卵母细胞体外成熟技术在体外受精-胚胎移植中的补救应用

目的 对未成熟卵的体外成熟(IVM)技术在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的补救性应用进行总结,探讨影响其治疗结果的因素.方法 在IVF-ET治疗中,对卵巢反应不良、卵泡发育迟缓和卵泡过多生长有发生过度刺激可能需要取消治疗周期的患者,在B超引导下经阴道卵泡穿刺术取卵后,对未成熟卵进行体外培养成熟后进行IVF或卵胞浆内单精子显微注射,良好胚胎进行移植.结果 取卵周期33个,共获未成熟卵214个,进行体外培养后126个成熟;32个周期进行常规胚胎移植,8例临床妊娠,移植周期临床妊娠率为25.00%(8/32);7例分娩8个健康婴儿.结论 未成熟卵IVM技术是IVF-ET治疗不孕不育中有效的补充方法,可以补救未成熟的卵,减少患者取消IVF-ET治疗周期的发生.     

自然周期未成熟卵体外培养、受精和胚胎移植研究

目的:探讨自然周期成熟卵体外成熟培养(In vitromaturation,IVM)、受精和胚胎移植技术在治疗不育症中的应用.方法:选取30对接受体外授精/卵胞浆内单精子显微注射-胚胎移植(In vitrofertilization/intracytoplasmic sperminjection-embryotransfer,ⅣF/ICSI-ET)助孕的小育夫妇为对象,在自然月经周期卵泡直径>10 mm、内源性LH(Luteinizing hormone)峰出现之前采卵.采卵当日成熟卵(Metaphase Ⅱ,M Ⅱ)行IVF授精,未成熟卵进行体外培养24～48 h,成熟至M Ⅱ期后行ICSI授精,受精后72 h行胚胎移植.结果:30个ⅣM周期中,2个周期取卵末获卵.另28个周期共获卵113个,其中成熟卵29个,退化卵10个,未成熟卵74个,体外培养后成熟印个,成熟率81.08%.20个周期有胚胎移植,6例临床妊娠.其中5例成功分娩足月健康婴儿(1例来自成熟卵、4例来自未成熟卵),1例临床妊娠流产.结论:自然周期未成熟卵IVM、受精和胚胎移植技术可以用于治疗不育患者.     

人类卵子体外成熟及其胚胎冷冻复苏研究

目的:探讨取卵周期准备、卵泡发育状态、培养液成分对未成熟卵的获取率、体外成熟率、受精率、胚胎质量、胚胎移植后成功率及其胚胎冷冻复苏移植的影响。方法:19例进行卵子体外成熟的不孕不育患者为研究对象。其中1例为自然周期,14例为促性腺激素(Gn)诱导排卵周期,4例常规控制性促排卵(COS)周期;分别以TCM 199或人输卵管液(HTF)为基础培养液,进行卵子体外成熟培养。结果:当取卵时卵泡大小不均一且最大卵泡直径≥12 mm时,获卵率、受精率和胚胎质量下降;TCM 199组优质胚胎的形成率显著高于HTF组(P<0.01)。IVM胚胎经冷冻复苏、胚胎移植能获得与常规IVF周期相似的妊娠成功,出生后代健康、无畸形。结论:在IVM周期取卵时卵泡大小不均一且最大卵泡直径≥12 mm时,将影响胚胎着床率和累积妊娠率。TCM 199优于HTF培养液,能提高未成熟卵体外成熟后受精卵所形成胚胎的发育能力。IVM胚胎经冷冻复苏-胚胎移植能获得与常规IVF周期相似的妊娠成功,出生后代健康、无畸形。     

未成熟卵母细胞体外培养治疗不孕症的临床研究

目的:评价未成熟卵母细胞体外培养成熟(IVM)治疗不孕症的临床价值.方法:40例不孕患者接受54个IVM周期治疗,包括26例难治性多囊卵巢综合征(PCOS)和14例月经周期正常但经其他辅助生育技术失败的患者.测定卵泡早期的性激素、抑制素-A(INH-A)、抑制素-B(INH-B).未经任何药物刺激,于月经周期的9～12 d在超声引导下经阴道对两侧卵巢内的小卵泡进行穿刺获卵.体外培养24～48 h,进行卵胞浆内单精子显微注射(ICSI),18 h后观察受精情况,继续培养24～48 h,直至胚胎移植,移植前行激光辅助孵化.结果:7个周期取消,取消率为13%(7/54).1例生化妊娠,19例临床妊娠,每取卵周期的临床妊娠率为35.2%(19/54),每移植周期的临床妊娠率为40.4%(19/47).47个移植周期共获得未成熟卵母细胞857个,平均每周期18.2个,体外培养48 h后总成熟率为73.7%(632/857),正常受精率为75.3%(476/632),卵裂率为91.2%.妊娠组的获卵数显著多于非妊娠组[(22.4±16.2)个vs(15.2±7.1)个,P＜0.05],取卵日和胚胎移植日的子宫内膜厚度显著大于非妊娠组[(8.0±1.5)cm vs(6.8±0.9)cm;(9.5±1.6)cm vs(8.3±1.3)cm,P＜0.05],但两组患者的年龄、不孕年限、体重指数、基础性激素、INH-A、INH-B各参数相比均无显著性差异.结论:未经药物刺激的IVM技术是治疗不孕症的一种有效方法,获卵数和子宫内膜厚度与成功率有关.     

体外受精-胚胎移植治疗不孕症64个周期的观察研究

目的分析本中心开展体外授精-胚胎移植(IVF-ET)治疗不孕症61例64个周期的治疗结局。方法接受治疗患者年龄25岁至41岁,共进行64个周期的常规IVF-ET治疗,于取卵后48～50h进行胚胎移植。结果本组治疗周期64个,取消周期4.6%,取卵周期61个,平均周期取卵数(9.61±6.63)个,受精率71.32%,卵裂率90.78%,每周期胚胎移植数(3.86±1.09)个,临床妊娠率为28.07%。结论IVF-ET治疗输卵管梗阻性及原因不明不孕症在临床已获成功,提高妊娠率有待改善各种有关条件。     

体外受精-胚胎移植32例次临床分析

目的将体外受精-胚胎移植(IVF-ET)辅助生育技术应用于临床.方法对32例次(下省略次)患者采用控制下超促排卵的方法促使卵泡发育 ,经阴道B超下取卵,精卵体外受精后再植入宫腔.结果 32例中有6例被取消,其中因卵泡生长不良2例,取卵前卵泡自破2例,取卵后卵子未受精2例.行体外受精-胚胎移植者26例,10例妊娠,其中生化妊娠3例,宫外孕1例,临床妊娠6例.周期妊娠率38. 46%,临床妊娠率23.08%.结论 IVF-ET是有效的辅助生育技术.     

早卵泡期FSH和LH水平预测未成熟卵母细胞体外成熟治疗结局

目的通过部分影响未成熟卵母细胞体外成熟(IVM)治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的相关因素分析,预测IVM技术治疗PCOS的成功率.方法 32个PCOS患者35个周期,月经第3天测性激素,设计促排卵方案,采用IVM技术治疗.结果 35个周期共获未成熟卵母细胞368个,每个患者平均10(1～31)个,卵母细胞的成熟率、受精率、卵裂率、移植后妊娠率分别是75%、68%、80%、23%,早卵泡期FSH水平与未成熟卵数的获得数显著相关,早卵泡期E2≥200 pmol/l可能预示高妊娠率.结论早卵泡期FSH和E2水平能预测多囊卵巢综合征患者未成熟卵母细胞体外成熟治疗结局.     

自然周期体外受精结合未成熟卵母细胞体外成熟培养是治疗不孕的潜在方法

本文旨在描述在自然周期中,从主导卵泡中获取成熟卵母细胞进行体外受精(IVF),同时对小卵泡中的未成熟卵母细胞进行体外成熟培养后行IV F,移植后患者获得妊娠并分娩活胎。病例报道:M cG ill大学皇家维多利亚医院生殖中心,3例接受不育治疗的正常卵巢或多囊卵巢患者,在自然月经周期中注射SC hCG(10000U)36h后取卵。吸出所有卵泡,对成熟卵母细胞立即进行IVF,而未成熟卵母细胞经体外成熟培养后行卵母细胞单精子显微注射(ICSI),然后进行移植胚胎。患者获得妊娠并分娩活胎。在自然周期IV F结合体外成熟培养(IV M)移植胚胎后,3例患者均获…     

对IVF超促排卵周期结局的分析

目的评价IVF-ET治疗不孕症的效果,分析IVF-ET失败的相关因素.方法回顾性分析28个IVF治疗周期结局.28例不孕症患者接受GnRH-a结合FSH/hMG或CC结合hMG等药物进行超促排卵后,将卵细胞在体外授精(IVF),取卵后2 d进行胚胎移植(ET).ET 2周后测血或尿HCG,6周后B超监测胚胎情况.结果 28例患者中,2例因未取到卵细胞而终止周期,1例仅得到1枚卵进行宫腔内配子移植,其余25个周期获得胚胎移植,其中临床妊娠9例,生化妊娠后流产2例,14例未获得妊娠.临床妊娠率为36.0%,生化妊娠率为44.0%,胚胎着床率16.4%.临床妊娠组与未妊娠组(除外生化妊娠和临床妊娠)受精率、卵裂率、高质量胚胎率、平均ET数等无明显差别,但临床妊娠组血清E2水平明显高于未妊娠组,卵泡生长数和平均获卵数也多于未妊娠组,而胚胎移植率低于未妊娠组.输卵管积液、移植管插入困难、子宫内膜薄、子宫形态异常等情况仅见于非妊娠组.此外,临床妊娠组与非妊娠组在促排卵方案方面存在一定差异.结论 IVF-ET治疗不孕症是有效的,IVF-ET失败的原因主要与促排卵方案、患者对超排卵药物反应低、空卵泡综合征、输卵管积液、移植困难及子宫内膜或子宫形态异常等有关.     

体外受精-胚胎移植(附77周期分析)

目的　评价体外授精 -胚胎移植 (IVF -ET)和卵母细胞单精子显微注射 (ICSI)技术的疗效。方法　 74例不孕患者采用常规超促排卵方案 ,B超监测卵泡成熟后 ,经阴道B超引导下取卵 ,实验室体外培养受精并作胚胎移植。结果　 74例共 77个治疗周期中 10 0 8个卵泡发育 ,获卵数 886个 ,获卵率87.90 % ;受精 6 8个 ,受精率 6 8.6 2 % ;5 88个卵裂 ,卵裂率 96 .71% ;移植数 30 0个 ,平均移植胚胎数 4.17±0 .77个。 77周期获临床妊娠 2 8例 ,妊娠率 36 .36 % ,已成功分娩 4例 ( 3例IVF -ET ,1例ICSI)。随访母婴良好。结论　体外受精 -胚胎移植疗效肯定 ,男性严重少、弱精患者可采用卵母细胞单精子显微注射技术     

高反应患者重复长方案对卵巢反应性及妊娠结局的影响

目的探讨高反应患者在体外受精-胚胎移植（IVF-ET）中行重复周期垂体降调节长方案,调整治疗策略对卵巢反应性及妊
娠结局的影响。方法选择南方医院生殖医学中心2008年1月~2011年12月30例高反应患者60个长方案行IVF-ET治疗不孕
症的周期进行回顾性分析,比较高反应患者前后周期治疗的临床特点。结果与第一治疗周期相比,患者行重复周期治疗时年
龄明显增加（P<0.001）,Gn启动剂量明显减少（P=0.049）,hCG日雌激素（E2）水平降低（P=0.027）,获卵数减少（P=0.030）,优质胚
胎形成率（P<0.001）、临床妊娠率（P=0.009）升高,但在降调节剂量、Gn应用总量、Gn刺激时间、2原核（PN）个数、受精数、卵巢过
度刺激综合征（OHSS）高危倾向周期取消率无显著性差异（P>0.05）,再次发生卵巢高反应者占40%（12/30）。结论对于高反应
患者,行长方案重复IVF周期治疗时应注意减小Gn启动剂量,减少再次发生高反应的风险,改善助孕结局。
     

孕晚期人未成熟卵母细胞的体外成熟:一种新的卵母细胞来源

目的 探讨来源于孕晚期、自然周期及Gn刺激周期(包括超促排周期及IVM周期)的人未成熟卵母细胞体外成熟的差异及颗粒细胞对孕晚期卵母细胞体外成熟的影响.方法 共获得未成熟卵母细胞1076枚,包括OCC 633枚和DO 453枚.其中OCC分为孕晚期组、自然周期组和IVM周期组;DO分为孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组;孕晚期来源的未成熟卵母细胞分为OCC组和DO组.所有未成熟卵母细胞体外成熟后,ICSI受精序贯培养,除IVM周期组行胚胎移植外,其余均培养至囊胚阶段.分别比较OCC和DO各组未成熟卵母细胞的成熟率、受精率、卵裂率和孕晚期组、自然周期组和超促排卵周期组的囊胚形成率,统计IVM周期组的移植周期妊娠率;比较孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率.结果 OCC:孕晚期组、自然周期组及IVM周期组的体外成熟率分别为74.3%、76.9%和82.2%,孕晚期组与IVM周期组相比具有统计学差异;三组受精率、卵裂率相比,孕晚期组和自然周期组囊胚形成率相比均未见统计学差异,IVM周期组移植周期妊娠率为20%.DO:超促排卵周期组体外成熟率最高(86.0%),明显高于自然周期组(72.5%)和孕晚期组(72.7%),P<0.01;孕晚期组受精率、卵裂率、囊胚形成率分别为65.0%、83.3%和38.5%,与其他两组相比均亦未见统计学差异.孕晚期OCC组与DO组的成熟率、受精率、卵裂率和囊胚形成率无差别.结论 孕晚期来源的未成熟卵母细胞在体外具有同样的发育潜能,孕晚期捐献的卵母细胞可作为一种供卵来源:有无颗粒细胞并不影响孕晚期卵母细胞的发育能力.

Abstract：

Objective To investigate the in vitro maturation of human oocytes (IVM)from pregnant late term,natural cycles and Gn stimulating cycles and the effect of granulose cells on IVM from pregnant late term.Methods A total of 1086 immature oocytes were obtained including 633 oocyte-cumulus complexes(OCCs)and 453 denuded oocytes(DOs).OCCs were divided into pregnant late term group,natural cycle group and IVM group,and DOs were divided into pregnant late term group,natural cycle group and controlled ovarian hyperstimulation(COH) group.All the oocytes were matured in IVM culture system and fertilized by ICSI.The embyos were cultured to blastcyst stage except that those in IVM group were transferred into the utems.The main outcomes were assessed including maturation rate(MR), fertilization rate(FR),cleaverage rate(CR),and blastulation rate(BR)(natural cycle group,pregnant late term group and COH group)and pregnancy rate per transfer cycle(PR) of IVM group.ReslIIts MR of OCCs in pregnant late term group,natural cycle group and COH group was 74.3%,76.9%and 82.2%,respectively,showing statistical difference between pregnant late term cycle group and IVM group.No statistical difference was observed in FR,CR or BR between the three groups.For IVM cycle group,clinical pregnancy rate of 20%per aspiration was achieved.For DOs,MR of COH group(86.0%)was significantly higher than that of the natural cycle group(72.5%)and pregnant late term group(72.7%) (P<0.01).FR,CR and BR showed no statistical difference among the 3 groups.No difference was found in MR,FR,CR and BR between OCCs group and DOs group from pregnant late term.Conclusions The oocytes from pregnant late term have the same development potential as those from natural cycles or Gn stimulating cycles in vitro,and provide a new source of donor oocytes.Granulose ceils do not affect the IVM from pregnant late term.     

微刺激与常规促排卵方案在体外受精-胚胎移植中的效果

目的：探讨微刺激促排卵方案在卵巢功能正常患者行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET）助孕治疗中的应用价值。方法：选择2009年1月至2012年7月在中国医科大学附属盛京医院生殖中心首次行IVF-ET助孕治疗,年龄26至38岁且卵巢功能正常的患者,比较首次行IVF-ET助孕治疗应用微刺激方案（研究组104例）和应用标准长、短方案（对照组198例）促排卵的治疗效果及临床结局。结果：研究组104个微刺激周期中,共97个周期进行胚胎移植,平均获卵数（3.1±1.6）枚,临床妊娠33例,新鲜周期临床妊娠率为34.0%（33/97）;对照组中198个行长、短方案促排卵周期中,共187个周期行胚胎移植,平均获卵数（10.2±5.7）枚,临床妊娠93例,新鲜周期临床妊娠率49.7%（93/187）, 两组差异有统计学意义（P<0.05）。研究组促性腺激素使用天数为（4.7±2.1） d,使用总数为（5.7±3.7）支（每支剂量为75 U）;对照组使用天数为（9.16±1.87） d,使用总数为（30.9±10.3）支,两组使用时间和数量差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：对于卵巢功能正常的患者应用微刺激方案行IVF-ET助孕治疗可以取得一定的临床效果,但明显低于标准长、短促排卵方案助孕治疗结果。     

体外受精获得全部非优质胚胎周期的移植策略分析

目的 探讨体外受精获得全部非优质胚胎周期的移植策略.方法 回顾性分析浙江大学医学院附属邵逸夫医院1998年12月至2010年6月全部胚胎为非优质胚胎的促排周期资料共621个周期,其中新鲜胚胎移植574个周期、冻融胚胎移植作为体外受精后首次胚胎移植47个周期,应用多因素Logistic回归方法分析临床相关因素与临床妊娠率之间的关系.结果 冻融胚胎移植作为体外受精后首次胚胎移植组的临床妊娠率显著高于新鲜胚胎移植组[38.3%(18/47)比22.1%(127/574),P＜0.05];年龄和移植时机与临床妊娠率密切相关,年龄因素校正后仍显示冻融胚胎移植作为体外受精后首次胚胎移植的临床妊娠率高于新鲜胚胎移植组(OR:2.107,95%CI:1.128～3.939,P＜0.05).结论 冻融胚胎移植作为体外受精后获得全部非优质胚胎周期的首次胚胎移植,可以获得较新鲜胚胎移植更高的临床妊娠率.

Abstract：

Objective To investigate the transfer strategy of low-quality embryo in in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) cycle. Methods A retrospective analysis was performed for the clinical data of 621 IVF-ET cycles under controlled ovarian hyperstimulation, including 574 fresh embryo transfer (ET) cycles (Group T1 ) and 47 frozen-thawed embryo transfer (FET) as the first ET cycles (Group C1 ). Logistic regression was used to model the probability of clinical pregnancy rate based on the cycle-specific factors. Results The clinical pregnancy rate was significantly higher in Group C1 than Group T1 [38. 3% ( 18/47 ) vs 22. 1% ( 127/574), P ＜ 0. 05]. Multivariate logistic regression analysis revealed that patient age and ET method were significantly associated with the clinical pregnancy rate. After adjusting for patient age, the clinical pregnancy rate remained significantly higher in Group C1 than Group T1 (OR:2. 107, 95% CI: 1. 128 - 3.939, P ＜0.05 ). Conclusion The use of FET instead of fresh ET may improve the clinical pregnancy rate in low-quality embryo cycles.     

两种补救性ICSI在常规体外受精中的应用

目的探讨在常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中不受精及受精率低的情况下,应用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)进行补救后获得胚胎移植的临床应用价值。方法选择IVF周期中发生完全不受精及受精率<30%的病例97个周期,其中57个周期行晚期补救ICSI,40个周期行早期补救ICSI,两种补救ICSI在完全不受精组和受精率低组中分别进行比较。结果在不受精组中,早期补救的2PN受精率、种植率和妊娠率分别为69.44%、28.00%、30.77%,明显高于晚期补救ICSI的56.23%、1.00%、2.50%(P<0.05或P<0.01),在低受精率组中两者的累计妊娠率、种植率差异无显著性(P>0.05),但受精率、优质胚胎率、胚胎冷冻率差异有高度显著性(P均<0.01)。结论早期补救ICSI较晚期ICSI的2PN受精率、胚胎种植率高,能更好地改善补救ICSI的妊娠结局。     

生长激素在体外授精-胚胎移植卵巢低反应患者中的应用

目的 探讨生长激素(GH)对体外授精-胚胎移植(IVF-ET)卵巢低反应患者的作用.方法 选择2010年1月至2010年12月在昆明医科大学第二附属医院生殖中心接受体外授精-胚胎移植的108例卵巢低反应患者.均用长方案促排卵,其中54例加用生长激素,作为研究组,其余54例作为对照组.观察促性腺激素(Gn)用量,MⅡ获卵数,受精率,卵裂率,临床妊娠率.结果 研究组Gn用量,用药时间明显低于对照组,MⅡ获卵数,受精率,妊娠率明显增加.结论 生长激素在IVF超排卵中有辅助作用,可减少Gn用量,改善卵子质量,提高临床妊娠率.     

冻融胚胎移植替代新鲜胚胎移植提高体外受精-胚胎移植临床妊娠率的探讨

目的 探讨冻融胚胎移植替代新鲜胚胎移植作为超促排卵体外受精周期首次移植提高体外受精-胚胎移植临床妊娠率的可行性.方法 回顾性分析超促排卵体外受精-胚胎移植周期1341例次的临床资料,其中新鲜胚胎移植周期1169个、冻融胚胎移植作为首次移植周期172个.应用多因素logistic回归方法分析临床相关因素与临床妊娠率之间的关系.结果 冻融胚胎移植替代新鲜胚胎移植组的临床妊娠率显著高于新鲜胚胎移植组(63.4%vs 49.4%,P＜0.01).年龄、移植优质胚胎数、移植时机因素进入logistic回归方程,与临床妊娠率密切相关.将移植优质胚胎数和年龄因素校正后显示冻融胚胎替代新鲜胚胎首次移植妊娠优势比为1.75,差异有统计学意义.按年龄＜35岁或获卵数≥15个分别分层分析显示,冻融胚胎替代新鲜胚胎移植均优于新鲜胚胎移植,差异有统计学意义.结论 冻融胚胎移植替代新鲜胚胎移植作为超促排卵周期首次移植可获得较常规移植方案更高的临床妊娠率.     

在体外受精周期中应用促性腺激素释放激素拮抗剂方案的临床分析

目的 分析体外受精-胚胎移植周期中应用促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂方案患者的临床特征和治疗结局.方法 回顾性分析54个GnRH拮抗剂起始周期和52个移植周期患者的年龄、GnRH使用天数和剂量、启用GnRH拮抗剂的时机和天数、用拮抗剂日和hCG日血清E2和LH水平、获卵数、临床妊娠率等,与同期长方案GnRH激动剂组临床妊娠率进行比较.结果 52个拮抗剂方案移植周期和同期126个激动剂长方案移植周期的临床妊娠率分别为46.2%和56.8%.拮抗剂组患者年龄(35.7±3.8)岁,应用Gn时间(8.5±1.6)d,应用拮抗剂(4.5±1.1)d,hCG日E2水平为(1616.7±721.1)pg/ml,取卵数7.4±4.6个,移植胚胎数(2.4±0.6)个,着床率27.7%.其中≤37岁组34个周期,≥38岁组18个移植周期,临床妊娠率分别为55.9%和27.8%.固定方案组于应用GnRH的第4～5天启动拮抗剂,36个移植周期的临床妊娠率为50.0%,机动方案组于卵泡12～15 mm时(应用GnRH的第6～9天)启动拮抗剂,16个移植周期的临床妊娠率为37.5%.与激动剂长方案组相比,拮抗剂方案组中患者年龄较大、GnRH用药时间较短、获卵数较少、血清E2峰值较低,有统计学差异(P＜0.01);临床妊娠率稍低,无统计学差异(P＞0.05).结论 在体外受精-胚胎移植周期治疗中应用GnRH拮抗剂,是一种方便、快速、有效的治疗选择,能获得满意的临床结局.