛素含量比较：果糖模型组和高脂模型组大鼠显著高于空白组（t=3．059-10．391，P〈0．01）。④各组大鼠胰岛紊敏感性指数、葡萄糖输注率、葡萄糖摄取率比较：果糖模型组和高脂模型组大鼠显著低于空白组（t=2．212—58．052，P〈0．01）。结论：高脂饲料和高果糖餐喂饲均可以诱导胰岛素抵抗大鼠模型。     

有氧运动对胰岛素抵抗大鼠肝细胞中蛋白激酶B表达的影响

目的：探讨有氧运动对胰岛素抵抗大鼠肝细胞中蛋白激酶B表达的影响，从而从基础研究上证明了运动对改善糖尿病胰岛素抵抗的作用。方法：实验选用30只清洁级Wistar雄性大鼠，将30只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和运动干预组，每组10只。高脂喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型，Western印迹法测定各大鼠肝细胞中蛋白激酶B表达水平。结果：①高脂喂养成功建立胰岛素抵抗模型，高脂喂养大鼠胰岛素敏感指数下降(P&;lt;0．01)。②模型组肝细胞中蛋白激酶B表达水平(7．34&;#177;0．19)低于对照组(8．97&;#177;0．20)(P&;lt;0．01)。运动干预组蛋白激酶B表达水平(7．63&;#177;0．18)明显高于模型组(7．34&;#177;0．19)(P&;lt;0．01)。结论：有氧运动能改善胰岛素抵抗，肝细胞中蛋白激酶B表达水平与胰岛素抵抗可能有关。     

高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠模型游离脂肪酸和胰岛素敏感性的变化

目的:观察经高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠模型的胰岛素敏感性及血清游离脂肪酸的变化情况。方法:实验于2002-04/08在重庆医科大学动物中心及附属第一医院内分泌实验室完成。选择6周龄Wistar大鼠24只,随机分为2组,即正常饲养组和高脂饲养组,每组12只。正常饲养组及高脂饲养组饲料的热量分别为13.53,18.71kJ/g。喂养6周后,应用葡萄糖钳夹技术评价胰岛素抵抗大鼠模型(葡萄糖输注率60～120越低,胰岛素抵抗越严重),血清游离脂肪酸水平应用生化比色法测定,血清三酰甘油、总胆固醇、低、高密度脂蛋白胆固醇水平应用生化酶法测定。比较两组大鼠体质量、葡萄糖输注率以及血清游离脂肪酸等的变化情况。结果:实验过程中两组各死亡2只,进入结果分析两组各10只大鼠。①两组大鼠喂养6周后血脂、游离脂肪酸水平比较:高脂饲养组大鼠的三酰甘油、游离脂肪酸水平显著高于正常饲养组[(1.24±0.34,0.61±0.12),(0.43±0.13,0.24±0.10)mmol/L(t=2.84,P<0.05;t=3.36,P<0.01)]。②两组大鼠喂养6周后体质量、血糖、胰岛素水平及葡萄糖输注率60～120比较:高脂饲养组大鼠体质量、血浆胰岛素水平显著高于正常饲养组(t=3.49,4.25,P<0.01),葡萄糖输注率60～120显著低于正常饲养组[(9.89±3.28,28.03±8.02)mg/(kg·min)](t=5.91,P<0.01)。结论:高脂饲养大鼠的葡萄糖输注率明显降低,提示高脂饮食可导致机体产生严重胰岛素抵抗,是建立胰岛素抵抗大鼠模型的有效手段。该模型同时伴有脂代谢异常,其胰岛素抵抗的形成可能与游离脂肪酸水平升高有关。     

果糖诱导高血压伴胰岛素抵抗大鼠血清脂联素和肿瘤坏死因子α水平的变化

目的：建立高血压伴胰岛素抵抗动物模型并观察血清脂联素，肿瘤坏死因子α的变化。 方法：实验于2005-07／09在海军总医院中心实验室完成。选择6周龄雄性Wistar大鼠20只，随机数字表法分为两组，对照组（n=10）以普通标准饲料＋普通自来水喂养；果糖组（n=10）以普通标准饲料＋10％果糖水喂养，连续喂养14周，于喂养后第8和14周末，采用尾部测量法测定大鼠血压，胰岛素抵抗指标采用胰岛素敏感性指数=ln[空腹血糖&;#215;空腹胰岛素]，采用放射免疫法测定血清脂联素和肿瘤坏死因子α的浓度。 结果：纳入动物20只，均进入结果分析。①第8周末果糖组肿瘤坏死因子α水平与对照组相比明显升高[分别为（2．21&;#177;0.34），（1.84&;#177;0.25）μg，P〈0．05]，胰岛素敏感性指数、脂联素明显下降[分别为-4．64&;#177;0．12，-4．23&;#177;0．27；（4.76&;#177;0.67），（5．83&;#177;0．99）mg／L，P〈0，01]。②第14周末两组间胰岛素敏感性指数、脂联素和肿瘤坏死因子α 的差异更加明显。第14周末果糖组胰岛素敏感性指数、脂联素与第8周末相比明显降低[-5.05&;#177;0．32，-4．64&;#177;0．12；（3.60&;#177;0.50），（4．76&;#177;0.67）mg／L，P〈0、01]。肿瘤坏死因子α明显升高[分别为（2．53&;#177;0.39），（2．21&;#177;0．34）μg/L，P〈0．01]。（3）相关性分析表明，脂联素与空腹胰岛素、胰岛素敏感性指数和肿瘤坏死因子α水平的相关性显著（r=0．564，-0．641，-0．538，P〈0．05）。 结论：10％果糖水喂养的Wistar大鼠，具有典型的高血压伴胰岛素抵抗的特点；胰岛素敏感性降低的同时伴有血清脂联素下降和肿瘤坏死因子α的升高.     

2型糖尿病大鼠大网膜和皮下脂肪组织抵抗素基因的表达

目的：观察实验性2型糖尿病大鼠大网膜与皮下脂肪组织抵抗素基因的表达，探讨抵抗素与胰岛素抵抗的关系。 方法：实验于2003-09／2004-06在郑州大学第一附属医院内分泌实验室完成．选择雌性Wistar大鼠30只，随机抽签法分为普通饲料组（8只）和高脂饲料组（22只），高脂饲料组大鼠采用0．1mol／L链脲佐菌素尾静脉注射加高脂喂养的方法建立2型糖尿病模型15只，随机抽取8只作为糖尿病组，普通饲料组为正常对照组，检测两组大鼠的空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感性指数、血清胆固醇及三酰甘油。采用反转录-聚合酶链反应检测两组大鼠大网膜和皮下脂肪组织中抵抗素基因的表达。 结果：纳入动物16只，均进入结果分析。①糖尿病组大鼠胰岛素敏感性指数与正常对照组大鼠相比明显降低（分别为-4．89&;#177;0，20．-2．63&;#177;0．42，P〈0．01），空腹血糖．胰岛素，三酰甘油和胆固醇明显升高[空腹血糖分别为（12.89&;#177;1．18）．（4．86&;#177;0．68）mmol／l；胰岛素分别为（10．51&;#177;1．93），（3．07&;#177;1．15）μU／L；三酰甘油分别为（2．63&;#177;0．71），（1．13&;#177;0．17）mmol／L：胆固醇分别为（1．73&;#177;0．15），（1．25&;#177;0．17）mmol／L，P〈0．011。②以A值比表示，糖尿病组大网膜脂肪组织的抵抗索基因表达与正常对照组皮下和大网膜脂肪组织、糖尿病组皮下脂畴组织比较明显升高（分别为0．27&;#177;0．03，0．15&;#177;0．02，0．15&;#177;0．03．0．17&;#177;0．02，P〈0．01），而后三者间相比差异无显著性（P〉0．01）。 结论：抵抗素基因在2型糖尿病大鼠大网膜脂肪组织中表达升高，可能是腹型肥胖更易导敛胰岛素抵抗的重要原因之一。     

运动对胰岛素抵抗大鼠肝脏蛋白酪氨酸磷酸酶1B表达的影响

目的：在高脂饮食诱导胰岛素抵抗的基础上，观察运动对大鼠肝脏中蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B，PTPIB)表达的影响。方法：选取雄性Wistar大鼠30只，随机分为对照组10只，给予基础饲料；模型组20只，给予高脂饲料。模型组大鼠给予高脂喂养5周后，随机分为2亚组：胰岛素抵抗组：继续高脂饮食；运动组：继续高脂饮食+运动。干预6周后，用蛋白印迹法检测各组大鼠肝组织中PTPlB蛋白含量。结果：①高脂饮食饲养5周后，大鼠的空腹血糖轻度升高(t=2.163．P&;lt;0.05)，胰岛素、三酰甘油、胆固醇及胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance index，HOMA．IR)明显升高(t≥5．307，P&;lt;0，001)，胰岛素敏感指数(insulin sensitive index，ISI)显著下降(t=3，097，P&;lt;0．01)，出现了胰岛素抵抗。②运动6周后，运动组大鼠的空腹血糖、三酰甘油、胆固醇、附睾脂肪垫及HOMA—IR下降(t≥3．365，P&;lt;0．01)，ISI显著升高(t=3．097，P&;lt;0.01)。③在胰岛素抵抗状态时，大鼠肝组织中PTP1B蛋白表达(A值)显著升高(0.62&;#177;0.08)，与对照组(0．31&;#177;0.07)比较，增加了98.3％(t=9.335，P&;lt;0.001)；游泳干预后，PTP1B的表达明显降低(0．42&;#177;0.12)，与胰岛素抵抗组(0．62&;#177;0．08)比较，减少了32.2％(t=4．263。P&;lt;0．001)。结论：运动改善组织胰岛素抵抗，可能与降低肝脏组织中PTP1B蛋白表达有关。     

白藜芦醇对高脂喂养诱导的脂肪肝大鼠血清TNF-α含量的影响

目的：观察白藜芦醇对非酒精性脂肪肝的治疗效果及其对血清肿瘤坏死因子（TNF-α）含量的影响。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分为3组各10只，对照组（NC组）给予基础饲料喂养，模型组（IR组）和干预组（HR组）均给予高脂饲料喂养，其中HR组从第7周开始给予100mg／（kg&#183;d）白藜芦醇灌胃。喂养16周后，以高胰岛素一正糖钳夹技术评价3组大鼠胰岛素敏感性；肝脏石蜡切片HE染色观察病理学改变；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清TNFha的含量。结果：与NC组比较，IR组大鼠葡萄糖输注率下降，光镜下肝脏出现明显脂肪变性，血清TNF—α含量升高69．3％（P〈0．01）。与IR组比较，HR组葡萄糖输注率明显升高，光镜下肝脏脂肪变性变化不显著；血清TNF-α含量降低31．5％（P％0．01）；与对照组比较，HR组除葡萄糖输注率有所降低（P〈0．01）外，其余检测指标水平均接近。结论：白藜芦醇可能通过降低高脂喂养大鼠的血清TNF-α含量而改善胰岛素抵抗，从而减轻脂肪肝。     

茵陈提取物对胰岛素抵抗大鼠血糖和血脂的调节作用

目的：研究茵陈蒿提取物对胰岛素抵抗大鼠血糖和血脂的调节作用。方法：采用高脂、高糖饲料喂养大鼠，饲养8周时，测定大鼠空腹血糖和2h血糖，并依血糖将大鼠随机分为模型组、二甲双胍组（O．2g·kg^-1）、茵陈蒿提取物高剂量组（6．9g·kg^-1）和低剂量组（2．3g·kg^-1）。连续灌胃给药4周后，测定大鼠空腹血糖和血清胰岛素水平，测定血浆甘油三酯（TC）、总胆固醇（TG）、低密度脂蛋白（LDL—C）、高密度脂蛋白（HDL—C）、游离脂肪酸（FFA）水平。结果：茵陈提取物高剂量组大鼠空腹血糖和血清胰岛素水平明显低于模型组，胰岛素敏感指数恢复正常（P〈0．05）；降低血脂（TC、TG、FFA和LDL—C）水平，升高HDL—C水平。结论：茵陈提取物对胰岛素抵抗大鼠血糖和血脂具有调节作用。     

急性有氧运动对糖尿病大鼠瘦素水平影响的时相性

目的：观察一次性游泳运动对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠瘦素和胰岛素水平影响的时相性。 方法：实验于2003-11／2004—01在河北师范大学生命科学学院生理实验室完成。取雄性SD大鼠48只单纯随机分为6组（n=8）：对照组、运动后即刻组、运动后1，3，6，12h组。所有大鼠腹腔内注射链脲佐菌素60mg／kg制备糖尿病大鼠模型，模型成功后除对照组以外，其他5组大鼠进行一次性60min游泳运动，尾部负重3％体质量，水温30-32℃；对照组大鼠浸水后捞出。运动后相应时间点取血测血糖、血胰岛素、血瘦素，同时对血胰岛素和血瘦素水平进行相关分析。 结果：48只大鼠全部进入结果分析。①血糖：运动后即刻组、运动后1，3，6，12h组均低于对照组[（25．44&;#177;0．34），（23．57&;#177;0．12），（17．40&;#177;0．33），（7．00&;#177;0．09），（11．06&;#177;0．17），（35．33&;#177;0．30）mmol／L，P〈0．05]。②血清胰岛素：运动后即刻组、运动后1，3h组均低于对照组[（13．75&;#177;0．21），（11．64&;#177;0．28）。（13.70&;#177;0．23），（14．95&;#177;0.23）mlU／L，P〈0，05]，运动后1h组最低，至运动后6h即恢复至对照组水平[（14．56&;#177;0．22）mlU／L，P〉0．05]。③血瘦素水平：运动后即刻组低于对照组[（0．81&;#177;0．06），（1．38&;#177;0．07）μg/L，P〈0．05]，运动后1，3，6，12h组均高于运动后即刻组（P〈0．05）。④糖尿病大鼠血瘦素水平和血胰岛素水平呈显著中度正相关（R=0．416,P=0．012） 结论：①一次性60min游泳运动后即刻糖尿病大鼠血胰岛素、血瘦素水平降低，运动后1h后开始上升，至运动后6h即恢复至运动前水平。②血瘦素水平和血胰岛素水平可能相互影响。     

The human insulin analogue insulin lispro

Insulin lispro is a newly developed analogue of human insulin where the positions of the amino acids lysine and proline have been switched at the end of the B chain of the insulin molecule. Insulin lispro with lysine at position B28 and proline at position B29 has a weaker tendency for self-association than human insulin. This leads to three major differences in the pharmacokinetics: the action begins faster, has a higher peak and the duration is shorter than with human insulin. Thus, insulin lispro has a more precise action profile for the mealtime than human regular insulin. Insulin lispro is recommended to be injected within 15 min before the meal in contrast to 30–40 min for human insulin. In clinical trials with insulin lispro, the postprandial rise of blood glucose is smaller, the rate of hypoglycaemia is lower particularly at night-time, the need for snacks is smaller and the patient preference is better than with human insulin. The long-term control as reflected by an improvement in the HbA_]c level is better with insulin lispro than with human regular insulin, provided that an appropriate basal insulin regimen is used to take into account the shorter duration of action. A few patients have been described who have a severe resistance to human insulin but who have been succesfully treated with insulin lispro. Insulin lispro was designed to be used as a mealtime insulin, and it is a step forward in the treatment of diabetic patients using a basal-bolus insulin regimen.     

Comparison of an insulin analog,insulin aspart,and regular human insulin with no insulin in gestational diabetes mellitus

OBJECTIVE: To assess the short-term efficacy of insulin aspart in comparison with regular human insulin in women with gestational diabetes mellitus (GDM) during standardized meal tests. RESEARCH DESIGN AND METHODS: The study included 15 women with GDM who had inadequate diabetes control with diet alone. On 3 consecutive days, breakfast meal tests were performed-the first with no exogenous insulin and the other two after the injection of either regular insulin or insulin aspart. RESULTS: The peak insulin concentration was higher and the peak glucose and C-peptide concentrations were lower with both insulin preparations than with no exogenous insulin. Glucose areas under the curve above baseline were significantly lower with insulin aspart (180-min area, 7.1 mg. h. dl(-1); P = 0.018), but not with regular insulin (30.2 mg. h. dl(-1); P = 0.997), than with no insulin (29.4 mg. h. dl(-1)). CONCLUSIONS: This study demonstrates that effective postprandial glycemic control in women with GDM who required insulin was brought about by insulin aspart through higher insulin peak and lower demand on endogenous insulin secretion.     

Intensive insulin therapy with insulin lispro: a randomized trial of continuous subcutaneous insulin infusion versus multiple daily insulin injection

OBJECTIVE: To evaluate glycemic control, hypoglycemic events, and quality of life in patients treated with continuous subcutaneous insulin infusion (CSII) and multiple daily insulin injection (MDI), with insulin lispro as the principal insulin. RESEARCH DESIGN AND METHODS: This clinical trial enrolled 27 patients with type 1 diabetes. They were randomly assigned to CSII (n = 13) or MDI (n = 14) treatment regimens. Glycemic control (HbA(1c) level) was the primary outcome and was measured monthly for 9 months. Secondary outcomes were patient reports of hypoglycemic events (recorded monthly for 9 months) and quality of life assessed at 9 months using the Diabetes Quality of Life (DQOL) questionnaire. RESULTS: A significant decrease in HbA(1c) from baseline was shown for both groups. However, the overall treatment effect (CSII - MDI) for HbA(1c) was +0.08% (95% CI -0.23 to +0.39, P > 0.10). This was significantly less than the a priori limit of +/-0.5% (P = 0.004). The relative treatment effect ([CSII - MDI]/MDI) for the overall number of hypoglycemic events was +9% (95% CI -37 to +87, P > 0.10). There were no statistically significant differences between treatment groups for any of the DQOL subscales. CONCLUSIONS: No statistically significant differences in glycemic control, reported hypoglycemic events, or quality of life were found in this study. Furthermore, a clinically significant difference of more than +/-0.5% HbA(1c) between the two regimens can be confidently ruled out. We conclude that the choice of intensive insulin therapy should be a matter of patient preference, consistent with lifestyle.     

Inhaled insulin (pulmonary administered insulin)]

The first report according to Inhaled insulin came out in 1924. Recent clinical trials of inhaled insulin made a real story to insulin-treated diabetic patients. Among some companies, insulin preparation of Pfizer company group consists of dry insulin dispersed by aerosol into particles sufficiently fine to drift into the distal twigs of the respiratory tree. Skylar et al in 2001 reported a randomized proof-of-concept study of inhaled insulin in type 1 diabetes mellitus. The result showed the same efficacy to the same time injections of regular insulin. Other reports showed the efficacy of inhaled insulin comparable to that of lispro insulin and the same action to not only type 1 but also type 2 diabetic patients.     

Impairments of insulin receptor function in insulin resistant states

Type 2 diabetes is characterized by insulin resistance in skeletal muscle. Since the molecular mechanism of insulin resistance is still unknown, insulin receptor dysfunction including abnormal IRS-1 phosphorylation is considered to be responsible for insulin resistance in some pathological states. Obesity is one of major factors to induce insulin receptor dysfunction. Regarding the mechanism of insulin resistance related obesity, the increased expression of Tumor necrosis factor alpha and abnormality in PTPase in skeletal muscle are postulated. As well as obesity, prolonged hyperglycemia, dyslipidemia and hypertension also induce the impairment of insulin receptor function. Therefore, the enhancement of insulin sensitivity by modulating these factors is a possible treatment modality in insulin resistant states.