阳和平喘颗粒对豚鼠哮喘模型炎症介质和肺组织形态学变化的实验研究

目的：观察阳和平喘颗粒对实验性支气管哮喘时炎症及组织的影响，探讨其治疗哮喘的机理。方法：采用卵蛋白成功诱发豚鼠哮喘后用阳和平喘颗粒进行治疗，ELISA法检测豚鼠血浆中可溶性白介素-2受体（sIL-2R）和白介素-6（IL-6）含量，放免法测定血浆中ET含量，并采用光镜和电镜法观察其对肺组织的影响。结果：模型组血浆中sIL-2R、IL-6和ET的含量与正常对照组比较明显增高（P〈0．01），肺组织光镜和电镜下观察显示：模型组动物的肺组织可见嗜酸性粒细胞片状浸润，Ⅱ型细胞部分线粒体脊突消失、膨胀，板层小体减少，有较多排空现象。肺组织光镜观察显示：血管腔狭窄，毛细血管内皮肿胀，核浓缩，胞浆内可见到髓样小体（细胞器变性），基底膜结构不清。阳和平喘颗粒高剂量可明显降低上述炎症介质，并可抑制肺组织中的炎症细胞浸润。结论：阳和平喘颗粒可能通过抗炎而达到抗实验性哮喘作用。     

阳和平喘颗粒对哮喘大鼠的保护作用

目的:研究阳和平喘颗粒对哮喘模型大鼠的保护作用及其可能的作用机制。方法:将60雄性只大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳和平喘颗粒(25.92、12.96、6.48g/kg)组、桂龙咳喘宁胶囊(1.62g/kg)组。试验开始第一天,大鼠腹腔注射10%卵清蛋白(OVA)氢氧化铝生理盐水溶液致敏,第8天再次致敏,正常对照组注射等量生理盐水。于初次致敏第15天起,除正常组外,其余各组大鼠用含1%OVA的生理盐水超声雾化激发20min,隔天一次,共7次,复制大鼠哮喘模型。实验第15天起,给药组分别灌胃给予相应的药物,治疗2周,正常组和模型组给予等容积溶媒。实验结束后,分别采用硝酸还原酶法和放射免疫法测定血清中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)的含量,HE染色法观察哮喘大鼠肺组织病理改变,免疫组化法观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在肺组织中的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠出现明显的哮喘症状,肺组织及周围有大量炎性细胞浸润,血清中NO、ET-1含量显著升高,肺组织中iNOS的表达水平明显高于正常对照组;与模型组相比,阳和平喘颗粒(25.92、12.96g/kg)组哮喘大鼠哮喘症状及肺组织炎症反应明显减轻,大鼠血清中NO、ET-1的含量及肺组织iNOS活性显著降低。结论:阳和平喘颗粒对OVA介导的大鼠哮喘模型的保护作用可能与其对ET-1、NO、iNOS的调节有关。     

阳和平喘颗粒对气道平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究阳和平喘颗粒在体外对支气管哮喘大鼠气道平滑肌增殖及PI3K/PKB通路相关因子的影响。方法:将阳和平喘颗粒含药血清及PI3K/PKB通路阻断剂分别组合作用于体外培养的支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞,噻唑蓝比色法(MTT)检测大鼠气道平滑肌细胞的增值情况,实时聚合酶链反应(Realtime-PCR)检测阳和平喘颗粒对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB)、肾上腺素受体(AR)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA表达水平的影响,蛋白印迹法(Western-Blot)检测阳和平喘颗粒对PI3K、PKB、AR、eNOS、PCNA蛋白表达水平的影响,酶联免疫吸附测定(ELISA)阳和平喘颗粒对磷脂酰肌醇二磷酸(PIP2)和磷脂酰肌醇三磷酸(PIP3)表达水平的影响。结果:50%阳和平喘颗粒(18.45g/kg)含药血清对支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞的增殖具有明显的抑制作用,阳和平喘颗粒含药血清及PI3K/PKB通路阻断剂能显著抑制支气管哮喘大鼠细胞内PI3K、PKB、PIP2、PIP3和PCNA的表达,促进eNOS和AR的生成。结论:阳和平喘颗粒具有在体外通过PI3K/PKB通路治疗支气管哮喘大鼠气道重塑的作用。     

阳和平喘颗粒对哮喘 BMSCs 归巢及Notch 信号通路的影响

目的观察阳和平喘颗粒通过调控Notch信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植后哮喘大鼠气道炎症的影响。方法取30 SD只大鼠随机分为5组:正常对照(NC)组、模型对照(MC)组、BMSCs移植(BMSCs)组、BMSCs地塞米松组(BMSCs地米组)、BMSCs阳和平喘颗粒组(BMSCs阳和组),每组6只。给予大鼠卵清蛋白致敏激发哮喘模型,尾静脉移植BMSCs。计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(E)、嗜中性粒细胞(Neu)、淋巴细胞(L)、单核细胞(MΦ),酶联免疫吸附法检测肺组织白细胞介素(IL)-2、IL-4、CXC趋化因子受体(CXCR-3)和CC趋化因子受体4(CCR-4),RT-PCR法检测肺组织Notch通路配体Jagged1及相关基因重组信号序列结合蛋白-J(RBP-J)、GATA结合蛋白3(GATA-3)mRNA表达,免疫印迹法检测肺组织基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、CXC趋化因子受体(CXCR)-4蛋白表达。结果与NC组比校,MC组BALF中炎性细胞总数及各炎性细胞计数显著升高,IL-2、CXCR-3、SDF-1表达降低,IL-4、CCR-4表达升高,肺组织Notch1、Jagged1、RBP-J、GTAT-3表达升高(P<0.05,P<0.01)。与MC组比较,BMSCs地米组及BMSCs阳和组炎性细胞(E、Neu、L、MΦ)数目均减少,IL-2、CXCR-3、SDF-1、CXCR4表达升高,IL-4、CCR-4降低,肺组织Notch 1、Jagged 1、RBP-J、GTAT-3表达降低(P<0.05,P<0.01)。与BMSCs组比较,BMSCs地米组MΦ数目、IL-4、CCR-4、Notch1、RBP-J表达降低,BMSCs阳和组Neu、MΦ、IL-4、Notch1、RBP-J表达降低(P<0.05)。BMSCs地米组与BMSCs阳和组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论阳和平喘颗粒可通过调节Notch通路,促进BMSCs向哮喘肺组织的归巢率,强化对Th2炎症的抑制作用而改善哮喘。     

阳和平喘颗粒对支气管哮喘慢性持续期寒哮证气道炎症的影响

目的：观察阳和平喘颗粒治疗支气管哮喘慢性持续期寒哮证的临床疗效及对气道炎症的影响。方法：60例患者随机分为2组各30例。对照组采用西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗的基础上加用阳和平喘颗粒,2组疗程均为4周。结果：2组有效率、治疗后肺功能（FEV1．0％、PEF）及血清INF-γ,血清IL-4水平,与对照组比较,均有统计学差异（P〈0．05）。结论：阳和平喘颗粒配合西医常规治疗可有效减轻支气管哮喘慢性持续期寒哮证患者临床症状,改善肺功能,减轻气道炎症。     

童喘清颗粒对过敏性哮喘豚鼠的影响作用研究

目的:评价童喘清颗粒对过敏性哮喘豚鼠的影响。方法:用卵蛋白复制豚鼠哮喘模型,观察童喘清颗粒对哮喘潜伏期、外周血中嗜酸性粒细胞、肺灌洗液中白细胞分类、血清中SOD、MDA、GSH-PX水平及肺组织的影响。结果:童喘清颗粒7.0、3.5和1.75g生药/kg剂量可明显延长哮喘潜伏期(P<0.05～0.001),降低模型豚鼠外周血中嗜酸性粒细胞数目(P<0.05～0.01),降低肺灌洗液中炎性细胞总数,提高血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),改善模型动物肺组织病理改变。结论:童喘清颗粒对过敏性哮喘模型豚鼠有很好的保护作用。     

阳和平喘颗粒对哮喘大鼠血清TNF-α和IL-6水平的影响

目的:观察阳和平喘颗粒对哮喘大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)表达的影响。方法:将健康清洁级雄性SD大鼠50只,随机分成5组,每组10只,分别为正常组,模型组,阳和平喘颗粒低剂量组,阳和平喘颗粒高剂量组,地塞米松组。采取卵清蛋白致敏法,长期制敏并激发制备哮喘模型。正常和模型组给予生理盐水取代阳和平喘颗粒或地塞米松灌胃,以苏木精-伊红(HE)染色法制备标本,观察哮喘大鼠在肺组织形态学上的改变,再选用ELISA法检测血清TNF-α,IL-6水平。结果:通过光镜观察发现,与正常组比较,模型组肺组织病理学改变明显,TNF-α,IL-6水平显著升高(均P0.05),与模型组比较,阳和平喘颗粒低、高剂量组以及地塞米松组的哮喘大鼠气道管壁黏膜与其周围血管肺组织的炎性细胞浸润程度有所减轻,气道上皮细胞的增生情况显著减少,阳和平喘颗粒低、高剂量组与地塞米松组血清TNF-α和IL-6水平明显降低(P0.05),而3组间两两比较,IL-6有差异(P0.05)、TNF-α无差异(P0.05)。结论:阳和平喘颗粒能够下调哮喘大鼠血清TNF-α,IL-6的表达,可能为其抑制哮喘慢性炎症的作用机制之一。     

防喘合剂对哮喘豚鼠的作用机制研究

目的探讨防喘合剂对哮喘豚鼠的作用机制及量效关系。方法将80只豚鼠随机分为五组,其中2～5组豚鼠造模,然后每日上午各组分别给予蒸馏水、不同剂量防喘合剂、强的松灌胃,14d后观察引喘潜伏期、肺泡灌洗液(BALF)细胞组分、血清IL-4、INF-γ、TXB2、6-keto-PGF1α水平、血嗜酸性粒细胞(EC)和肥大细胞(MC)计数及胸腺、脾、肾上腺重量。结果各治疗组与模型组比较,均能延长豚鼠引喘潜伏期、降低BALF细胞总数和EC数、降低血EC和MC数、降低血清IL-4和TXB2水平、升高INF-γ和6-keto-PGF1α水平;各治疗组比较,除血EC和MC数、升高INF-γ水平三项指标无差异,其余指标合剂大剂量组作用优于小剂量组,呈剂量正相关,而合剂大剂量组与西药组作用相当;对照组、模型组、合剂大剂量组胸腺、脾及肾上腺重量比较无显著性差异,但西药组低于此三组,差异有显著性。结论防喘合剂对豚鼠具有免疫调节作用,能控制气道变应性炎症,降低气道高反应性;改善气道局部及全身的循环状态;未见明显的激素样副作用。     

阳和平喘颗粒对哮喘大鼠HMGB1相关信号通路蛋白及炎症因子的影响

目的 探讨阳和平喘颗粒对哮喘大鼠相关炎症因子及高迁移率组蛋白（HMGB1）、Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)信号通路调控的影响。方法 60只SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常组，模型组，地塞米松组（0.25 g/kg），阳和平喘颗粒（简称阳和）低（3.87 g/kg）、中（7.74 g/kg）、高（15.48 g/kg）组，每组10只。联合应用氢氧化铝和卵蛋白致敏诱发大鼠，建立哮喘的动物模型，药物干预4周。采用HE染色观察肺组织病理炎症评分和形态学变化；吉姆萨染色计肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞（Eos）、中性粒细胞（Neu）、淋巴细胞（Lym）数量；动物肺功能仪检测各组大鼠肺功能；免疫组化法检测肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB蛋白表达量；酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中IL-5、IL-4、IL-13含量；Western Blot法检测各组大鼠肺组织HMGB1、TLR4、磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)、磷酸化核因子-κB抑制蛋白（p-IκB）蛋白表达情况；实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）检测各组大鼠肺组织HMGB1、TLR4、NF-κB、核因子-κB...     

定喘颗粒对OVA诱导豚鼠急性哮喘的作用研究

目的 探讨定喘颗粒对于卵清蛋白（Ovalbumin,OVA）诱导的豚鼠急性哮喘模型的影响。方法通过腹腔注射OVA溶液并进行行为学评分后,随机分为模型组、硫酸特布他林组、喘嗽宁片组、定喘颗粒低剂量组、定喘颗粒中剂量组、定喘颗粒高剂量组,并从未处理豚鼠中随机选取8只作为空白组。在给药2周后通过OVA喷雾进行刺激,检测模型组及各给药组中豚鼠的引喘潜伏期,利用酶联免疫吸附测定（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测豚鼠血清和支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)的水平,并借助嗜酸粒细胞直接计数液检测全血和BALF中嗜酸性粒细胞（Eosinophil,EOS）的数量,苏木素-伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色检测豚鼠肺部组织的病理变化情况并评估。结果 与空白组相比,模型组炎症相关指标出现明显异常,指示造模成功。与模型组相比,阳性药组尤其是硫酸特布他林片组,以及定喘颗粒高...     

肾系疾病之中医辨证属阳虚证型与甲状腺激素关系的研究进展

国内外研究表明,肾系疾病及其中医辨证的阳虚证型均与甲状腺激素下降相关,甲状腺激素在肾系疾病的病情发展、转归预后及疗效评价方面具有重要意义。综述发现目前肾系疾病其它证型与甲状腺激素的关系研究尚少,认为应进一步研究肾病中医分型与甲状腺激素的关系,同时将甲状腺激素作为肾病中医辨证客观化、量化和观察中医药治疗肾病疗效的指标具有重要临床意义。     

芩荑合剂治疗实验性哮喘动物模型气道变应性炎症的机理研究

目的：以芩荑合剂为基础，制成超声雾化液，通过实验观察探讨其作用机理。方法：观察谊方对卵白蛋白致敏哮喘动物模型支气管肺泡灌洗液（BALF）中Eo、IL-3、IL-5、GM．CSF、SIL-2R、NO的影响。结果：实验发现：芩荑合剂雾化液能显著降低炎性指标（Eo、IL-3、IL-5、GM-CSF、SIL-2R、NO）。病理切片证实治疗组支气管肺组织中E0等炎症细胞浸润减少。结论：芩荑合剂具有解痉、平喘、抗炎、祛痰等作用。其作用机理可能与拮抗了气道的E0等炎症细胞浸润、活化及相关细胞因子、炎性介质释放有关。     

温肺散寒化痰定喘法治疗小儿寒性哮喘临床研究

目的：探讨温肺散寒化痰定喘法治疗小儿寒性哮喘的临床疗效。方法：将254例小儿患者随机分为两组,治疗组130例,采用温肺散寒化痰定喘法治疗,方用小青龙汤合三子养亲汤（方药组成：麻黄、桂枝、细辛、干姜、半夏、五味子、白芍、白芥子、紫苏子、莱菔子）治疗;对照组124例,采用西药抗生素配合口服氨茶碱、酮替酚及特布他林气雾吸入,均以7d为1个疗程。结果：治疗组有效率89．23％,对照组有效率79．03％,经χ2检验,两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：温肺散寒化痰定喘法治疗小儿寒性哮喘有良好效果。     

芍药甘草汤防治支气管哮喘机理研究

目的：探讨芍药甘草汤防治支气管哮喘模型小鼠的作用机制。方法：采用卵蛋白（OVA）致敏剂制备小鼠哮喘模型,随机分正常对照组、模型对照组、地塞米松组、芍药甘草汤低、中、高剂量组6组,流式细胞术检测外周血中调节性T细胞CD4＋CD25＋百分比,观察肺组织形态学的改变,肺泡灌洗液（BLAF）中的细胞计数及分类。结果：模型组小鼠肺组织有明显炎性细胞浸润,渗出物增加,水肿明显,说明造模成功。芍药甘草汤中、高剂量组CD4＋CD25＋T细胞比例显著升高（P〈0.05）,低剂量组与模型对照组比较没有统计学意义。病理学组织观察示芍药甘草汤中剂量组、地塞米松组炎症性变化较芍药甘草汤高、低剂量组及模型组明显减轻。芍药甘草汤中、高剂量组与模型对照组相比较,细胞总数及EOS、Lym比例均降低（P〈0.05）。芍药甘草汤低剂量组与模型对照组比较没有差异（P〉0.05）。结论：芍药甘草汤可以抑制OVA致敏支气管哮喘小鼠各类炎性细胞的增生,调节肺组织中氧化/抗氧化系统的平衡,减轻氧自由基对肺组织结构的氧化损伤程度,调节哮喘小鼠体内CD4＋CD25＋T的优势表达,芍药甘草汤对支气管哮喘有一定的预防及治疗作用。     

六味地黄颗粒协同辅舒酮吸入对哮喘大鼠气道炎症的抑制作用

目的:研究滋阴补肾代表方六味地黄颗粒协同辅舒酮吸入对大鼠哮喘模型过敏性气道炎症的作用。方法:W istar大鼠随机分成6组,除正常动物对照组外,其余各组均以卵蛋白(OVA)辅以氢氧化铝为佐剂注射致敏,2周后雾化吸入卵蛋白激发哮喘,建立哮喘模型。从实验第8天开始,给药组辅舒酮喷雾给药,六味地黄颗粒灌胃给药,正常组和模型组灌服生理盐水。正常组用生理盐水替代卵蛋白进行注射和吸入。结果:六味地黄颗粒加不同剂量辅舒酮组大鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞均比哮喘模型对照组低,其差异均具有显著性意义(P<0.05)。肺支气管病理切片表明六味地黄颗粒协同不同剂量辅舒酮雾化吸入均可减轻特异性的致敏原所诱发的炎症和组织损伤。结论:六味地黄颗粒协同辅舒酮吸入具有减轻哮喘气道慢性炎症的作用。     

脾、肾阳虚模型大鼠脂质过氧化与抗氧化相关性的比较研究

目的：探讨实验性脾、肾阳虚模型大鼠脂质过氧化与抗氧化的相关性。方法：采用经典方法分别复制脾阳虚证和肾阳虚证动物模型。观察并对比了两种模型大鼠和相应治疗组的脂质过氧化物(LPo)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)以及GSH—Px／LPO(抗氧化能力的重要参数)的变化。结果：脾、肾阳虚模型大鼠LPO含量增加,GSH—Px活性及GSH—Px／LP0比值下降,且组间差异显著。温补脾肾药物具有降低LPO含量,提高GSH—Px活性及抗氧化能力的作用。结论：脂质过氧化损伤是脾、肾阳虚证的共同病理生理基础。     

喘平方对哮喘豚鼠肺泡灌洗液中IgE,TGF-β1及TNF-α的影响

目的: 探讨喘平方防治支气管哮喘的作用机制。 方法: 取白化豚鼠60只,随机分为正常组、模型组、麻黄组(0.20 g·kg^-1)、洋金花组(0.07 g·kg^-1)、喘平方组(0.32 g·kg^-1)、地塞米松组(7.5×10^-4 mg·kg^-1),通过对豚鼠ip卵蛋白致敏并雾化吸入激发,建立实验性哮喘豚鼠模型;治疗组自注射第14天起每天ig给药1次,连续7 d,正常组及模型组给予生理盐水。观察豚鼠的一般情况,豚鼠肺泡灌洗液中免疫球蛋白E(IgE),转化生长因子β₁(TGF-β₁),肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化,肺组织病理情况。 结果: 各组豚鼠肺泡灌洗液中IgE,TGF-β₁,TNF-α分别为:正常组IgE(68.25±5.92) mg·L^-1,TGF-β₁(78.72±10.92)ng·L^-1,TNF-α(388.02±55.61) ng·L^-1;模型组IgE(137.28±14.38) mg·L^-1,TGF-β₁(172.39±14.04)ng·L^-1,TNF-α(752.76±51.25)ng·L^-1;喘平方组IgE(76.35±6.22) mg·L^-1,TGF-β₁(115.76±9.17)ng·L^-1,TNF-α(569.32±39.7) ng·L^-1;哮喘组及喘平方组豚鼠肺泡灌洗液中IgE,TGF-β₁,TNF-α含量均高于正常组(P<0.05);喘平方组豚鼠肺泡灌洗液中IgE,TGF-β₁,TNF-α含量均低于哮喘组(P<0.05)。 结论: 喘平方能够通过下调豚鼠肺泡灌洗液中IgE,TGF-β₁,TNF-α含量,可降低气道高反应性、减轻气道炎症症状、控制或延缓气道纤维化进程。     

咳喘灵对实验性豚鼠哮喘模型支气管-肺泡灌洗液嗜酸细胞Fas—mRNA及bcl2-mRNA表达的影响

研究咳喘灵对实验性豚鼠哮喘模型支气管-肺泡灌洗液嗜酸细胞凋亡基因Fas—mRNA及bcl2-mRNA表达的影响。方法：按文献造模，将豚鼠随机分哮喘模型组、强的松组、中药组、空白对照组。用原位杂交法检测治疗前后各组豚鼠支气管-肺泡灌洗液嗜酸细胞Fas—mRNA、bcl2-mRNA的表达，用HPIAS-1000彩色病理图文分析系统进行分析。全部数据使用SPSS10．0统计软件进行统计学处理。结果：中药组与强的松组均较空白对照组及哮喘模型组豚鼠支气管-肺泡灌洗液嗜酸细胞Fas—mRNA表达显著增多；bcl2-mRNA表达显著减少，P〈0．05；中药组较强的松组Fas—mRNA表达显著增多，P〈0．05。     

扶正化痰方对哮喘豚鼠肺组织NO、NOS浓度的影响

目的:观察扶正化痰方对哮喘豚鼠肺组织中一氧化氯(NO)、一氧化氮合酶(NOS)浓度的影响,探讨扶正化痰法防治哮喘的机理。方法:40只健康豚鼠随机分为正常组、造模组、中药组、西药组,以卵蛋白致敏豚鼠并诱喘成功后,予中药扶正化疲方、西药酮替芬等治疗后,测定各组豚鼠肺组织中NO、NOS水平。结果:造模组豚鼠血清NO、NOS水平较正常组豚鼠显著升高(P<0.01),中药组豚鼠肺组织NO、NOS较造模组显著降低(p<0.01)。结论:扶正化痰方可降低哮喘豚鼠肺组织NO、NOS水平,对哮喘有一定的防治作用。