可溶性Fas阻断Fas介导的T淋巴细胞凋亡

在用肝癌手术切除标本制备肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)过程中，应用可溶性Fas阻断激活T细胞间诱导T细胞凋亡可望短时间获得大量肿瘤特异的激活T细胞。本研究进一步观察阻断Fas介导T细胞凋亡后制备的CTL抗肿瘤免疫活性，观察肝癌细胞表面Fas被封闭后对杀伤敏感性变化，可望为肿瘤免疫治疗研究提供新策略。     

Fas配体在膀胱肿瘤细胞系免疫逃逸中的作用

目的　探讨膀胱肿瘤细胞系的免疫逃逸机制。　方法　采用免疫细胞化学方法检测膀胱癌细胞系BIU 87中Fas配体 (FasL)的表达 ,应用BIU 87与JurkatT淋巴细胞共培养的方法体外研究FasL诱导T淋巴细胞凋亡的作用。　结果　膀胱癌细胞系BIU 87FasL表达阳性。BIU 87与JurkatT淋巴细胞共培养T细胞凋亡率为 (33.2± 6 .5 ) % ,应用抗体NOK 2中和BIU 87细胞FasL后 ,T细胞凋亡率减少为 (10 .1± 2 .7) % ,两组相比 ,差别有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　膀胱肿瘤细胞系可能通过表达FasL主动诱导T淋巴细胞凋亡从而在膀胱肿瘤的免疫逃逸中发挥作用     

Fas/FasL在异源融合瘤诱导结肠癌细胞早期凋亡中的作用

目的 探讨Fas/FasL通路在人异源树突状细胞（dendritic cell,DC）/结肠癌细胞融合瘤诱导结肠癌细胞凋亡中的作用.方法 使用50%聚乙二醇（PEG）将健康人外周血来源DC与结肠癌细胞SW480融合,用其致敏T淋巴细胞,采用流式细胞术检测致敏细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对结肠癌细胞凋亡的影响;使用免疫组化法分别检测SW480细胞Fas分子的表达以及T淋巴细胞活化前后FasL的表达情况.结果 结肠癌SW480细胞的早期凋亡率为46.88%;结肠癌SW480细胞高表达Fas分子用融合瘤致敏T细胞后,其FasL分子的表达明显增加.结论 异源树突状细胞融合瘤可能通过Fas/FasL通路来诱导结肠癌细胞的早期凋亡.     

腹主动脉瘤患者T淋巴细胞Fas系统功能的研究

目的 通过分析Fas诱导的外周血活化T淋巴细胞的凋亡来评价腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm,AAA)患者Fas系统的功能. 方法采用细胞培养方法,应用Fas单克隆抗体激活Fas通路,分析20例AAA患者和15例腹主动脉硬化闭塞症(aortic atherosclerotic occlusive disease,AOD)患者以及25例正常人外周血T淋巴细胞Fas系统的功能,并计算细胞的存活率和死亡率. 结果 AOD组和正常人组中Fas诱导的活化T细胞发生很强的凋亡反应,而AAA患者组则不明显.AAA组细胞存活率(98.9%±10.3%)明显高于AOD组(58.9%±15.2%)和正常人组(59.4%±12.9%,P＜0.01).该结果与采用FICT-Annexin-V和propidium iodide染色及流式细胞仪检测分析细胞凋亡的结果一致.T细胞Fas功能的缺陷并不是Fas表达减少所致,而且这种功能缺陷具有Fas特异性,因为采用甲基强的松龙均可诱导细胞凋亡.结论 AAA患者T淋巴细胞中存在Fas系统功能缺陷,这种缺陷可能是主动脉瘤发展的重要影响因素.     

硒对淋巴细胞杀伤大肠癌细胞过程中Fas/FasL表达的影响

目的　探讨硒对淋巴细胞抗大肠癌过程中凋亡相关基因Fas/FasL表达的影响。方法　以半胱氨酸硒作为影响因素,人T淋巴细胞为效应细胞及人结肠癌细胞（LoVo细胞株）为靶细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、凋亡细胞荧光计数检测凋亡细胞的数量,逆转录-聚合酶链(RT-PCR)反应、原位杂交技术检测,硒对效应细胞杀伤肿瘤细胞过程中Fas/FasL表达的影响。结果　不同浓度的半胱氨酸硒（0.5、1.0　mg/L）作用48h后,可增强人T淋巴细胞抗肿瘤活性［分别为（25.12±3.91）%,（46.17±3.68）%,P＜0.05］,且肿瘤细胞的凋亡比例上升［分别为(18.6±4.1)%,（32.7±2.1）%,P＜0.05］;能使免疫效应细胞和肿瘤细胞表达FasL和Fas水平增高。结论　硒可提高淋巴细胞的抗肿瘤作用,可能通过Fas/FasL途径起作用。     

Fas配体诱导淋巴细胞凋亡与肾癌免疫攻击作用

目的　探讨Fas配体 (FasL)诱导淋巴细胞凋亡与肾癌免疫攻击作用的关系。　方法　采用免疫组化技术检测 4 4例肾癌组织FasL表达及肿瘤周围浸润淋巴细胞 (TIL)凋亡情况 ,并应用肾癌细胞株 786 0、GRC 1与JurkatT淋巴细胞共培养检测T细胞凋亡率。SP法检测Ki6 7表达 ,评价肾癌预后。　结果　 (1) 4 4例肾癌组织FasL表达阳性率 4 6 .5 % ,高于正常肾组织的 2 3.2 % ,差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。随肾癌分期增加 ,FasL表达阳性率增加。肾癌FasL表达率与Ki6 7表达率呈显著正相关 (r =0 .93,P <0 .0 1)。 (2 )肾癌组织TIL凋亡率为 33.9% ,高于正常肾组织的3.5 % ,差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。肾癌FasL表达率与TIL凋亡率呈显著正相关 (r =0 .96 ,P <0 .0 1)。 (3) 786 0FasL表达率 18.6 % ,GRC 1表达率 2 .3% ,二者差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。Ju rkat细胞与 786 0细胞共培养的凋亡率 14 .9% ,与GRC 1共培养的凋亡率 1.3% ,二者差别有显著性意义 (P <0 .0 1)。中和抗体NOK 2中和 786 0细胞FasL后 ,与之共培养的Jurkat细胞凋亡率显著减少 (P <0 .0 1)。　结论　肾癌组织FasL表达增高 ,以此诱导淋巴细胞凋亡 ,实现对宿主的免疫攻击。     

RNA干扰沉默胃癌细胞FasL表达的抗肿瘤免疫作用

目的 探讨胃癌细胞FasL表达诱导肿瘤特异性CD8⁺CTL凋亡介导胃癌细胞的免疫逃逸,RNA干扰沉默胃癌细胞FasL表达能通过增加肿瘤特异淋巴细胞的数量以提高机体抗肿瘤免疫作用。方法 设计并筛选针对性的人胃癌细胞FasL-siRNA,应用脂质体法把siRNA双链分子（dsRNA）转入胃癌细胞,以沉默胃癌细胞中FasL的表达,设置实验组（转染目标质粒）、阴性对照组（转染空载质粒）及空白对照组（未转染）。沉默胃癌细胞FasL基因表达后,在与肿瘤特异性CTL共培养系统中观察其对CTL的凋亡诱导作用和抗肿瘤免疫功能的影响。采用流式细胞仪检测胃癌细胞Fas/FasL表达水平,采用MTT（二苯基四氮唑溴盐）法观察胃癌细胞与肿瘤特异性CTL共培养结果。结果 转染FasL-siRNA的胃癌细胞经检测细胞膜的FasL表达减少,与转染前对比差异存在统计学意义（P < 0.05）,并且转染后实验组较阴性对照及空白对照组表达FasL量存在统计学差异（P < 0.05）,胃癌细胞与肿瘤特异性CTL共培养显示,实验组淋巴细胞数量（吸光度值）较阴性组和空白对照组多,差异存在统计学意义（P < 0.05）。结论 应用RNA干扰技术可使胃癌细胞FasL表达量下降,减少胃癌细胞通过Fas/FasL途径诱导抗肿瘤淋巴细胞凋亡的发生,增强淋巴细胞对胃癌细胞的杀伤作用。     

白细胞介素-2基因修饰树突状细胞体外增强其诱导的抗肝癌免疫反应

目的探讨腺病毒介导的白细胞介素(IL)-2基因修饰能否使抗原冲击的树突状细胞(DC)在体外诱导出更强的抗肝癌免疫反应。方法IL-2的重组腺病毒载体体外转染经肝癌细胞株HepG2冻融抗原致敏的DC(AdIL-2-HepG2/DC),FACS分析AdIL-2-HepG2/DC表面分子的表达,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测IL-2水平,3H-TdR掺入法检测T淋巴细胞增殖分化能力,噻唑蓝(MTT)法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)效应。结果AdIL-2-HepG2/DC能高水平的表达CD1a(61.7±8.1)%,CD11c(72.9±6.2)%,CD80(81.1±7.1)%,CD86(76.4±6.8)%以及HLA-DR(90.6±6.4)%,并分泌较高水平的IL-2(6.78±0.18)mq/L。AdIL-2-HepG2/DC能非常显著地刺激自体T细胞增殖(CPM值为21 878±1089),当靶细胞为HepG2时,其诱导的CTL杀伤活性(74.5±3.8)%显著高于其他各组,并且其杀伤能力与效应细胞数量成正比。结论AdIL-2- HepG2/DC可以增强体外诱导的特异性抗肝癌免疫反应。     

膀胱尿路上皮癌患者外周血T淋巴细胞凋亡蛋白Fas的表达

目的 探讨膀胱尿路上皮癌与Fas介导的血T淋巴细胞凋亡的关系.方法 应用流式细胞仪检测52例膀胱癌患者和37例健康对照者外周血CD4Fas、CD8Fas阳性T细胞.结果 膀胱癌患者外周血CIM、CD8Fas阳性T细胞分别为(20.74±9.02)%、(7.51±5.93)%,对照组分别为(15.68±5.58)%、(4.27±3.08)%,肿瘤组较对照组明显增加(P<0.01).浸润组CD8Fas阳性T细胞数为(5.83±3.95)%,表浅组为(5.83±3.95)%,浸润组较表浅组明显降低(P<0.05).复发组CD4、CD8Fas阳性T细胞与初发组比较筹异无统计学意义(P>0.05).结论 血T淋巴细胞Fas表达的异常可能在膀胱癌的发生发展中起重要的作用.     

睾丸支持细胞免疫豁免功能的机理研究

目的:探讨睾丸支持细胞免疫功能发生的机制.方法:分离培养48h后的睾丸支持细胞与活化的淋巴细胞共同培养,MTT法检测其对淋巴细胞的杀伤作用;应用Fas IgG抗体阻断试验评价睾丸支持细胞杀伤活化的淋巴与Fas/FasL系统之间的关系.结果:睾丸支持细胞体外可杀伤活化的淋巴细胞,该种杀伤作用可以被抗Fas IgG抗体阻断,表明睾丸支持细胞通过Fas/FasL系统发挥其免疫豁免功能.结论:睾丸支持细胞能通过Fas/FasL作用而调节T细胞的活性,这可能是睾丸支持细胞提供局部免疫功能的机制之一.     

Prognostic Significance of Fas and Fas Ligand System-Associated Apoptosis in Gastric Cancer

Background: Previous studies indicate that gastric carcinomas express Fas ligand and downregulate Fas to escape from the host immune attack; however, the prognostic importance of Fas/FasL expression in this tumor is yet to be evaluated.Methods: Specimens from 87 gastric carcinoma patients of different stages treated in a defined period with curative intent were evaluated for apoptosis, Fas, FasL, and CD8 expression using an immunohistochemical method.Results: The percentage of terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL)-positive apoptotic cells expressed as apoptotic index (AI) was higher in 43 patients when the cut-off value was set at the median value. There were no significant correlations between AI and clinicopathologic parameters. Thirty-nine patients showed a high number of CD81 cells within cancer nests. Positive FasL and Fas expression was seen in 53 and 72 patients, respectively. CD8 and FasL expressions were related only to patients age. Fas expression had significant correlations with tumor invasion and Lauren classification. There were significant direct correlations between AI and number of nest CD81 cells and between AI and grade of Fas expression. Apoptotic index, pT stage, CD8 expression, and Fas expression were identified as independent prognostic factors.Conclusions: Spontaneous apoptosis in gastric carcinoma may be an independent prognosticator for survival and is significantly influenced by tumor Fas expression and number of nest CD81 cells.     

Fas和FasL在胆囊癌免疫逃逸中的作用

目的探讨Fas／FasL在胆囊癌免疫逃逸机制中的作用。方法（1）应用SP免疫组织化学法研究26例胆囊癌组织、18例胆囊腺瘤组织、3例胆囊上皮不典型增生组织和20例慢性胆囊炎组织中Fas蛋白和FasL蛋白的表达水平；（2）运用TUNEL法原位检测在上述4种组织中浸润的淋巴细胞的凋亡。（3）比较在不同的胆囊癌临床病理类型中Fas蛋白和FasL蛋白的表达情况和在原位胆囊癌组织浸润的淋巴细胞的凋亡情况。结果（1）Fas蛋白表达的阳性率在上述4种组织之间的差异无统计学意义。FasL蛋白表达的阳性率在胆囊癌组织显著高于慢性胆囊炎组织（χ^2=4．89。P〈0．05）；（2）浸润的淋巴细胞的凋亡数量在高分化癌显著低于低分化癌（t=2．52，P〈0．05）．在腺瘤和慢性炎症组织中未见到浸润的淋巴细胞的凋亡。（3）浸润的淋巴细胞的数量在腺瘤组织显著低于癌组织（t=6．99，P〈0．01），在慢性炎症组织显著低于腺瘤组织（t=3．66，P〈0．01）：在高分化癌显著低于低分化癌（t=5．31，P〈0．01），在NevinⅠ、Ⅱ、Ⅲ期显著低于Ⅳ、Ⅴ期（t=3．76。P〈0．01）。结论胆囊癌细胞表达的FasL通过诱导在癌组织浸润的淋巴细胞的凋亡从而使癌细胞逃避机体的免疫监视，它的上调表达在胆囊癌的分化、浸润和转移过程中扮演重要角色。     

Examination of soluble Fas (sFas) and soluble Fas ligand (sFasL) in patients with burns

The FasL–Fas system is one of the recognized apoptosis-inducing systems, and has been determined to have important functions in relation to homeostasis and biological defense mechanisms. In this study, we investigated the serum levels of soluble Fas (sFas), soluble FasL (sFasL) and tumor necrosis factor (TNF-) in patients with burns. The sFas levels were found to be significantly higher in the patients who eventually died as compared to those in the patients who survived (3.9±1.8 ng/ml versus 2.6±1.0 ng/ml). On the other hand, the sFasL levels were significantly higher in the patients who survived (61.5±29.9 ng/ml versus 37.2±14.4 ng/ml) than in those who eventually died. A positive correlation was noted between the TNF- level and the sFas level, and a negative correlation was observed between the TNF- level and the sFasL level. These findings suggest that worsening of the condition of a burns patient may be related to changes in the Fas–FasL system.     

Fas/FasL的表达与关节软骨

骨关节病 (ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ,ＯＡ)是活动关节的一种慢性、进行性疾病 ,以关节软骨基质崩解、减少为主要特征 ,研究表明软骨细胞凋亡与ＯＡ进程密切相关 ,而Ｆａｓ在ＯＡ的发展过程中起着重要的作用。1　Ｆａｓ/ＦａｓＬ的基本结构ＡＰＯ 1/Ｆａｓ基因位于 10号染色体长臂 ,由 9个外显子和 8个内含子组成。Ｆａｓ(ＡＰＯ 1,ＣＤ95 )蛋白是一种含有 319个氨基酸的Ｉ型跨膜蛋白 ,相对分子质量为 4 0× 10 4,在结构上与ＴＮＦ、ＮＧＦ相似 ,属于ＴＮＦ受体 (ＴＮＦＲ)超家族。Ｆａｓ分子贯穿于细胞膜 ,且分为膜外区(15 7ＡＡ ,含…     

Fas配体在膀胱癌中的表达及意义

探讨肿瘤免疫逃避与膀胱发生、侵袭及复发的关系。方法采用ＳＡＢＣ免疫组化法检测１４例膀胱腺癌,３４例移行细胞癌及１０例慢性单纯性膀胱炎石蜡切片中Ｆａｓ配体的表达情况。结果ＳＣＣ中ＦａｓＬ无表达;ＡＣ８例表达、ＴＣＣ２０例明显表达且与组织类型无关;ＦａｓＬ的表达与临床分期及复发密切相关,而与ＴＣＣ的病理分级关系不密切。     

Expression of Fas and Fas ligand in human testicular germ cell tumours

In the present study, we analysed the expression of Fas ligand (FasL) and its cognate receptor Fas in 14 seminomatous testicular germ cell tumours (TGCT) and six normal testicular tissues obtained following orchiectomy. Tissue samples have been processed to prepare either total RNA or protein extracts or fixed and embedded in paraffin for immunohistochemistry (IHC) experiments. Quantitative RT-PCR experiments demonstrated in TGCT a significant ( p  < 0.01) increase of the FasL mRNA expression of 21.1 ± 5.4 fold, with respect to normal tissues. On the contrary, in the same cancer tissues, the levels of Fas mRNA were significantly ( p  < 0.01) reduced to 0.27 ± 0.06 fold. These observations were confirmed in western blot experiments showing a significant increase of FasL and a concomitant decrease of Fas proteins in testicular cancer tissues, with respect to normal testis. Moreover, IHC experiments showed a strong FasL immuno-reactivity in six out of eight TGCT samples analysed, while Fas immuno-positivity was found in cancer cells of only two TGCT tissues. In addition, in all tumour samples, infiltrating lymphocytes were Fas positive. However, no correlation could be observed between Fas or FasL mRNA variations and clinical parameters such as patient's age, TNM stage or tumour size. We also compared the serum levels of soluble FasL (sFasL) of 15 patients affected by seminomatous TGCT, of four patients with non-seminomatous TGCT and six age-matched healthy males. No significant differences in sFasL serum level could be identified. In conclusion, our data demonstrated that the majority of seminomas are characterized by an increased expression of FasL and a concomitant reduction of Fas, with respect to human normal testis, and that sFasL serum level is not a tumour marker for patients affected by TGCT.     

冠状动脉搭桥术后血浆可溶性Fas及其配体的变化

目的比较在心肺转流（CPB）或非CPB下冠状动脉搭桥术（cABG）后可溶性Fas（sFas）和可溶性Fas配体（sFasL）的血浆浓度变化。方法19例病人分别在CPB（CPB组，n=9）或非CPB（非CPB组，n=10）下行择期cABG。术前、术毕和术后取血测定白细胞介素-6（IL-6）、中性粒细胞弹性蛋白酶、sFas、sFasL血浆浓度。结果术毕、术后4h的IL-6和术毕、术后4、12h的中性粒细胞弹性蛋白酶非CPB组明显低于CPB组（P〈0．05或P〈0．01）。CPB组的sFas在术后4、12h明显升高（P〈0．05或P〈0．01），非CPB组在术后12h明显升高（P〈0．01），术后24h恢复至术前水平。两组的sFasL在术毕和术后4、12h均明显升高（P〈0．05或P〈0．01），术后24h恢复至术前水平；其中术后12h非CPB组明显低于CPB组（P〈0．05）。结论CPB或非CPB下行cABG均导致sFas和sFasL血浆浓度升高，但CPB的应用使sFasL血浆浓度升高得更多。sFasL血浆浓度可反映机体炎性反应的程度。     

狼疮肾炎患者外周血单核细胞表达有功能的Fas

目的 探讨狼疮肾炎（ＬＮ）患者单核细胞凋亡加速的机制。方法 对灯例ＬＮ患者进行观察及以 １５例正常人为对照。采用流式细胞仪检测单核细胞 ＦａＳ和 Ｆａｓ Ｌｉｇａｎｄ（ＦａｓＬ）的表达；单核细胞与重组人ＦａＳＬ共孵育，碘化丙啶染色、流式细胞仪检测单核细胞凋亡，四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）法观察单核细胞体外存活率。结果ＬＮ患者单核细胞Ｆａｓ的表达较正常人明显上调（Ｐ＜０．０５）；处于狼疮活动期的ＬＮ患者与狼疮静止期的ＬＮ患者之间Ｆａｓ的表达差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。正常人和ＬＮ患者的单核细胞表面均未检测出ＦａｓＬ的表达。单核细胞与重组人ＦａｓＬ在体外共同培养２ｈ后，ＬＮ者单核细胞的凋亡较正常人明显增加（Ｐ＜０．０５），单核细胞与重组人 ＦａｓＬ在体外共同培养６ｈ后，ＬＮ患者单核细胞的存活率较正常人明显低下（Ｐ＜０．０５）。结论 ＬＮ患者单核细胞表面功能性Ｆａｓ表达上调是ＬＮ患者单核细胞凋亡加速的可能机制。     

肝癌Fas/FasL途径免疫逃逸机制及对策

Fas是细胞表面重要的死亡受体,是细胞凋亡的信号分子。Fas与其配体FasL结合,活化并传导凋亡信号,是诱导细胞凋亡的重要途径。肿瘤的发生和发展与细胞凋亡的异常有密切的关系,其中,通过Fas/FasL系统使肿瘤细胞抵抗Fas介导的凋亡以及反击免疫细胞使T细胞凋亡,是肿瘤细胞免疫逃避的重要机制之一。近年来,国内外学者对Fas/FasL系统与肝癌免疫逃逸机制的关系及其相应的对策进行了深入的研究和探讨,现将该领域的研究进展作一综述。1Fas/FasL系统及其诱导的凋亡Fas和FasL相互作用是诱导细胞凋亡的重要途径之一。Fas也称Apo-1或CD95,是属于…