巨噬细胞极化与动脉粥样硬化

巨噬细胞可极化成两种亚型,促炎的M1型和抗炎的M2型,通过调控炎症反应可影响动脉粥样硬化发展进程。研究表明,巨噬细胞极化在动脉粥样硬化病理生理中发挥了重要作用,但目前调控巨噬细胞极化决定动脉粥样硬化炎症反应转归的机制尚不十分清楚。本文重点就动脉粥样硬化发展过程中影响巨噬细胞极化的因素做一阐述,为调节炎症反应防治动脉粥样硬化提供一个新研究方向。     

巨噬细胞极化与动脉粥样硬化

巨噬细胞是动脉粥样硬化过程中最具代表性的炎症细胞。机体通过多个信号通路选择性表达靶基因,使巨噬细胞呈现相应特征性的分子标志物,最终实现不同极性及功能,即促炎的M1型和抗炎的M2型巨噬细胞。MI/M2型巨噬细胞具有可塑性,二者的分化影响着动脉粥样硬化的发展结局。因此,如何控制巨噬细胞介导的炎症反应已成为心血管领域的关注热点,也为动脉粥样硬化的防治带来新的希望。     

巨噬细胞极化与肥胖型哮喘

肥胖和支气管哮喘(简称哮喘)之间的相关性日益受到关注,大量研究证明两者之间存在关联,但是其机制尚不明确.肥胖导致机体产生的慢性低度炎症,可能是解释肥胖和哮喘关联性的因素之一.研究证明,脂肪组织中浸润的免疫细胞和炎症细胞,释放细胞因子,诱发炎症反应,损害肺、肝、心脏等其他终末器官,并引发慢性疾病如哮喘、脂肪肝、冠心病等.其中,巨噬细胞是比较重要的免疫细胞.通过巨噬细胞介导的炎症反应解释肥胖与哮喘之间的关系不容忽视.本文就巨噬细胞及其亚型特点作一综述,并阐述其与肥胖和哮喘的关联.     

M2型巨噬细胞在肺纤维化中的相关研究进展

［摘要］　肺纤维化是一种由于细胞外基质过度沉积从而导致肺结构破坏和瘢痕形成的间质性肺疾病。M2型巨噬细胞是一种先天免疫细胞,可以通过分泌多种促纤维化介质调节组织损伤修复,在肺纤维化发病中起着重要作用。该文对M2型巨噬细胞在肺纤维化中的研究进展作一综述。     

巨噬细胞极化在痛风炎症机制中的研究

痛风性关节炎是一种可涉及一系列复杂的炎症级联扩增反应的自身炎症性疾病, 其区别于其他自身炎性关节病的特征之一是其关节炎症在临床上可表现为自发缓解。促炎因子与抗炎因子动态平衡在痛风炎症自发缓解机制中发挥重要作用。巨噬细胞是人体固有免疫细胞, 在不同的微环境下, 巨噬细胞可极化为促炎的M1型与抗炎的M2型, 不同表型之间的转化贯穿于痛风炎症发生、发展和转归过程。促进巨噬细胞M2型极化可以缓解痛风急性炎症, 故早期调控痛风炎症中M1及M2各亚群之间的平衡成为探索痛风急性炎症新治疗策略的重要切入点。     

M1型和M2型巨噬细胞及相关组织因子在结核性胸膜炎患者治疗前后的变化及意义

目的在结核性胸膜炎(TP)中探讨M1、M2巨噬细胞及相关组织因子在抗TP治疗前后的表达变化和意义。方法使用流式细胞术检测TP患者与健康人群外周血及胸腔积液中单个核细胞(PBMC/PFMC)M1、M2巨噬细胞的表达率及TP患者经1个月规律抗TP治疗后PBMC与PFMC中M1、M2巨噬细胞的表达变化,ELISA检测外周血及胸腔积液中相关因子IL-10、IL-1、t-PA、PAI-1、ADA、LDH和蛋白的表达水平,分析健康人群与TP患者上述指标的表达差异和治疗后TP患者外周血及胸腔积液中上述指标的变化及各指标间的相关性。结果 TP患者PBMC中M2型巨噬细胞比例显著增加,且IL-10、PAI-1表达水平明显高于健康人群,而t-PA明显降低;在TP患者PFMC中M2型巨噬细胞比例显著高于M1型;TP患者中,外周血中M2型巨噬细胞表达与IL-10、PAI-1表达水平呈正相关,胸腔积液中M1型巨噬细胞与IL-12呈正相关,而M2型巨噬细胞与IL-10、PAI-1、ADA、LDH呈正相关,与t-PA呈明显负相关。治疗后,TP患者PBMC及PFMC中M1/M2极化现象得到明显改善,其中以M2型巨噬细胞比例减少最为显著。结论在TPPBMC与PFMC中均以M2巨噬细胞占主导地位,且外周血与PE中IL-10、PAI-1、t-PA与ADA、LDH水平与M2型巨噬细胞具有相关性,抗TP可明显改善M2巨噬细胞及相关细胞因子过度表达的现象。     

桥本甲状腺炎患者内脏脂肪M1型巨噬细胞与胰岛素抵抗的相关分析

<正>桥本甲状腺炎（HT）又名慢性淋巴细胞细胞性甲状腺炎,发病核心是炎性细胞及炎症因子浸润甲状腺^[1]。最新研究发现,HT患者可伴有胰岛素抵抗（IR）^[2-3],甲状腺功能亢进或减退均伴有不同程度的IR,但具体机制尚不清楚。此外,有学者发现HT患者肾脏组织甲状腺过氧化物酶抗体（TPO）染色阳性,也反映出HT患者中多器官的自身免疫损害^[4]。IR是一种慢性系统性低度炎症,巨噬细胞（M?）浸润内脏脂肪是IR发生的关键步骤^[5]。脂肪组织的M?存在不同的表型:M1型M?,     

M2型巨噬细胞在COPD发病机制中作用的研究进展

M2型巨噬细胞因其促进炎症消散、组织重塑和纤维化的功能特点被认为广泛地参与到了COPD的发生、发展过程中。研究发现,M2型巨噬细胞可能通过影响 IL-17a、IFN-γ以及CCL18水平来促进肺气肿的发生;不仅如此,M2型巨噬细胞还能通过调节各种炎症因子水平来促进炎症消散,同时还能通过影响 ADORA3水平来参与基质金属蛋白酶的产生、转化生长因子β通路的激活,从而引起小气道病变。但 M2型巨噬细胞参与 COPD发病的分子机制尚未完全明确,本文将对M2型巨噬细胞在COPD发病机制中作用的相关研究进行综述。     

M2型巨噬细胞来源外泌体对食管癌细胞生长行为及人脐静脉血管内皮细胞血管生成的影响

目的 探讨M2型巨噬细胞来源的外泌体(Exo)对食管癌细胞生长及人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)血管生成的影响。方法 采用佛波酯(PMA)和白细胞介素(IL)-4将人单核细胞系THP1细胞诱导为M2型巨噬细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测巨噬细胞相关基因肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、重组人精氨酸酶(Arg)1、转化生长因子(TGF)-β及CD206的表达变化;超速离心法分离M2型巨噬细胞来源的Exo,透射电镜观察形态,粒径分析仪检测粒径分布,Western印迹法检测Exo标志蛋白表达;利用PKH67标记Exo后再与食管癌细胞株EC9706共培养,细胞免疫荧光染色检测Exo被EC9706细胞摄取情况;将分离的Exo与EC9706细胞共培养,CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移与侵袭,细胞成管实验检测HUVEC血管生成情况。结果 经PMA和IL-4诱导后的细胞内M1型巨噬细胞相关基因TNF-α、IL-6和iNOS的mRNA表达水平显著下调(P<0.05),M2型巨噬细胞相关基因Arg1、T...     

M2型巨噬细胞对大肠癌SW620上皮—间质转化的影响

目的探讨M2型巨噬细胞对大肠癌细胞上皮—间质转化的影响。方法采用人单核细胞白血病细胞株（THP-1）诱导成M2型巨噬细胞，用流式细胞术鉴定后与大肠癌细胞株SW620非接触式共培养（实验组），以其单独培养为对照（对照组）。分别在培养24、48、72h时用ELISA法测细胞液中TNF-α、TGF-β，用Western blot法测细胞中E—Cadherin、Vimentin蛋白。结果与对照组比较，观察组TNF-α、TGF-β水平及Vimentin蛋白表达明显上调，并随着培养时间的延长而增加；E—cadherin表达下调，并随着培养时间的延长而降低（P均〈0．05）。结论M2型巨噬细胞对SW620的上皮-间质转化有促进作用。     

巨噬细胞极化分型与儿童支气管哮喘的相关性分析

目的 探讨巨噬细胞极化分型与儿童支气管哮喘(简称哮喘)演进的相关性并分析其可能相关机制.方法 分离2014年9月至2016年8月两年间西安市儿童医院哮喘患儿外周血中单核巨噬细胞,流式细胞术分析M1与M2的比例,并且分析其与患儿急性发作严重分级的相关性及常规全球哮喘防治创议方案控制疗效的相关性.结果 哮喘患儿急性发作严重分级及控制疗效与外周血中巨噬细胞无相关性(P＞0.05),与M1及M2呈现较强的相关性(P＜0.01),与M1呈正相关(r=0.938),与M2呈负相关(r=-0.835).结论 哮喘患儿外周血中巨噬细胞的不同亚群对该疾病的演进及预后发挥不同的作用,因此巨噬细胞极性的转变有可能成为儿童哮喘治疗的关键节点.     

定量评价左室大小和功能的解剖M型超声新技术

解剖M型是一项超声心动图新技术，其两大特点是①可任意调整取样线的位置，使之垂直通过心室短轴和心室壁，提高了心腔内径和室壁厚度测量的准确性及可重复性；②可同时使用多条取样线，对左室壁多个节段的收缩活动进行定量分析，故有可能提高缺血心肌的检出率，对心脏负荷试验帮助更大。     

M2型巨噬细胞来源的外泌体对快速起搏HL-1细胞KCa3.1的作用及可能机制

目的 探究M2型巨噬细胞来源的外泌体对快速起搏小鼠心房肌细胞(HL-1)KCa3.1的作用及可能机制。方法 提取C57/6J小鼠骨髓巨噬细胞并分为未分化组(未加干预的骨髓巨噬细胞)和分化组(骨髓巨噬细胞经白细胞介素-4干预24 h分化为M2型巨噬细胞)。分别收集分化组和未分化组细胞培养液上清，采用超速离心法得到外泌体。实时荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-146a-5p在分化组和未分化组外泌体中的表达情况。将HL-1细胞分为8组，分别为对照组(HL-1细胞未施加任何干预)、起搏组(HL-1细胞快速起搏)、共培养组(HL-1细胞快速起搏的同时与M2型巨噬细胞来源的外泌体共培养)、模拟物组(HL-1细胞快速起搏同时转染miR-146a-5p模拟物)、模拟物对照组(HL-1细胞快速起搏同时转染模拟物对照)、抑制物组(HL-1细胞快速起搏同时转染miR-146a-5p抑制物)、抑制剂物对照组(HL-1细胞快速起搏同时转染抑制剂物对照)、PDTC组[HL-1细胞起搏同时给予核因子-κBp65(NF-κB p65)特异性阻断剂PDTC]。采用qRT-PCR检测各组中miR-146a-...     

细粒棘球蚴原头节源外泌体体外刺激髓源抑制性细胞极化的研究

目的 探究细粒棘球蚴原头节源外泌体体外刺激髓源抑制性细胞(MDSC)向M2型巨噬细胞极化的动态变化,并探讨二者协同发挥免疫抑制作用的生物学意义。方法体外培养细粒棘球蚴原头节并收集培养上清,超速离心上清获得外泌体。透射电镜观察外泌体形态,蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测外泌体蛋白CD9和烯醇化酶的表达。取3只健康BALB/c小鼠,制备股骨髓系细胞,刺激分化为MDSC后,分为实验组、阳性对照组和阴性对照组。于6孔板中每孔加入1×10~6个MDSC细胞,实验组、阳性对照组和阴性对照组分别加入20μl外泌体(5μg)、白细胞介素-4 (IL-4)(40 ng)和RPMI 1640培养基进行刺激。于刺激24、 48和72 h后,分别收集3组MDSC,采用流式细胞术分析单核型MDSC (M-MDSC)的细胞比例变化及其M2型巨噬细胞分子标志F4/80和CD206的表达情况。采用GraphPad Prism 8.0.2统计学软件进行统计学分析。结果透射电镜下可见细粒棘球蚴原头节源外泌体为圆形的膜状结构,直径集中在60～90 nm。Western blotting分析结果显示,外...     

NASH患者脂肪组织巨噬细胞计数的变化

目的：研究非酒精性脂肪性肝炎（NASH）患者网膜脂肪及皮下脂肪巨噬细胞数量的变化。方法选择NASH伴单纯性胆囊结石患者22例和单纯性胆囊结石患者28例。在腹腔镜手术中取肝组织、网膜脂肪组织和皮下脂肪组织。常规检测BMI、腹围、血糖、血酯、HOMA指数、胰岛素、游离脂肪酸;采用免疫组化法检测脂肪组织巨噬细胞。以抗CD68抗体标记巨噬细胞,抗CD11C标记M1亚群巨噬细胞,抗CD206抗体标记M2亚群巨噬细胞。结果 NASH患者血清AST （31.43±14.76）U/L对（23.68±9.64）U/L、TG （2.42±0.82）mmol/L对（1.65±0.47） mmol/L、胰岛素（83.18±44.34）mlu/L对（51.15±32.12）mlu/L和HOMA指数（21.00±14.75）对（12.43±10.66）显著高于胆囊结石患者（P＜0.05）;NASH患者网膜脂肪组织巨噬细胞数量为（34.41±15.35）,皮下脂肪组织巨噬细胞数量为（27.91±11.13）,而胆囊结石患者分别为（29.93±11.49）和（15.57±5.67）,（P＜0.01）;在22例NASH患者中,其NAS评分7分2例,6分6例,5分9例,4分5例。NASH患者皮下脂肪组织巨噬细胞、M1亚群巨噬细胞和M2亚群巨噬细胞数量与NAS评分呈正相关（P＜0.01）,但在网膜脂肪组织中三种细胞与NAS评分无显著性相关（P＆gt;0.05）。结论网膜脂肪及皮下脂肪中的巨噬细胞数量变化参与了NASH的发病过程。     

白细胞介素-13在特发性肺纤维化发生发展中的作用机制研究进展

特发性肺纤维化（IPF）是一种慢性、进行性、间质性纤维化疾病。白细胞介素-13(IL-13)被认为是一种中央介质,其通过复杂的信号通路,与上皮细胞、巨噬细胞和成纤维细胞等细胞的功能密切相关。IL-13在IPF患者的肺组织中表达上调,可以导致肺泡上皮细胞的分化障碍、促进上皮—间充质转化,并使其产生骨膜蛋白,与其他细胞外基质产生相互作用;而受损的肺泡上皮细胞可以促进IL-13的生成,二者相互作用,形成恶性循环。IL-13作为一种促炎细胞因子,可以通过基质金属蛋白酶、生长分化因子等激活M2型巨噬细胞释放转化生长因子-β等促纤维化分子;而M2型巨噬细胞也可以释放部分抗炎细胞因子减少炎症浸润及损伤修复,从而在IPF发生发展中发挥双重作用。另外,IL-13可以诱导成纤维细胞的活化与增殖,增加其迁移和侵袭性,并促进其向肌成纤维细胞转化,导致平滑肌细胞收缩以及胶原合成,从而参与IPF的发生发展。     

糖蛋白M6B对RAW264.7巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的 研究糖蛋白M6B（glycoprotein M6B,GPM6B）对巨噬细胞炎症因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ和IL-6的影响。 方法 ①Western blot和qPCR检测RAW264.7经典激活的巨噬细胞（classically activated macrophage, M1）和替代激活的巨噬细胞（alternatively activated macrophage, M2）中GPM6B表达量变化。②分别用对照组（sh-Scramble）和GPM6B干涉组（sh-GPM6B1和sh-GPM6B2）的慢病毒感染RAW264.7巨噬细胞系,荧光显微镜下观察病毒的感染效率。Western blot和qPCR检测GPM6B的干涉效率。③qPCR检测对照组和GPM6B干涉组促炎因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达水平,ELISA法检测上清中IL-1β和IL-6的含量。④Western blot检测干涉GPM6B后炎症相关分子p65和Iκα的磷酸化水平变化。 结果 ①相比于对照组,RAW264.7巨噬细胞M1型中GPM6B蛋白和mRNA水平均显著升高（P<0.05）,而M2型中GPM6B蛋白和mRNA水平均显著降低（P<0.05）。②与sh-Scramble组相比,sh-GPM6B1组和sh-GPM6B2组GPM6B蛋白和mRNA水平均显著降低（P<0.05）。③干涉GPM6B后促炎因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ的mRNA表达水平和上清中IL-1β和IL-6均显著降低（P<0.05）。④干涉GPM6B后炎症相关分子p65和Iκα的磷酸化水平降低。 结论 干涉GPM6B可抑制RAW264.7巨噬细胞促炎因子的表达。     

氧化型极低密度脂蛋白诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡

探讨氧化型极低密度脂蛋白诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡的作用。应用低温超速离心法分离健康人血浆极低密度脂蛋白，用CuCl2氧化得到氧化型极低密度脂蛋白。琼脂糖凝胶电泳观察巨噬细胞凋亡DNA断裂“梯状”图谱；流式细胞仪和二苯胺法分别测定凋亡巨噬细胞百分率和：DNA片断百分率；光镜观察凋亡巨噬细胞形态变化。结果发现：①氧化型极低密度脂蛋白能诱导巨噬细胞发生凋亡及DNA断裂；②抗氧化剂二甲基硫脲能部分抑制氧化型极低密度脂蛋白诱导的：DNA断裂；③核转录因子核因子kB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐可完全抑制氧化型极低密度脂蛋白诱导的DNA断裂。提示氧化型极低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡可能是动脉粥样硬化形成机制之一；氧化型极低密度脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的作用可能与自由基和激活核因子kB有关。