鼠交配前、后单侧卵巢切除对胎儿及胎盘发育的影响

<正> 在交配前(ULO-B)4～6周或交配后(ULO-A)8天切除鼠的单侧卵巢,怀孕后的第13、16和22天检查了胎盘重量和胎儿的效应。(ULO-A)在第13天导至早期胚胎和胎盘营养不良,但,之后,胎盘重量在第16天和22天各自比对照值增加123%和132%。     

鼠李素下调Notch-1的表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移的调节作用

目的　探索鼠李素对乳腺癌MCF-7细胞增殖,侵袭和迁移的影响及其分子机制。 方法　MCF-7细胞分为4组：MCF-7(对照组)、鼠李素(1、2.5、5 μM)组。CCK-8检测细胞增殖。Transwell检测细胞侵袭。划痕实验分析细胞迁移。蛋白印记检测Notch-1、CSL、Hes1、Ki67和VEGF表达。 结果　低浓度的(< 5 μM)的鼠李素不会影响MCF-7细胞活力;高浓度的(> 5 μM)的鼠李素对MCF-7有显著毒性。2.5和5 μM鼠李素组细胞增殖倍数明显低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,鼠李素(1、2.5、5 μM)组细胞侵袭和迁移明显降低(P <0.05)。另外,鼠李素(1、2.5、5 μM)组Notch-1、CSL和Hes1相对蛋白表达量都明显少于对照组(P < 0.05)。而且,Notch-1通路激活剂Jagged1(10 μM)还可明显抑制鼠李素(5 μM)诱导的Notch-1、CSL、Hes1、Ki67和VEGF表达的下降(P < 0.05)。 结论　鼠李素通过下调Notch-1的表达抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,侵袭和迁移。     

米非司酮对晚孕引产新生鼠大脑皮质超微结构的影响

目的　探讨米非司酮引产对新生鼠脑组织超微结构的影响。方法　将 10只孕鼠随机分为实验组和对照组 ,每组各 5只。孕 2 0天给实验组母鼠灌服米非司酮 11 5± 1mg加麻油 1ml引产 ,对照组母鼠灌服麻油 1ml。产后 2 4小时内随机选新生鼠 1只 /窝 ,取右侧大脑顶叶皮质组织进行电镜观察。结果　与对照组相比实验组新生鼠脑组织可见 :(1)神经细胞肿胀 ,坏死。 (2 )神经毡肿胀 ,局部结构破坏。 (3)突触连续减少 ,间质水肿。 (4)神经胶质细胞肿胀 ,染色质浓染 ,泡沫细胞增多。(5 )毛细血管内皮内线粒体肿胀 ,星形胶质细胞脚板肿胀。结论　米非司酮可造成新生鼠脑组织缺血缺氧性损害。     

AIM2炎性体识别胞浆鼠巨细胞病毒DNA的实验研究

目的 观察AIM2( absent in melanoma 2)在感染早期识别胞浆小鼠巨细胞病毒(MCMV) DNA的变化状况.方法 建立MCMV全身播散型感染模型,接种MCMV Smith株后第1、3、5和7天各处死3只小鼠;同时设模拟感染小鼠作为正常对照.Western blot检测脾脏巨噬细胞中AIM2、衔接子凋亡相关点样蛋白(ASC)和caspase-1蛋白的表达状况;同时应用ELISA法检测血清中IL-1β和IL-18的水平;空斑法测定感染小鼠唾液腺感染性病毒滴度.结果 MCMV感染后第3、5、7天,小鼠唾液腺组织中感染性病毒滴度逐渐增加;MCMV感染鼠脾脏巨噬细胞中AIM2、ASC和caspase-1蛋白的表达呈现一致的变化,与模拟感染对照鼠比较,AIM2、ASC和caspase-1蛋白相对吸光值在感染后第1天开始升高(P＞0.05),第3天明显升高并达峰值[分别为(1.121±0.243) vs(0.240±0.046),(1.318±0.333) vs (0.248±0.090),(1.085±0.243) vs (0.247±0.064); P＜0.01],其后接近正常;MCMV感染鼠血清IL-1β和IL-18水平在感染后第3天也明显高于模拟感染对照鼠[分别为(112.72±5.20) pg/ml vs (47.86±4.35) pg/ml,(42.74±4.23) pg/ml vs( 22.60±2.82)pg/ml;P＜0.01],其后均逐渐下降接近正常.结论 MCMC感染早期巨噬细胞通过AIM2炎性体识别胞浆MCMV DNA,可能成为CMV感染及感染后所引起的疾病的治疗靶点.     

小鼠形成腹水性肿瘤和产生单克隆抗体的影响因素

杂文瘤细胞注入小鼠腹腔内诱发腹水性肿瘤,并产生含有高滴度单克隆抗体的腹水。为确定形成腹水和产生单克隆抗体的最佳条件,研究了影响分泌免疫球蛋白肿瘤生长的几个因素。用SP2/0骨髓瘤。胞和免疫小鼠脾细胞融合产生杂交瘤细胞,作者证明:(1)诱发腹水性肿瘤需要的最佳杂交瘤细胞数在6—32×15~5细胞之间;(2)每只小鼠最多用0.5ml降植烷致敏;(3)用降植烷致敏后14天才可注射杂交瘤细胞;(4)用雄性小鼠形成腹水和产生单克隆抗体明显优于雌性鼠;(5)小鼠年龄应在43～78天之间。在上述条件下最多在6天过程中,平均每鼠产生7～10ml腹水,其中含有高滴度的抗体。这些动物在注射肿瘤细胞后通常活存11～16天,在第5和第9天之间开始产生腹水。     

Down综合征16三体小鼠胃的神经发育观察

目的　研究Dow n 综合征动物模型16 三体和正常同窝鼠支配胃的神经发育。方法　采用16三体鼠培育,同窝鼠胚胎龄(em bryonic days, ED)13～18 天细胞遗传学分析,蛋白基因产物9.5(proteingene product 9.5, PGP9.5)免疫组化等方法对16 三体小鼠胃的神经发育进行了研究。结果　正常同窝鼠,胎龄13 天(ED13)来源于外胚层神经嵴的神经母细胞迁移并进驻胃壁;ED14 神经元发出突起,形成原始神经网络;ED15 形成简单排列的肌间神经丛,开始出现早期的神经节;ED16 有分布规则的肌间神经丛;ED17 神经母细胞进驻粘膜下层,形成粘膜下神经丛;ED18 完整的胃神经丛形成,即粘膜下浅、深神经丛和肌间神经丛。与正常同窝鼠比较,16 三体鼠胃神经系发育迟缓,ED14 胃壁始有散在分布神经元。此后,胃神经系的发育与分化均较正常延迟,至ED18 仅有肌间神经丛。根据胃神经系的发育程度和PGP9.5 免疫反应强度作半定量分析及秩和检验,16 三体鼠胃神经的发育明显落后于它们正常的同窝鼠,两者比较有显著性差异(P< 0.05)。结论　16 三体小鼠是公认的Dow n 综合征动物模型,它除了有多系统和多器官的畸型外,还发现有小鼠胃神经丛发育迟缓,粘膜下神经丛缺失。     

不同CA16流行株的相关生物学和VP1基因的分子生物学研究

目的 对柯萨奇病毒A组16型(CA16)病毒株进行生物学特征与基因背景研究,为CA16病原和疫苗的进一步研究奠定基础.方法 从咽拭子标本中分离出CA16病毒;通过中和鉴别试验和RT-PCR对病毒进行分子生物学鉴定;病毒的VP1基因序列测定后,与其他CA16序列进行比较,绘制种系发育树,确定病毒基因型;测定病毒滴度,观察病毒在Vero细胞上的噬斑形态;攻击乳鼠分析病毒的致病性.结果 从手足口病患者咽拭子标本中分离到6株病毒,采用肠道病毒通用引物可以从病毒感染细胞中扩增出约150 bp大小的目的产物带;采用CA16特异性引物可以从病毒感染细胞中扩增出210 bp大小的目的产物带.而采用EV71特异性引物未见特异性扩增条带.噬斑分析发现,6株病毒在Vero细胞上接种96 h后均能出现清晰的噬斑,其中BJ-3噬斑直径为4～5 mm,B J-5噬斑直径约为3 mm,B J-1、B J-2、BJ-4、BJ-6噬斑直径为1.5 ～2 mm;除BJ-3噬斑边缘模糊外,其余5株噬斑边缘整齐.该6株病毒均可被人CA16抗体阳性血清中和.在Vero细胞上连续传5代,滴度均在7.0LgCCID50/nl左右.基于VPI基因序列的种系发育分析结果显示,BJ-2、B J-4、B J-5属于C1亚型,BJ-1、BJ-3、BJ-6属于C3亚型,该6株病毒核苷酸同源性达90％以上,氨基酸同源性达99％以上.乳鼠攻击试验结果显示,BJ-3和BJ-5攻击后第4～5天乳鼠开始发病,后肢出现明显的麻痹、瘫痪症状,至第6～7天全部死亡,正常对照组和其他病毒组直至攻击后第14天均无异常.结论 不同CA16病毒株的生物学特性有所不同,基因背景相近,致病性明显不同,需进一步了解中国流行的 CA16病毒株的致病特点,为疫苗的研发提供直接依据.     

新生鼠急性缺氧后脑组织儿茶酚胺含量及超微结构变化的研究

将年龄分别为第1、8、15和22天龄的新生大鼠置于5%的低氧环境中2小时,观察其行为变化,并利用高效液相色谱-电化学检测仪测定幼鼠5个脑区(额叶皮质、尾壳核,下丘脑、海马和小脑)内儿茶酚胺神经递质的含量,发现各脑区NE和DA含量呈升高趋势,但第1、8天龄鼠某些脑区含量下降;透射电镜观察发现1、8天龄鼠额叶皮质、尾壳核和海马部分神经元出现线粒体肿胀和空泡样变,细胞间隙扩大,部分细胞核结构破坏,突触小泡的聚集和增多,第15和22天龄鼠脑形态无明显变化.     

肾上腺髓质素加强高糖对自发性高血压大鼠胰岛β细胞的毒性作用

探讨高糖是否对自发性高血压大鼠 (SHR)和 Wistar- Kyoto(WKY)鼠胰岛 β细胞分泌功能具有抑制作用 ,肾上腺髓质素 (adrenomedullin,AM)能否加强此抑制作用。选取 6周龄 SHR鼠及 10周龄 WKY鼠各 10只 ,分离胰岛放入 12孔培养板内 (90个胰岛 /孔 )培养。先以含 5 .6 m mol/ L(m M)葡萄糖的 RPMI16 4 0培养基培养 1h,取出培养液。然后用含 2 0 m M葡萄糖及不同浓度 AM(分别是 0 ,10 - 8,10 - 7,10 - 6 M)的 RPMI 16 4 0培养基培养 1小时 ,取出培养液 ,放射免疫分析 (RIA)方法测定两次培养液的胰岛素含量。 SHR鼠的胰岛细胞经用不加 AM含 2 0m M葡萄糖的 16 4 0培养基培养 1h后 ,与用含 5 .6 m M葡萄糖的 16 4 0培养基培养 1h相比 ,其培养液中胰岛素含量明显降低 (分别是 19.9± 6 .6 vs6 0 .9± 33.6 m U/ L,P<0 .0 5 )。当用含 2 0 m M葡萄糖及不同浓度 AM的 16 4 0培养基培养时 ,随着 AM浓度的增加 ,培养液中的胰岛素含量进一步减少 (19.9± 6 .6 vs2 2 .2± 8.0 vs2 1.5± 5 .6 vs17.9± 3.6 m U/ L)。对照组 WKY鼠的胰岛细胞经上述相同方法处理后得出相似的结果。但 WKY鼠与 SHR鼠相比 ,其胰岛细胞经用含 5 .6 m M及 2 0 m M葡萄糖培养基培养后培养液中的胰岛素含量较高 (P<0 .0 1)。用高糖培养基培养     

环孢素A诱导妊娠失败模型孕鼠外周母-胎免疫耐受

目的探讨环孢素A(cyclosporin A,CsA)能否诱导妊娠失败模型CBA/J×DBA/2孕鼠外周母-胎免疫耐受。方法分别使用CBA/J×DBA/2及CBA/J×BALB/c作为妊娠失败模型和正常妊娠模型,CBA/J小鼠于妊娠第4天(着床期)腹腔注射不同剂量(0、5、10、15mg/kg)CsA,妊娠第9天和第14天时分别采用单向混合淋巴细胞反应分析孕鼠外周脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力,并用RT-PCR分析细胞IL-2mRNA含量以研究脾脏细胞母-胎免疫耐受状态;妊娠第14天观察两组的胚胎吸收率。结果(1)于妊娠第4天腹腔注射5、10、15mg/kg CsA后,妊娠失败模型胚胎吸收率分别下降至2.86%、5.75%及11.24%,明显低于对照组(P<0.001,P<0.01,P<0.01);而对妊娠成功模型胚胎吸收率无显著性影响(P>0.05)。(2)混合淋巴细胞反应研究显示,于妊娠第4天腹腔注射CsA,可使妊娠第9、14天的妊娠失败模型孕鼠外周脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力显著下降(P均<0.01);RT-PCR分析显示,孕鼠脾细胞受父系抗原刺激后IL-2转录显著下降(P均<0.01)。结论于孕早期腹腔注射CsA可诱导妊娠失败模型孕鼠外周免疫细胞对父系抗原的特异性免疫耐受,从而使自然流产模型孕鼠的妊娠结局达到正常妊娠水平,提示CsA可能成为治疗妊娠失败的有效药物。     

6 Collagen type Ⅳ对周围神经中的再生轴突及非神经细胞的作用和影响

<正>本文通过用抗Collagen Ⅳ(Col.Ⅳ)抗体阻断Col.Ⅳ活性的方法,研究Col.Ⅳ失活的移植神经段(1cm)在植入大鼠坐骨神经后对再生轴突和非神经细胞的作用和影响.实验用90只Wistar大鼠.30只鼠双侧坐骨神经经退变处理后,切取1cm长的神经段作为供体神经.60只受体鼠随机分成对照组(30只)和抗(col.Ⅳ)组(30只).供体神经(60条)经5次冷冻和加热处理以杀死雪旺氏细胞,然后再用稀释50倍的正常小鼠血清处理.用这样处理的神经段植入对照组大鼠右侧腿内;其余神经段再用抗Col.Ⅳ抗血清处理后植入抗Col.Ⅳ组鼠内.术后5、7、10、15和30天取材,在移植神经段1、5和9mm处切片进行光镜和电镜观察,并作计数和统计学处理.实验结果显示:1.再生轴突数抗Col.Ⅳ组占对照组的百分比是:术后15天1和5mm处各为65%和4%;术后30天1、5和9mm处分别为94%、82%和57%.提示抗Col.Ⅳ组的再生轴突生长速度低于对照组.2.巨噬细胞数术后10天抗Col.Ⅳ组为对照组的1.7倍;术后15天为2倍;术后30天为3倍.提示Col.Ⅳ水平降低导致神经再生微环境的异常.结论;1.雪旺氏细胞基底膜成份Col.Ⅳ在早期神经再生中参与促进轴突的生长和成熟;2.Col.Ⅳ是神经微环境中不可缺少的物质,它对维持神经微环境的平衡起重要作用.文章对Col.Ⅳ的作用机制作了初步的分析和探讨.     

孕早期干预CD80/CD86协同刺激信号对自然流产模型免疫活性细胞协同刺激分子表达的影响

目的 :探讨孕早期干预协同刺激信号对自然流产模型孕鼠免疫活性细胞MHC Ⅱ类抗原和协同刺激分子的调控作用。方法 :建立自然流产模型组CBA×DBA 2和协同刺激信号干预组CBA×DBA 2 (CBA小鼠在孕 4天腹腔注射CD80及CD86mAb各 0 1mg)。分别于孕第 14天计数两组的胚胎吸收率 ,于孕第 9天采用流式细胞技术分析孕鼠脾细胞MHC Ⅱ类抗原与协同刺激分子CD80 (B7 1)、CD86 (B7 2 )、CD2 8和CD15 2 (CTLA 4 )的表达。结果 :孕早期干预协同刺激信号后 ,孕第 14天的胚胎吸收率显著下降 (P <0 0 5 ) ;孕第 9天免疫活性细胞CD80、CD86和CD2 8的表达显著下降 (P <0 0 1) ;CTLA 4的表达则显著升高 (P <0 0 5 ) ;而MHC Ⅱ类抗原的表达无显著改变 (P >0 0 5 )。结论 :孕早期体内干预协同刺激信号使免疫活性细胞协同刺激分子CD80、CD86、CD2 8表达下调和CTLA 4表达上调 ,及母胎界面Th2型免疫偏离 ,从而诱导系统性母 胎免疫耐受     

利用杂交瘤建立三株分泌抗破伤风类毒素单克隆抗体细胞的实验研究

以破伤风类毒素疫苗免疫Balb/c小鼠6次,每次间隔10—15天,末次免疫后三天取小鼠脾脏于铜网中研磨成单个细胞,按脾细胞与SP2/0瘤细胞的比值为10:1(脾细胞1.5×10~3,SP2/0瘤细胞为1.5×10~7)用50％PEG1000进行细胞融合,以Balb/c小鼠腹腔细胞为饲养细胞,于HAT培养液中将融合细胞分种于4块16孔大孔板(天津产)内,放入水封密闭的自制培养合中,充入5％Co_2混合气,37℃培养。培养5天后第一次换液,以后每3天观察换     

静息B细胞免疫诱导小鼠心肌移植物存活时间的延长

本文用小鼠耳后心肌移植作为模型观察静息B细胞在诱导延长移植物存活的作用。用C5 7BL/ 6新生小鼠的心脏移植给Balb/c成年雌性小鼠的耳后 ,受鼠在移植前 1周事先尾静脉注射C5 7BL/ 6静息B细胞 ,同时观察了用静息B细胞免疫后的Balb/c小鼠脾细胞对C5 7BL/ 6小鼠脾细胞的CTL活性。结果显示单独使用静息B细胞免疫组受鼠的同种移植物平均存活时间为 (16± 1 34 )d [空白对照组为 (10± 1 0 5 )d],单独注射阿霉素组心肌平均存活时间为 (14 6± 1 74)d ,静息B细胞预处理同时配合使用阿霉素组 ,心肌平均存活时间延长至 (2 7 8± 3 96 )d (P <0 0 0 1)。而活化B细胞组的小鼠排斥反应强烈 ,在移植后 8d之内全部排斥。静息B细胞免疫鼠对同种细胞的杀伤率 ,明显低于用活化B细胞免疫的对照组。     

宫内缺氧对胚胎大鼠神经干细胞增殖的影响

目的　探讨宫内缺氧对胚胎大鼠神经干细胞 (neuralstemcell,NSC)增殖的影响。方法　用低张性缺氧模型致胎龄 15天大鼠宫内缺氧 ,将胎鼠脑组织作神经巢蛋白 (Nestin)和Fos蛋白免疫组化染色 ,并进行图像分析。结果　缺氧组胎鼠Nestin和Fos免疫组化反应较对照组增强 ,阳性细胞数增多 (P <0 0 5 )。结论　 (1)缺氧可刺激神经干细胞进入增殖状态 ,Fos蛋白的表达可能是引起神经干细胞增殖的机制之一 ;(2 )可采用低张性缺氧方法使孕鼠缺氧来制造胚胎大鼠宫内缺氧模型。     

神经细胞黏附分子1和骨调蛋白在神经管畸形中的变化

目的初步探究神经细胞黏附分子1和骨调蛋白在神经管畸形中的变化。方法20只健康成年SD孕大鼠随机分为正常对照组和神经管畸形实验组,每组10只。通过胃饲维甲酸建立胚胎大鼠神经管畸形模型,检查了神经管畸形鼠体重的变化;用HE染色观察神经管畸形鼠神经管结构的变化;通过Western blot分析神经管畸形鼠组织中神经细胞黏附分子1和骨调蛋白的变化。结果神经管畸形鼠形态偏小,体质量为(0.34±0.45)g,明显低于正常对照组(0.53±056)g。胚胎鼠在第9天神经管处于未闭合状态,在第11天已完全闭合。胚胎第9天和11天神经管畸形大鼠的神经细胞黏附分子1比正常组表达均明显增加(P0.01)。骨调蛋白在胚胎第9 d神经管畸形大鼠中的表达比正常明显增高(P0.01),但在胚胎第11天的表达与正常相比没有差异(P0.05)。结论神经细胞黏附分子1和骨调蛋白的变化可能与神经管畸形形成有密切关系。     

不同配方复合润肤生凝胶促进大鼠创面愈合的实验研究

目的了解不同配方复合润肤生凝胶在大鼠创伤修复中的作用。方法将SD大鼠30只,在脊柱两侧各1．5cm处环形全层切除皮肤,形成直径1．8cm的圆形皮肤缺损创面4个,共120个创面,双盲随机采取配方Ⅰ、2、3、对照组(以生理盐水外用)4种处理方式,分别于伤后1天、2天、3天、5天、7天、10天、12天等时间点观测平均愈合时间、创面面积、肉芽组织和上皮组织的增生情况、组织学切片等;选取较优配方凝胶后,将SD大鼠30只,用同样方法随机采取该配方和对照组(以生理盐水外用) 2种处理方式,分别观测上述指标。结果各配方均能促进创面愈合,以配方Ⅱ较显著有统计学意义。结论适当比例配方活性玻璃复合透明质酸能促进创面愈合。     

咖啡因对胎鼠及乳鼠睾丸生殖细胞数量和PCNA表达的影响

为了深入了解咖啡因(Caffeine,Caf.)对胎儿、新生儿生殖细胞数量及其PCNA(增殖细胞核抗原)表达的影响,本实验采用低(0.3mM)、中(0.6mM)、高(1.2mM)浓度Caf.体外培养SD孕18天胎鼠、0天及4天乳鼠睾丸组织块,培养时间分别为1周、2周、3周,观察Caf.对睾丸内生殖细胞数量及其表达PCNA的影响.结果如下:(1)18天胎鼠睾丸培养组织内生殖细胞数量受Caf.影响最小,0天乳鼠次之,4天乳鼠受影响较大.(2)低浓度的Caf.对生殖细胞数量影响较少;中等浓度的Caf.在培养三周后,生殖细胞的数量才减少;而高浓度的Caf.在培养二周后,生殖细胞数量已有下降,三周更明显.(3)Caf.对生殖细胞PCNA表达阳性率无明显影响,但PCNA含量在大多数实验组都有降低.由此可知高浓度Caf.长时间培养后使生殖细胞数量减少,降低了生殖细胞PCNA的含量.     

SIN-1降低重症肌无力大鼠的自身免疫反应

用一氧化氮 (NO)供体 3 吗啉 斯德酮亚胺 (SIN 1)干预乙酰胆碱受体 (AChR)致敏的实验性自身免疫性重症肌无力 (EAMG)大鼠模型。并进行临床评分、体重测量、免疫学指标及细胞凋亡检测。结果显示在大鼠致敏后 0～ 7天和 16～ 2 5天给药后 ,SIN 1组大鼠临床症状明显减轻伴发病延迟 ,血清IgG含量始终明显低于对照组 ;致敏后第10天 ,SIN 1组大鼠脾单个核细胞AChR反应性IFN γ分泌性细胞数 (6 38± 1 0 6 )比对照组 (8 2 5± 1 6 7)明显减少(P <0 0 5 ) ,外周血AChR反应性凋亡细胞含量 (8 5 9± 1 35 )与对照组 (5 0 5± 0 6 3)相比明显增多 (P <0 0 1)。实验证明SIN 1可以促使AChR反应性MNC凋亡增加 ,下调自身免疫反应 ,在EAMG的发病和疾病进展中起保护作用。     

C1q缺陷型小鼠对鼠伤寒沙门菌的易感性

此项研究采用C1q缺陷型小鼠(C1qa-/-,129/Sv,Nram-pr)经静脉或腹腔感染鼠伤寒沙门菌菌株12023,并用野生型小鼠作为对照试验,旨在阐明C1q在宿主防御沙门菌感染中的重要作用。方法与结果:①对鼠伤寒沙门菌的易感性:将实验菌株104CFU经腹腔或105CFU经静脉注射给实验动物,观察14天。在此期间,腹腔注射组中,对照组小鼠(n=16)死亡1只,而实验组(n=23)死亡17只(73%,P=0.0001),动物死亡始于感染后第6天。静脉注射组中,对照组(n=14)无一死亡,而实验组(n=9)死亡8只(88%,P<0.0001)。②肝、脾内活菌计数:对实验小鼠(观察期间死亡的小鼠除外)于感染…