TT病毒的检测及部分核苷酸序列比较

目的 为阐明ＴＴ病毒（ＴＴＶ）流行病学特征和基因级异质性以及血清学诊断试剂的研制提供资料。方法 从健康查体者的血清中提取ＤＮＡ，设计一套引物，采用套式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｌ－ＰＣＲ）检测ＴＴＶ，对其中７例阳性标本进行了克隆测序，并与２株ＴＴＶ的核苷酸序列作了比较。结果 １１１例正常人中ＴＴＶ的感染率为１２．６％。７株中国株ＴＴＶ间的核苷酸同源性为９０．６％～９５．４％，与日本株ＴＸ０１１（Ｏ）     

TT病毒研究进展

TT病毒(TTV)是新近发现的一种DNA病毒，有关TTV的研究近年取得了很大进展，本文就TTV相关的研究现状并结合所存在的问题进行简要综述。     

南京市部分幼儿TT病毒DNA检测及基因序列分析

目的 了解幼儿人群中TT病毒的流行率及基因判别。方法 设计、合成引物,采用半套式聚合酶链反应（hemi-nested PCR)方法检测幼儿血清标本并进行序列分析。结果 在110份幼儿血清中,TTV DNA总检出率为12．73％。在107名ALT正常,抗HAV－IgM、HBsAg、抗HCV阴性的幼儿血清中,TTV DNA检出率为11．2％（12／107）;从1名ALT升高幼儿血清中检出TTV DNA,从2名HBsSg阳性幼儿血清中检出TTV DNA阳性血清1份。对2株TTV DNA阳性株序列分析结果显示,它们与日本分离株N22、TA278（G1a)、TX011（G1b)、TS003(G2a)、NA004（G2b)和中国株CHN1相应位置核苷酸序列的同源性分别为83．3％／86．0％、84．2％／87．8％、93．7％／98．6％、67．6％／67．1％、64．9％／64．4％、83．8％／88．3％,经系统发育分析它们属于G1b型。结论 幼儿人群中存在TTV感染,TTV流行率为12．73％。TTV感染可能存在血源传播途径外的其他传播途径,并存在健康携带状态。     

TT病毒的研究进展

1997年12月，日本学者Nishizwa等用代表性差异分析法(representational difference analysis，RDA)，从原因不明的输血后肝炎患者血清中发现了1vrV。此后，许多学者开展了对1vrv的研究，其生物学特性、流行病学、检测方法、及临床致病性等方面的研究取得了一定的进展。本文结合国内外文献。对以上问题简要综述如下。     

献血员中TT病毒DNA检测及部分基因序列分析

目的探讨献血员中一种与输血后肝炎有关的病毒—ＴＴＶ的感染情况。方法采用ＴＴＶ基因组ＯＲＦ１区的套式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）方法检测２６２份献血员血清标本。结果在血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）异常、ＨＢｓＡｇ及抗－ＨＣＶ阴性的５８份献血员血清标本中，１８份ＴＴＶＤＮＡ阳性，ＴＴＶＤＮＡ的阳性检出率为３１０％；在２０４份正常献血员血清标本中检出３０份（１４７％）ＴＴＶＤＮＡ阳性，ＴＴＶＤＮＡ的阳性检出率明显低于ＡＬＴ异常献血员人群（χ２＝３８１，Ｐ＜００５）。序列分析结果显示，其序列与日本株和中国株相应位置核苷酸序列的同源性大于９７％，可能属同一基因型。结论提示我国献血员中存在ＴＴＶ感染，ＴＴＶ存在“健康携带状态”，输血可能成为传播ＴＴＶ感染的途径之一     

原位杂交法检测非甲～庚型肝炎患者肝组织中TT病毒DNA

目的 证实在非甲－庚型病毒性肝炎患者肝组织中TT病毒（transfusion-transmitted virus,TTV)的存在。方法 采用地高辛素标记TTV DNA探针以原位杂交技术对51例血清学病毒标记非甲－戊型、免疫组化检测肝组织中HBsAg、HCV NS3Ag及HGV N55Aag阴性的病毒性肝炎患者石蜡包埋肝组织进行了检测。结果 各型病毒性肝炎肝组织中TTV基因的总检出率为27．5％,其中急性轻型肝炎的检出率为30．8％（4 ／13）,急性重型肝炎为1／8,亚急性重型肝炎为3／7,慢性肝炎为2／6,活动性肝硬化为2／9,慢性重肝肝炎为1／4,原发性肝癌为1／4。TTV DNA表达于肝细胞核或胞质内,以核型多见。在急性肝炎,TTV阳性细胞弥漫分布于肝小叶内,慢性肝炎于汇管区附近较为密集,而在肝硬化病例,阳性细胞在假小叶内多呈片族状不规则分布。结论 在不明原因病毒性肝炎患者血清及肝组织中TTV DNA的检出表明TTV为一种新型的肝炎病毒,TTV为一种嗜肝性病毒。     

TT病毒与肝炎关系的临床流行病学研究

目的 对闽南地区各种肝炎患者、健康体检者、义力献血员和肝癌患者共４８０例从临床流行病学角度探讨ＴＴ病毒（ＴＴＶ）的致生及其与各种肝炎的关系。方法 采用巢式ＰＣＲＩｇＧ,用ＥＰＩ ＩＮＦＯ６．０软件进行统计分析。结果 ４８０名研究对象中ＴＴＶＤＮＡ的总检出率为２３．９６％。各种胆炎患者的ＴＴＶ总阳性率为２３．９４％,肝癌患者的ＴＴＶ阳性率为２０．６９％,而健康者的ＴＴＶ阳性率为２４．８４％,义务献血     

部分人群TT病毒的分子流行病学研究

继甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎的相继发现后 ,仍有部分肝炎病人未能进行病原学的分型。日本学者Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等〔1〕 报道了一种可能与输血后肝炎相关的病毒 ,暂称为输血传播病毒 (ＴＴｖｉｒｕｓ) ,它可能是原因不明的非甲～庚型肝炎的病原。目前对ＴＴＶ的研究尚处在起步阶段 ,其病毒特性、临床情况和流行病学状况均有待研究。我们对部分人群血清进行了ＴＴＶＤＮＡ的检测 ,并分析了部分片段的ＤＮＡ序列。1　材料和方法1.1　化学试剂及工具酶　ＴａｑＤＮＡ聚合酶、ＰＣＲ仪来自ＰＥＲＫＩＮＥＬＭＥＲ公司 (美国 ) ,限制性内切…     

7株TT病毒部分核苷酸及氨基酸序列分析

目的 了解TT病毒（Transfusion transmitted virus,TTV）在我国的流行情况,研究我国TTV株序列特点。方法 采用半巢式聚合酶链反应（PCR）扩增TTVDNA,PCR阳性扩增产物直接测序。结果 我国7例TTVDNA株部分序列与日本株相比,核苷酸及氨基酸同源性分别为64．7％－98．4％及62．7％－96．4％;7株间的核苷酸及氨基酸同源性分别为63．5％－98．4％及60．2％－96．4％,分别属于两种型及其中一型中的两种亚型。结论 我国存在TTV并可能存在多种TTV基因型。     

TT病毒学研究进展

甲－戊型肝炎病毒是人类肝炎的主要原因,但部分病人不具备上述任何病毒标志物,这提示还存在其它引起肝炎的病毒,最近,日本学者报道了一种新的可经输血传播的DNA病毒,即TT病毒,并认为该病毒可能与某些肝病有关,到目前为止,人们对TTV的认识还不全面,本文仅对TTV病原学研究的最新进展作一综述。     

特异核酸捕获-PCR技术在从高背景标本中检测TT病毒DNA的应用

目的 解决因TTV在样本中的水平极低而导致从高背景核酸样本中检测TTV DNA存在非特异性扩增的问题。方法 采用辛和素生物素系统将TTV特异的核酸片段包括被在微孔板上,利用特异核酸捕获样本中的TTV DNA,从而建立特异核酸捕获－PCR检测TTV DNA方法,并以10份血清（4份TTV DNA阳性）和肝组织配对标本为对象与抽提法进行比较,阳性产物进行DNA序列分析,最后评价特异核酸捕获－PCR的特异性。结果 抽提法在血清和肝组织中的检出率分别为4／10和9／10。RFLP初步分析产物具有特异性,但经DNA序列分析证实的检出率仅分别为2／10和3／10。采用特异核酸捕获－PCR检测的结果与抽提法经DNA序列分析后的结果一致,获得的电泳条带也更为清晰。结论 特异核酸捕获－PCR方法能显著提高TTV DNA检测的特异性,特别是针对高背景核酸标本,表明该方法在其他低水平病原体检测及高背景核酸样本检测中也有广泛的应用前景。目前广泛采用的TTV DNA检测方法如不进行DNA序列分析则可导致过高地估计了TTV的感染率。．     

ELISA法检测血清中柯萨奇B组病毒抗体

以柯萨奇Ｂ组１－６型病毒感染的Ｖｅｒｏ细胞上清液作抗原，建立了间接ＥＬＩＳＡ法，用于检测心肌炎患者血清中ＣｏｘＢ１－６型病毒ＩｇＧ抗体，ＩｇＧ抗体滴度≥６４００者定为阳性，在４４例心肌炎患者中有３１例为阳性占７０．４５％，其阳性检出率明显高于正常对照组，后者仅占７．４１％。     

间接ELISA检测柯萨奇B组病毒抗体

用PEG处理的CoxB病毒抗原,建立了快速测定该组1～6型病毒抗体的ELISA法,其特异性与中和试验相同。用此法测定健康人330名,病毒性心肌炎患者122例,不明原因发热患者45例。结果显示:健康人群普遍存在低水平该组病毒抗体。CoxB病毒感染与病毒性心肌炎密切相关,也是原因不明发热的重要病因,因此该项检查对CoxB组病毒感染的病因诊断有重要意义。     

ELISA检测孕妇血清巨细胞病毒特异性IgG及新生儿脐带血清特异性IgM

用ELISA法检测长春地区390名孕妇血清巨细胞病毒(CMV)特异性IgG,阳性率为92.42%(366/396);用同种方法检测186名新生儿脐血清MCV特异性IgM抗体,阳性率为2.65%(4/186).4名新生儿为先天性巨细胞病毒感染,其中1名临床诊断为巨细胞包涵体病(CID).余者无症状.4名先天性巨细胞病毒感染的新生儿的母亲血清学检查亦为阳性.     

TT病毒在谷丙转氨酶升高的体检者和肝病患者中检 …

目的 通过研究ＴＴ病毒在谷丙转氨酶升高的体检人群和肝病患者中的意义。探讨其致病性。方法 收集１９例谷丙转氨酶升高体验者和４１例转氨酶正常的随机对照的血清,以及１８２例肝病患者的血清,采用ＰＣＲ方法检测ＴＴ病毒的ＤＮＡ。聚合酶链反应（ＰＣＲ）产物经限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析验证。同时检测甲,乙,丙,戊,庚型肝炎病毒（ＨＡＶ,ＨＢＶ,ＨＣＶ和ＨＧＶ）感染标志。结果 １９例转氨酶升高体检者中,     

应用ELISA方法检测抗呼吸道合胞病毒免疫核糖核酸免疫活性的研究

本文报导在小鼠模型系统中,应用ELISA方法对兔抗呼吸道合胞病毒(RSV)免疫核糖核酸(i-RNA)诱生血清特异性抗体及抗体生成的动态进行观察。实验结果表明:抗呼吸道台胞病毒免疫核糖核酸(RSV-i-RNA)在小鼠体内具有诱生血清特异性抗体能力。RSV-i-RNA常规致敏后24h抗体水平明显增高,72h达高峰,11天左右降至正常水平,RNase处理使RSV-i-RNA诱生血清特异性抗体能力明显减低,而DNase、Pronase对其则无明显影响。     

从6例血友病患者分离的TT病毒基因克隆及序列测定

目的 了解血友病人的输血传播病毒（ＴＴＶ）基因型及其在个体内存在状况。方法 对６例血友病人血清中分离的ＴＴＶ进行基因克隆,从每例病人的标本随机选多个克隆进行测序,比较其核苷酸和氨基酸序列。结果 除１例病人的５个克隆ＴＴＶ ＤＮＡ序列基本相同外,其余病人所测的ＴＴＶ ＤＡＮ克隆序列均不完全相同。根据同源性分析,该６例病人的ＴＴＶ ＤＮＡ主要可分为３组：Ｇ１ａ、Ｇ１ｂ和Ｇ２基因型。结论 同一病人可混合     

血液透析及骨髓移植患者TT病毒感染情况分析

目的了解ＴＴ病毒（简称ＴＴＶ）在血液透析患者和骨髓移植患者中的感染情况,并评估ＴＴ病毒的致病力。方法回顾性调查３７例血液透析患者和９０例骨髓移植患者的ＴＴＶ感染情况,分析ＴＴＶ感染的致病力。结果ＴＴＶ在３７例血液透析患者中的感染率为１６２２％（６／３７）,在９０例骨髓移植患者中的感染率为３３３％（３／９０）,经统计学处理,两组感染率比较有显著性差异。６例ＴＴＶ阳性患者中５例有输血史,４例行肾移植术。ＴＴＶ感染与是否存在ＨＢＶ或ＨＣＶ感染无关。未发现ＴＴＶ阳性和ＴＴＶ阴性两组之间肝功能的损害程度存在差异。结论输血或血浆在传播ＴＴＶ感染上有重要意义。ＴＴＶ的致病力较弱。ＴＴＶ是否嗜肝病毒,有待进一步研究。     

用间接ELISA法检测柯萨奇B组病毒特异性IgM抗体

用间接ＥＬＩＳＡ法检测柯萨奇Ｂ组病毒特异性ＩｇＭ抗体李晓眠，刘民，罗世春，马海伦，任中原（天津医学院微生物学教研室，天津３０００７０）特异性ＩｇＭ抗体的检测是早期诊断传染病的可靠方法之一。在病毒感染疾病中已广泛应用直接、间接和抗体捕捉ＥＬＩＳＡ法作早...