糖基化终末产物对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1表达韵影响

目的：观察糖基化终末产物（AGEs）对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）表达的影响及其与细胞外基质（ECM）成分含量的关系。方法：体外培养正常大鼠肾系膜细胞，分别用糖化牛血清白蛋白（AGEs）及未经糖化的牛血清白蛋白（BSA）处理，以常规培养的肾系膜细胞作为对照，检测不同时间、不同浓度AGEs对纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原、PAI-1表达的影响。MTT法检测AGEs对系膜细胞增殖的作用，ELISA测定条件培养基中FN、Ⅳ型胶原及PAI-1蛋白含量，逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测系膜细胞PAI-1 mRNA的表达。结果：与相应浓度的BSA比较，AGEs（0—200mg／L）对系膜细胞增殖无明显影响，但可不同程度地刺激系膜细胞FN、Ⅳ型胶原、PAI-1蛋白的产生。RT—PCR检测显示，给予AGEs（100mg／L）的系膜细胞PAI-1 mRNA的表达明显增加（P〈0．01）。结论：AGEs促进系膜细胞PAI—1的表达，提示AGEs通过上调PAI-1的表达而减少细胞外基质降解，可能是糖尿病肾病细胞外基质积聚的原因之一。     

木犀草素对STZ诱导的糖尿病肾脏的保护作用

目的:探讨木犀草素对糖尿病肾脏的保护作用及其可能机制。方法:雄性SD大鼠随机分为5组,即正常对照组、糖尿病模型组、木犀草素低、中、高剂量组,采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病大鼠模型,生化方法测定血糖、尿蛋白、血及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及肾组织丙二醛(MDA)的含量;W estern blotting检测肾皮质转化生长因子β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)蛋白质水平;光镜观察肾组织形态改变。结果:与糖尿病模型组相比,木犀草素治疗组大鼠血糖水平明显降低(P0.01)、24 h尿蛋白明显减少(P0.01),血清及肾组织SOD、CAT活性升高(P0.01),肾组织MDA含量显著降低(P0.01),木犀草素治疗组肾皮质TGF-β1及PAI-1蛋白表达明显低于糖尿病模型组。结论:木犀草素对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用及降低肾组织TGF-β1、PAI-1的蛋白表达有关。     

体外培养的血管内皮细胞低氧低糖损伤后tPA、PAI-1表达变化

目的：观察体外培养的血管内皮细胞低氧低糖损伤后组织型纤溶酶原激活剂(tPA)、Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)表达变化，探讨脑缺血后纤溶系统的变化及机制。材料和方法：制备体外内皮细胞低氧低糖损伤模型，利用HE染色、免疫细胞化学染色观察tPA、PAI-1表达变化。结果：低氧低糖损伤后，tPA、PAI-1表达均明显增强。结论：成功制备体外内皮细胞低氧低糖损伤模型。内皮细胞低氧低糖损伤可以诱导tPA、PAI-1表达增多，进一步说明脑缺血损伤后tPA、PAI-1表达增加并参与损伤过程。     

肝素对大鼠Thy-1肾炎u-PA/PAI-1表达的影响

目的：研究尿激酶型纤溶酶原激活物／Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子（u-PA/PAI-1)在大鼠Thy-1肾炎病变进展过程中的变化，以及肝素对其表达的影响。方法：以抗Thy-1单抗成功制备大鼠Thy-1肾炎模型，并用肝素对其进行治疗，分别于1、3、7、14、21、28d处死动物并分别取其肾皮质。应用RT－PCR及Western blot方法检测肾皮质u-PA/PAI-1 mRNA及蛋白表达的变化，以观察肝素对其表达的影响。结果：RT－PCR法显示肾炎模型组（G组）于3－28d的肾皮质u-PA mRNA和3－21d的肾皮质PAI－1 mRNA的表达均高于对照组（P＜0.05或P＜0.01)；肝素治疗组（H组）仅21d时肾皮质u-PA mRNA的表达高于G组（P＜0.05)，而PAI-1 mRNA的表达于3－28d时均低于G组（P＜0.05)。Western blot结果显示3－28d时，G组u-PA和PAI－1蛋白表达量高于对照组（P＜0.05或P＜0.01)，这与RT－PCR检测结果相似；H组肾皮质u-PA蛋白表达量与G组相比差异无显著性，而3－21d时PAI－1蛋白表达量均低于G组（P＜0.05或P＜0.01)。结论：大鼠Thy-1肾炎肾皮质u-PA与PAI－1的表达均随肾小球病变的进展而增强，肝素治疗可能通过干扰或抑制u-PA和PAI－1的表达而发挥其治疗作用。     

黄腐酸钠对糖尿病大鼠视网膜病变的作用

目的 :探讨黄腐酸钠对糖尿病大鼠视网膜病变 (DR)的治疗作用及其机制。方法 :对佐菌素诱导的糖尿病大鼠早期给予 0 .5 %黄腐酸钠 3 0mg/kg皮下注射 ,1次 /日 ,共 6个月。利用光镜和透射电镜观察其视网膜组织的形态改变 ,同时检测血浆纤溶酶原激活剂 (t PA)、纤溶酶原激活剂抑制物 (PAI 1)活性及循环血中粒细胞表面抗原CD11a、CD11b。结果 :(1)黄腐酸钠治疗组视网膜组织光镜下及超微结构变化较病变组大鼠有明显改善 ,毛细血管基底膜的增厚明显减轻 (P <0 .0 1)。 (2 )治疗组t PA、PAI 1活性的改变较病变组得以纠正 (P <0 .0 1)而接近于正常对照组水平 (P <0 .0 5 )。基底膜厚度与血浆t PA活性呈显著负相关。 (3 )治疗组CD11a、CD11b的表达受到抑制 (P <0 .0 5 )。结论 :黄腐酸钠对DR的进展有一定的抑制作用。此作用可能与维持血浆t PA、PAI 1平衡而改善纤溶活性 ,减少白细胞粘附有关。     

蚯蚓蛋白激酶对体内纤溶活性的增强作用研究

目的：探讨蚯蚓蛋白激酶制剂（LK）的纤溶增强作用。方法：采用静脉给药方法，观察LK对SD大鼠纤溶激活因子t-PA及其抑制物PAI-1的急性作用。结果：给药后，PAI-1活性被显著抑制（P<0.01），t-PA活性则明显增强（P<0.01）。剂量1200 U/kg体重的LK，其增强t-PA作用显著大于600U/kg体重剂量LK（P<0.05）。此外，体外观察表明:LK具有明显的激活纤溶酶原（Plg）作用，且有量-效关系，具有一定的浓度依赖性（1.56-25 kU/L）。结论：结果表明，LK具备增强纤溶的特性，静脉给药作用快速而肯定。     

检测DM2患者血浆tPA、PAI-1、uPA及uPAR水平的价值

目的:检测2型糖尿病(DM2)血浆tPA、PAI-1、uPA及uPAR水平,探讨其临床价值.方法:分别以ELISA检测尿蛋白正常组、尿蛋白阳性组、严重尿蛋白组和对照组的tPA、PAI-1、uPA及uPAR水平.结果:与对照组相比,尿蛋白正常组的tPA和PAI-1变化不明显(P＞0.05);尿蛋白阳性组tPA活性明显下降...     

糖基化终末产物对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1表达的影响

目的:观察糖基化终末产物(AGEs)对大鼠肾系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的影响及其与细胞外基质(ECM)成分含量的关系。方法:体外培养正常大鼠肾系膜细胞,分别用糖化牛血清白蛋白(AGEs)及未经糖化的牛血清白蛋白(BSA)处理,以常规培养的肾系膜细胞作为对照,检测不同时间、不同浓度AGEs对纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原、PAI-1表达的影响。MTT法检测AGEs对系膜细胞增殖的作用,ELISA测定条件培养基中FN、Ⅳ型胶原及PAI-1蛋白含量,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测系膜细胞PAI-1mRNA的表达。结果:与相应浓度的BSA比较,AGEs(0-200mg/L)对系膜细胞增殖无明显影响,但可不同程度地刺激系膜细胞FN、Ⅳ型胶原、PAI-1蛋白的产生。RT-PCR检测显示,给予AGEs(100mg/L)的系膜细胞PAI-1mRNA的表达明显增加(P<0.01)。结论:AGEs促进系膜细胞PAI-1的表达,提示AGEs通过上调PAI-1的表达而减少细胞外基质降解,可能是糖尿病肾病细胞外基质积聚的原因之一。     

妊娠糖尿病孕妇糖化血红蛋白与部分止凝血指标活性的相关性

目的探讨妊娠糖尿病（GDM）孕妇的部分凝血、纤溶指标活性的变化及其与糖化血红蛋白（GHbA1c）的相关性。方法对正常非孕妇女、正常妊娠妇女（各40例）和GDM孕妇（50例）的GHbA1c、血浆Ⅶc因子（FⅦc）、组织型纤溶酶原激活物（t-PA）及其抑制物（PAI-1）、蛋白C活性依赖凝固时间（PCAT）及抗凝血酶-Ⅲ（AT-Ⅲ）等指标进行检测,并分析糖化血红蛋白与各指标之间的相关性。结果与正常非孕组及正常妊娠组比较,GDM组GHbA1c、FⅦc、PAI-1均显著增高（P〈0．01）,t-PA明显下降（P〈0．01）;正常妊娠组AT-Ⅲ较非孕组呈下降趋势,GDM患者AT-Ⅲ水平、PCAT与正常妊娠组无显著差异。全部GDM患者GHbA1c与t-PA呈负相关（r=-0．607．P〈0．01）,与PAI-1呈正相关（r=0．493,P〈0．01）,与FⅦc活性正相关（r=0．421,P〈0．01）。结论糖尿病孕妇存在着明显的血栓前状态,血糖通过影响纤溶凝血系统功能,导致凝血功能异常,在妊娠糖尿病的发生发展中起着重要的作用。提示应密切关注患者糖化血红蛋白及凝血纤溶指标的变化,预防并发症的发生。     

PAI-1基因4G4G基因型与IgA肾病易感性及临床表现的关系

目的探讨PAI-1基因启动子区4G／5G多态性与IgA肾病的发生、进展和临床表现的关系。方法收集IgA肾病患者的临床资料；应用PCR-限制性片段长度多态技术分析296例IgA肾病患者和310名健康人的PAI-1基因4G／5G多态性；分析PAI-1基因4G／5G多态性与IgA肾病的发生与临床表现及病理改变的关系。结果（1）PAI-1基因4G4G，4G5G，5G5G基因型频率在IgA肾病组和正常对照组分别为0．33、0．19、0．48和0．3、0．23、0．47，两组之间差异无统计学意义（X^2=1．63，P〉0．05）；（2）4G4G纯合子基因型频率在病理Lee氏分级Ⅲ级以下组（A组）和Ⅳ～Ⅴ级组（B组）分别为0．39和0．28，（X^20=7．86，P〈0．05）。（3）按基因型分组，4G4G组IgA肾病患者的肌酐清除率明显低于非4G4G组；4G4G组患者的血清甘油三酯水平明显高于5G5G组；4G4G组患者高甘油三酯血症发生率明显高于4G5G组（P〈0．05）。结论PAI-1基因启动子区4G／5G多态性不是IgA肾病发生的易感因素，但可能是IgA肾病病情加重的危险因子。     

登革2型病毒调控血管内皮细胞纤溶系统相关蛋白的表达

目的观察登革2型病毒（DV2）对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）表达组织纤溶酶原激活物（tPA）和纤溶酶原激活物抑制物1（PAI-1）的影响。方法应用胰酶消化分离HUVEC并进行传代培养，用生长良好的第2．3代细胞进行试验。用cell counting kit-8（CCK-8）测定DV2感染后细胞活性变化；发色底物法测定感染DV2组和对照组培养液中tPA、PAI-1活性；RT-PCR检测细胞内tPA和PAI-1 mRNA水平。结果DV2感染对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义。感染DV2组培养液中tPA活性在12～72h显著升高（P〈0．05）；DV2诱导HUVEC表达tPA mRNA的水平显著上调，12h达到峰值，以后渐降，72h mRNA表达水平仍高于对照组（P〈0．01）。而DV2感染组培养液中PAI-1活性和PAI-1 mRNA的表达与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论DV2感染可显著上调HUVEC的tPA mRNA转录，增强内皮细胞tPA蛋白的分泌，而不影响PAI-1 mRNA的转录或改变内皮细胞PAI-1的分泌。结果提示DV2可活化但并不损伤内皮细胞，诱发内皮细胞增强表达纤溶酶原激活物而致使纤溶系统失衡，引起纤溶亢进，这可能是诱发DHF／DSS患者急性期出血、低血容量性休克等体征的主要因素之一。     

代谢综合征患者纤溶活性与胰岛素抵抗的关系

目的:探讨代谢综合征患者血浆纤溶活性及与胰岛素抵抗的关系。方法:选择单纯代谢综合征患者36例,代谢综合征合并冠心病患者44例和健康人群对照20例。观察一般情况,并测定血浆纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)和组织型纤溶酶原激活物(t-PA)、纤维蛋白原(Fib)、空腹血糖(FBG)、空腹血胰岛素(Ins)和血脂等指标;计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果:代谢综合征患者的ISI较正常对照组明显下降(P<0.05);血浆PAI-1、Fib等明显升高(P<0.05)。代谢综合征合并冠心病组PAI-1与Fib、Ins正相关,与ISI、高密度脂蛋白(HDL)负相关。结论:代谢综合征患者存在明显的胰岛素抵抗和纤溶活性异常,同时纤溶活性异常与胰岛素抵抗相关。     

尼古丁对血管内皮细胞释放t-PA及PAI-1的影响

目的: 研究尼古丁对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)释放组织型纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的影响。方法: HUVECs培养后接种于24孔培养板中,随机分为对照组及实验组,分别进行以下实验。(1)以0.1、1、10、100 μmol/L 尼古丁孵育HUVECs,12 h后收集各组上清液;(2)以100 μmol/L尼古丁与HUVECs孵育0、4、6、8、12 及24 h,收集各组上清液。采用ELISA法测定各组t-PA和PAI-1的浓度。结果: HUVECs与不同浓度尼古丁孵育12 h后,100 μmol/L尼古丁组PAI-1蛋白较对照组明显增加(P<0.01);0.1、1及10 μmol/L尼古丁组PAI-1蛋白与对照组比较,均无显著差异(均P>0.05);各浓度组t-PA蛋白与对照组比较,均无显著差异(均P>0.05)。HUVECs 与100 μmol/L的尼古丁分别孵育4 、6 、8 、12 及24 h,各组PAI-1蛋白均较对照组明显升高(P<0.05),且其升高呈时间依赖性;各组t-PA与对照组比较,均无显著差异(均P>0.05)。结论: 尼古丁可抑制HUVECs的纤溶活性,对内皮细胞具有损伤作用。     

脑梗塞患者甘油三脂与纤溶活性异常的研究

目的 :探讨脑梗塞患者血高甘油三酯与纤溶系统异常的危险因素。方法 :采用酶联免疫吸附双抗体夹心法、酶法 ,对 5 1例脑梗塞患者及 5 0例健康对照组血组织型纤溶酶原激活物 (t PA) ,纤溶酶原激活物抑制物 1(PAI 1)和甘油三酯 (TG)水平进行了对比分析。结果 :血高TG、高PAI 1,与低t PA含量变化为脑梗塞患者异常变化特征 ,与正常组相比有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :高甘油三酯通过改变纤溶活性是诱发脑梗塞疾病发生、发展的危险生物学因素     

核黄素对STZ诱导的大鼠糖尿病肾病的治疗作用

目的:探讨核黄素对STZ诱导的大鼠糖尿病肾病的治疗作用及机制。方法:将雄性Sprague-Daw-ley大鼠随机分为3组,即正常对照组、糖尿病模型组、核黄素治疗组,采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病大鼠模型,收集各组血、尿及肾组织,生化方法检测24h尿蛋白量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)的含量,并计算肾脏脏器系数(KW/BW);Western blotting检测不同组别肾皮质TGF-β1、纤溶酶原活化抑制因子-1(PAI-1)蛋白质水平;光镜观察肾组织形态改变。结果:与糖尿病模型组大鼠比较,核黄素治疗组大鼠尿蛋白量显著降低(P0.01),肾组织及血清SOD、CAT活性升高(P0.01),肾组织MDA含量显著降低(P0.01),核黄素治疗组肾皮质TGF-β1及PAI-1蛋白表达明显低于糖尿病模型组。结论:核黄素对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏有一定的保护作用,其机制可能与其降低肾组织TGF-β1、PAI-1蛋白表达有关。     

2型糖尿病肾微血管病变患者PAI-1、TNF-α水平变化

目的:观察2型糖尿病(T2DM)肾微血管病变患者纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化及其与糖代谢指标的相关性。方法:T2DM患者125例,根据24h尿微量白蛋白(UMA)排泄量分为三组:(1)T2DM无肾病组(A组);(2)T2DM早期肾病组(B组);(3)T2DM临床肾病组(C组)。平行检测PAI-1、TNF-α和空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)浓度。结果:(1)各组T2DM患者PAI-1水平均较正常对照组高,C组的PAI-1显著高于A、B组(P<0.01),B组高于A组(P<0.05)。(2)C组的TNF-α显著高于A、B组(p<0.01),B组高于A组(P<0.05)。(3)相关分析表明PAI-1与FINS、FBG,TNF-α与HbA1c、FINS具有显著正相关性(P<0.05)。结论:PAI-1、TNF-α升高与肾损害有关,可能是T2DM肾病发生的共同危险因素;降低PAI-1、TNF-α活性,对延缓T2DM微血管病变的发生发展有重要作用。     

血浆同型半胱氨酸对糖尿病肾脏损伤机制的探讨

目的探讨血浆同型半胱氨酸水平与糖尿病肾脏病大鼠肾组织表达PAI-1的关系,并探讨其引起肾损伤可能的机制。方法38只健康SD雄性大鼠随机分为正常对照组及糖尿病组。用链佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠模型,于第4、8、12周末收集24h尿测定UAER,并处死大鼠,心脏采血,ELISA法测血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平,生化分析仪测血糖、血肌酐等生化指标。取肾脏称重,免疫组织化学法测肾组织中PAI-1的表达情况。结果与正常对照组相比,①糖尿病组大鼠肾肥大指数（肾质量/体质量,KW/BW）、UAER显著增加（P〈0.05）;②糖尿病组大鼠血浆Hcy浓度明显升高（P〈0.01）,且随病程延长而逐渐增加,肾组织表达PAI-1明显增强（P〈0.05）;③相关分析表明,血浆Hcy水平与肾组织表达PAI-1强度及UAER呈显著正相关（r=0.641,r=0.684,P〈0.01）。结论血浆Hcy参与了糖尿病肾损伤的发生、发展,其机制可能与其造成内皮损伤,引起纤溶系统失衡等因素有关。     

妊娠期糖尿病患者血清VAP-1、PAI-1表达与新生儿结局的相关性研究

目的 通过检测妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中血管黏附蛋白-1(VAP-1)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的表达情况,探究两者与新生儿结局的相关性.方法 选取2018年6月-2020年6月宁波市第七人民医院已收治确诊的GDM患者120例作为观察组;选取115例健康孕妇作为对照组.通过ELISA(酶联免疫吸附法...     

睾酮对人血管内皮细胞纤溶活性影响及机制

目的：观察睾酮对人血管内皮细胞分泌纤溶酶原激活物（tPA）、纤溶酶原激活物抑制物1（PAI-1）的影响及其机制。方法： 将体外培养的人血管内皮细胞（HUVEC）分为5个浓度睾酮组及单纯培养基对照组，MTT实验观察睾酮对细胞生长及活性影响。ELISA 法测各组tPA、 PAI-1含量。用雄激素受体拮抗剂(flutamide)预处理细胞后重复实验。结果： 生理及略低于生理剂量睾酮（3×10-10 mol/L-3×10-8 mol/L）可明显促进tPA 分泌（P＜0.01）；而大剂量则使tPA 含量明显减少（P＜0.01）。各睾酮组PAI-1含量均明显低于对照组（P＜0.05）。Flutamide 能有效消除睾酮的上述作用。结论： 生理浓度睾酮通过雄激素受体促进tPA分泌，降低PAI-1浓度而增强纤溶系统活性，有利于防止血栓性疾病的发生。     

uPA和PAI-1在肺纤维化中的作用

慢性炎症和纤维化疾病都以炎性细胞和介质的聚集为特征 ,并且细胞外基质及纤溶酶系统均有明显的改变。目前发现 ,纤溶酶原激活系统的改变是肺纤维化发展中一个非常关键的环节。研究表明各种肺纤维化患者的支气管灌洗液 (BAL)中纤溶酶原活性受到的损害往往是由于尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)缺失 ,以及纤溶酶原激活因子抑制物 1(PAI 1)表达增加所致。