前列腺素D2的睡眠调节作用

前列腺素D2(PGD2) 是由前列腺素D2合成酶合成的一种二十碳不饱和脂肪酸.研究表明PGD2具有睡眠调节作用,其机理为PGD2与前列腺素D2受体结合,升高基底前脑部位细胞外腺苷水平.腺苷通过腺苷A2A受体激活睡眠调节中枢(腹外侧视前区,VLPO)神经元,并通过GABA抑制觉醒调节中枢(结节乳头核,TMN)组胺能神经元而导致睡眠.对PGD2睡眠调节作用及其机理进行研究,有望开发出新型的镇静催眠药物.     

鼻咽癌患者糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D 活性及其表达水平的初步研究

目的①通过研究正常人和鼻咽癌患者的糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D（GPI-PLD）的酶活性和酶促反应的3-D图,探索鼻咽癌患者该酶活性的变化情况及该酶促反应的可能机制。②通过研究正常人和鼻咽癌患者GPI-PLD mRNA的表达水平,探寻鼻咽癌患者该酶活性变化的可能机制,为鼻咽癌的诊断、预后估计提供有效指标。方法①采用我室自制的具完整GPI结构的胎盘型碱性磷酸酶（PLAP）作底物进行酶促反应,测定正常人和鼻咽癌患者GPI-PLD的酶活性并应用韩国新科有限公司生产的Photodiode Array Uv-Vis Spectrophotometer仪器研究了该酶的催化机理,并且利用该机所带软件作出3-D图。②采用逆转录PCR（RT-PCR）检测正常人和鼻咽癌患者的GPI-PLD mRNA的表达水平,以RT-PCR结果的琼脂糖电泳照片的积分光密度值（IA）比值代表GPI-PLD mRNA的表达水平。结果①正常人和鼻咽癌患者血清GPI-PLD的活性水平（均以转化底物百分比表示）分别为17.6%±2.7%和20.6%±2.4%,鼻咽癌患者的血清GPI-PLD活性比正常人血清GPI-PLD活性显著增高（P〈0.05）。并且其酶促反应的3-D图显示有直观差异。2.RT-PCR检测GPI-PLD mRNA的表达,结果表明正常人鼻咽上皮细胞中GPI-PLD mRNA琼脂糖电泳照片的平均积分光密度比值（IA比值）是2.6131±0.7653,鼻咽癌患者鼻咽上皮细胞中GPI-PLD mRNA琼脂糖电泳照片的平均积分光密度比值（IA比值）是9.3522±5.2879,鼻咽癌患者的GPI-PLD mRNA的表达水平比正常人鼻咽上皮细胞中GPI-PLD mRNA的表达水平显著性增高（P〈0.05）。结论①鼻咽癌患者的血清GPI-PLD活性比正常人显著增高,其酶促反应的3-D图也与正常人有明显差异,提示测定GPI-PLD活性可作为临床诊断鼻咽癌的生化指标。②鼻咽癌患者GPI-PLD mRNA的表达水平高于正常人。GPI-PLD mRNA表达增强是导致鼻咽癌患者GPI-PLD酶活性增高的主要机制。     

前列腺素E_2、酵母多糖及雷公藤红素对大鼠腹腔细胞内cAMP水平的调节

PGE_2增加大鼠腹腔细胞内cAMP含量,其增加呈浓度依赖关系。蛋白胨刺激的大鼠,其细胞对PGE2反应更敏感。酵母多糖明显增加细胞内cAMP,于0.5 mg/ml时,上清液中cAMP亦有明显增加,同时增敏细胞对PGE_2的反应性。雷公藤红素(tripte-rine)1.0μg/ml降低cAMP含量,且明显抑制细胞对PGE_2及酵母多糖的反应性,部分解释了雷公藤红素的抗炎机理。     

前列腺素E_2与雌二醇联合应用对动脉粥样硬化的影响和机理探讨

在本室以往研究的基础上,利用同位素技术、血清过氧化脂质(LPO)、血小板聚集性和血脂测定以及形态学和超微结构等方法,综合观察了大剂量前列腺素 E_2(PGE_2)和雌二醇联合应用对实验性动脉粥样硬化(AS)的影响,结果多种指标显示联合用药比单纯 PGE_2具有更明显的抑制 AS 的协同作用。文中根据各种检测指标的变化就其作用机理进行了讨论。     

牛磺酸对前列腺素E_2兴奋大鼠胃底平滑肌作用的影响

目的 :观察了牛磺酸对大鼠胃底平滑肌收缩性的影响。方法 :采用离体平滑肌实验技术观察胃底条收缩作用。结果 :牛磺酸能使前列腺素E2 (PGE2 )累加量效曲线明显降低。结论 :牛磺酸能对抗PGE2 兴奋大鼠胃底平滑肌作用     

16,16-二甲基前列腺素E_2及γ-干扰素抗大鼠肝纤维化实验研究

目的:研究16,16-二甲基前列腺素E2(dnaPGE2)和γ-干扰素(IFN-γ)的抗肝纤维化作用。方法:以二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型.染毒开始及染毒后5周分别用dmPGE2和IFN-γ预治疗和治疗肝纤维化。与正常及染毒组比较,观察各组病理及肝纤维化程度。结果:dmPGE2预治疗和治疗组纤维化程度与IFN-γ组相近,且明显小于染毒对照组,肝羟脯氨酸(HyP)血清透明质酸(HA)较染毒组明显降低。结论:dmPGE2有较好的抗肝纤维化作用。     

褪黑素对大鼠松果腺细胞产生前列腺素E_2的影响

采用松果腺细胞培养、前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）放射免疫测定等方法，研究了松果除分泌的褪黑素（ＭＴ）对松果腺细胞产生ＰＧＥ２的影响。结果表明：ＭＴ０．１～１０μｍｏｌ·Ｌ－１抑制松果腺细胞产生ＰＧＥ２，０．０１～１０μｍｏｌ·Ｌ－１对抗去甲肾上腺素刺激松果腺细胞产生ＰＧＥ２，且以１μｍｏｌ·Ｌ－１的作用最为明显。提示ＭＴ对松果腺细胞功能有负性调节作用。Ｐ＜０．０１图２ＭＴ对去甲肾上腺素刺激松果腺细胞（１０５ｃｅｌｌｓ）转引产生ＰＧＥ２的影响●－●：ＮＥ；○－○：ＮＥ＋ＭＴ；ｎ＝４与对照组比较，Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１；与对应的去甲肾上腺素比较，△Ｐ＜０．０５，△△Ｐ＜０．０１３讨论支配松果腺细胞的交感神经纤维在暗相时产生与释放大量去甲肾上腺素，作用于松果腺细胞膜上的β１、α１受体，双重受体激动后通过Ｇ蛋白使蛋白激酶Ｃ激活，Ｃａ２＋、Ｋ＋、花生四烯酸增多，继而使ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ产生明显增加，松果腺细胞内特有的合成ＭＴ的限速酶Ｎ－乙酰转移酶和羟基吲哚－０－甲基转移酶被激活，从血液中摄取的色氨酸迅速转化为ＭＴ。在ＭＴ合成过程中，ＰＧ起很重要作用，因α１受体激动可使ＰＧ产生增多，ＰＧ进而促进ｃＧＭＰ生成和ＭＴ的合成?     

大剂量前列腺素E_2与硒联用对体外培养的高脂血症兔主动脉平滑肌细胞的作用

采用离体细胞培养技术,从细胞和分子水平证实大剂量前列腺素 E_2 (56.74mol/L,20μg/ml)有抗动脉粥样硬化形成作用:抑制高脂血症性兔主动脉平滑肌细胞的增生及过氧化脂质形成,并在电镜下观察到相应变化。同时显示与抗氧化剂硒联用具明显协同作用。     

不同剂量前列腺素E_2对离体培养主动脉平滑肌细胞的不同影响

以不同剂量前列腺素 E_2 作用于离体培养兔主动脉平滑肌细胞,观察其对细胞形态、生长性能和代谢的影响。结果显示不同剂量前列腺素 E_2 具有双相作用,即小剂量可促进 DNA 合成和细胞增生,轻度促进脂质过氧化反应,超微损伤较明显,而大剂量明显抑制 DNA 合成,轻度降低过氧化脂质的产生,超微变化轻微。上述所见与以往体内实验结果相一致。     

WRN基因在氢醌致U937细胞DNA损伤中的作用

目的 WRN基因在氢醌(HQ)致U937细胞DNA损伤中的作用.方法 常规培养白血病细胞U937至生长对数期,低剂量HQ组、中剂量HQ组、高剂量HQ组分别以10、20、40μmol/L HQ染毒24 h及48 h,以等体积的完全培养基培养的细胞组为完全空白对照组.采用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞DNA损伤;采用免疫印迹法检测WRN蛋白的相对表达量.结果 (1)HQ可导致细胞DNA损伤,且损伤效用随染毒浓度增加而增大,48 h比24 h的DNA损伤程度增加,呈时间—剂量依赖性(P＜0.05);(2)免疫印迹结果显示,HQ染毒24 h,WRN蛋白相对表达量在各组差异无统计学意义(P＞0.05);HQ染毒48 h高剂量组分别与空白组、低剂量、中剂量中比较,WRN蛋白相对表达量呈降低的趋势(P＜0.05).结论 HQ诱导WRN蛋白表达下调影响U937细胞DNA损伤修复.     

白藜芦醇对U937细胞基质金属蛋白酶-9转录的抑制作用

目的:观察白藜芦醇对佛波酯诱导的U937细胞中基质金属蛋白酶-9活性的影响,并从蛋白、mRNA及核转录因子激活蛋白-1(AP-1)水平对其影响进行分析。方法:酶谱法测定U937细胞培养上清中MMP-9的活性;Western blot法考察MMP-9蛋白的生成;RT-PCR法检测MMP-9 mRNA的表达;电泳迁移率变动分析法(EMSA)研究核转录因子SP-1的活性。结果:PMA 10nmol/L 可显著诱导无血清培养的U937细胞中MMP-9活性(P<0.01);白藜芦醇在1和10 μmol/L浓度下可抑制 PMA 10 nmol/L诱导的MMP-9活性(P<0.05 和P<0.01);PMA 10 nmol/L可显著诱导U937细胞中MMP-9蛋白生成(P<0.01)和MMP-9 mRNA的表达(P<0.01),白藜芦醇在1、10μmol/L浓度下可抑制PMA 10 nmol/L诱导的MMP-9蛋白生成和MMP-9 mRNA的表达(P<0.05);白藜芦醇在10、1和0.1μmol/L浓度下可抑制PMA诱导的U937细胞中AP-1的活化。结论:白藜芦醇可有效地抑制PMA诱导的U937细胞中MMP-9的活性,其作用可能是通过抑制PMA诱导的U937细胞核转录因子AP-1活化,进而降低MMP-9 mRNA表达,减少MMP-9蛋白生成而实现的。     

Apoptosis-inducing effect of Akebia saponin D from the roots of Dipsacus asper Wall in U937 cells

Methanol extracts of the root of Dipsacus asper Wall (Dipsacaceae) were found to exhibit apoptosis-inducing activities in U937 (human monocyte-like histiocytic) cells. Investigation of the active n-BuOH fraction led to the isolation of akebia saponin D (ASD). Structure was established by spectroscopic methods. Treatment of U937 cells with ASD induced apoptosis in a dose dependent manner. ASD exerted strong cytotoxicity against human and murine leukemia cells. It is significantly increased the subG1 cell population and expression of p53 and Bax gene. And also ASD enhanced NO production from RAW264.7 macrophage cells. Taken together, these results strongly indicate that ASD may exert apoptosis-inducing activity via induction of apoptosis through activation chiefly via the nitric oxide and apoptosis-related p53 and Bax gene expression. These data provide scientific evidence that Dipsacus asper Wall can be useful as a chemopreventive agent.     

白藜芦醇通过下调血管紧张素Ⅱ分泌抑制白血病U937细胞增殖

目的:观察白藜芦醇或血管紧张素Ⅱ对白血病U937细胞增殖作用,及白藜芦醇调节U937细胞分泌血管紧张素Ⅱ作用,探讨白藜芦醇抗癌作用机制。方法:人白血病U937细胞暴露于一定浓度梯度的白藜芦醇(12.5,25,50,100,200μmol.L-1)或血管紧张素Ⅱ(0.25,1,4,16nmol.L-1),U937细胞培养一段时间(12,24,36,48h)后,MTT法检测U937细胞增殖抑制率。在白藜芦醇作用下,用放射免疫法检测U937细胞培养上清液中血管紧张素Ⅱ含量。结果:白藜芦醇呈时间与浓度依赖性抑制U937细胞增殖;血管紧张素Ⅱ呈时间与浓度依赖性促进U937细胞增殖;白藜芦醇作用U937细胞,培养细胞上清液中血管紧张素Ⅱ含量明显降低,且与细胞增殖率呈正相关。结论:白藜芦醇有可能通过下调血管紧张素Ⅱ的分泌而抑制白血病细胞增殖,为临床治疗白血病提供试验依据。     

地西他滨联合丙戊酸钠对U937细胞hPer3基因表达调控的影响

目的观察地西他滨(DCA)和丙戊酸钠(VPA)联用对白血病细胞株U937的作用及对hPer3基因表达的影响。方法分6组:A组(未处理组),B、C组(DCA 1,4μmol·L-1),D组(VPA 2 mmol·L-1),E、F组(DCA 1,4μmol·L-1+VPA 2,2 mmol·L-1),作用48 h。用甲基化聚合酶链反应(MS-PCR)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测hPer3启动子甲基化和mRNA表达;MTT法检测生长抑制率;Annexin V/PI法检测凋亡;FCM检测CD117和CD14。结果E、F组的hPer3 mRNA、抑制率、凋亡率、CD117 MFI、CD14表达率均高(或低)于各自相应的单药组,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。结论 DCA联合VPA在U937细胞中能显著加强抗白血病效应,并增强hPer3基因的表达。     

Immunosuppressant PG490 (triptolide) induces apoptosis through the activation of caspase-3 and down-regulation of XIAP in U937 cells

PG490 (triptolide) is a natural, biologically active compound extracted from Chinese herb Tripterygium wilfordii. It possesses potent anti-inflammatory and immunosuppressive properties. The mechanism by which triptolide initiates apoptosis remains poorly understood. In the present report, we investigated the effect of triptolide on the apoptotic pathway in U937 human promonocytic cells. We show that triptolide inhibits U937 cells growth by inducing apoptosis. Following treatment of U937 cells with 25 nM triptoride for 24 hr, morphological features of apoptosis and DNA fragmentation were observed. Caspase inhibitors significantly reduced triptolide-induced caspase-3 activation. In addition, apoptosis triggered by triptolide was not associated with the generation of reactive oxygen species, which was not affected by the antioxidant N-acetylcysteine (NAC). The data collectively indicate that the cytotoxic effect of triptolide in U937 cells is attributable to apoptosis mediated by the caspase-3 activation pathway that may be associated with XIAP down-regulation.     

反义寡脱氧核苷酸抑制U937泡沫细胞血管内皮生长因子的表达(英文)

AIM:To study the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) induced by oxidized low density liprotein (ox-LDL) and the inhibitory effects of antisense oligodeoxynucleotide (asODN) on the levels of VEGF protein and mRNA in the U937 foam cells. METHODS: U937 cells were incubated with ox-LDL 80 mg/L for 48h, then ,the foam cells were treated with asODN (0,5,10, and 20μmol/L). The VEGF concentration in the media was determined by ELISA. The VEGF protein expression level in cells was measured by immuohistochemistry; the positive ratio detected by a morphometrical analysis system was used as the amount of the VEGF expression level. The VEGF mRNA level was examined by Northern blotting. RESULTS: After U937 cells were incubated with ox-LDL, VEGF expression level increased greatly both in the cells and in the media. asODN markeldy inhibited the increase of VEGF. After treatment with asODN 20μmol/L, the VEGF protein concentration in the media decreased by 45.0%, the VEGF positive ratio detected by immuohistochemistry in cells decreased by 64.9%, and the VEGF mRNA level decreased by 47.1%. CONCLUSION: The expression of VEGF in U937 foam cells was strong. asODN inhibited VEGF expression significantly in U937 foam cells in vitro.     

Propolis induces cell cycle arrest and apoptosis in human leukemic U937 cells through Bcl-2/Bax regulation

We investigated mechanism(s) where propolis induces apoptosis in human leukemic U937 cells. Propolis inhibited the proliferation of U937 cells in a dose-dependent manner by inducing apoptosis and blocking cell cycle progression in the G2/M phase. Western blot analysis showed that propolis increases the expression of p21 and p27 proteins, and decreases the levels of cyclin B1, cyclin A, Cdk2 and Cdc2, thereby contributing to cell cycle arrest. DAPI staining assay revealed typical morphology features of apoptotic cells. Propolis-induced apoptosis was also confirmed by assays with annexin V-FITC, PI-labeling and DNA fragmentation assay. The increase in apoptosis level induced by propolis was associated with down-regulation of Bcl-2 and activation of caspase-3, but not with Bax. These results suggests that propolis-induced apoptosis is related to the selective activation of caspase-3 and induction of Bcl-2/Bax regulation.     

体外柴胡皂苷元d对C_6大鼠神经胶质瘤细胞前列腺素E_2生成的影响

目的　观察柴胡皂苷元d(saikogenind ,SGD)对C6大鼠神经胶质瘤细胞体外前列腺素E2 (PGE2 )生成的影响。方法　用放射性免疫法测定细胞产生的PGE2 ,液体闪烁测量法测定14 C花生四烯酸 (AA)标记细胞释放14 C AA。结果　SGD在 1～ 2 0 μmol·L-1范围内 ,抑制由钙离子载体A2 3187诱发C6大鼠神经胶质瘤细胞前列腺素E2 (prostaglandinE2 ,PGE2 )释放 ,其IC50 为 3μmol·L-1,但对花生四烯酸 (arachi donicacid ,AA)释放无影响。SGD不影响细胞微粒体组分将AA转化为PGE2 。结论　SGD抑制由钙离子载体A2 3187诱发体外C6大鼠神经胶质瘤细胞PGE2 产生 ,但不抑制AA释放和直接抑制环氧脂酶 (cyclooxygenase ,COX)活性。     

TLR4-p38MAPK信号通路在金黄色葡萄球菌感染人巨噬细胞系U937过程中的表达及意义

目的观察金黄色葡萄球菌感染人巨噬细胞系U937细胞后信号通路Toll样受体4(TLR4)-p38蛋白激酶(p38MAPK)的表达及意义。方法体外培养人巨噬细胞系U937细胞,感染0、30、60和90 min时收集细胞,应用Western blot法检测各组TLR4和p38MAPK蛋白表达的变化;在另一实验中,分为对照组、金黄色葡萄球菌感染60 min组及p38MAPK抑制剂SB203580 5 mg/m L干预组、SB203580 10 mg/m L干预组,应用Western blot法检测各组TLR4和p38MAPK蛋白表达的变化。结果随着感染时间的延长,TLR4和p38MAPK蛋白的表达逐渐增加;给予SB203580抑制剂后,TLR4和p38MAPK蛋白的表达明显减弱。结论金黄色葡萄球菌感染U937细胞可引起TLR4-p38MAPK信号通路的活化,而SB203580对其有明显的抑制作用,证明TLR4-p38MAPK信号通路与金黄色葡萄球菌感染U937细胞密切相关。