HPLC同时测定补阳还五汤提取液中4种成分的含量

目的:建立HPLC同时测定补阳还五汤提取液中苦杏仁苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸含量的方法。方法:采用反相高效液相法,依利特Hyperil ODS2色谱柱,流动相乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长分别为210(苦杏仁苷),230(芍药苷),250(毛蕊异黄酮葡萄糖苷),315 nm(阿魏酸)。结果:苦杏仁苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸线性范围分别为1.080~10.80,1.735~17.35,0.242~2.42,0.106~1.06μg,相关系数分别为0.999 8,0.999 8,0.999 5,0.999 6;平均加样回收率分别为98.39%,98.89%,97.25%,95.39%,RSD分别为1.9%,2.0%,3.3%,2.6%。结论:该建立的高效液相色谱法方便、简便、准确,适用于同时对补阳还五汤提取液中苦杏仁苷、芍药苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷及阿魏酸的含量测定。     

超高效液相色谱法同时测定黄芪中6种黄酮类成分的含量

 目的 本实验采用超高效液相色谱法(UPLC)建立同时测定主产地(甘肃、陕西、内蒙古)黄芪药材中毛蕊异黄酮苷,芒柄花苷,槲皮素,毛蕊异黄酮,山柰酚,芒柄花素6种黄酮类成分的含量测定方法。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相A 为0.1% 甲酸水,流动相B 为0.1% 甲酸乙腈-异丙醇(7∶3),流速为0.25 mL·min^-1,梯度洗脱,检测波长254 nm,柱温30 ℃,进样量2 μL。结果 6种黄酮类成分在选定的范围内线性关系良好(r≥0.999),平均加样回收率(n=6) 在99.60%～101.2%,RSD 1.2%～2.0%。结论 本实验首次采用UPLC对黄芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、槲皮素、毛蕊异黄酮、山柰酚、芒柄花素6种黄酮类成分进行含量测定,该方法专属性强、重复性好、稳定、可控,可作为黄芪药材质量控制的方法。     

补阳还五汤化学成分、药理作用研究进展及质量标志物（Q-Marker）预测

补阳还五汤（Buyang Huanwu Decoction,BHD）具有补气活血通络之功效和抗血栓、抗神经损伤、抑制细胞凋亡等药理作用,临床上常用于治疗缺血性脑卒中。通过对BHD的化学成分、药理作用进行系统总结与梳理,依照质量标志物（quality marker,Q-Marker）理念,从传递与溯源、特有、有效、复方配伍、可测和超分子“印迹性”6个方面对BHD的Q-Marker进行预测分析,提示黄芪甲苷、黄芪皂苷I、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、芒柄花苷、阿魏酸、川芎嗪、藁本内酯、芍药苷、苦杏仁苷、羟基红花黄色素A可作为该复方的Q-Marker,后续可选择这些Q-Marker为指标,根据药材、饮片、制剂的量值传递规律建立并控制BHD全过程质量可溯源体系。     

高效液相色谱法测定补阳还五汤及总苷部位中黄芪甲苷的含量

目的:建立补阳还五汤及总苷中黄芪甲苷HPLC测定法。方法:色谱柱C184.6×250mm,5μm,检测波长:203nm,流动相:乙腈∶水(33∶67),流速:1mL.min-1,柱压:15.17±0.4137MPa,温度:45℃。结果:黄芪甲苷在2~10μg内浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系,r=0.9997,加样回收率为100.3%,RSD为1.038%,补阳还五汤、总苷中黄芪甲苷的6批不同产地的药材所得制剂的平均含量分别为0.9395mg.mL-1和11.44mg.g-1。结论:该法简便、准确,所测结果稳定、重现性好,可以用于补阳还五汤总苷的质量控制。补阳还五汤及总苷因药材产地不同,其黄芪甲苷含量有较大差异。     

黄芪剂量对补阳还五汤中芍药苷、阿魏酸含量的影响

目的：比较黄芪在不同剂量情况下对补阳还五汤中芍药苷和阿魏酸含量的影响。方法：采用高效液相色谱法测定了不同黄芪剂量（0～120g）情况下补阳还五汤中芍药苷、阿魏酸的含量，并对测定结果进行了统计检验。结果：君药黄芪剂量对补阳还五汤中的芍药苷、阿魏酸含量影响很大（P＜0．05）。结论：该研究为探讨方剂的组方理论提供了科学依据。     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定马鞭草中5种糖苷类成分的含量

目的建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法同时测定马鞭草中桃叶珊瑚苷、戟叶马鞭草苷、马鞭草苷、龙胆苦苷、毛蕊花糖苷的含量。方法色谱柱采用Waters SunfireTMC18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水(25∶75→40∶60),梯度洗脱,流速0.8 m L/min,进样量5μL,柱温30℃;采用电喷雾离子源(ESI),以多反应监测方式(MRM)进行定量分析。桃叶珊瑚苷、戟叶马鞭草苷、马鞭草苷、龙胆苦苷在正离子电离模式下定量分析离子对分别为m/z 167.2→m/z 149.1、m/z 243.2→m/z 225.2、m/z 227.2→m/z195.2、m/z 195.2→m/z 177.2。毛蕊花糖苷在负离子电离模式下定量分析离子对为m/z461.3→m/z 161.0。结果桃叶珊瑚苷、戟叶马鞭草苷、马鞭草苷、龙胆苦苷、毛蕊花糖苷五种组分在120~1 200,10 000~100 000,5 000~50 000,1.2~12,510~5 100μg/L的浓度范围内与峰面积均呈良好的线性关系,平均回收率分别为101.2%,98.63%,99.45%,101.6%,100.3%。结论本法操作简便、准确、具有良好的重现性,为马鞭草药材的合理应用及质量控制奠定了基础。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定知母主根和须根中18种成分

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法分析知母主根和须根中螺甾皂苷类(知母皂苷AⅠ,知母皂苷AⅡ,知母皂苷AⅢ,知母皂苷Ⅲ,菝葜皂苷元),呋甾皂苷(新知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅡ,知母皂苷BⅢ,知母皂苷Ⅰa,知母皂苷Ⅰ,知母皂苷C,知母皂苷E),黄酮(淫羊藿次苷Ⅰ,宝藿苷Ⅰ),双苯吡酮(新芒果苷、芒果苷、异芒果苷),氢醌糖苷(β-熊果苷)5类共18种成分的方法,从而分析不同来源知母主根和须根差异性,为知母资源可持续发展提供参考。方法:取样品0.25 g用稀乙醇25 mL回流提取30 min,色谱分离采用Waters ACQUITY UPLC?BEH HILIC C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相0.1%甲酸水-乙腈,梯度洗脱,体积流量0.2 mL·min~(-1)。采用电喷雾离子源(ESI+,ESI-),多反应离子监测(MRM)进行检测,利用外标法计算知母样品中所测成分的含量,通过SMICA14.1软件对知母主根和须根样品间的差异进行分析。结果:所测成分在各自的线性范围内呈良好的线性关系,精密度、重复性、稳定性良好,加样回收率在95.22%～101.42%,RSD均4%。实验结果表明,以18种成分为主成分进行多元统计分析时,知母主根与须根有较大差异。结论:该研究为知母须根资源再利用和知母质量控制提供了实验依据。     

补阳还五汤共煎液与单煎混合液中芍药苷、阿魏酸含量比较

目的 比较补阳还五汤共煎液和单煎混合液中芍药苷和阿魏酸的含量.方法 采用高效液相色谱法测定了共煎、单煎情况下补阳还五汤中芍药苷、阿魏酸的含量,并对测定结果 进行了统计学分析.结果 补阳还五汤共煎液中的芍药苷、阿魏酸含量比单煎混合液有显著性增高(P＜0.05).结论 本研究为探讨方剂的配伍提供了科学依据.     

超高效液相色谱串联质谱法测定中药何首乌中10种真菌毒素的含量

目的:建立超高效液相色谱串联-质谱同时测定何首乌中10种真菌毒素的方法.方法:样品经70％甲醇提取,再经亲水亲脂平衡(HLB)柱净化处理后进样分析.样品采用Welch Ultimate XB C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.5μm)进行分离,流动相为甲醇(A)-0.1％甲酸(含5 mmol/L乙酸铵)(B...     

补阳还五汤共煎液与单煎混合液中芍药苷、阿魏酸含量比较

目的比较补阳还五汤共煎液和单煎混合液中芍药苷和阿魏酸的含量。方法采用高效液相色谱法测定了共煎、单煎情况下补阳还五汤中芍药苷、阿魏酸的含量,并对测定结果进行了统计学分析。结果补阳还五汤共煎液中的芍药苷、阿魏酸含量比单煎混合液有显著性增高（P〈0.05）。结论本研究为探讨方剂的配伍提供了科学依据。     

HPLC法同时测定补阳还五汤中毛蕊异黄酮苷、芍药苷、羟基红花黄色素A的含量

目的 建立补阳还五汤中毛蕊异黄酮苷、芍药苷、羟基红花黄色素A的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱:Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-乙腈(26:2)为流动相A,0.7%磷酸为流动相B,梯度洗脱;检测波长:毛蕊异黄酮苷为260 nm,芍药苷为230 nm,羟基红花黄色素A为403 nm;柱温:35℃.结果 毛蕊异黄酮苷在0.0539～1.0780μg范围内线性关系良好,r=0.999 5,平均回收率为99.4%,RSD=1.5%;芍药苷在0.4160～8.3200μg范围内线性关系良好,r=0.999 8,平均回收率为100.6%,RSD=1.7%;羟基红花黄色素A在0.0418～0.8352μg范围内线性关系良好,r=0.999 5,平均回收率为101.0%,RSD=1.9%.结论 本方法简单快捷,适用于测定补阳还五汤中毛蕊异黄酮苷、芍药苷、羟基红花黄色素A的含量.     

高效液相色谱串联质谱法测定当归芍药散提取物和含药血清中3种活性成分含量

目的 建立测定当归芍药散提取物和含药血清中3种活性成分含量的高效液相色谱串联质谱方法.方法 药物提取物样品经甲醇-水(1:1,V/)溶液溶解、离心、净化后过0.45 μm滤膜,血清样品适当稀释、过膜后用高效液相色谱串联质谱法测定.色谱柱为Agilent Poroshell 120 EC-C18(100 mmX2.1 m...     

煎煮时间对补阳还五汤中芍药苷、阿魏酸含量的影响

目的:比较不同煎煮时间对补阳还五汤中芍药苷和阿魏酸含量的影响。方法:采用高效液相色谱法测定了不同煎煮时间(10min~120min)情况下补阳还五汤中芍药苷、阿魏酸的含量,并对测定结果进行了统计检验。结果:煎煮时间对补阳还五汤中的芍药苷、阿魏酸含量影响很大(P<0.05)。结论:本研究为探讨方剂的合理煎煮时间提供了科学依据。     

补阳还五汤两种提取方法中黄芪甲苷含量的比较

目的：探讨两种提取方法对补阳还五汤中黄芪甲苷含量的影响。方法：建立补阳还五汤中黄芪甲苷的高效液相色谱含量测定方法，比较水提液和水提醇沉液中黄芪甲苷含量的差异。结果：两种方法所得汤剂中黄芪甲苷含量无显著性差异。结论：补阳还五汤可用水提醇沉法进行精制。     

HPLC法同时测定益心血脂康胶囊中3种成分

目的建立HPLC法同时测定益心血脂康胶囊(黄芪、三七、川芎)中3种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.2%甲酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1 m L/min;检测波长260 nm(毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素)和321 nm(阿魏酸);柱温35℃。结果毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、阿魏酸分别在0.084 4~0.844 0μg(r=0.999 8)、0.052 0~0.520 0μg(r=0.999 1)、0.043 4~0.434 0μg(r=0.999 2)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD,n=6)分别为99.96%(2.65%)、96.30%(2.31%)、98.50%(2.46%)。结论该方法简便准确,重复性好,可用于益心血脂康胶囊的质量控制。     

基于2种分析方法的补阳还五汤中有效成分提取工艺优化研究

目的对比以R语言为基础结合BP神经网络和遗传算法与响应面分析2种方法,优化补阳还五汤(BHD)中主要有效成分的提取工艺。方法在单因素实验的基础上采用响应面实验设计方法,利用HPLC法检测提取得到的BHD中主要有效成分,计算其提取率。提取率结果进行熵权法赋值,得到综合评价值。在此基础上首先采用响应面分析方法得到其最佳提取工艺和综合评价预测值。再通过另一种优化分析方法:R语言环境下的BP神经网络和遗传算法,分别进行网络模型优化和目标寻优,以期得到另一组BHD中有效成分的最佳提取工艺和综合评价预测值。结果响应面处理方法得到的最优提取工艺为提取时间1.8 h、乙醇体积分数51%、提取温度91℃、液料比14∶1,该方法下综合评价预测值为908.45,验证试验平均值为897.58,相对误差为1.20%;R语言环境下BP神经网络和遗传算法处理得到的最佳提取工艺为提取时间2 h、乙醇体积分数40%、提取温度100℃、液料比14∶1,该模型综合评价预测值为907.71,验证试验平均值为905.33,相对误差为0.26%。结论对比2种分析方法发现,神经网络结合遗传算法的相对误差较小,与验证试验拟合度较高,即R语言环境下的BP神经网络和遗传算法数学模型可用来对BHD中有效成分的提取工艺进行分析和预测,优于响应面分析,为实现中药有效成分目标寻优以及中药现代化提供了新的思路和参考。     

超高效液相色谱串联质谱法检测葛花中异黄酮

目的建立超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,检测葛花中异黄酮成分。方法葛花经乙醇提取和乙酸乙酯纯化,HPLC分析采用Diamonsil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-乙腈-水(2∶1∶2)为流动相,体积流量为0.5 m L/min,检测波长为264 nm,柱温为25℃,进样量10μL,质谱检测设定为负离子模式。结果得到7种异黄酮成分,MS鉴定为大豆苷、大豆苷元、鸢尾苷、鸢尾苷元、染料木黄酮、印度黄檀苷和鸡豆黄素。结论 HPLC-MS/MS法检测葛花异黄酮,具有高灵敏度和选择性,方法准确可靠。     

高效液相色谱波长切换法同时测定参芪益气口服液中3种成分含量

目的:建立HPLC波长切换法同时测定参芪益气口服液中绿原酸、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的方法。方法:采用反相高效液相法,色谱柱为Agilent HC-C18(250 nm×4.6 nm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,采用波长转换法,绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷检测波...     

高效液相色谱-串联质谱法同时测定参麦注射液中9种皂苷

目的:本研究采用高效液相色谱-串联质谱检测方法,建立同时测定参麦注射液中人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rc,Rd,Rb1,Rb2,Ro和麦冬皂苷D的分析方法。方法:本实验应用Thermo BDS Hypersil C18柱(150 mm×2.1 mm,5μm),柱温30℃。以乙腈(A)-0.02%醋酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.2 mL·min-1,以电喷雾离子源选择反应监测(SRM)方式正离子模式分别检测离子对m/z 823.5→643.75(人参皂苷Rg1),m/z 969.4→789.46(人参皂苷Re),m/z 823.6→371.94(人参皂苷Rf),m/z 1101.7→343.17(人参皂苷Rc),m/z 969.4→789.46(人参皂苷Rd),m/z 1131→371.80(人参皂苷Rb1),m/z 1101.7→343.35(人参皂苷Rb2),m/z 979.7→641.65(人参皂苷Ro);负离子模式检测离子对m/z 889.4→853.67(麦冬皂苷D)。结果:本法专属性良好,各成分均能达到有效分离,线性关系良好(r>0.99),人参皂苷Rg1,Re,Rf,Rc,Rd,Rb1,Rb2,Ro和麦冬皂苷D最低定量限分别为0.03、0.003、0.3、0.03、0.003、0.03、0.03、5、3 ng·mL-1,回收率均在97.10%¹02.14%范围内,重复进样精密度均小于2.63%(RSD)。讨论:与文献中报道方法相比,本方法快速、灵敏度高、准确性好、重复性好,可以对参麦注射液中含量差异较大的四类皂苷类成分进行同时定量,能够用于参麦注射液的含量测定和质量控制。     

LC-MS-MS法同时测定黄芪注射液和黄芪口服液中5种成分

目的建立LC-MS-MS法同时测定黄芪注射液和黄芪口服液中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素5种有效成分的含有量。方法黄芪注射液和黄芪口服液甲醇稀释液在Agilent ZORBAX SB C18(2.1 mm×150 mm,5μm)色谱柱上分离,流动相为甲醇-水(含0.1%甲酸,70∶30,V/V);体积流量为300μL/min。MS采用电喷雾离子源,多反应监测方式进行正离子扫描。结果 5种成分在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,在黄芪注射液和黄芪口服液中的平均回收率分别为96.8%~102.3%和95.9%~101.5%。结论本法测得结果准确、可靠、灵敏度高,可用于黄芪注射液和黄芪口服液的质量控制。